ПРЕПАРАТ ДЛЯ БОРЬБЫ С ГНОЙНО-НЕКРОТИЧЕСКИМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ ДИСТАЛЬНОГО ОТДЕЛА КОНЕЧНОСТЕЙ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА "ПРОЦЕОЛ" Российский патент 1994 года по МПК A61K37/00 A61K37/00 A61K35/00 

Предполагаемое изобретение относится к ветеринарным лекарственным средствам, биологически активным веществам, и предназначено для использования при лечении животных на молочных и откормочных фермах, комплексах.

Массовая заболеваемость дистального отдела конечностей сельскохозяйственных животных (крупного рогатого скота и овец) является причиной значительного экономического ущерба животноводства как у нас в стране, так и за рубежом.

У больных животных в зависимости от тяжести заболевания конечностей снижается молочная продуктивность от 8 до 27% и более, прирост массы при доращивании и откорме - 30%, а также воспроизводительные функции.

При отсутствии лечении или его неудовлетворительной организации до 70% больных животных преждевременно выбраковывается на убой, что снижает возможность производства молока и мяса.

Причинами широкого распространения болезней конечностей является травматизм, болезни обмена веществ, нарушение зоогигиенических и ветеринарно-санитарных правил в технологии содержания скота, плохой уход за конечностями животных.

В условиях крупных специализированных животноводческих ферм диагностика начальных стадий болезний конечностей и копытец весьма затруднительна, так как асептические, поверхностные гнойные ламиниты, пододерматиты, свежие раны, проникающие трещины копытцевого рога характеризуются незначительным развитием воспалительного процесса и клинически проявляются в виде хромоты легкой степени. Отсутствие лечения приводит к развитию возбудителей хирургической инфекции, поражению глубоколежащих тканей копытец и тяжелейшим осложнениям - глубоким гнойным пододерматитам, некрозу копытцевой кости, артритам копытцевого сустава, подотрохлеитам, флегмонам мякиша и межкопытцевым флегмонам. Перечисленные заболевания сопровождаются выраженными клиническими признаками - хромотой средней и сильной степени, резкой болезненностью, повышением местной температуры, воспалительным отеком и обилием некротизированных тканей на месте повреждения.

Лечение болезней конечностей на этой стадии требует громадных затрат и должно быть направлено на удаление некротизированных тканей, на подавление возбудителей хирургической инфекции и стимулировании регенеративных процессов. В противном случае оно неэффективно и животные подвергаются выбраковке и вынужденному убою.

Среди комплекса средств, рекомендуемых и применяемых уже для лечения животных в настоящее время, существенное место занимают пролонгированные ферментные препараты.

Так известен препарат профезим (пролонгированный ферментный препарат - биологически активное вещество), широко применяемый в медицине и ветеринарии для лечения острых гнойно-некротических процессов различной этиологии, а также длительно незаживающих ран у сельскохозяйственных, домашних и лабораторных животных. При использовании препарата в ветеринарии перед нанесением его в области дистального отдела конечностей выполняют туалет раны с удалением гноя и свободнолежащих нежизнеспособных тканей. По возможности иссекаются все некротизированные ткани, вскрываются ниши и карманы. При отсутствии стока раневого экссудата необходимо использовать дренаж (марлевый или из полиэтиленовых трубок). Затем на рану наносят тонкий слой суспензии профезима и накладывают марлевую повязку, увлажненную физиологическим раствором. Повязку закрепляют. Препарат применяется раз в трое суток до полного очищения раневой поверхности от гнойно-некротических масс в сочетании с антибактериальными средствами, антисептиками с последующим использованием сухих присыпок. Очищение гнойно-некротической некробактериозной раны происходит на 7-8 сут, полное заживление раны под воздействием профезима в сочетании с показанными антибактериальными средствами наступает на 18-22 сут.

Препарат профезим обладает целым набором положительных свойств: оказывает некролитический, противоотечный и противовоспалительный эффекты в первой фазе раневого процесса, стимулирует регенерацию, ускоряет рост и созревание грануляционной ткани во второй фазе, снижает интоксикацию организма продуктами распада тканей и токсинами микрофлоры. В то же время продукты раневого распада должны удаляться из раны за счет создания дренажей и других вспомогательных процедур. Работа с препаратом очень трудоемкая, поскольку профезим применяется на стадиях заболеваний конечностей у крупного рогатого скота, когда начинаются гнойно-некротические процессы. В силу трудоемкости процесса обработки (расчистка, многократная фиксация животных) препарат не применяют на начальных стадиях, при тяжелых и массовых поражениях конечностей у скота на фермах и комплексах.

Высокая стоимость препарата не позволяет использовать его в виде ванн, к тому же он не обладает адгезивными свойствами, а при применении его в виде аппликаций, в силу ограниченной всасывающей способности марлевых повязок продукты лизиса некротизированных тканей задерживаются в ране.

Известны сухие смеси для профилактики заболеваний конечностей крупного рогатого скота, содержащие цеолит и медный купорос в соотношении 20:1. Эти смеси применяют в виде сухих ванн, через которые прогоняют животных. Профилактический эффект против заболеваний конечностей крупного рогатого скота достигается за счет действия сернокислого купороса как антимикробного агента и цеолита, осушающего поверхность конечности животного, тем самым достигаются условия, ограничивающие развитие микрофлоры, вызывающей заболевания дистального отдела конечностей крупного рогатого скота.

Ванны, которые заполняются сухими смесями измельченных цеолитов и медным купоросом, в условиях ферм быстро загрязняются экскрементами, в зимних условиях они быстро замерзают и выходят из строя, а в летнее время под действием массы животных превращаются в каменистую массу. Биодоступность смесей к микротравкам копытец и пальцев низка. Вследствие этого ванны с сухими смесями измельченного цеолита с медным купоросом не нашли широкого применения в ветеринарной практике.

Таким образом, в настоящее время существует острая потребность в препарате, который обладал бы высокими профилактическими и лечебными свойствами, был удобным и нетрудоемким в применении при использовании для массовой профилактики и лечения гнойно-некротических процессов различной этиологии у сельскохозяйственных животных (крупного рогатого скота, овец, оленей).

Поставленная задача решается препаратом для профилактики и лечения гнойно-некротических заболеваний дистального отдела конечностей сельскохозяйственных животных, содержащим измельченный до состояния пушонки природный цеолит и протеолитический фермент (ГЗХ) - протосубтилин, взятые в следующем соотношении, мас. части: цеолит - 20,0, протеолитический фермент 0,3...1,0.

Препарат назван авторами процеолом.

Природные цеолиты - группа минералов, представляющих собой по составу водные алюмосиликаты щелочных и щелочноземельных металлов и имеющих общую эмпирическую формулу элементарной ячейки
M ˙[(AlO₂)_x ˙ (SiO₂)_y] ˙zH2O, где М - катион или катионы с суммарной валентностью Х. Отношение y/x зависит от минерального вида цеолита, характера кристаллической решетки и в большинстве случаев изменяется от 1 до 5.

Цеолиты относятся к подклассу трехмерных каркасных алюмосиликатов. Их кристаллическая решетка построена из четырех пяти и более многочисленных колец, образованных кремнекислородными тетраэдрами. В той или иной части этих тетраэдров атом кремния замещается алюминием; возникающие при этом отрицательные электрические заряды каркаса кристаллической решетки компенсируются в основном катионами натрия, калия, кальция. В результате такого строения во внутрикристаллическом пространстве цеолитов образуется система соединенных между собой микрополостей, в которых располагаются обменные катионы и молекулы воды.

Пористая открытая микроструктура цеолитов определяет их полезные свойства: адсорбционные, молекулярно-ситовые, ионообменные и каталитические.

Природные цеолиты широко используются в промышленности для сушки и очистки газов, как катализаторы реакций крекинга, изомеризации, гидрогенизации, деалкилирования и т.д.

В сельском хозяйстве: в качестве носителей инсектицидов и микроудобрений, для очистки масел, пива, сахарных сиропов и др.

В земледелии: адсорбции токсических примесей, стимулировании роста растений.

В животноводстве: в качестве биостимулирующих кормовых добавок, подстилок для скота, очистителей стоков. В качестве протеолитического фермента использовали препарат протосубтилин.

Применение протеолитических ферментов обеспечивает определенный успех в лечении гнойных ран. Для лечения предлагаются водные растворы протеолитических ферментов растительного, бактериального и животного происхождения, такие, как трипсин, химотрипсин, диклиаза, стрептокиназа, папаин, химопсин и др. Протеолитические ферменты расщепляют пептидные связи между остатками аминокислот в молекулах белков. Эти ферменты, гидролизуя денатурированные белки некротизированных тканей и гнойных масс, способны очищать гнойные полости и раневые поверхности, ускоряя выздоровление.

Однако эффективность применения протеолитических ферментов могла быть выше, если бы водные растворы их в результате самопереваривания (автолиза) не теряли быстро своей активности. Кроме этого, протеолитический эффект растворимых препаратов протеолитических ферментов снижается под действием ингибиторов бактериального происхождения, при повышении температуры и изменении рН в ране.

Возможность стабилизации активности протеолитических ферментов связана с разработкой способа иммобилизации ферментов. Она достигается: путем адсорбции ферментов на нерастворимых носителях; включением ферментов в ячейки гелей при полимеризации их в присутствии ферментов; путем ковалентного присоединения фермента к нерастворимому носителю.

В качестве источника протеолитических ферментов использовали коммерческий препарат протосубтилин ГЗХ, выпускаемый микробиологической промышленностью. Это смесь щелочных и нейтральных протеиназ, продуцируемых в культуральную среду.

Протосубтилин ГЗХ выпускают в виде трех групп. I группа без наполнителя, II и III с наполнителем. Препарат используется для комбикормовой промышленности, в качестве кормодобавки, с целью повышения продуктивности сельскохозяйственных животных и птицы, а также в кожевенной и в микробиологической промышленности для получения ферментативных гидролизатов микробной биомассы.

Заявляемый препарат готовят следующим образом: пушонку цеолита смешивают в мешалке с протосубтилином марки ГЗХ в соотношении 20:0,3...1,0.

Приготовленный таким образом препарат, названный авторами "процеол", обладает протеолитической активностью от 0,3 до 2,0 ПЕ/г массы.

От прототипа заявляемый препарат отличается тем, что он содержит протеолитический фермент - протосубтилин, при вышеуказанном соотношении компонентов. Авторами впервые установлено, что в процеоле, при добавлении воды, протосубтилин сорбируется на цеолитах временными неспецифическими связями. Такая сорбция позволяет препарату обладать свойствами профезима и в то же время использовать молекулярно-ситовые свойства цеолита для поглощения продуктов ферментативного гидролиза некротизированных тканей. Поэтому при нанесении препарата на раны протосубтилин, сорбированный на цеолитах, расщепляет нежизнеспособные ткани, а цеолиты, являясь природными высокопористыми материалами, поглощают продукты этого распада.

Пастообразные состояние препарата увеличивает его доступность к микротравмам на поверхности дистального отдела конечностей животных, что может быть использовано для профилактики заболеваний.

Результатом перечисленных свойств предлагаемого препарата является высокий лечебный и профилактический эффект, что установлено при лечении экспериментальных ран копытец крупного рогатого скота и клинической апробации в условиях животноводческих хозяйств.

Процеол целесообразно использовать в виде пасты, приготовленной с использованием воды. Процеол и воду берут в соотношении 2:1 и тщательно перемешивают. Препарат выдерживают в течение 15-20 мин и он готов к применению. Срок хранения пасты 20-25 дней при температуре 10-15^оС. Срок хранения сухого препарата 1,0-1,5 года.

После предварительной расчистки раны наносят тонкий слой приготовленной пасты на раневую поверхность и накладывают легкую воздухопроницаемую повязку. Препарат применяют 1 раз в трое суток до полного очищения раневой поверхности. При содержании животных в местах с повышенной влажностью процеол можно использовать в виде присыпки - после расчистки раны наносят тонкий слой сухого препарата на раневую поверхность и накладывают легкую воздухопроницаемую повязку. Препарат можно использовать в виде ножных ванн.

Сущность заявляемого препарата процеола поясняется следующими примерами.

Изучена лечебная эффективность препарата, содержащего цеолит и протосубтилин (ГЗХ) в следующих соотношениях 20:0,3; 20:1; 10:1.

Для этого были подобраны четыре группы бычков черно-пестрой породы, возрастом 6-7 месяцев, по 4 бычка в каждой. Всем бычкам наносили экспериментальные раны на подошву копытца третьего пальца правой тазовой конечности по специальному шаблону, на фоне инфильтрационной анестезии по Зыкову Г. Н. Основу кожи подошвы размозжали хирургическими пинцетами. После этого раны загрязняли навозной жижей, взвесь которой втирали в место повреждения, и накладывали повязки. К лечению приступали через 72 ч.

Для лечения бычков I опытной группы использовали процеол в соотношении 20: 0,3; II опытной группы в соотношении 10:1, III опытной группы 20:1. Четвертая группа животных контрольной, где для лечения использовали чистый цеолит без примеси протосубтилина. Лечебные процедуры проводили каждые 3-е суток. С целью контроля динамики заживления ран осуществляли измерение площади раны (целлофанографией), воспалительного отека в области 1 фаланги и на уровне путового сустава, оценку местных и общих клинических признаков.

Эффективность лечения представлена в табл. 1, 2, 3.

Как видно из таблиц, процеол обладает выраженным терапевтическим эффектом при лечении экспериментальных ран копытец крупного рогатого скота в сравнении с чистым цеолитом. При этом установлено, что процеол в соотношении 20:1 и 10:1 более эффективны в первую фазу раневого процесса, в сравнении с животными опытной группы, причем достоверной разницы в результатах лечения между бычками II и III опытных групп не установлено, т.е. процеол в таких соотношениях обладает одинаковым лечебным эффектом.

В то же время, процеол в соотношении 20:0,3 менее эффективен в I фазу раневого процесса и более во II фазу, что видно из сокращения площади раневой поверхности.

Кроме вышеизложенного следует сделать вывод о том, что содержание протосубтилина в смеси ниже 20:0,3 (массовой части) оказывает незначительный лечебный эффект, к тому же приготовление таких смесей сопряжено с технологическими трудностями. Препарат, содержащий протосубтилин выше 20:1-10:1 (мас.ч.) обладает сходным терапевтическим действием с процеолом, содержащим 20:1 мас.ч., поэтому увеличение содержания протосубтилина в смеси нецелесообразно и приводит к перерасходу протеолитического фермента и удорожанию препарата процеол.

По срокам заживления экспериментальных ран применение процеола равносильно использованию профезима, где заживление наступает на 14-24 сут от начала лечения. В сравнении с традиционными способами лечения, где заживление ран наступает на 28-36 сут, эффективность процеола в 1,5 раза выше.

Клиническую апробацию процеола в производственных условиях проводили методом "ножных ванн", с целью профилактики и лечения первичных повреждений дистального отдела конечностей крупного рогатого скота.

П р и м е р 1. Гурт коров в количестве 230 голов, из которых 28 голов (10%) были клинически больны, наблюдалась хромота средней и легкой степени, повышение местной и общей температуры, гнилостный запах и обилие гнойного экссудата из ран пораженных конечностей, расслоение копытцевого рога.

Всех коров прогоняли через ванну, заполненную 150 кг процеола, 2-кратно в течение 1 сут, 1 раз в 2 недели в течение месяца. По окончании клинической апробации установлено, что из числа больных животных 4 головы вынужденно убиты, 1 животное осталось невылеченным, остальные 23 головы признаны клинически здоровыми. Из числа здоровых 202 коров заболевших не было. Таким образом, лечебный эффект от применения "процеола" составил 83%, профилактический эффект 100%.

Использование смеси с профилактической целью позволило предотвратить дальнейшее распространение заболеваемости в стаде. Спустя месяц после обработки на ферме заболеваемость среди КРС составила 1 голову из числа обработанных животных. За это время заболеваемость на других отделениях хозяйства осталась прежняя.

П р и м е р 2. Исходная заболеваемость в стаде КРС хозяйства составляла 34% от общего поголовья в месяц. Наибольшая заболеваемость была среди молодых животных (первотелок, нетелей). С целью профилактики через ванну с процеолом прогоняли (раз в неделю) гурт из 140 голов первотелок, контрольный гурт из 137 голов аналогичных животных прогоняли через ванну с 10% сульфатом меди. В опытной и контрольной группах заболевших животных выявляли путем клинического осмотра по наличию признаков хромоты и деформации копытец. После трехкратного применения ванн с процеолом и последующих еженедельных процедур динамика заболеваемости животных в опытной и контрольных группах представлена в табл. 4.

Таким образом, профилактический эффект от применения процеола колеблется от 28-48,3% в зависимости от погодных условий, что дает возможность стабилизировать заболеваемость в условиях недостатка ортопедических звеньев.

Использование: ветеринария, а именно: лекарственные средства при лечении животных на молочных и откормовочных фермах и комплексах от гнойно - некретических заболеваний дистального отдела конечностей крупного рогатого скота. Сущность изобретения: процеол содержит природный цеолит в виде пушонки и протосубтилин ГЗХ при следущем соотношении, мас.ч.: природный цеолит 20,0, протосубтилин ГЗХ 0,3 - 1,0. Препарат обладает высокими лечебным и профилактическим эффектом (87 - 93%), прост в изготовлении, удобен в использовании. 4 табл.

Препарат для борьбы с гнойно-некротическими заболеваниями дистального отдела конечностей крупного рогатого скота, включающий природный цеолит, отличающийся тем, что он дополнительно содержит протосубтилин ГЗХ при следующем соотношении компонентов, мас.ч.:
Природный цеолит 20,0
Протосубтилин ГЗХ 0,3 - 1,0