Способ исследования капиллярного кровотока Советский патент 1987 года по МПК A61B5/275 

Изобретение относится к биологии, а именно к физиологии кровообращения, и может быть использовано в экспериментальной медицине.

Цель изобретения - повыпшние точности способа за счет использования в качестве диффундирующего индикатора этанола, а в качестве недиффундирующего индикатора - красителя голубого Эванса, адсорбированного на белках плазмы.

Способ осуществляется следующим образом.

В артерию исследуемого региона вводят болюс, содержащий недиффундирующий индикатор (1%-ный раствор краски голубой Эванса, адсорбированной белками плазмы крови) и диффундирующий через всю поверхность эндотели,я индикатор (обезвоженный этиловый спирт). Доза индикаторов подбирается в зависимости от величины объемного кровотока через регион из расчета 5-7 мг краски и 0,5-0,7 мл этилового спирта при кровотоке 100 мл/мин.

Болюс вводят в течение 1-3 с и одновременно из вены этого региона забирают кровь в течение 1 мин порционно за каждые 4-б с. Затем проводят анализ порций крови на содержание краски (спектрофотометриче- ским методом) и этилового спирта (метод газовой хроматографии) по стандартным методикам. Концентрации указаннЕз1х индикаторов в порциях венозной крови выражают в относительных величинах, строят на каждый опыт график хроноконцентрацион- ной зависимости, которая имеет вид полусинусоиды. Максимальное значение концентрации краски указывает на содержание индикаторов на входе в систему микрососудов, а концентрация спирта - на оставщую- ся его часть в крови капилляров при установившемся диффузионном равновесии между кровью и тканями.

Расчет доли капиллярпого кровотока от общего регионарного проводят по формуле

ft- a:- -jn-ioo%

ТНА

-/-НА

где 7, -поток (массоперенос) краски голубой Эванса по системе микрососудов;

оставшийся поток этилового спирта в системе микрососудов. Для вычисления величины капиллярного кровотока используют формулу: QK QvK, где QK- капиллярный кровоток; QP - регионарный кровоток; К, - доля капиллярно|-о кровотока.

Способ использован в экспериментах на наркотизированных кошках обоего пола весом от 3 до 4,5 кг (9 животных, 15 экспериментов). Под гексеналовым наркозом (100 мг/кг веса) в ветвь верхней брыжеечной артерии вводили болюс с индикаторами, венозную кровь собирали через канюлю.

5

введенную в верхнюю брыжеечную вену, проксимальный конец которой перевязывали. Концентрацию краски голубой Эванса определяли па спектрофотометре СФ-16, кон- центрацию спирта - на газовом хроматографе.

Способ иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Кот беспородпый, вес 3 кг.

Введено внутрибрюшиппо 300 мг гексанола; в яремную вену 750 ед. гепарина. Из этой же вены взято 2 мл крови для получения плазмы, которую используют для осаждепия на ее белках краски голубой Эвапса. Через 40 .мин сделана лапаротомия по средней линии живота.

В корне брыжейки отпрепарована вена и идуп;ая рядо.м верхняя брыжее щая артерия, ветвь которой к поперечно-ободочной кишке перевязана и и псе вставлены канюля.

0 Канюля вставлена в верхнюю брыжеечную вену, которая перевязана проксимальпее. С помоп1ью шприца через артериальную канюлю введен болюс, содержащий 2 мг краски голубой )ванса, разведенной в 0,2 мл физраствора, 0,2 мл обезвоженного спирта,

5 0,5 мл гыазмы. Болюс введен в течение 2 с и сразу же начат сбор крови через венозную каню;1ю в заранее приготовленные 12 мерных пробирок порциями за 5-секундпые интервалы.

Измеряют количество крови в каждой пробирке, берут для анализа из каждой порции 0,2 мл крови для исследовапия на голубой краситель Эванса и 0,5 мл .тля опреде лепия этилового спирта.

Рассчит1 1вают относительное со.аержание

индикаторов в каждой порции, строят по этим дапным график хронокопцептрациоп- ной зависимости. Д аксимальпое зпачение голубой Эванса составило 635-10 , максимальное зпачение этилового спирта 160

0 Х10 отп. ед. Рассчитывают по указанной- форму..1е долю капиЛо 1Я|)пого кровотока в общем ре1 иопарном, которая равна 74,8%. Объемный кровоток через топкую кишку равен 42 м.м/мин, следовательно, капилляр- пый кровоток 31,4 мл/мин.

5Пример 2. Кот беспородный, вес 3,5 кг.

Введено внутрибрюншнно 350 мг гексанола, в яремную вену - - 900 ед. гепарина. Подготовка сосудов к эксперименту проведена, как oimcano выше. Через венозную канюлю сделано кровопускание (28,6 мл). В артериальную капюлю вве.аен болюс: 2 мг голубой Эванса на 0,2 мл физраствора, 0,2 мл этилового спирта, 0,5 мл плаз.мы крови. Забор крови через 5-секундпые интервалы в 12 мерных пробирок. Измерено количество

5 крови в каж.а.ой пробирке, взято .аля анализа из каждой пробирки 0,2 ivui крови для исследовапия на голубую Эванса и 0,5 мл для определения этилового спирта.

0

Относительное максимальное значение голубой Эванса равнялось 485 10 а этилового спирта 157,. Доля капиллярного кровотока составила 67,9%. Объемный кровоток через регион равен 28,8 мл/мин.

Пример 3. А. Кот, 4,0 кг. Введено в артерию региона 2 мг голубой Эванса и 0,2 мл этилового спирта. Объемный кровоток составил 39,7 мл/мин, доза голубой Эванса в пересчете на кровоток 100 мл/мин равнялась 5 мг, этилового спирта 0,5 мл.

Максимальная концентрация красителя в первом эксперименте состави„ 1а 912Х Х10 г/мл, во втором г/мл; максимальная концентрация этилового спирта 1,9 и 3,15% соответственно. Таким образом, предлагаемый диапазон средней дозы индикаторов создает в оттекающей крови концентрацию индикаторов, оптимальную для исследования с использованием спектрофотометра и газового хроматографа.

Пример 4. А. Кот, 4,5 кг. При заборе крови 4 с максимальная концентрация голубой Эванса в пробирке 5 (20 с от момента введения краски) 800 10 г/мл, максимальная концентрация спирта 1,9%.

При заборе крови через 5 с максимальная концентрация голубой Эванса в пробирке 4 (20 с от момента введения краски) составила

Концентрация этих индикаторов в отте- венозной крови региона представлена в таблице.

Б. Кот, 3,5 кг. Введено в артерию региона 2 мг голубой Эванса и 0,2 мл этилового спирта. Объемный кровоток составил 28,6 мл/мин, т. е. доза голубой Эваиса в пересчете на кровоток 100 мл/мин равнялась 6,99 мг (7 мг), этилового crn-ipTa 0,699 мл (0,7 мл).

Концентрация индикаторов в оттекаю1цей венозной крови представлена в таблице.

800 10 г/мл, спирта 1,9%. Капиллярный кровоток равен 77% от регионарного.

При заборе крови через 6 с максимальная

5 концентрация краски в пробирке 3 (18 с

от момента введения краски) равна 790 X

г/мл, спирта 1,9%. Капиллярный

кровоток равен 76% от регионарного.

Разница значений капиллярного кровотока при заборе крови в диапазоне от 4 до 6 с составила 1 %.

Б. Кот, 3,5 кг. При заборе крови через 5 с максимальная концентрация краски составила в пробирке 4 (20 с от момента введения) 950 10 г/мл, спирта 3,15%. Капиллярный кровоток равен 67% от регионарного.

При заборе крови через 4 с максимальная концентрация краски составила в пробирке 5

0

5

(через 20 с после введения) 95010 г/мл, спирта 3,15% о. Капиллярный кровоток равен 67% от регионарного.

При заборе крови через 6 с максимальная концентрация краски составила в пробирке 3 (через 18 с после введения) SOO lO г/мл, спирта 2,55%о. Капиллярный кровоток равен 68% от регионарного.

Разница значений капилляр}юго кровотока при заборе крови в диапазоне от 4 до 6 с составила 1%.

Следовательно, укорочение времени сбора крови до 4 с не меняет точности исследования по сравнению с забором ее через 5 с; удлинение времени до 6 с допустимо, так как изменяет расчетные показатели только иа ±1%.

Использование изобретения по сравнению с известным способо.м исследования капиллярного кровотока повышает точность определения, так как применяется индикатор, диффундируюпгий через всю повер.х- ность эндотелия капил;1яров; расчет величины ка1. и.;1лярного кровотока проводится на

основании данных о концентрации индикатора на входе в систему капилляров и в период диффузионного равновесия между капиллярной кровью и тканями, что достигается порционным забором крови в течение первой минуты после введения индикаторов.

Формула изобретения

Способ исследования капиллярного кровотока путем внутриартериального введения диффундирующего и недиффундирующего индикаторов с последующим забором венозной крови измерением концентрации в ней индикаторов и расчетом величины кровотока, отличающийся тем, что, с целью повышения точности определения, в качестве диффунди- |)уюилего индикатора используют этанол, в качестве недиффундирующего индикатора - краситель голубой Эванса, иредварительно адсорбированный на белках плазмы, а исследование проводят в динамике через каждые с в течепие ми1.

Изобретение относ1ггся к био.логии, а именно к физиологии, и нредназначено для экспериментальной медицины. Цель изобретения -- новышение точности способа. Для этого в артерию исследуемого pei .noHa вводят болюс, содержащий недиффундирующий индикатор (1%-ный раствор краски голубой Эванса, адсорбированной белками плазмы крови) и диффундирующий через всю поверхность эндотелия индикатор (обезвоженный этиловый спирт) из расчета 5- 7 мг краски и 0.5-- 0.7 м, 1 этилового спирта при крОБОтоке 100 мл/мин. Болюс вводят 1-3 с и олновременно из вены этого региона забирают кровь в течение 1 мин порционно, каждые 4-6 с. Затем проводят анализ нор- ций крови на содержание краски (спектро- фотометрически) и этилового снирта (мет&д газовой хроматограф|1и). Строят на каждый опыт график хропокопцентрационной зависимости, 1ме о;ией вид полусинусоиды. Максимальное значение концентрации краски указывает .на содержание индикаторов на входе в систему микрососудов, а концентрация С :ирга - па оста и1 у1ося часть в крови капилляров при установив1немся диффу- зионно.м paBnoBCCiUi между кровью и тканями. Величину капиллярного кровотока онре- деляют по формуле QK где QK - капиллярный кровоток, QP - регионарный кровоток; Д - доля капн. клярпого кровотока. 1 табл. W со о со СО со