ШТАММ BACTERIOPHAGUM SHIGELLOSUM П, АКТИВНЫЙ В ОТНОШЕНИИ SHIGELLA DYSENTERIAE 2-9, SHIGELLA FLEXNER 6, SHIGELLA BOYDII 1-10, 14, 15, SHIGELLA SONNEI Российский патент 1995 года по МПК C12N7/00 

Изобретение относится к медицинской микробиологии, а именно к способам лабораторной диагностики шигеллезов (дизентерия 2-9, Флекснер 6, Бойд 1-10 и 14-15 Зонне) и может быть использовано в научных и практических лабораториях, занимающихся индикацией и идентификацией возбудителей бактериальной дизентерии.

Для идентификации шигелл в исследуемом материале известен способ, заключающийся в поэтапном выделении из исследуемого материала чистой культуры шигелл, изучения ее свойств и заключительной идентификации серологическим способом (реакция агглютинации). Оконча- тельный результат становится возможным на 4-сутки при типичных формах и на 6-7-е сутки при атипичных формах возбудителя.

Штамм Вacteriophagum shigellosum П хранится в официальной коллекции-депозитарии Республики Узбекистан (Республиканская коллекция микроорганизмов) при Научно-исследовательском институте эпидемиологии, микробиологии и инфекционных заболеваний Республиканского научного центра по борьбе с инфекционными и паразитарными заболеваниями Минздрава Республики Узбекистан под N 8 и характеризуется следующими морфологическими признаками.

Относится к третьей морфологической группе. Размер головки 420 ± 70 , отростка 150 ± 30 . Тип нуклеиновой кислоты ДНК, молекулярный вес 6000 кДальтон.

Питательный агар (по ФС 42-188, ВС-88). На газонах Shigella dysenteria 2-9, Shigella Flexner 6, Shigella Boydii 1-10, 14-15, Shigella Sohnei величина негативных колоний 1,0 ± 0,1 мм в диаметре. Край колоний ровный, дно прозрачное.

Питательный бульон (по ФС 42-224 ВС-88). При посевной дозе 1х10⁷ микробных клеток на 1 мл среды и множественности инфекции 1:10 вызывает просветление взвеси и накапливается n ˙ 10⁷ корпускул на 1 мл среды.

Одиночный цикл развития характеризуется продолжительностью минимального латентного периода, равного 19 мин. Урожайность 82 корпускул на 1 инфицированную клетку.

Серологические свойства. Константа скорости нейтрализации антифаговой сыворотки 34 мл в 1 мин.

Цель изобретения получить штамм поливалентного бактериофага для идентификации бактерий Shigella dysenteria 2-9, Shigella Flexner 6, Shigella Boydii 1-10, 14-15, Shigella Sonnei, выделяющихся на территории Узбекистана и других регионов, т. е. фаг, обладающий строго специфичностью для указанных групп шигелл и пригодный для их ускоренной лабораторной диагностики.

Предлагаемый штамм Bacteriophagum shigellosum П новый и в патентной литературе не описан.

П р и м е р 1. На плотную питательную среду (питательный агар) бактериологической петлей наносят полоску свежей (не более 1 сут) бульонной культуры или взвеси микробов в конденсационной жидкости столбика трехсахарного агара. На полоску культуры наносят пастеровской пипеткой или бактериологической петлей каплю бактериофага. Посев инкубируют 18 ч при 37^оС.

В случае, если исследуемая культура является одной из вышеуказанных на полоске в месте нанесения бактериофага наблюдают четкую зону специфического лизиса. Наличие лизиса является диагностическим признаком для идентификации культур, который подтверждается серологическим путем (реакция агглютинации) и при наличии соответствующими монофагами, после чего выдается ответ.

Применение диагностического поливалентного фага Bacteriophagum shigellosum П позволяет сократить сроки лабораторной диагностики минимум на 1 сут за счет сокращения процесса диагностики (частичное сокращение этапа биохимического иссле- дования "пестрый ряд"). Достигается также экономический эффект за счет целенаправленного использования дорогостоящих агглютинирующих сывороток.

Использование: медицинская микробиология. Сущность изобретения: для идентификации шигелл Дезентерия 2 - 9, Флекснер 6, Бойд 1 - 10 и 14 - 15 Зонне используется поливалентный Bacteriophagum shigellosum П НИИЭМИЗ РНЦБИПЗ N 8. Эффект от изобретения заключается в сокращении сроков диагностики на 1 сут при типичных формах возбудителя и на 2 - 3 сут при атипичных формах возбудителя.

Штамм Bacteriophagum Shigellosum П НИИЭМИЗ РНЦБИПЗ N 8, активный в отношении Shigella dysenteriae 2-9, Shigella Flexner 6, Shigella Boydii 1-10, 14,15, Shigella Sonnei.