Способ культивирования хлореллы Советский патент 1993 года по МПК C12N1/12 A01H13/00 

Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к способам культивирования одноклеточных организмов, к каким относится хлорелла.

Целью изобретения является повышение выхода биомассы хлореллы,

Это достигается тем, что известный способ культивирования хлореллы на питательной среде известного состава в сосудах с рабочим объемом для питательной среды в 1 л при оптимальных условиях перемешивания воздухом, освещения и температуры, дополняется тем, что по достижении хлореллой плотности популяции (40-50) млн.кл/мл в каждом из параллельно работающих сосудов сливают вместе выращенные суспензии из 5-6 таких сосудов в один более объемный и продолжают культивирование в том же режиме до достижения плотности популяции 210-250 млн.кл/мл.

Выход биомассы при этом составляет до 5,4 г/л, что по биомассе на 15% выше,

чем при известной технологии выращивания хлореллы.

Сущность изобретения состоит в следу- . ющем. Известный способ культивирования хлореллы в нескольких сосудах с рабочим объемом в 1 л для питательной среды, содержащей минеральные соли и фильтрат жидких отходов, образующихся при варке и бланшировке картофеля на картофелепере- рабатывающих предприятиях, включающий засев маточной культурой Chlorella Vulgarls с исходной концентрацией засева не менее, чем 8-10 млн.кл./мл, выращивание при температуре 23±1°С, освещенности 4500±500 лк, 12-часовом чередовании светового и темнового периодов, при перемешивании воздухом в течение светового периода, дополняется тем. что по достижении плотности популяции (40-50) млн,кл./мл в каждом из параллельно работающих сосудов сливают вместе выращенные суспензии из 5-6 таких сосудов в один более объемный

00

о

ON

00 СП

СО

и продолжают культивирование в том же режиме до достижения плотности популяции 210-250 млн.кл/мл,

Существенным отличием предлагаемого изобретения является то, что популяция хлореллы не проходит в своем развитии стрессовой фазы, и это гарантируется, во- первых, временной синхронизацией указанных действий по соединению параллельных в количестве 5-Q популяций хлореллы с достижением ими указанных плотностей в (40-50) млн.кл/мл (при выращивании в сосудах с рабочим объемом в 1 л для питательной среды), во-вторых, временной синхронизацией момента прекращения культивирования с достижением плотности объединенной популяции (210-250) млн.кл/мл; и такая последовательность операций из литературы неизвестна.

Пример 1, Для приготовления фильтрата жидкие отходы, образующиеся при варке и бланшировке картофеля, направляют в емкости, где они отстаиваются в течение 30 мин, после чего надосадочную жидкость сливают и пропускают .через фильтр для получения фильтрата с концентрацией сухих веществ 1,5%. В 100 мл полученного фильтрата жидких отходов вносят 0,3 г азотно-шслого калия, 0,08 г однозаме- щенного фосфорно-кислого калия, перемешивают и доливают указанный фильтрат до общего объема 1 л, после этого подвергают дробной стерилизации 3 раза через сутки при 0,02 Мпа в течение 30 мин.

Приготовленную таким образом среду заливают в параллельные сосуды в количестве по 1 л в каждый и засевают маточной культурой Chlorella Vulgarls с исходной концентрацией засева не менее, чем 8-10 млн.кл./мл. Культивирование микроводо- росли ведут при температуре 23±1°С, освещенности 4500±500 лк и чередовании светового и темнового периодов 12:12. В течение светового периода культуру перемешивают воздухом. По достижении хлореллой плотности популяции (40-50) млн.кл./мл в каждом из параллельно работающих сосудов сливают вместе выращенные суспензии из 4 таких сосудов в один более объемный и продолжают культивирование в том же режиме. Один или несколько однолитровых сосуда оставляют для контроля. Выход биомассы при этом составляет для контрольного варианта (прототип) 4,52 г/л при плотности популяции 217 млн.кл./мл, Для сосуда, в котором происходит доращи- вание объединенной культуры, выход биомассы составляет 4,96 г/л при плотности популяции 278 млн,кл./мл.

Пример 2. Приготовление фильтрата из жидких отходов, засев маточной культурой Chlorella Vulgaris, а также температура, яркость и режим освещенности остаются такими же, как это описано в примере 1.

По достижении хлореллой плотности популяции (40-50) млн.кл./мл в каждом из параллельно работающих сосудов сливают вместе выращенные суспензии из 5 таких

сосудов в один более объемный и продолжают культивирование в том же режиме. Выход биомассы составляет 5,31 г/л при плотности популяции 252 млн.кл./мл.

Пример 3. Приготовление фильтрата

из жидких отходов, засев маточной культурой Chlorella Vulgarls, а также температура, яркость и режим освещенности остаются такими же, как это описано в примере 1.

По достижении хлореллой плотности

популяции (40-50) млн.кл./мл в каждом из параллельно работающих сосудов сливают вместе выращенные суспензии из 6 таких сосудов в один более объемный и продолжают культивирование в том же режиме,

Выход биомассы составляет 5,44 г/л при плотности популяции 212 млн.кл,/мл.

Пример 4. Приготовление фильтрата из жидких отходов, засев маточной культурой Chlorella Vulgarls, а также температура,

яркость и режим освещенности остаются такими же, как это описано в примере 1.

По достижении хлореллой плотности популяции (40-50) млн.кл./мл в каждом из параллельно работающих сосудов сливают

вместе выращенные суспензии из 7 таких сосудов в один более объемный и продолжают культивирование в том же режиме.

Выход биомассы составляет 5,02 г/л при плотности популяции 192 млн.кл./мл.

П р и м е р 5. Приготовление фильтрата из жидких отходов, засев маточной культурой Chlorella Vulgaris, а также температура, яркость и режим освещенности остаются такие же, как это описано в примере 1.

По достижении хлореллой плотности популяции (30±3) млн.кл./мл в каждом из параллельно работающих сосудов сливают вместе выращенные суспензии из 5 таких сосудов в один более объемный и продолжают культивирование в том же режиме.

Выход биомассы составляет 4,33 г/л при плотности популяции 176 млн.кл./мл,

Пример 6. Приготовление фильтрата из жидких отходов, засев маточной культурой Chlorella Vulgarls, а также температура, яркость и режим освещенности остаются такими же, как это описано в примере 1.

По достижении хлореллой плотности популяции (30±3) млн.кл./мл в каждом из

параллельно работающих сосудов сливают вместе выращенные суспензии из 6 таких сосудов в один более объемный и продолжают культивирование в том же режиме. Выход биомассы составляет 4,48 г/л при плотности популяции 184 млн.кл./мл.

Пример 7. Приготовление фильтрата из жидких отходов, завес маточной культурой Chloretia Vulgaris, а также температура, яркость и режим освещенности остаются такими же, как это описано в примере 1.

При достижении хлореллой плотности популяции (60±5) млн.кл./мл в каждом из параллельно работающих сосудов сливают вместе выращенные суспензии из 5 таких сосудов в один более объемный и продолжают культивирование в том же режиме,

Выход биомассы составляет 5, .12 г/л при плотности популяции 245 млн.кл./мл.

Примерв. Приготовление фильтрата из жидких отходов, засев маточной культурой Chlorella Vulgaris, а также температура, яркость и режим освещенности остаются такими же, как это описано в примере 1,

По достижении хлореллой плотности популяции (60±5) млн.кл./мл в каждом из параллельно работающих сосудов сливают вместе выращенные суспензии из 6 таких сосудов в один более объемный и продолжают, культивирование в том же режиме.

Выход биомассы составляет 5,08 г/л при плотности популяции 210 млн.кл./мл.

Результаты эксперимента приведены в таблице.

Результаты о.пыта по выращиванию культуры Chlorells Vulgaris на субстрате, содержащем 0,3 г/л азотнокислого калия, 0,08 г/л однозамещенного фосфорно-кис- лого калия, 1,5 мае. % сухих веществ.

Из таблицы видно, что во втором и третьем опытах получены наибольшие выходы биомассы.

Таким образом, предлагаемый способ культивирования хлореллы позволяет повысить выход биомассы примерно на 15%.

Формула изобретения

Способ культивирования хлореллы, включающий выращивание ее на питательной среде при освещении в оптимальных условиях до максимального накопления биомассы, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода биомассы хлореллы, выращивание проводят в 5-6 параллельно работающих сосудах до достижения концентрации 40-50 млн. кл./мл в каждом сосуде, затем полученные культурэльные жидкости сливают в один более объемный сосуд и продолжают культивирование в тех же условиях до достижения концентрации 210-250 млн.кл./мл.

Использование: микробиологическая промышленность, способы культивирования хлореллы. Сущность изобретения: способ культивирования состоит в засеве маточной культурой сосудов с рабочим объемом в 1 л для питательной среды, получающейся из жидких отходов после варки картофеля, выращивание проводят при освещении в оптимальных условиях, после достижения хлореллой концентрации 40-50 млн.кл/мл в каждом из параллельно работающих сосудов сливают вместе полученные культураль- ные жидкости из 5-6 таких сосудов в один более объемный и продолжают выращивание в тех же условиях до достижения концентрации 210-250 мян.кл/мл. 1 табл.