Способ определения белка в биологической жидкости Советский патент 1991 года по МПК G01N33/48 A61B10/00 

Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторным исследованиям.

Г / Целью изобретения является повышение точности способа, а также его упрощения.

Способ осуществляют следующим образом.

Прецизионными пипеточными дозаторами наносят каплю на стекло.

Объем капли биожидкости всегда был один и тот же - 20 мкл. Капля свободно сбрасывается с насадки дозатора, установленного на указанный объем, с расстояния 3-4 мм от поверхности стекла Каплю высушивают и получают овальный рисунок на стекле. Далее измеряют ширину аморфной зоны, так как этому способствует стандартизация объема капли, ее форма в виде круга, а также обусловленность границ измерения (ширина аморфной зоны измерялась под микроскопом от края капли до начала кристалла соли). В тех случаях, когда капля при сбрасывании на стекло принимала не круглую, а овальную, либо какую-другую форму, раскапывание повторялось В других случаях, когда объем биожидкости для анализа был очень мал, а единственная капля при раскапывании приобретала, например, форму овала, то вычисляли среднюю арифметическую ширины аморфной зоны в 4 точках (на 12, 3, 6 и 9 часах), калибровочную прямую получали следующим образом: берут 20-25 образцов биологической жидкости, например, ликвор, с различной концентрацией белка (г/л), определяемой унифицироCS 00

00

Ю

ванным способом, раскапывают, замеряют соотношение диаметра капли и ширины аморфной зоны и наносят соответствующее значение на график (ось X - соотношение диаметра, мм, ось Y - концентрация белка, г/л). Прямую проводят через максимальное совпадение числа точек. То же самое повторяют с другими биожидкостями (сыворотка крови, выпотные жидкости).

Раствор альбумина на физиологическом растворе хлористого натрия показал следующие концентрации белка, г/л: 1,0; 2,5; 5,0; 10,0; 20,0; 30,0; 40,0; 50,0; 60,0; 70,0; 80,0; 90,0; 100,0. Измерив по капле соотно- d

шение

D

(мм) получена калибровочная

прямая.

Концентрация белка в растворе альбумина дана в таблице.

Приведенная калибровочная прямая по альбумину является универсальной для биологических жидкостей.

П р и м е р 1. Больной П., 20 лет. Диагноз при поступлении: опухоль задней черепной ямки. Взято для исследования 0,02 мл спинномозговой жидкости. При исследовании содержания белка в пробе выявлено:

Ширина краевой зоны (d) равна 0,9 мм.

Диаметр пробы (D) равен 7,0 мм.

Соотношение - равно 0,13, что соответствует содержанию белка в пробе в количестве 3,9 г/л (см. таблицу).

П ри ме р2. Больной С., 39 лет. Диагноз при поступлении: бронхопневмония, осложненная плевритом. Взято 0,02 мм плевральной жидкости (без разведения). При исследовании содержания белка в пробе выявлено:

Ширина краевой зоны (d) равна 1,2 мм.

Диаметр пробы (D) равен 6,0 м.

Соотношение р: равно 0,2 , что соот

ветствует содержанию белка в количестве 7,0 г/л.

П р и м е р 3. Больной В., 69 лет. Диагноз при поступлении: миеломная болезнь. Взято 0,02 мл сыворотки крови (без разведения). При исследовании содержания белка в лробе выявлено:

Ширина краевой зоны (d) равна 1,6 мм.

Диаметр пробы (D) равен 6,0 мм.

Соотношение -

равно 0,27, что соот

ветствует содержанию белка в количестве 95 г/л.

Способ позволяет точно и, что особенно ценно, просто при использовании капли биологической жидкости получить ответ о содержании белка в данной пробе.

Формула изобретения

Способ определения белка в биологической жидкости путем исследования пробы жидкости, отличающий-ся тем, что, с целью повышения точности способа и его упрощения, пробу наносят на стекло, далее высушивают при температуре 18-30°С, а ко- личеств,о белка определяют по ширине и диаметру краевой зоны, которое рассчитывают по формуле

г - к u с-к s,

где С - количество бел ка в исследуемой жидкости, г/л;

d - ширина краевой зоны, мм;

D - диаметр пробы, мм;

К - коэффициент расчета калибровочной кривой по соотношению количества аль- бумина на величину отношения ширины краевой зоны на диаметр пробы.

Продолжение таблицы

Изобретение относится к области медицины, а именно к методам лабораторного исследования. Целью изобретения является повышение точности способа, а также его упрощение. Цель достигается тем, что каплю исследуемой жидкости наносят на стекло, далее ее высушивают при 18-30°С. В сухом образце определяют ширину и диаметр краевой зоны, которая имеет более гомогенный рисунок и четко определяется от центра, заполненного солевыми кристаллами. Содержание белка определяют по формуле. Способ прост, не требует сложных методов, точность его выше, чем известные клинические способы по определению белка. 1 табл.