Способ диагностики дистального колита у детей Советский патент 1992 года по МПК G01N33/68 

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, в частности к способам диагностики дистального колита у детей при острых кишечных инфекциях.

Целью изобретения является повышение точности диагностики.

Цель достигается определением у больных детей активности эндогенных фосфолипаз в супернатанте исправжнений. При повышении активности фосфолипаз от 7,5 Мкмоль/мин/мл до 35,0 Мкмоль/мин/мл и выше диагностируют дистальный колит.

Способ осуществляют следующим образом,

Копрофильтрат готовят путем растирания исправжнений весом 1 г (собирают утреннюю порцию, допускается хранение 2-4 ч при +4°С) с добавлением песка и физиологического раствора, взятое равное по весу испражнениям. Растирание проводят в течение 10 мин, до получения гомогенной массы и приливают дополнительно 20 мл физиологического раствора (при значительно жидком стуле первоначально физиологический раствор не добавляется).

Полученный гомогенат пропускают через ватно-марлевый фильтр и центрифугируют в течение 10-15 мин при 3000 об/мин. Супер- натант является растворимой фракцией копрофильтрата, который используется для дальнейших биохимических исследований. Определение активности эндогенных фосфолипаз проводили по методу С.А.Тыжили- на и А.И.Салуэнья, 1975, с внесенными в данный метод изменениями (применение стандартного промышленного раствора лецитина, увеличение времени инкубации субстратов и титрование раствором едкого натра меньшей концентрации. Способ позволяет определить активность фосфолипа- зы А, основан на определении изменения рН среды в результате образования под действием фосфолипаз свободных жирных кислот из фосфолипидов яичного желтка.

Для определения активности фосфолипаз обе пробирки (опытная и контрольная) с 1,0 мл копрофильтрата (супернатанта) рН около 7,0 помещали в термостат 60°С на 15 мин для инактивации липаз, после чего добавляли по 3,0 мл 0,3% раствора трипосина

СО

с

XS

о XJ

N СО 00

для активирования фосфолипазы А и помещали в холодильник при +4°С на 1 час. Затем в контрольную пробирку приливали 1 мл взвеси лецитина. Растворы помещали в термостат при +37°С на 15-20 ч. После инкубации в обе пробирки добавляли по 2 капли 0,1%-ного раствора фенолфталеина. Контрольный и опытный раствор титровали 0,05 Н едкого на тра до розового окрашивания. r J,

Расчет фосфолипазной активности в копрофильтрате производили по количеству жирных кислот, отщепляющих от лецитина за 1 мин в 1 мл инкубационной смеси.

Пересчет осуществлялся по формуле:

X (Ао - АО х 50, г„ е:

А - количество едкого натра в мл, пошедшего на титрование;

АО - опыта;

А - контроль;

50 - коэффициент перерасчета,

X - активность фосфолипазы в копрофильтрате в Мкмоль/мин/мл.

Пример 1. Больная Р., 1 г 8 мес. и.б. № 5166. Заболевание началось остро, на фоне субфебрильной температуры появилась слабость, недомогание, ухудшился аппетит, к вечеру жидкий стул частый (более 10 раз) зеленый со слизью. Лечили дома отварами коры дуба, гранатовых корок. На 4-й день состояние резко ухудшилось, нарастала слабость, вялость, температура 37,3°С, отмечалось выпадение слизистой прямой кишки, боли в животе. Стул частый жидкий зеленый со слизью. Госпитализирован в инфекционный стационар с диагнозом: кишечная инфекция неясной этиологии.

При поступлении состояние средней тяжести, ребенок вялый, стонет, жалуется на боли в животе, отмечается сухость губ, об- ложенность языка, бледность кожных покровов, тургор кожи снижен. Живот мягкий болезненный, печень вы ступает из-под края реберной дуги до +1,0 см не вздут. Сигма спазмирована, анус податлив. В стационаре в течение двух дней сохранялся жидкий стул зеленый со слизью, выпадение слизистой прямой кишки. Проводимая терапия оказала клинический эффект, на 3-й день пребывания стул стал кашицеобразным с зеленью и слизью, с 5-го дня оформленным, общее состояние улучшилось, исчезли боли в животе, восстановился стул, ребенок выписан.

Анализ крови: НВ - 115 г/л, СОЭ - 10 мм/час, Л - 6,3 х 109, Э - 2, П - 3, Сег - 42, Лим - 44, М-4. Копрограмма - Л - 7-8 в п/зрения, ЭР - ед, крахмал ед, слизь.

Кал на б/посев - выделены Ш.Флексне- ра 1 В, повторно отрицательные. Фосфолипазная активность в копрофиль грате Б день поступления 12,5 Мкмоль/мин/мин.

Диагноз клинический: острая дизентерия Флекснера энтероколитическая форма, средней тяжести.

Таким образом указанный клинический пример свидетельствует о достоверности диагностического критерия для постановки диагноза дистального колита.

0 П р и м е р 2. Больной М., 6 лет, и.б. № 189. Заболевание началось острой, повысилась температура 38°С, появилась рвота, бескопойство, боли в животе, жидкий стул со слизью, зеленью. Лечились дома отвара5 ми трав, улучшений нет, госпитализирован в стационар на 3-й день болезни. При поступлении ребенок вялый, бледный язык обложен, живот болезненный, умеренно вздух, урчание по ходу кишечника, сигма

0 спазмирована. На 4-й день пребывания стул становится скудным со слизью до 3-х раз в сутки, появляются тенезмы.

Проводимая терапия оказала клинический эффект, в дальнейшем стул становится

5 кашицеобразным чередуется оформленным, длительно сохраняется слизь. При осмотре живота определяется увеличенная печень до +3,0 см. уплотненная сигма до 8 дней.

0 Анализ крови: НВ-142 г/л, Л-6,9 х 10 , СОЭ - 33 мм/час, Э - 6, П - 4, Сег - 54, Л ИМ - 29, М-7.

Копрограмма - Л - 1-12 в п/зрения, Эр- до 10 в п/зрения.

5 Бактериологическое исследование кала выделены ЭПКП 020.

Активность эндогенных фосфолипаз в копрофильтрате - 30,0 Мкмоль/мин/мл. Клинический диагноз: острый эшерихиоз

0 020, гастроэнетроколитическая форма, средней тяжести. Данный показатель является достоверным для постановки диагноза дистального колита.

Проведенные исследования показали,

5 что процент подтверждения диагноза по заявляемому способу составляет 91,5%, а по прототипу процент подтверждения составил всего 65,2% при наших исследованиях.

0

Формула изобретения Способ диагностики дистального колита у детей, включающий исследование коп- рофильтрата, отличающийся тем,

5 что, С целью повышения точности диагностики, копрофильтрат центрифугируют, в супернатанте определяют активность фосфолипаз и при значении показателя от 7,5 до 35,0 Мкмоль/мин/мл - диагностируют дистальный колит.

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для диагностики дистального колита у детей. Целью изобретения является повышение точности диагностики. Цель достигается за счет определения в супернатанте испражнений активности фосфолипаз и диагностирования заболевания при значении показателя от 7,5 до 35,0 Мкмоль/мл-мин. Использование изобретения позволяет повысить точность диагностики до 91,5%, а при использовании способа-прототипа точность составила лишь 65,2%