Установка для электрофореза Советский патент 1981 года по МПК C25B7/00 

био.чогических препаратов и через мпогокапальпый перистальтический насос посредством переходника с резервуаром для рабочего буферпого раствора п с коллектором, выполненным в виде емкостей-приемппков фракций и отработапиого раствора, снабженных штуцерами, доиолпительно содержит газожидкостпые сепараторы, соединенные через циркуляционный насос с электрофоретичеекой камерой, а емкости-приемники фракций п отработанного раствора выполнены из эластичного материала и расположены в резервуаре для рабочего буферного раствора, иерслодпик вьпюлнен в виде миогокана.тьпого гидроразъема, пижняя часть которого расположепа в резервуаре для рабочего буферпого раствора и выполнена в виде диафрагмеипого гидрораспределителя, а верхняя, связанная с многоканальным перпстальтичееким наеоеом i электрофоретической камерой, выполнена в виде иабора капиллярных игл с обии1м иглодержателем и установлена с возмо кпос ью возвратно-поступательного перемещеиия. Кроме того, гидрораспределитель состоит из металлической иласти1Пз1 и раеположеииых сверху и спизу самоуилотпяющихся прокладок, причем илае1ипа имеет отверст 1я, расиоложе1И ые сооспо штуцерам емкостей-приемпиков фракций п отработн пого раствора, сообп1,а101циеся между собой, и отверстия для отбора буферного раетвора, верхняя прокладка выполнена сплошной, а нижняя имеет отверетия, раеположенпые сооепо штуцерам емкоетей-приемпиков отработанного раствора и отверстиям для отбора буферного раствора. Р1а фиг. 1 изобралсена схема предлагаемой установки для электрофореза; на фиг. 2 показан переходник для рабочего буферного раствора и коллектора. Установка для электрофореза содержит электрофоретичеекую камеру 1, соединенпую с блоком 2 биологических препаратов и через многоканальный перистальтический наеос 3 посредством переходника 4 с резервуаром 5 для рабочего буферного раствора и коллектором 6, а через циркуляционный насое 7 с емкостью 8 для электродного буферного раствора п газо/кидкостнымн сенараторами 9, пульт 10 и блок питапия 11. Все гидравличеекп евязанпые элементы охлаждаютея циркулирующим теплоносителем. В резервуаре 5 для рабочего буферного раствора размещен коллектор 6, выполненный в виде злаетпчиых е.мкостей-прпемпиков 12 разделенных фракций и емкостейприемников 13 отработанного раетвора. Последние необходимы для промывки полостей электрофоретической камеры 1 и гидромагистралей после проведеиия разделения одного биопрепарата, например белка, перед разделением другого биопрепарата, например клетки. Емкоети-приемники 12 для разделенных фракций соединены со штуцерами 14, запрессованными в основапне 15 гндрораснределителя, входы которых заглушены самоунлотняющейея проклс1дкой 16. Отверстия в пластине 17, еоосные заглушенным штуцерам 14, соединены каналом и еообш,аются через незаглушенные штуцеры 18 е емкостями-прие1миикамп 13 отработанного раствора, а входы их заглушены еамоушютняющейся прокладкой 19. В осповапип 15 предусмотрены нанравляюш,ие для стыковки с другой частью гидроразъема, которая иредетавляет собой сборную конструкцию, состоящую из иглодержателя, выполненного в виде пластины 20 с запрессованными в ней иглами 21, входы которых в расстыкованном положении заглушены самоуплотняющейся прокладкой 22. В плас1ине 20 предусмотрены отверстия для направляющих другой части гидроразъема. Смонтироваппый на этой части гидроразъема нривод ее возвратно-поступательного перемещения предназначен для автоматической стыковки обеих частей гидроразъема в трех фикеировапных положениях. В первом положении нглы 21 находятся вне гидрораспределителя (фиг. 2), что соответствует расстыковаииому гидроразъему. Второе положение. Махождение игл 21 в отверстиях пластины 17 гидрораспределителя образует гидравлическую евязь электрофоретичеекой камеры с емкостями-приемниками 13 отработанного раствора и резервуаром 5 для рабочего буферного раствора. Третье положение. Нахождение игл 21 в штуцерах 14 обеспечивает гидравлическую связь электрофоретической камеры с емкостями-приемниками 12 фракций и резервуаром 5 для рабочего буферного раетвора. В днище резервуара для рабочего буферного раствора находится штуцер 23, на который надет эластичный мешок 24, имеющий связи с окружающей атмосферой и обеспечивающий равенство давления жидкости во всех емкостях и окружающего атмосферного воздуха. Установка для электрофореза работает следующим образом. Биологичеекий препарат, подлел ащий разделепию, е помощью механизма подачи поступает из блока 2 для биологических препаратов в электрофоретичеекую камеру 1 (фиг. 1). Одновременно с этим многоканальный перистальтичеекий насое 3 обеспечивает поступление в электрофоретичеекую камеру I рабочего буферного раетвора из резервуара 5. Под воздействием электрического поля, источником которого является блок 11 высоковольтного питания, биологический препарат разделяется на фрак5

ции с одинаковой электрофоретической подвижностью.

Выделяющиеся при электрофоретическом процессе электродные газы удаляются из электрофоретической камеры 1 потоком электродного буферного раствора, подаваемым циркуляционным насосом 7. Из магистрали электродные газы удаляются газожидкостными сепараторами 9. Обезгаженный таким образом электродный б гферный раствор поступает в емкость 8, откуда вновь подается в электрофоретическую камеру 1.

Разделенные фракции вместе с буферным раствором подаются многоканальным перистальтическим насосом 3 через переходник 4 в емкости-приемники разделенных фракций коллектора б или при выведении устройства на заданный режим работы - в емкости-приемники отработанного раствора коллектора 6 в зависимости от положения переходника 4, определяемого возвратно-поступательным прнводом.

Переходник может находиться в одном из трех положений. Первое состояние - исходное, соответствует расстыкованному состоянию гидроразъема, при котором иглодержатель с капиллярными иглами 21 находится в таком ноложенни. что выходные отверстия всех капиллярных игл 21 оказываются погруженными в тело самоунлотняюшейся нрокладки 22.

Во ВТОРОМ положении осуидествляется гидравлическая связь электроАоретической камеры с ДВУМЯ эластичными емкостямиприемниками 13 отпаботанного раствора по каналам отбопа Лпакнии и с оезервуаром 5 для рабочего буферного раствооа по двум дополнительным каналам, по КОТОРЫМ осуществляется полама рабочего буферного раствора в электроборетическую камеру. В этом состоянии иглодержатель заннмает положение, при котором иглы, пройдя через самоуплотняющнеся нрокладки 16 и 19, располагаются следующнм образом: выходные отверстия игл, по которым ослщтествляется сбор (Ьракций, попадают в ПРОДОЛЬНЫЙ канал, а выходные отверстия двух игл, по которым ПРОИЗВОДИТСЯ отсос буферного раствора, располагаются в соответствующих отверстиях пластины гндроразъема. Наличие такого состояния гидроразъема позволяет производить ПРОМЫВКУ электрофоретической камеры рабочим буферным раствором.

Третье положение переходника позволяет осуществлять прием фракций в эластичные емкости коллектора и одновременно обеспечивать подачу рабочего буферного раствора из резервуара. При этом иглодержатель фиксируется в положении, при котолом выхолнт.те отвепстия игл, по КОТОРЫМ производится сбор Лпакпнй. пронтедщих через самоуплотняющиеся прокладки, попадают в емкости-приемники фракций, а выходные отверстия двух дополнительных

б

игл, по которым производится отсос рабочего буферного раствора из резервуара, как и во втором положении, находятся в резервуаре для рабочего буферного раствора.

Изобретение позволяет проронить электрофоретическое разделение биоппрпаратов в различных буферных средах, что существенно расщнряет экспепиментальттые возможности предлагаемого устпойства. Кроме того, применение таких блоков, снаряженных стерилизующими и консервирующими растворами, позволяет пповопнть стерилизацию и консервацию э,лектоофоретического устройства без его разборки.

Работа блока основана на пришхипе замещения объемов: при заполнении эластичных емкостей-приемников ко,тлектора пронсхолртт отбор рабочего буферного ряствора из резервуара, причем скорости отбора л :идкости из резервуара для рабочего блферного раствора и поступления ее в емкости-приемники коллектора равны. Таким образом, суммаоттый объем жидкости в блоке всегда остается постоянным. Использование этого иринцт1па позволяет уменьшить габаритиые размеры устпойства за счет отказа от емкости для буферного раствора как самостоятельной конструктивной едиНИНЫ.

Поимененне диафоагменного многоканалытого гиярорасипеяелителя обеспечивает герметичное гидоавлическое соединение или пазъелинение прелвапительно заполценной раствором электроФопетической камепы с резепвуаром для рабочего блФепного раствора и емкостями-приемниками коллектора, а также ппепятствл ет попаданию воздуха как в электрофоретическую

камеру, так и в резервуар для рабочего буфериого раствора и смкости-приемиики коллектора.

Применение этой устаттовкн позволяет проводить разделение различных образцов,

а также их хранение и консервацию.

Формула изобретения

1. Установка лля электрофореза, содержащая электрофоретическую камеру, соединенную с блоком бнологических препаратов и через многоканальный перистальтический насос посредством переходника с резервуаром для рабочего буферного раствора и с коллектором, выполненным в виде емкостей-ппиемнисов фпакиий и отработанного раствора, снабженных титуцепами, отличающаяся тем. что. с целью уменьТ1ТРН1ТЯ габяпитоя лттяновкч и пасщтшенття

области ее ППТТМРНРЦЦЯ. оттл пополнительно солепжит ГЯЗОЖ1Т1КОСТНЫР српапатопы. соелинрнныр чепез тгипкулятппнцнй насос с электрофоретической камерой, а емкостинриемники фракций и отработанного раствора выполнены из эластичного материала

7

н расположены в резервуаре для рабочего буферного раствора, переходник вынолнен в виде многоканального гидроразъема, нижняя чаетг которого расноложена в резерВ}аре для рабочего буферного раетвора и выполнена в виде днафраг.менного гидрораснределителя, а верхняя, связанная с многока 1альным перистальтическим насосом и электрофоретичеекой камерой, выполнена в виде набора капиллярных игл с общим иглодержателем н установлена с возможностью возвратно-поступательного перемещения.

2. Установка по н. 1, от л и чающаяся тем, что гидрораспределитель состоит из металлической пластины и расноложенных

сверху и снизу самоуплотняющихся прокладок, нрнчем нластина имеет отверстия, расположенные соосно нпуцерам емкостейириемпиков фракций и отработанного раствора, сообн1,ающиеся между собой, и отверстия для отбора буферного раствора, верхияя прокладка выполнена силощной, а нижняя имеет отверстия, раеположепные соосно штуцерам емкостей-прнемников отработанного раствора н отверстиям для отбора буферного раствора.

Источники инф.рмацин, нринятые во внимание при экспертизе

1. «Ракетная техника и космонавтика, 1978, т. 16, № 5, с. 213-216 (ирототии).