Способ получения энтомопатогенного биологического препарата Советский патент 1993 года по МПК A01K67/00 

И

Использование: изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано для борьбы с колорадским жуком, озимой совкой и другими видами насекомых. Сущность: способ получения энтомо- патогенного биологического препарата заключается в разведении насекомого-хозяина Agrotls segetum S. при определенных лабораторных режимах и корме, заражении гусениц нематодами Prlstlonchus unlformis и последующем приготовлении концентрированного препарата, 3 табл.

Изобретение относится к микробиологической промышленности и может быть использовано при борьбе с колорадским жуком, озимой совкой и другими видами вредителей.

Целью изобретения является повышение выхода продукта и снижение его себестоимости.

Способ предусматривает разведение насекомого-хозяина на искусственном корме, заражение гусениц нематодами и приготовление препарата, причем для наработки препарата при поточном круглогодичном разведении используют нематоды Prlstlonchus unlformis. которыми заражают гусениц озимой совки Agrotls segetum Sen., а в качестве корма для гусениц используют картофель, морковь, пшеничные отруби и воду с добавками витаминов - аскорбиновой и фолиевой кислот, в качестве субстрата

культуры для выращивания гусениц озимой совки используют стерильную торфяную почву при температуре 26-28 С, относительной влажности воздуха 60-80% и длине светового дня 16-18 ч.

Пример. Способ включает поточное круглогодичное разведение озимой совки, заражение гусениц, сбор погибших насекомых и культивирование в них нематод, сбор нематодной биомассы, концентрирование, стандартизацию и хранение нематодной суспензии. В качестве садков для культивирования озимой совки используют вазоны для выращивания растений с верхним диаметром 120 и нижним диаметром 85 мм и высотой 115 мм или садки других размеров. Емкости устанавливали попарно один над другим, стыкуя широкими отверстиями. В нижние вазоны насыпали 50-200 г влажной 15-20% стерильной почвы, на которую уста00

ю ю о ю

навливалк поилку (донышко или крышку пластмассовой чашки Петри 0 40 мм), а на нее помещали ватный тампон, смоченный сахарным сиропом (5%-ный водный раствор). На землю помещали по 5 куколок озимой совки (2 самки - 3 самца), потемневших перед вылетом бабочек на 12-14 день инкубации. В каждую пару садков помещали листы фильтровальной бумаги, сложенные в виде гармошки, на которые самки откладывали яйца в течение 10-14 дней.

После начала откладки бабочками яиц в чистые вазоны насыпали стерильную сухую землю. Поверх земли насыпали тонкий слой сухих пшеничных отрубей (5-10 г). Туда помещали поилки-донышки чашек Петри с ватными тампонами, смоченными раствором витаминов (0,001 % аскорбиновой кислоты и 0,0001 % фолиевой кислоты, растворенных в воде). В каждую пару вазонов помещали по 1 гармошке из фильтровальной бумаги с яйцами, отложенными самками в течение 1-2 суток(100-300 яиц). Отродившиеся гусеницы зарываются в землю и выходят питаться ночью.

По достижении гусеницами 4-5 возраста их рассаживают по 5-7 особей в каждую пару вазонов и выращивают до окукливания, так же и младшие возраста. Гусеницы в почве окукливаются в колыбельках из склеенных частиц почвы. Куколок вынимают из почвы и инкубируют в чашках Петри на влажной почве до потемнения имагиналь- ных дисков. При массовом выращивании при температуре 2б-28°С, относительной влажности воздуха 60-80%, влажности почвы 10-15% и длине светового дня 16-18 ч, освещенности 1200 лк. гусеницы достигают 3-4 возраста (возраста наиболее пригодного и благоприятного для заражения нематодами) через 15-17 суток после внедрения в землю после отрождения.

Выбор основных параметров развития озимой совки осуществляли следующим образом.

Изучали влияние корма, субстрата для обитания насекомых и физических факторов при разведении озимой совки. В табл.. 1 представлены результаты исследований по влиянию корма и субстрата на выход конечного продукта.

В табл. 2 представлены результаты исследований по влиянию корма, субстрата и физических факторов на активность озимой совки.

Таким образом, наиболее благоприятными из испытанных параметров можно считать сочетание следующих факторов: влажность почвы - менее 15%, влажность воздуха 60-80%, температура воздуха 2628°С, освещенность 1000-1200 лк и длина светового дня 16-18 ч. Освещенность необходима для бездиапаузного развития гусениц. При изменении режима освещенности

гусеницы впадают в спячку и погибают. Торфяная почва оказалась более благоприятная для содержания гусениц, чем гумусная. Наиболее благоприятный корм - сухие пшеничные отруби с подкормкой морковью,

картофелем и раствором витаминов (аскорбиновая и фолиевая кислота).

Гусениц, отобранных для заражения, инваэировали нематодами из расчета 50- 100 личинок /гусеницу. Гибель насекомых от

заражения наступала на 2-3 сутки после заражения. Заражение осуществляли в чашках Петри по 10-20 особей в каждой. Иноку- люм наносили в водном растворе на фильтровальную бумагу, которой выстилали

донышки чашек Петри, прежде чем поместить туда гусениц.

Погибших насекомых, инвазировали нематодами, раскладывали на платформы из перевернутых (меньшего размера) чашек

Петри, обернутых фильтровальной бумагой, которые помещали в чашки большего диаметра с тонким слоем воды на дне. Воду с отловленными нематодами сливали ежедневно. На каждую платформу помещали по

10-15 особей.

Суспензию нематод отстаивали в течение суток, сливали супернатан и добавляли формалин в количестве 0,01%. после чего хранили в течение 1-1,5 года в холодильнике при температуре -4-6°С.

Сравнительная характеристика наработки препарата на предлагаемом объекте и личинках большого мучного хрущака представлены в табл. 3.

Формула изобретения

разведение насекомого-хозяина, заражение гусениц нематодами и последующее приготовление препарата, отличающийся тем, что в качестве насекомого-хозяина используют Ag rot Is segetum S, а для заражения гусениц используют нематоды Prlstlonchus unlformls.

морковь, пшеничные отруби и воду с добавлением витаминов - аскорбиновой и фолиевой кислот.

segetum S. осуществляют при температуре

26-28°С, относительной влажности воздухе 60-80%, длине светового дня 16-18 ч, а в

Влияние корма и субстрата на повышение выхода продукта

Агаровый корм

(среда Борисовой)60

Безагаровый (БП-10) 75

Порошковый (без подкормки)

Порошковый + витаминыTk

Порошковый 4 картофель + морковь + витамины С и Сг (предлагаемый)

Таблица2

Влияние корма, субстрата и физических факторов на развитие и активность озимой совки

Агаровый корм (среда Борисовой)

Безагаровый корм (ЬП-10)

Порошковый корм (отруби) без полкормки

Порошковый корм (отруби) с подкормкой витаминами С и Ъс

качестве субстрата используют стерильную

торфяную почву.

Таблица 1

72 1.05

28

56,3 82,1

21,9

103,6 81,0

117,0

трат

31,5

27,0 100

113

13Э6

ЗВь

во

римечание. - балл - гусеницы вялые, передвигаются с

трудом,

2- гусеницы передвигаются медленно, при

Прикосновении не пытаются бежать

3 гусеницы быстро передвигаются, при

прикосновении пытаются убекать остальные параметры во всех вариантах опыта:субстрат - торфяная почва; корм - отруби с подкормкой витаминами -f картофель, морковь

Продолжение табл.2

Сравнительная характеристика использования разных видов насекомых для воспроизводства пристионхус

Параметры

Известный способ на личинках большого мучного хрущака

Зараженность нематодами, % Количество насекомых с размножающимися нематодами

Таблица 3

Предлагаемый способ на гусеницах озимой совки

98

100

84

100