Способ повышения жизнестойкости оплодотворенной икры рыб Советский патент 1980 года по МПК A01K61/00 

I

Данное изобретение относится к рыб(фазведению, в частности к способу пог вышения жизнестойкости оплодотворенной икры рыб.

Известен способ, заключающийся в выдерживании оплодотворенной икры в водном pacTBqae биологически активных соединений. Б качестве соединения используют молоко fl.

Недостатки известного способа заключаются в невысоком выходе личинок из икры и высокой смертности выклюнувшихся личинок в Постнатальный период.

Цель изобретения - повьпиение выхода личинок путем снижения смертности последних в Постнатальный период.

Для достижения этой цели в качестве биологически активньк веществ, используют смесь Р) -каротина, oL -токоферола, убихинонай , пирогаллола, пропилгаллата и аскорбиновой кислоты соответственно при конце1гграции их в растворе 10 10 моля и в соотношении (0,2-2): :(0,4-5):(0,5-2,5):(0,8-3):(0,6-1.5):

:(0,7 5-5,5), при г этом вьщерживанив икры осуществляют в течение 10-6О мин. Способ основан на том, что антиокс - данты и их синергисты предотвращают последующей развитие в лишодах шфы и эмбриона свободно радикальных реакций, 1ФИВОДЯЩИХ к накоплению плазматических ядов (липидных перекисей и щюдуктов их распада), например у вьюновых и осетровых рыб в период эмбрионально10го развития при недостаточном запасе в яйцеклетке биоантиоксидантов возникает и развивается свободно-радикальная патология, для кoтqзoй характерно несвойственное нормальным физиологическим гфо15цессам повышение концентрации продуктов свободно-радикальных реакций. Эти гфодукты обладают активностью плазмати- четких ядов, в повышенных концентрациях нарушают активную и пассивную 1фо20ницаемость клеточных мембран и оболочек икры, угнетают энергетический и .пластический обмен в клетках эмбрионал ных тканей, ивдуцируют уродства и ы 1зывают гибель эмбрионов. При обогащении воды антиоксидантами и синергистами ан тиоксвдантного действия икра сорбирует эти вещества и таким образом оптимизируется эмбриогенез. Способ осуществляют следующим образом. Икру вьюновых либо осетровых рыб непосредственно после оплодотворения и обесклеивания вьщерживают в течение 1О-6О мин в смеси водных растворов антиоксндангов и синергистов антиоксиг дангного действия, например р, -карот1 на, оС -токоферола, убихинона Q , пирогал; лопа, пропилгаллата, аскорбиновой кислоты в соотношении 0,2:0,4: О,5:О,8; :О,6:О,75 - 2:5:2,5:3:1,5:5,5. Действующие агенты берут а виде двухкомпонентных либо трехкомпонентных смесей, тогда преимущественным соотношением для тех и других смесей является соотношение соответственно 1:1 и 1:1:1 Концентрацию для отдельных компоненто -U берут Ю - 1О моля/литр, что составляет в г/л для всех веществ 1О умноженное, соответственно, на р) -каротин - 468, L - токоферол - 416, убихиHoaOL Q- 754, пирогаллол - 126, пропи галлат - 196, аскорбиновая кислота 176. После этого икру переносят в инкуба ционный аппарат и инкубируют обычным образом. Пример 1. Готовят смесь антиоксидантов oL -токоферола и убихинона GLjjB соотношении 1:1 при концентрации каждого 1О моля (соответственно 416 7 54 Х- ), после чег .смешивают ее с Твином 8О в соотношении 1:1О. Затем к 10О мл полученной смеси добавляют 9ОО мл отстойной вод проводной воды, получив таким образом раствор, содержащий 1О антиоксидантов СХшодотворенную и обесклеенную икр вьюна помещают на ЗО. мин в эксикатор с полученным водным раствором антиок оадакгов, после чего икру переносят в эксикатор с отстойной водопроводной водой, где инкубируют икру при температуре 18 С. Каждые 8 часов воду меняют к удаляют погибшие личишси. На 2-3 сутки получают выклев личинок. П р и м е р 2. Берут производителей вьюна одинакового размера и состо яния и инициируют созревание половых продуктов общепринятым методом путем внутримышечной инъекции хориогонина. При температуре 2lC получают через 124 часа текучую самку. Самку аавор ивают в марлю и выдавливают икру в ухую чашку Петри. Забивают самца, звлекают семенники, помещают их в ту е чашку Петри, не приводя в соприкосовение с икрой и мелко измельчают ожницами. В чашку с половыми продуками приливают немного воды и осто эожыми покачиваниями чашки приводят икру и сперму в контакт. Такое покачивание проводят 3-5 мин для того, чтобы икра, которая в первый момент осеменения (активации) становится клейкой, не прилипала ко дну чашки и не склеивалась в комки. Активированную икру делят на 2 равные части и одну помещают на 30 мин в эксикатор с водным раствором антиоксидантов и из синергистов одной из указанных ниже концентраций. Обработанную таким образом икру партиями по 500 штук помещают в 3 эксикатора, в которых находится по 1 литру отстоянной водопроводной воды, в контрольные эксикаторы, идентичные экспериментальным, помещают по 500 активированных икринок из части, необработанной водными растворами антиоксидантов. Через каждые 8 часов во всех эксикаторах меняют воду и удаляют погибшие икринки. Температура воды в эксикаторах комнатная (15-20с). Смесь антиксидантов ( -токоферола и убихинона готовят в соотношении 1:1 при концентрации каждого 10 моля. Берут навеску dl-токоферола и убихинона в любой последовательности смешивают с полиоксиэтиленсорбитан моноолеатом (Твином 8О) в соотношении 1:1О. Берут 1ОО мл полученной смеси и добавляют 90О мл отстойной водо1ФОВОДНОЙ &ОДЫ. Полученный раствор содержит 1() моля антиоксидантов. Аналогичным приемом получают растворы с концентрациями антиоксидантов 1О , 10 lO-f . В результате на 2 - 3-й сутки получают выклев личинок и на 3-и сутки имеют в контроле в 1 - 3-ем эксикаторах соответственно мертвых (к моменту выклева) 178, 231, 287 икринок и вышедших из оболочки личинок 50, 33, 2О штук. На 6-е сутки от нач;ала инкубации имеют уродливых личинок 160, 138, 1О2 щтук и нормально развивающихся 162, 131, 111 штук. В партии обработанной антиоксидантами, например концентрациями 1(5 м/литр, на 3-й сутки имеют в1 - 3-ем эксикаторах соответственно мертвых (к моменту выклева)

131, 138, 167 икринок, вышедших из оболочки 108, 130, 139 личинок. На .6-е сутки от начала инкубации имеют уродливых личинок 66, 35, 28 штук и нормально развиваюишхся 303, 327, 305 штук.

При обработке после оплодотворения икры осетровых рыб согласно предлагаемому способу двухкомпонентной смесь антиокидантов oL -токоферол и убихинон

равных соотношениях при концентрашш каждого 1СГм, например севрюги, и дальнейшем выдерживании икры в экспериментальных условиях выход личинок на 4-е сутки больше, чем в контроле, а, начиная с 9-х суток, процент выживших личинок значительно превышает контрольный, где на 12-е сутки не остается живых особей, в то время как при использовании предлагаемого сопсоба со;фаняется около 7О% личинок севрюги.

Таблица 1

j Антиоксид анты (равные соотношения при концентрации ) В-кароти Н.-токоферол- -убихинонй + пирогаллол+пропилгаллат аскорбиновая кислота Пропилгаллат+А-токоферол+убихинонКонтроль Из таблицы 2 видно, что обработке после оплодотворения икры в течение 30 мин воднымя: растворами антиоксидантов и,их синергистов всех компонентов выживаемость личинок на ЗО-й день равна 80-85% при контроле равном 9%. Длина личинок на ЗО-й ден колебалась в контроле от 3 до 1О мм, прн обработке икры антиоксидантами и их синергистами была 8-12 мм при большей однородности особей. П р и м е р 3. Берут смесь антиокс дангов (пирогаллола, dL-токоферола и убюишона Q ) в соотнсшениях 1:1:1 ор концентрации каждого 1СГ моля. ДальТаблицаНор ес Минимальный и максимальразвивающиный размер личинок (мм) ки на ЗО-й (%) O нейшие операции проводят согласно способу. В результате получают в течение 2-3 сутоквыклевличинсж и на 3-й сутки имеют в контроле в 1 - 3-ем эксикаторах соответственно мертвых (к моменту выклева) 180, 2ОО, 296 икринок и вышедших иа оболочки личинок 54, 38, 18. На б-е сутки от начала инкубации имеют уродливых личинок 164, 121, 94 штуки и нормально развиваюшихся 156, 179, НО штук. Выклев личинок в контроле наблюдают от 6О до 75 часа эмбриогенеза, при основной массе выклюнувшихся осо бей на 72-75 час.

В партии, обработанной ангиоксидан- , таМи, например концентрациями 1Ь моля, на 3-й сутки имеют в 1 - эксикаторах соответственно мертвых (к моменту выкле)а} 44, 23, 6 икринок и вышедших из оболочки 456, 477, 494 личинок. На сутки от начала инкубации имеют уродливых личинок 21, 31, 42 штуки .и нормально развивающихся 435, 446, 452. Выклев в партии, обработанной антиоксидантами, наблюдают от 46 до 52 часов инкубации при основ№сЛ массе выклюнувшихся особей на 4852 час.

ТехниЕо-економический эффект способа заключается в том, что способ позволяет : увеличить выход личинок из икры в 3 раза, Jrмeньшить их смертность в постнатальный период в 8 раз и получать QQHqppaHbie популяции разбивающихся личинок по скорости роста и приросту биомассы и размерам.

Формула изобретения

Способ повьпиения жизнестойкости оплодотворенной икры рыб, закпючаюишйся в выдерживании оплодотворенной икры в водном растворе биологически активных соединений, отличающийс я тем, что, с целью повышения выхода личинок путем снижения смертности последних в постнатальный период, в качестве биологически активных веществ . используют смесь -каротина,с(, -токофе- рола, убихинона СЦр пирогаллола, пропилгаллата и аскорбиновой кислоты соответственно при концентрации их в растворе Ю моля и в соотношении (О,2-2): (0,4-5): (0,5-2.5): (0,8-3): (0,6-1,5): (0,75-5,5), при этом выдерживание икры осуществляют в течение 106О минут. Источники информации,

принятые во внимание при экспертизе 1. Авторское свидетельство СССР №554848, кл. А 01 К 61/ОО, 1976.