ШТАММ BACTERIOPHAGUM SHIGELLOSUM ЛС4, АКТИВНЫЙ В ОТНОШЕНИИ SHIGELLA DYSENTERIA 4 Российский патент 1994 года по МПК C12N7/00 

Изобретение относится к медицинской микробиологии, а именно к способам лабораторной диагностики шигеллезов (дизентерия 4), и может быть использовано в научных и практических лабораториях, занимающихся индикацией и идентификацией возбудителей бактериальной дизентерии.

Для идентификации шигелл в исследуемом материале известен способ, заключающийся в поэтапном выделении чистой культуры шигелл из исследуемого материала, изучении ее свойств и заключительной идентификации серологическим способом (реакция агглютинации). Окончательный результат становится возможным на 4-е сутки при типичных формах и на 6-7-е сутки при атипичных формах возбудителя.

Штамм Bacteriophagum shigellosum ЛС 4 хранится в официальной коллекции-депозитарии Республики Узбекистан (Республиканская коллекция микроорганизмов) при Научно-исследовательском институте эпидемиологии, микробиологии и инфекционных заболеваний Республиканского научного центра по борьбе с инфекционными и паразитарными заболеваниями Минздрава Республики Узбекистан под N 22 и характеризуется следующими морфологическими свойствами.

Относится к третьей морфологической группе. Размер головки 420± 100, отростка - 200± 65. Тип нуклеиновой кислоты - ДНК, молекулярный вес 6000 кдальтон.

Питательный агар (по ФС 42-188 ВС-88). На газоне Shigella dysenteria 4 величина негативных колоний 2,0 ±0,5 мм в диаметре. Край колоний ровный, дно прозрачное.

Питательный бульон (по ФС 42-224 ВС-88). При посевной дозе 1 х 10⁷микробных тел на 1 мл среды и множественности инфекции 1:10 вызывает просветление взвеси и накапливается n ˙ 10⁸ корпускул на 1 мл среды.

Одиночный цикл развития характеризуется продолжительностью минимального латентного периода, равного 18 мин. Урожайность 100 корпускул на 1 инфицированную клетку.

Серологические свойства. Константа скорости нейтрализации антифаговой сыворотки 12,5 мл в 1 мин.

Цель изобретения - получить штамм специфического бактериофага для идентификации бактерий Shigella dysenteria 4, выделяющихся на территории Узбекистана и других регионов, т.е. фаг, обладающий строгой специфичностью для указанной группы шигелл и пригодный для их ускоренной лабораторной диагностики.

Предлагаемый штамм Bacteriophagum shigellosum ЛС 4 новый и в патентной литературе не описан.

П р и м е р. На плотную питательную среду (питательный агар) бактериологической петлей наносят полоску свежей (не более 1 сут) бульонной культуры или взвеси микробов в конденсационной жидкости столбика трехсахарного агара. На полоску культуры наносят пастеровской пипеткой или бактериологической петлей каплю бактериофага. Посев инкубируют в течение 18 ч при 37^оС.

В случае, если исследуемая культура является Shigella dysenteria 4, на полоске в месте нанесения бактериофага наблюдают четкую зону специфического лизиса. Наличие лизиса является диагностическим признаком для идентификации культуры, который подтверждается серологическим путем (реакция агглютинации), после чего выдается ответ.

Применение диагностического фага Bacteriophagum shigellosum ЛС 4 позволяет сократить сроки лабораторной диагностики минимум на 1 сутки за счет сокращения процесса диагностики (частичное сокращение этапа биохимического исследования - "пестрый ряд"). Достигается также экономический эффект за счет целенаправленного использования дорогостоящих агглютинирующих сывороток.

Использование: медицинская микробиология. Сущность изобретения: для идентификации возбудителя "Дизентерия 4" используется специфический бактериофаг Bacteriophagum shigellosum ЛС НИИЭМИЗ РНЦ БИПЗ N 22. Эффект от предлагаемого изобретения заключается в сокращении сроков диагностики на 1 сут при типичных формах возбудителя и на 2 - 3 сут при атипичных формах возбудителя.

Штамм Bacteriophagum shigellosum ЛС4 НИИЭМИЗ РНЦ БИПЗ N 22, активный в отношении Shigell dysenteria.