ШТАММ BACTERIOPHAGUM SHIGELLOSUM 6, АКТИВНЫЙ В ОТНОШЕНИИ SHIGELLA DYSENTERIA 6 Российский патент 1994 года по МПК C12N7/00 

Изобретение относится к медицинской микробиологии, а именно к способам лабораторной диагностики шигеллезов (дизентерия 6), и может быть использовано в научных и практических лабораториях, занимающихся индикацией и идентификацией возбудителей бактериальной дизентерии.

Для идентификации шигелл в исследуемом материале известен способ, заключающийся в поэтапном выделении из исследуемого материала чистой культуры шигелл, изучении ее свойств и заключительной идентификации серологическим способом (реакция агглютинации). Окончательный результат становится возможным на 4-е cутки при типичных и на 6-7-е cутки при атипичных формах возбудителя.

Штамм Bacteriophagum shigellosum 6 хранится в официальной коллекции-депозитарии Республики Узбекистан (Республиканская коллекция микроорганизмов) при Научно-исследовательском институте эпидемиологии, микробиологии и инфекционных заболеваний Республиканского научного центра по борьбе с инфекционными и паразитарными заболеваниями Минздрава Республики Узбекистан под N 13 и характеризуется следующими морфологическими признаками.

Относится к третьей морфологической группе. Размер головки 640640± 210, отростка - 200200± 70. Тип нуклеиновой кислоты - ДНК, молекулярный вес 6000 кдальтон.

Питательный агар (по ФС 42-188 ВС-88). На газоне Shigella dуsenteria 6 величина негативных колоний 2,0±0,5 мм в диаметре. Край колоний ровный, дно прозрачное.

Питательный бульон (по ФС 42-224 ВС-88). При посевной дозе 1˙10⁷ микробных клеток в 1 мл среды и множественности инфекции 1:10 вызывает просветление взвеси и накапливается n˙10⁹ корпускул на 1 мл среды.

Одиночный цикл развития характеризуется продолжительностью минимального латентного периода, равного 29 мин. Урожайность - 124 корпускулы на 1 инфицированную клетку.

Серологические свойства. Константа скорости нейтрализации антифаговой сыворотки - 252 мл в 1 мин.

Цель изобретения - получить штамм специфического бактериофага для идентификации бактерий Shigella dusenteria 6, выделяющихся на территории Узбекистана и других регионов, т.е. фаг, обладающий строгой специфичностью для указанной группы шигел и пригодный для их ускоренной диагностики.

Предлагаемый штамм Bacteriophagum shigellosum 6 новый и в патентной литературе не описан.

П р и м е р. На плотную питательную среду (питательный агар) бактериологической петлей наносят полоску свежей (не более 1 суток) бульонной культуры или взвеси микробов в конденсационной жидкости столбика трехсахарного агара. На полоску наносят пастеровской пипеткой или бактериологической петлей каплю бактериофага. Посев инкубируют в течение 18 ч при 37^oC.

В случае, если исследуемая культура является Shigella dуsenteria 6, на полоске в месте нанесения бактериофага наблюдают четкую зону специфического лизиса. Наличие лизиса является диагностическим признаком для идентификации культуры, который подтверждается серологическим путем (реакция агглютинации), после чего выдается ответ.

Применение диагностического фага Bacteriophagum shigellosum 6 позволяет сократить срок лабораторной диагностики минимум на 1 сут за счет сокращения процесса диагностики (частичное сокращение этапа биохимического исследования - "пестрый ряд"). Достигается также экономический эффект за счет целенаправленного использования дорогостоящих агглютинирующих сывороток.

Использование: медицинская микробиология. Сущность изобретения: для идентификации возбудителя "Дизентерия 6" используется специфический бактериофаг Bacteriophagum shigellosum 6 НИИЭМИЗ РНЦБИПЗ N 13. Эффект от предлагаемого изобретения заключается в сокращении сроков диагностики на 1 сут при типичных и на 2 - 3 сут при атипичных формах возбудителя.

Штамм Bacteriophagum shigellosum 6 НИИЭМИЗ РИИБИПЗ N 13, активный в отношении Shigella dysenteria 6.