СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СРЕДНЕГО ОБЪЕМА ЭРИТРОЦИТОВ Российский патент 1996 года по МПК G01N33/483 

Изобретение относится к медицине и ветеринарии, а именно к исследованию крови и может быть использовано в клинической, лабораторной практике. Известен способ определения диаметра эритроцитов по гематокриту ("Справочник по клиническим лабораторным исследованиям", под общ. редакцией Е.А.Кост, М. Медицина, 1968г. стр.63). Однако он трудоемок.

Сущность предполагаемого изобретения заключается в том, что согласно способа определения среднего объема эритроцитов исследуют рассеяние взвеси эритроцитов, поглощение раствора гемолизированных эритроцитов и по соотношению оптических плотностей взвеси и раствора эритроцитов определяют среднеобъемный диаметр и объем эритроцитов.

Способ осуществляется следующим образом: первую пробу крови (0,02 мл) разводят 0,85% раствором NaСL (16 мл, разведение 1:800); вторую пробу крови (0,02 мл) разводят 0,1% раствором НСL (4 мл, разведение 1:200). Полученные растворы помещают в кювету спектрофотометра (СФ-26А L 1 см). Перед фотоэлементом прибора помещают диафрагму d 2 мм. Измерения проводят сразу после приготовления взвеси. Оптическую плотность взвеси эритроцитов D^вз (проба 1) определяют при трех длинах волн: 635 нм, 1025 нм, 540 нм; оптическую плотрость раствора D^р (проба 2) при 540 нм. (Оптическую плотность определяют по отношению к 0,85% раствору NаСL).

I. Вычисляют волновую экспоненту:
II. По экспериментально найденному h определяют
1) безразмерный параметр рассеяния: ρ = 10^{(0,632-0,161n)}
2) фактор эффективности рассеяния:
III. Рассчитывают
1) среднеобъемный диаметр эритроцитов:
2) средний объем эритроцитов: V_э= 0,523d2э

(мкм³),, где
Vэ объем эритроцита;
dэ диаметр эритроцита,
D оптическая плотность, надстрочное обозначение
р раствора гемолизированных эритроцитов
вз взвеси эритроцитов подстрочная цифра длина волн используемого света. Например: Ddp635 оптическая плотность взвеси эритроцитов при длине волны 635 нм;
к(р) коэффициент рассеяния;
ρ безразмерный параметр рассеяния.

Пример 1.

Кровь человека (женщина 40 лет). Результаты эксперимента:
Оптическая плотность взвеси эритроцитов Dвз635

=90, Ddp1025= 0,70; Ddp540= 0,95..

Оптическая плотность раствора гемолизированных эритроцитов Dp540

= 0,48..

Результаты расчетов:
1) Волновая экспонента h 0,52;
2) Безразмерный параметр рассеяния ρ- 3,50;
3) Коэффициент рассеяния К (р) 3,О5;
4) Среднеобъемный диаметр d_э 4,87 мкм (значение диаметра, определенное по световой микроскопии 4,87 мкм);
6) Средний объем эритроцитов 60,51 мкм³.

Пример 2.

Кровь козы. Результаты эксперимента.

1) Оптическая плотность взвеси эритроцитов Dвз635

= 1,02;; Ddp1025= 0,52;Ddp540= 1,15;
2) Оптическая плотность раствора гемолизированных эритроцитов Dp540= 0,28;;
Результаты расчетов:
1) Волновая экспонента h 1,39;
2) Безразмерный параметр рассеяния ρ= 2,55; 3) Коэффициент рассеяния К(р) 2,26;
4) Среднеобъемный диаметр эритроцитов d_э 2,50 мкм (значение диаметра эритроцитов, определенное по световой микроскопии 2,42 мим);
5) Средний объем эритроцитов V_э 8,17 мкм³.

Пример 3.

Кровь кролика. Результаты эксперимента.

1) Оптическая плотность взвеси эритроцитов Dвз635

= 1,00;; Ddp1025= 0,71;Ddp540= 1,01.
2) Оптическая плотность раствора гемолизированных эритроцитов Dp540= 0,43;
Результаты расчетов:
1) Волновал экспонента h 0,74;
к) Безразмерный параметр ρ 3,25;
3) Коэффициент рассеяния K(p) 2,9;
4) Cреднеобъемный диаметр эритроцитов d_э 4,20 мкм (диаметр, определенный по световой микроскопии d_э 4,18 мкм);
5) Средний объем эритроцитов V_э 38,75 мкм³.

Использование: медицина, ветеринария, гематология, для определения среднего объема эритроцитов. Сущность изобретения: исследуют уровень светорассеяния взвеси эритроцитов, поглощение раствора гемолизированных эритроцитов и по соотношению оптических плотностей взвеси и раствора раcсчитывают средний объем эритроцитов.

Способ определения среднего объема эритроцитов, отличающийся тем, что исследуют спектр мутности взвеси эритроцитов, оптическую плотность раствора гемолизированных эритроцитов и по соотношению светорассеяния взвеси эритроцитов и поглощения раствора гемолизированных эритроцитов определяют средний объем эритроцитов по формуле
V_э 0,523 dзэ

(мкм³),
где (мкм)
d_э среднеобъемный диаметр эритроцитов,
Д_р оптическая плотность раствора гемолизированных эритроцитов;
Д_вз оптическая плотность взвеси эритроцитов;
К_р коэффициент рассеяния;
S безразмерный параметр рассеяния.