ВОДОРАСТВОРИМЫЕ СОПОЛИМЕРЫ N-ВИНИЛ-2-ПИРРОЛИДОНА С ПРОИЗВОДНЫМИ КРОТОНОВОЙ КИСЛОТЫ, ОБЛАДАЮЩИЕ ГЛЮКОКОРТИКОИДНОЙ АКТИВНОСТЬЮ, И СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ Российский патент 1997 года по МПК C08F226/10 A61K31/79 C08F226/10 C08F220/10 

Изобретение относится к химии высокомолекулярных соединений, медицинской и биоорганической химии, точнее, к водорастворимым сополимерам с глюкокортикоидной активностью общей формулы:

где R₁ H, -CH₂CH₂N(C₂H₅)₂;
R₂ остаток кортикостероида, присоединенный по 21 CH₂OH-группе, из ряда, включающего гидрокортизон и дексаметазон, при n 56.4 89.8 мол. M 2.0 29.8 мол. l 5.5 13.8 мол. с ММ (4 - 40)•10³.

Изобретение относится к также к способу получения вышеописанных сополимеров.

Изобретение может быть использовано в биологии и медицине для создания препаратов, обладающих глюкокортикоидной активностью.

Гидрокортизон 11бета, 17альфа 21-тригидрокси-4-прегнен-3,20-дион, ММ 362.5 (каталог Sigma, 1993, с. 524, H 4001).

Дексаметазон 11 бета, 17 альфа, 21-тригидрокси-16 альфа -метил-1,4-прегнадиен-9 альфа -фтор-3,20-дион, ММ 392.5 (каталог Sibgma, 1993, с. 316, D 1756).

Известны тройные сополимеры N-винилпирролидона, монозамещенных 21-мелеинатов кортикостероидов и малеиновой кислоты, обладающие глюкокортикоидной активностью, общей формулы:

где R остаток глюкокортикоида (гидрокортизона, преднизолона, дексаметазона), n 50 мол. m 41.3 48.3 мол. l 1.7 8.7 мол. ММ 10⁴, получаемые этерификацией соответствующих стероидов альтернативным сополимером N-винилпирролидона и малеинового ангидрида /1/. Полиэфиры указанной структуры характеризуются малой гидролитической стабильностью и относительно высокой токсичностью
Задачей предлагаемого изобретения является получение водорастворимых полимерных производных, обладающих глюкокортикоидной активностью, с повышенной гидролитической стабильностью и сниженным уровнем токсичности.

Эта задача решалась водорастворимыми сополимерами N-винил-2-пирролидона с производными кротоновой кислоты общей формулы:

где R₁ H, -CH₂CH₂N(C₂H₅)₂;
R₂ остаток кортикостероида из ряда, включающего гидрокортизон или дексаметазон, по первичной 21-CH₂OH-группе при n 56.4 89.8 мол. m 2.0 29.8 мол. l 5.5 13.8 мол. с ММ (4 - 40)•10³.

Задача решалась также способом получения водорастворимых сополимеров вышеуказанной структуры, который реализуется совокупностью следующих существенных признаков:
1. Подвергают сополимеризации в органическом растворителе в среде инертного газа (аргона) смесь N-винил-2-пирролидона, 21-кротоната кортикостероида и кротоновой кислоты или N,N-диэтиламиноэтилкротоната в присутствии радикального инициатора.

2. Полимеризацию проводят в растворе при суммарной концентрации сомономеров от 6 до 55 масс.

3. Полимеризацию проводят при следующих соотношениях сомономеров (мол.): N-винил-2-пирролидон: 21-кротонат кортикостероида: кротоновая кислота (или N,N-диэтиламиноэтилкротонат) (17.0 91.0) (4.7 19.0) (2.4 64.0).

4. В качестве 21-кротоната кортикостероида используют соединение из ряда, содержащего 21-кротонат гидрокортизона и 21-кротонат дексаметазона.

5. В качестве органического растворителя берут соединение из ряда, включающего этанол, 2-пропанол, бензол, N,N-диметилформамид.

Оба объекта изобретения вещество и способ его получения связаны единым общим изобретательским замыслом, направленным на реализацию единой идеи достижение поставленной задачи.

Отличительными от признаков сополимера-прототипа, структура которого изложена выше, являются все признаки, определяющие в совокупности структуру нового сополимера.

Отличительными от признаков способа-прототипа являются все существенные признаки, характеризующие заявленный способ.

Таким образом, заявленное комплексное изобретение соответствует требованию "новизна" по обоим своим объектам.

Анализ известного уровня науки и техники показал, что известны водорастворимые сополимеры N-винил-2-пирролидона, обладающие глюкокортикоидной активностью, общей формулы:

где R₁ -H, -CH₃;
R₂ -H, -CH₃;
R₃ -NH₂; -CH₂NH₂; -COO(CH₂)₂N(CH₃)₂; -COO(CH₂)₂N(C₂H₅)₂;

R остаток глюкокортикоида, присоединенный по 21-CH₂OH-группе, с ММ (14.9 93.6)•10³; n 77 91 мол. m 6.8 16.5 мол. l 2.0 11.0 мол. Содержание глюкокортикоидного остатка в полимере 4.6 23.0 масс. /2/.

Способ получения известных водорастворимых сополимеров N-винил-2-пирролидона, обладающих глюкокортикоидной активностью, заключается в обработке сополимеров N-винил-2-пирролидона с виниламинами общей формулы:

где R₁ H, H, CH₃ при R₂ H, CH₃, H, соответственно; R₃ -NH₂; -CH₂NH₂; -COO(CH₂)₂N(CH₃)₂; -COO(CH₂)₂N(C₂H₅)₂; при n 77 91 мол. m 9 23 мол. с ММ (10 40)•10³, 21-галогенацетатами глюкокортикоидов общей формулы X-CH₂-CO-R, где X Cl, Br, I, а R - остаток глюкокортикоида (гидрокортизона или дексаметазона).

Основным недостатком решения является невысокая устойчивость сополимеров к гидролизу при хранении и относительно высокий уровень токсичности /2,3/.

Известны также сополимеры N-винилпирролидона с 21-кротонатом гидрокортидоза /4/. Такие сополимеры оказались водорастворимыми при содержании стероидных звеньев, не превышающем 5 мол.

Настоящее изобретение основано на том, что было обнаружено, что дополнительное введение в состав сополимера, содержащего звенья N-винилпирролидона и 21-кротоната кортикостероида, звеньев кротоновой кислоты или N,N-диэтиламиноэтилкротоната, сообщает получаемому тройному сополимеру водорастворимость при содержании звеньев 21-кротоната кортикостероида 5.5 - 13.8 мол. Полученный результат было трудно предвидеть, поскольку N-винилпирролидон и кротоновая кислота или N,N-диэтиламиноэтилкротонат являются гидрофильными мономерами.

Кроме того, не представлялось очевидным, что сложноэфирная ковалентная связь в молекуле 21-кротоната кортикостероида окажется более стабильной к гидролизу в заявленном сополимере, чем та же связь в сополимере-прототипе. Тем не менее именно такие результаты были получены при изучении заявленного тройного сополимера.

Впервые также для сополимеров, содержащих звенья ковалентно присоединенных остатков кортикостероидов, был обнаружен высокий уровень противошоковой активности.

Все вышеперечисленные, впервые обнаруженные при создании изобретения взаимосвязи признаки-свойства обеспечивают соответствие заявленного комплексного решения требованию "изобретательский уровень".

На фиг. 1 и фиг. 2 показана зависимость глубины гидролиза (оси ординат:) сложноэфирной связи полимер-гидрокортизон от времени выдерживания (оси абсцисс: сут•10^-2, фиг. 1; c•10^-5, фиг. 2), водно-солевых растворов сополимеров (примеры 9, 12, 13) при pH 5.2 9.3 и T 23±3^oC (фиг. 1) или 75±0.5^oC (фиг. 2). Концентрация сополимеров в растворах 1 мг/мл.

Гидролитическая стабильность сополимера N-винилпирролидона и 21-кротоната гидрокортизона (пример 9) в 0.01 м. ацетатном буфере (pH 5.2) показана на кривой 1а, в 0.01 м. натрий-фосфатном буфере (pH 7.3) 1б, в 0.05 м. бура-фосфатном буфере (pH 9.3) 1в. (фиг. 1, фиг. 2).

Стабильность сополимера, содержащего звенья N,N-диэтиламиноэтилкротоната (пример 12), в указанных выше буферных системах представлена зависимостями 2а (pH 5.2), 2б (pH 7.3) и 2в (pH 9.3). (фиг. 1, фиг. 2).

Стабильность сополимера, содержащего звенья кротоновой кислоты (пример 13), для того же набора буферных систем представлена на зависимостях 3а (pH 5.2), 3б (pH 7.3) и 3в (pH 9.3) (фиг. 1, фиг. 2).

Биологические испытания полученных полимерных аналогов глюкокортикоидов были проведены в опытах на белых беспородных взрослых мышах-самцах весом 20
23 г и белых беспородных крысах обоего пола в возрасте от 2 до 4 недель.

Для экспериментов на молодых животных выделили группы крысят разного пола по 10 12 особей в каждой. Подбор животных в группы проводили с таким расчетом, чтобы масса тела и линейные размеры крысят отличались не более, чем на 2% Контролем служили крысята, взятые из каждого помета. Контрольных и подопытных животных содержали в одинаковых условиях.

Образцы сополимеров, содержащих глюкокортикоиды, вводили животным внутрибрюшинно в виде водного раствора в дозах 0.2 и 10 мг/кг для производных дексаметазона и гидрокортизона соответственно, в пересчете на содержащийся в них стероид, что обусловлено различной противовоспалительной активностью указанных глюкокортикоидов /5/.

В хронических экспериментах растворы полимерных производных вводили в объеме 0.2 мл один раз в сутки в утренние часы (14 дней), в остром опыте 4 раза с интервалом один час в объеме 0.1 мл. Активность исследуемых образцов сравнивали с эффектом исходных глюкокортикоидов. Контролем служили животные, получавшие дистиллированную воду вместо исследуемых стероидов.

Противовоспалительную активность проверяли по общепринятым методикам формалинового отека и "ватной гранулемы", служащих моделями экссудативной и пролиферативной фаз воспаления /6/. Скорость роста животных (увеличения длины и массы тела) определяли по методу /7/. У контрольных и подопытных животных в конце хронического эксперимента оценивали также степень гипотрофии тимуса /6/.

В опытах на животных была исследована также противошоковая активность (на модели "турникетного" шока) некоторых образцов полимерных производных.

Шоковое состояние у мышей и крыс вызывали наложением тугих эластичных жгутов на бедренную часть задних конечностей. Жгуты оставляли на 4 ч. Образцы сополимеров вводили внутрибрюшинно через 2 часа после наложения жгута и после его снятия. Оценивали величину летальности и время начала гибели животного после снятия жгута /8/.

Для подтверждения соответствия изобретения требованию "промышленная применимость" и для иллюстрации заявленного решения приводим примеры его конкретной реализации.

Водорастворимые сополимеры заявленной структуры получают радикальной терполимеризацией N-винил-2-пирролидона, 21-кротонатов кортикостероидов и кротоновой кислоты или N,N-диэтиламиноэтилкротоната в органическом растворителе.

Для синтеза мономеров и сополимеров использовались гидрокортизон и дексаметазон аналитической чистоты (Serva), свежеперегнанные кротоноилхлорид (т. кип. 125 126^oC, n21d

1.459), N,N-диэтиламиноэтилэтанол (т. кип. 68 68^oC/23 24 мм рт. ст. n21d 1.439), коммерческий N-винилпирролидон (т. кип. 66 67^oC/3 4 мм рт. ст. ), кротоновая кислота (Fluka, чист. т. пл. 70 72^oC), 2,2'-азобис(изобутиронитрил), перекристаллизованный из этанола, и растворители, очищенные стандартными методами.

Получение эфиров кротоновой кислоты.

Пример 1. Синтезе 21-кротоната гидрокортизона. 21-кротонат гидрокортизона получен известным способом /9/. Раствор 0.590 г (6.10 моль) кротоноилхлорида в 1 мл ДМФА добавили по каплям за 10 мин при перемешивании к охлаждаемому в ледяной бане раствору 2.00 г (5.52 ммоль) гидрокортизона в 5 мл ДМФА, содержащему 0.450 мл (6.10 ммоль) пиридина. Реакционную смесь перемешивали при 0^oC 30 мин. По окончании реакции реакционную смесь вылили в 100 мл 2% водного раствора гидрокарбоната натрия. После удаления воды и органических растворителей в вакууме ротационного испарителя (T<60^oC) остаток при нагревании суспензировали в 70 мл хлороформа, отделяли фильтрованием нерастворимые соли, и целевой продукт, содержащийся в фильтрате, очищали методом колоночной хроматографии (силикагель L 40/100 "Chemapol", колонка SR-25 фирмы "Pharmacia", 25•1000 мм; элюент градиент от хлороформа к смеси хлороформетанол 1 1, 6 мл/мин; фотометрический детектор, λ 254 нм). Выделенный 21-кротонат гидрокортизона промывали смесью диэтилового и петролейного эфиров 1 1. Выход продукта 2,19 г (92% от теоретического). T_пл 197 198^oC. Структура полученного эфира была подтверждена нами ранее методами ИК-, ПМР- и ЯМР ¹³C-спектроскопии, а также элементного анализа /4/.

Пример 2. Синтез 21-кротоната дексаметазона. 21-кротонат дексаметазона, ранее не описанный, получен по методу /9/. Раствор 0.586 г (5.61 ммоль) кротоноилхлорида в 2 мл ДМАА добавили по каплям за 10 мин при перемешивании к охлаждаемому в ледяной бане раствору 2.00 г (5.10 ммоль) дексаметазона в 7 мл ДМАА, содержащему 0.452 мл (5.61 ммоль) пиридина. Реакционную смесь перемешивали при 0^oC 3 ч. По окончании реакции реакционную смесь вылили в 100 мл 2% водного раствора гидрокарбоната натрия, перемешивали 1 ч и оставили в холодильнике на 2 сут. Выпавший белый мелкокристаллический порошок остаток отфильтровывали, промыли водой и высушили в вакууме. От исходного стероида целевой продукт отделяли колоночной хроматографией, промывали смесью диэтилового и петролейного эфиров 1 1, перекристаллизовали из этанола. Получили 1.23 г белых кристаллов (65% от теоретического). T_пл 194.5 - 196^oC. R_f 0.58. ("Silufol", хлороформ-этанол 10 1). Вычислено, C 67.81, H 7.22. C₂₆H₃₃FO₆. Найдено, C 67.45, 67.92: H 7.20, 7.38 (анализ на фтор не проводился). ИК-спектр (KBr, n_max и δ_max см^-1): 1715 (O C-O), 1695 (C²⁰ O), 1620 1665 (C³ O, C¹ C², C⁴ C⁵), 970 (транс CH CH).

Пример 3. Синтез N,N-диэтиламиноэтилкротоната. Синтез проведен по методу /10/. Раствор 11.5 г (0.098 моль) N,N-диэтиламиноэтанола в 12 мл хлороформа добавили по каплям за 1.5 ч к перемешиваемому при 0^oC раствору 10.8 г (0.103 моль) кротоноилхлорида в 10 мл хлороформа. Перемешивали 2.5 ч при комнатной температуре, оставили на ночь. К реакционной смеси добавили 100 мл насыщенного водного раствора аммиака, органический слой отделили. Из водного слоя аминоэфир трижды экстрагировали диэтиловым эфиром (по 50 мл), затем органические слои объединили и сушили над карбонатом калия. После удаления растворителей при пониженном давлении аминоэфир перегоняли в вакууме. Выделили 10.8 г (59% от теоретического) целевого продукта, который представляет собой бесцветную прозрачную жидкость со слабым характерным запахом. Т. кип. 72 - 72^oC/1.2 2 мм. рт. ст. n25d

= 1,451•d204 = 0,947 ПМР-спектр (CDCl₃, 200 МГц; δ м. д. ): 1.00 т 1.83 м 2.56 к 2.70 т 4.17 т 5.81 м 6.92 м
Получение полимерных производных кортикостероидов.

Пример 4. Раствор 0.109 г 21-кротоната детексаметазона, 0.522 г N-винилпирролидона и 6.1 мг 2,2'-азобис(изобутиронитрила) в 2.00 мл 2-пропанола нагревали в среде аргона при T 70^oC в течение 8 ч. Сополимер отделяли от остаточных мономеров методом препаративной эксклюзионной жидкостной хроматографией на Сефадексе LH-20 в 70% водном этаноле (фотометрический детектор, λ 254 нм). После удаления этанола в вакууме ротационного испарителя сополимер N-винилпирролидона и 21-кротоната дексаметазона выделяли лиофильной сушкой в виде белого аморфного порошка. Выход 0.447 г (71% от теоретического).

Пример 5. Раствор 0.119 г 21-кротоната дексаметазона, 0.110 г N,N-диэтиламиноэтилкротоната, 0.522 г N-винилпирролидона и 6.2 мг 2,2'-азобис(изобутиронитрила) в 2.00 мл 2-пропанола нагревали в условиях Примера 4 в течение 18 ч. Образовавшийся тройной сополимер выделяли в условиях примера 4. Получили 0.419 г сополимера (72% от теоретического).

Пример 6. Раствор 0.123 г 21-кротоната дексаметазона, 32 мг кротоновой кислоты, 0.522 г N-винилпирролидона и 6.5 мг 2,2'-азобис(изобутиронитрила) нагревали в среде аргона при T 65^oC в течение 7 ч. Сополимер выделяли в условиях примеров 4 и 5. Получили 0.419 г продукта (62% от теоретического).

Примеры 7 16. Синтез сополимеров осуществляли в условиях примеров 4 6 с возможными незначительными отличиями. Так, в примере 8 в качестве растворителя использовали бензол, в примере 10 N,N-диметилформамид, в примерах 11 16 этанол. В примерах 10 и 11 сополимер выделяли осаждением диэтиловым эфиром из реакционной смеси, экстрагировали эфиром в аппарате Сокслета и сушили в вакууме. Конкретные соотношения мономеров, условия реакций (концентрация мономеров и инициатора, температура, время реакции).

Выход и характеристика водорастворимых стероидсодержащих сополимеров (примеры 4 16) представлены в табл. 1.

Наличие кортикостероидов в сополимерах было подтверждено специфической цветной реакцией с соляной кислотой /11/. Содержание остатков дексаметазона и гидрокортизона в сополимерах определяли спектрофотометрически /12/ в спиртовых растворах l_max 242 248 нм) с учетом поглощения звеньев N-винилпирролидона /9/. Максимальное содержание стероида в полученных тройных сополимерах, при котором сохраняется их водорастворимость, определялось в тестах на растворимость таких сополимеров с разным содержанием стероида в водных растворах гидрокарбоната натрия или уксусной кислоты, добавленных в эквимолярном количестве по отношению к карбоксильным или аминогруппам полимерных производных. Содержание звеньев кротоновой кислоты или N,N-диэтиламиноэтилкротоната в сополимерах определяли потенциометрическим титрованием карбоксильных или аминогрупп. Характеристическую вязкость сополимеров измеряли в вискозиметре Убеллоде, по которой оценивали средневязкостную молекулярную массу сополимеров (табл. 1). При этом использовались константы уравнения Марка-Куна-Хаувинка для поли(N-винилпирролидона) в метаноле (K 1.75•10^-4 г/дл, α 0.68 /13/) или этаноле (K 1.05•10^-4 г/дл, a 0.75 /14/).

Анализ известных данных по стабильности полимерных производных глюкокортикоидов со сложноэфирной связью полимер-стероид /3/ показал, что аналогичные водорастворимые производные гидрокортизона и дексаметазона не отличаются по стабильности в одинаковых условиях. В силу этих причин была изучена гидролитическая стабильность полимерных эфиров гидрокортизона как более доступных из заявляемых производных.

При исследовании гидролитической стабильности сополимеров были использованы 0.01 м. ацетатный (pH 6.2), 0.01 м. натрий-фосфатный (pH 7.3) и 0.05 м. бура-фосфатный (pH 9.3) буферные растворы, стабилизированные 0.02 масс. азида натрия. Растворы двойного и тройных сополимеров 21-кротоната гидрокортизона (примеры 9, 12, 13) в указанных системах с концентрацией сополимеров 1 мг/мл запаивали в ампулы в среде аргона и выдерживали при T 23±3^oC и 75±0.5^oC. Кроме того, сополимеры выдерживали в сухом виде запаянными в ампулы в среде аргона при T 23±3^oC. Скорость гидролиза сложноэфирной связи полимер-стероид оценивали по количеству отщепившегося стероида, которое определяли методом аналитической эксклюзионной жидкостной хроматографии (Сефадекс LH-20; 30% водный метанол, содержащий 0.05 м/л NaCl; 0.5 мл/мин) с использованием откалиброванного фотометрического детектора (254 нм) и электронного интегратора.

Как следует из табл. 1, сополимеры N-винилпирролидона, кротоновой кислоты или N, N-диэтиламиноэтилкротоната и стероидных эфиров кротоновой кислоты, содержащие 17.4 34.0 масс. остатков гидрокортизона при М (4 - 34)•10³ или 16.6 28.1 масс. остатков дексаметазона при М (10 - 40)•10³, в солевой форме водорастворимы.

Результаты изучения гидролитической стабильности полимерных производных, представленные в табл. 2, на фиг. 1 и фиг. 2, показывают, что сополимеры характеризуются наибольшей устойчивостью к гидролизу при pH от 5.2 до 7.3 и ионной силе 0.02 моль/л. Скорость отщепления остатков гидрокортизона для тройных сополимеров (примеры 12, 13) составляет в этих условиях 1 4% в год при T 23^oC и 1 13% за 100 ч при T 75^oC. Двойной сополимер (пример 9) в этих условиях отщепляет 6 13% стероида в год при T 23^oC и 14 17% за 100 ч при T 75^oC. В одинаковых условиях тройные сополимеры оказались значительно стабильнее двойных сополимеров, при этом не выявлено заметного отличия в стабильности тройных сополимеров, содержащих звенья N,N-диэтиламиноэтилкротоната (пример 12) и кротоновой кислоты (пример 13). Полученные в соответствии с заявленным способом полимерные производные гидрокортизона (примеры 9, 12, 13), запаянные в ампулу в сухом виде, не отщепляли стероид в течение года. В то же время полимерные производные гидрокортизона, полученные по известному способу /2/, при хранении в сухом виде в тех же условиях теряют 28 30% стероида за 6 мес.

Результаты исследования биологической активности ряда полимерных производных глюкокортикоидов, полученных в соответствии с заявленным способом, представлены в таблицах 3 и 4.

Полученные данные обработаны статистически с применением критериев Стьюдента и Вилкоксона-Манна-Уитни. Достоверность показателей по отношению к контролю обозначена p_k, по отношению к эффекту исходного стероида - p_c.

Дексаметазон и гидрокортизон в дозах, сопоставимых между собой по противовоспалительной активности, угнетали экссудативную фазу воспаления в равной степени, снижая величину отека лапы на 25 29% по отношению к контролю (p_k<0.001) (таблица 3). Полимерные аналоги дексаметазона (примеры 4 - 6) и гидрокортизона (пример 9) вызывали антиэкссудативный эффект, не отличающийся статистически от действия исходных стероидов. Угнетение воспалительной реакции после их введения составило 22 44% от контроля (p_k<0.001, p_c>0.05).

На модели "ватной гранулемы" дексаметазон и гидрокортизон статистически значимо на 35% (p_k<0.001) подавляли воспалительную реакцию (таблица 3). Активность полимерных производных дексаметазона (примеры 4 6) близка к эффекту исходных стероидов. Они угнетали пролиферативную реакцию на инородное тело на 30 45% по сравнению с контролем (p_k<0.001, p_c>0.05). Сополимер, содержащий остатки гидрокортизона (пример 9), угнетал пролиферацию в 1.8 раза сильнее, чем гидрокортизон при расчете на активное начало, на 63% по сравнению с контролем (p_c<0.05, p_k<0.001).

Исследованные глюкокортикоиды угнетали скорость прироста массы C_w и длины тела C_l крысят (таблица 3). При 2-х недельном введении дексаметазона и гидрокортизона отмечено снижение по сравнению с контролем C_w на 67% (p_k <0.001) и C_l на 45% (p_k <0.001). Все исследованные полимерные эфиры глюкокортикоидов (примеры 4 6, 9), в отличие от низкомолекулярных стероидов, не оказывали влияния на C_w и C_l (p_k>0.05, p_c<0.001).

У заявленных полимерных производных наряду с противовоспалительной активностью при низком уровне побочных эффектов был обнаружен высокий уровень противошоковой активности на модели "турникетного" шока.

Известные низкомолекулярные природные и синтетические глюкокортикоиды, макромолекулярными аналогами которых являются заявленные сополимеры, также обладают противошоковой активностью [5] однако имеют ряд существенных недостатков:
уровень противошоковой активности относительно низок;
задерживают физическое развитие растущего организма;
подавляют функции тимуса и надпочечников;
вызывают атрофию мышц.

Обнаруженная высокая противошоковая активность полимерных производных глюкокортикоидов не вытекает с очевидностью из их структурной формулы, молекулярной массы и другой известной информации.

Дексаметазон и гидрокортизон в дозах, сопоставимых между собой по активности, в 1.5 2 раза (p_k<0.001) увеличивали промежуток времени с момента снятия жгута до начала гибели животного. При этом они снижали летальность на 5 10% (p_k<0.05), которая в контроле составила 100% (см.таблицу 4). Полимерные аналоги дексаметазона (пример 6) и гидрокортизона (пример 9) снижали летальность на 50 55% (p_k<0.001, p_c<0.001), увеличивая среднюю продолжительность жизни животных более, чем в 3 раза (p_k<0.001, p_c<0.001).

При исследовании биологической активности заявленных полимерных эфиров кортикостероидов установлено, что отличия в уровнях как противовоспалительного, так и противошокового эффектов полимерных производных дексаметазона и полимерных производных гидрокортизона незначительны или находятся в пределах погрешности эксперимента (при расчете на активное начало), что согласуется с наблюдаемой эквивалентностью соответствующих биологических эффектов указанных низкомолекулярных стероидов, сравниваемых в сопоставимых дозах, и ранее опубликованными данными по удельной биологической активности полимерных производных, выбранных в качестве аналога и прототипа. Такой результат следовало ожидать, так как гормоны группы кортикостероидов имеют характерную структуру и содержат наиболее реакционно способную гидроксильную функцию при C-21, в результате чего присоединение остатков кортикостероидов к полимерной основе по заявленному и другим упомянутым способам происходит региоэквивалентно.

Изобретение относится к химии высокомолекулярных соединений, медицинской и биоорганической химии, точнее, к водорастворимым сополимерам общей формулы:
,
где R₁ = H, -CH₂CH₂N(C₂H₅)₂;
R₂ = остаток кортикостероида, присоединенный по 21-CH₂OH-группе, из ряда, включающего гидрокортизон и дексаметазон, при n = 56.4 - 89.8 мол.%, m = 2.0 - 29.8 мол.%, l = 5.5 - 13.8 мол.%, с ММ (4 - 40)•10³.

Изобретение может быть использовано для создания медицинских препаратов. Указанные сополимеры получают сополимеризацией в органическом растворителе в среде инертного газа смеси N-винил-2-пирролидона, 21-кротоната кортикостероида и кротоновой кислоты или N,N-диэтиламиноэтилдкротоната в присутствии радикального инициатора; соотношение сомономеров, мол.%: 17.0 - 91.9 : 4.7 - 19.0 : 2.4 - 64.0 соответственно. Суммарная концентрация сомономеров 6 - 55 масс%. В качестве растворителя используют этанол, 2-пропанол, бензол, N,N-диметилформамид. Полученные сополимеры обладают повышенной стабильностью к гидролизу: в герметичных условиях гидролиз стероидной группы не происходит при хранении в течение года; производное, полученное известным способом, отщепляло 28 - 30% стероида за 6 мес. в тех же условиях. 2 с. и 2 з.п. ф-лы. 2 ил.

1. Водорастворимые сополимеры N-винил-2-пирролидона с производными кротоновой кислоты общей формулы

где R₁ H, CH₂CH₂N(C₂H₅)₂;
R₂ остаток кортикостероида, присоединенный по 21-CH₂-OH группе, при n 56,4 89,8 мол.

m 2,0 29,8 мол.

l 5,5 13,8 мол.

с молекулярной массой (4 40) • 10³, обладающие глюкокортикоидной активностью.

2. Сополимеры по п.1, отличающиеся тем, что в качестве остатка кортикостероида они содержат остаток соединения из ряда: гидрокортизон или дексаметазон. 3. Способ получения водорастворимых сополимеров по п.1, заключающийся в том, что смесь N-винил-2-пирролидона, кротоновой кислоты или N, N-диэтиламиноэтилкротоната и 21-кротоната кортикостероида подвергают сополимеризации в органическом растворителе в присутствии радикального инициатора при следующем соотношении мономеров, мол. N-винил-2-пирролидон 17,0 91,9; кротоновая кислота или N, N-диэтиламиноэтилкротонат 2,4 64,0; 21-кротонат кортикостероида 4,7 19,0. 4. Способ по п.3, отличающийся тем, что в качестве 21-кротоната кортикостероида в реакцию вводят соединения, выбранные из ряда, содержащего 21-кротонат гидрокортизона или 21-кротонат дексаметазона.