Способ изучения задних путей оттока глазного яблока Советский патент 1992 года по МПК A61F9/07 

Изобретение относится к медицине, а более конкретно к офтальмологии, и может быть использовано в научных исследованиях для изучения состояния заднего дренажа глаза при различных видах патологии.

Существуют методы выявления задних путей оттока из глаза, включающие введе ние метк(4 в стекловидное тело (СТ) с дальнейшим морфолоп4ческим исследованием заднего отдела глаза и зрительного нерва.

Однако эти методы не позволяют вь явить морфологические структуры, несущий маркер. Методы сложные, дорогостоящие, так как для их выполнения нужны радиоактивные изотопы.

Существует также способ выявления задних путей оттока из глаза, включающий введение морфологического маркера (тушь, масса Герота) в СТ, фиксацию глаза и 3jwiтельного нерва в формалине, вскрытие его.

приготовление препаратов, обезвоживание в спиртах восходящей крепости, заливку а целлоидин, парафин, приготовление срезов, окрашивание их и микроскопирование.

Однако зтот способ, требующий вскрытия глаза, не позволяет сохранить маркер в несущих его структурах. Он не дает возможности проследить на нативнмх препаратах за расположением туши в СТ и путь попадания маркера в зрительный нерв, поскольку даже после фиксации глазного яблока в формалине при вскрытии глаза тушь выливается из СТ и из крупных несущих ее коллекторов и окрашивает структуры артефициально. Кроме того, этот способ не позволяет выявить ультрамикроскопическую структуру задних путей оттока.

Цель изобретения - повышение информативности о задних путях оттока, включающей представление о расположении туши

в СТ, распространении ее в орбиту с сохранением маркера в крупных коллекторных путях, выявлении ультраструктуры задних путей оттока и получении данных о связи между задним отделом глаза и межоболочечным пространством мозга, а также исключение артефактов.

Поставленная цель достигается тем, что в способе изучения задних путей оттока глазного яблока, включающем прижизненное введение морфологического маркера в СТ, последующее макромикроскопическре исследование глазного яблока и зрительного нерва с оболочками, согласно изобретению, после декапитации животного удаляются оба глаза вместе с хиазмой, с сохраненными зрительными нервами и их оболочками, производится микропрепаровка оболочек зрительного нерва за зоной распространения маркера, вырезается окно в склеральной капсуле глаза у зрительного нерва, проводится ультрамикроскопическое исследование зрительного нерва с оболочками.

При изучении других известных технических решений в данной области признаки, отличающие заявляемое изобретение от известного, не были выявлены и потому они обеспечивают заявляемому техническому решению соответствие критерию существенные отличия.

Способ осуществляется следующим образом.

На подопытном животном, например кролике-альбиносе, после наркотизирования животного делается парацентоз, выводится влага передней камеры и в СТ глаз вводится маркер. Количество вводимого маркера должно соответствовать количеству удаленной из передней камеры влаги для .поддержания исходного внутриглазного давления. Через заданные промежутки времюни животные декапитируются, чего оба глаза знуклеируются вместе с хиазмой. Ретр ульбарную ткань м оболочку зрительного нерва позади склеры с вентральной и дорзальной стороны рассла1«гаают под микроскопом типа МБС-2. Одновременно позади места распространения маркера осуществляетсй перевязка дистального конца зрительно-о нерва. 1 озада| зоны распространения маркера берется препарат для электронной микроскопии. Для визуального установления связи СТ и диска зрительного нерва (ДЗН) в склеральной капсуле каждого глаза вырезается лоскут вокруг з| ительного нерва и выш рачивается наружу. 8 результате этого обнажается воронка зрительного нерва и прослеживаются контрастируемые маркером связи СТ с

ДЗН, после чего весь препарат фиксируется в формалине и подготавливается для гистологических исследований.

Пример. Под наркозом (промедол,

аналгин, димедрол) на обоих глазах кролика произведен парацентоз и удалена влага передней камеры по 0,3 мл из каждого глаза, после чего в СТ был введен маркер (тушь с желатиной по Камахидзе) в количестве, равном количеству удаленной влаги. Маркер вводится с помощью иглы, склера прокалывалась у экватора. Причем игла со шприцем после введения туши оставалась в СТ в течение 3-4 мин. После введения маркера в СТ

5 шприц снимался с иглы, игла была оставлена в глазу и ее просвет закрывали лаком. Внутриглазное давление после введения маркера осталось без изменений. По истечении 30 мин производилась декапи0 тация, оба глаза вместе с хиазмой энуклеировались путем вскрытия черепной коробки и разрушения задней стенки орбиты. Под микроскопом МБС-2 была произведена отсепаровка оболочек каждого зрительного

5 нерва и окружающей их ретробульбарной ткани и устанавливалась глубина проникновения маркера по зрительным задним, по периневральным Путям (фиг. 1). Затем была произведена перевязка зрительного нерва

0 на каждом.глазу шелковой нитью позади места распространения туши (фиг. 2). Позади места перевязки на расстоянии .B мм от последней был отделен препарат зрительного нерва для электронной микроско5 ПИИ. Склера обоих глаз надрезалась на расстоянии 5 мм от заднего полюса. С помощью ножниц был выкроен лоскут вблизи заднего полюса в виде окна, при открытии которого производились осмотр и фотографирование СТ, ДЗН и внутренних оболочек глаза (фиг. 3). Далее весь препарат фиксировался в формалине. Участок зрительного нерва вместе с его диском был отделен от глазного яблока, после чего обычным путем

5 приготавливались парафиновые срезы, которые окрашивали гематоксилинэозином. : Обычнь1м методом подготовлены препараты для электронной микроскопии. В результате исследования было выявлено, что тушь через полчаса введения ее в стекловидное

0 тело проникает из СТ в периневральное пространство зрительного нерва на глубину 1,5 мм от выхода зрительного нерва из склеры. При отгибании склерального лоскута была видна тушь, в СТ сообща1бщаяся в зоне

5 ДЗН, а также прозрачная сетчатка и подлежащие оболочки. Необходимость проведения комплексного метода с сохранением маркера при анатомическом и гистологическом анализах различных моделей болезни

диктуется отсутствием анатомических; данных о том, как в различных условиях, по каким структурам оттекает внутриглазная жидкость из стекловидного тела и отсутствуют данные о патологических изменениях самих путей. Кроме того, нет в литературе данных о том, каков характер структур в межоболочечных пространствах зрительного нерва, по которым идет отток жидкости из глаза, так как нет данных об ультраструктуре клеток, выстилающих эти пути.

Обнажение заднего полюса дает возможность получить более полную информацию о связи стекловидного тела с воронкой зрительного нерва и о задних путях оттока. Удаление обоих глаз вместе с хиазмой, отсепаровка под микроскопом оболочек зрительного нерва и межоболочечных пространств, перевязка зрительного нерва позади зоны распространения маркера - зги приемы позволяют обнаружить структуры, несущие маркер без их повреждения, при зтом удается сохранить маркер (тушь с желатиной) в крупных коллекторных путях и при приготовлении парафиновых препаратов зрительного нерва. Комбинация микроскопического исследования позволяет судить о характере Путей, несущих маркер, а также о связи между задним отделом глаза и межоболочечными пространствами мозга. Предлагаемый способ может быть использован для изучения задних ликворных и лимфатических путей оттрка из глазного яблока в норме и при патологии, а также при воздействии различных препаратов. Формула изобретения Способ изучения задних путей оттока глазного яблока в зкслерименте путем прижизненного введения животному морфологического маркера в стекловидное тело с последующими декапитацией животного, знуклеацией глаза с его оболочками и их исследованием, о т личающийся тем, что, с целью повышения информативности, удаляют оба глаза с хиазмой, сохраняя целостными зрительные нервы с оболочками, после расслоения ретробульбарной ткани и оболочек зрительного нерва перевязывают дистальный конец зрительного нерва и исследуют воронку зрительного нерва.

Изобретение относится к медицине, а более конкретно к офтальмологии, и Можетбыть использовано в научных исследованиях для изучения состояния заднего дренажа глаза при различных видах патологии. Изобретение позволяет за счет знуклеации обоих глазе хиазмой, микропрепаровки оболочек зрительного нерва, перевязки дисталь- ного конца зрительного нерва позади места распространения маркера, вырезания склерального "окна" в зоне зрительного нерва гистологического и электронно-микроскопического исследования получать более полную информацию с уюключением артефактов о задних путях оттока глаза. 3 ил.

ФигГ