Способ получения искусственного партеногенеза у кур Советский патент 1980 года по МПК A01K67/00 

Изобретение относится к биологии, в частности к генетике и эмбриологии, и может быть использовано в генетических исследованиях и в экспериментальной эмбриологии. Известен способ получения искусственного партеногенеза на неоплодотворенных яйцах насекомых, земноводных, пресмыкающихся и млекопитающих, который осуществляется путем воздействия электрического тока иглоукалывания, обработкой гиалуронидазой, осмотическим шоком и др. 1J. Известен также способ выявления естественного партеногенеза на индей ках путем инкубации неоплодотворенны яиц PJ . Наиболее близким способом к предлагаемому является способ получений партеногенетического развития у кур Гз1, который осуществляется путем ин кубирования неоплодотворенных яиц разных пород и линий кур в инкубаторе при 37,50с, где было установлено, что способность кур к зачаточному партеногенезу, также как и у индеек, наследственно обусловлена. Для темного корниша в линиях с высокой частотой зачаточного естественного партеногенеза она доходила до 40-50%, для белого леггорна Белтвиллских линий она составила 0-0,12%. Недостатком известного способа является то, что он применим для птицы, партеногенез которой наследственно обусловлен/ а для выявления этой склонности требуется инкубирование многих тысяч яиц.-Дальнейшее повышение частоты партеногенеза требует проведения многолетней селекционной работы на породах кур, которые с самого начала показали высокий уровень естественного партеногенеза. Применение этого способа на курах с низкой частотой естественного партеногенеза не приводит к успеху. Цель изобретения - получение искусственного партеногенеза у кур с низкой частотой естественного партеногенеза. Поставленная цель достигается тем, что проводят извлечение фолликул размером 17-37 мм из тела курицы, затем воздействуют тепловым потоком при 45-46 С в течение 30-40 мин в присутствий питательной среды, содержащей 48-50% куриного белка на растворе Хенкса с последующим инкубированием in vitro фолликул в этой среде. Пример . У 60-ти виргинных кур-несушек породы белый леггорн линии М-9 из брюшной полости извлекают все крупные фолликулы (примерно за 1,2,3 суток до образования и .снесения яйца) и освобождают от наружной фолликулярной оболочки. Полное отделение фолликулярных оболочек вызывает разрыв желточной оболочки. Фолликулы без наружной фолликулярной оболочки помещают в стеклянные центрифужные стаканы, имеющие внутренний диаметр 40 мм, в которых находится питательная среда, содержащая 48-50% гомогената жидкого белка оплодотворенных яиц после 12-15 ч инкубации на физио логическом растворе Хэнкса. Сверху стаканы закрывают целлофановой пленкой, которая имитирует скорлупу яйца и тем самым способствует хорошему га зообмену, сохранению стерильности и предотвращению испарения. Сверху ста . каны стягивают резиновым кольцом, по мещают на водяную баню и активируют фолликулы кратковременным.тепловым по током при 45-4бс в течение 30-40 ми затем инкубируют 24 ч при 41, и в последующие сутки при , и влажности 58-60%. В процессе инку/ бирования определяют наличие искусст . венного партеногенеза путем определе ния степени развития бластодерлы, ее размеров и наличия эмбриональных кле ток. Результаты опытов стимуляции фолликул кур-несушек к партеногенезу пр ведены в таблице. Продолжение табл. В общей сложности на 3-й сутки из 250 фолликул, использованных в опытах, 198 штук показали развитие 75,2%, из фолликул диаметром более 15 мм показали развитие 96% (195 из 203). Положительный эффект определяется тем, что способ получения искусственного партеногенеза у кур позволяет получать до 96% партеногенеза в линиях кур с низкой частотой естествен-. ного партеногенеза. При этом исключается инкубация большого числа яиц. Кроме того, данный способ позволяет изучать ранние этапы эмбриогенеза, генетическую роль материнских генов, летальные гены и мутации и может быть использован для других сельскохозяйственных птиц с низкой частотой естественного партеногенеза. Формула изобретения Способ получения искусственного партеногенеза у кур, отличающийся тем, что, с целью получения искусственного партеногенеза в породах кур с низкой частотой естественного партеногенеза, проводят извлечение фолликул размером 17-37 мм из тела курицы, затем воздействуют тепловым потоком при температуре 454бс в течение 30-40 мин в присутствии питательной среды, содержащей 4850% куриного белка на растворе Хэнкса с последующим инкубированием in vitro фолликул в этой среде. Источникиинформации, принятые во внимание при экспертизе 1.Авторское свидетельство СССР № 656607, кл. А 01 К 67/00, 1975. 2.01 sen М. Aviom parthenogenesis Al-S-NE-65, 1975. 3.Olsen М. J. Heredity, 1966, 57,. 23-25.