Способ определения активности фолликулостимулирующего гормона Советский патент 1993 года по МПК A61K37/38 

Изобретение относится к ветеринарии, в частности к способам определения активности гормонов, стимулирующих половую охоту и полиовуляцию у самок сельскохозяйственных животных.

Цель изобретения -упрощение способа определения активности фолликулостимулирующего гормона.

Поставленная цель достигается тем, что в качестве биологического объекта используют культивируемые ооциты животных, а оценку биологической активности гормонов проводят по продолжительности времени и интенсивности созревания ооцитов в питательной среде.

П р и м е р . На мясокомбинате от только что убитых коров берут яичники в стадии фолликулярного роста. В стерильных условиях в лаборатории извлекают ооциты, размещают их в чашки Петри с питательной средой ТС-199 с 20 % фетальной сыворотки примерно по 30 штук в каждую. Формируют

пять групп. В одну чашку Петри гормональные препараты не добавляют. Эта группа ооцитов является контролем. Во вторую чашку Петри к стандартной питательной среде, нанесенной на дно в количестве 2-3 мл, добавляют 10и кг/мл стандартного фолликулостимулирующего гормона (ФСГ), заведомо известной активности, а в три следующие чашки Петри с таким же количеством питательной среды вносят 5, 10 и 15 iu кг/мл проверяемого гормонального препарата. Все чашки Петри помещают в одинаковые условия в эксикатор с максимальной влажностью при 5-процентном содержании углекислого газа. Эти условия позволяют поддерживать в эксикаторе рН равную 7,3-7,5. Культивирование ооцитов осуществляют в течение 30 ч в термостате с постоянной температурой 38,5°С. Затем с помощью цитогенетического анализа определяют стадии созревания ооцитов с подсчетом процента ооцитов на стадии

XI

00

XI о

со

Сл)

метофазы П. При 70-80% фактического наличия их в группе, дальнейшее культивирование прекращают. Ооциты могут быть оплодотворены семенем быка-производителя, Использование активного ФСГ обес- печивает созревание ооцитов самок крупного рогатого скота уже через 25-26 ч.

Результаты 30-часового культивирования ооцитов приведены в таблице.

Как видно из данных таблицы, в первой серии опытов доза 10/г кг/мл испытываемого ФСГ была эквивалентна такой же дозе стандартного ФСГ, а во второй серии опытов - проверяемый гормональный препарат был не менее активен. Лишь доза 15/гкг/мл соответствовала эквивалентному количеству в 10/ кг/мл стандартного ФСГ.

Таким образом, использование предложенного способа определения активности фолликулостимулирующего гормона позво- ляет в течение 25-30 ч с минимальными затратами труда и средств определить фактическую активность испытываемого гормонального препарата. При этом не нарушается биотехнологический процесс воспроизводства сельскохозяйственных животных. Отпадает необходимость в выращивании инфантильных крыс или мышей, их инъецировании, взятия влагалищных маз- ковб забоя с последующей препаровкой и взвешивания их полового аппарата.

Формула изобретения

Способ определения активности фолликулостимулирующего гормона, включающий оценку его физико-биологического воздействия на биологические объекты, о т- личающийся тем, что, с целью упрощения способа, в качестве биологического объекта используют ооциты животных, а оценку биологической активности гормона по интенсивности созревания ооцитов в питательной среде.

Использование: ветеринария, в частности способы определения активности гормонов, стимулирующих половую охоту и полиовуляцию у самок сельскохозяйственных животных. Сущность изобретения; активность фолликулостимулирующего гормона определяют по его воздействию на биологические объекты. В качестве биологического объекта используют ооциты животных. Оценку биологической активности гормона осуществляют по интенсивности созревания ооцитов в питательной среде. 1 табл.