СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КРИСТАЛЛОГРАММЫ СУБСТРАТА Российский патент 1999 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторным методам исследования в диагностике различных заболеваний.

Известен способ применения кристаллографического метода в лабораторных исследованиях биосубстратов путем получения кристаллических налетов. Для этого из исследуемого субстрата готовят мазки на предметном стекле и выращивают в термостате при температуре 37^oC и постоянной влажности в течение 24 часов [1]. Недостатком этого метода является то, что картина кристаллических налетов нечетко выражена и малоинформативна для постановки диагноза. Специфичность данного способа в том, что готовится нативный материал без кристаллообразователя.

Известен другой способ получения кристаллограмм, где в качестве кристаллообразователя используется 0,9%-ный водный раствор хлористого натрия [2]. Кристаллы выращивают при температуре 37^oC в течение 24 часов.

Наиболее близким к заявляемому является выбранный в качестве прототипа способ выращивания кристаллограмм, где биосубстрат в соотношении 2:10 смешивают с 2%-ным раствором хлорной меди в этиловом спирте [3]. Полученную смесь разливают в чашки Петри и выдерживают при температуре 37^oC и постоянной влажности в присутствии хлористого кальция в течение 6 часов. Последний метод отличается от первых ярко выраженной картиной кристаллического рисунка и четкой дифференциацией кристаллограмм при различных патологиях. Общим недостатком этих способов является длительность выращивания кристаллов.

Задачами, на решение которых направлено данное изобретение, является повышение скорости получения кристаллограмм биосубстратов и исключение из лабораторной практики использования наркотического вещества, что достигается путем замены в кристаллографическом методе исследования растворителя - этилового спирта на ацетон.

Предлагаемый вместо этилового спирта ацетон обладает более низкой температурой кипения: T_{кип. ацетон} = 56,2^oC, T_{кип. этанол} = 76,2^oC, а следовательно, и большей летучестью. Для получения кристаллограмм с использованием ацетона достаточно 3 часов термостатирования вместо 6 часов с этиловым спиртом. Кроме того, этиловый спирт относится к группе наркотиков, поэтому нежелательно его широкое использование в лабораторной практике.

Способ реализуется следующим образом. К 2 мл биосубстрата, взятого для анализа, капельно при постоянном встряхивании добавляют 10 мл 2%-ного раствора хлорной меди в ацетоне. Полученную смесь выдерживают 15 минут при комнатной температуре, затем фильтруют через обеззоленный фильтр и переливают в чашку Петри. Чашку Петри ставят в термостат для кристаллообразования при температуре 37^oC. Через 3 часа вынимают готовую кристаллограмму.

На фиг. 1 и 2 проиллюстрированы кристаллограммы биосубстратов с этиловым спиртом и ацетоном соответственно.

Макро- и микроскопическая оценка кристаллограмм, полученных с применением ацетона и этилового спирта показала их абсолютную идентичность. Следовательно, ацетон можно использовать как альтернативный растворитель в кристаллографическом методе исследования биосубстратов с сокращением времени получения кристаллограммы почти вдвое. Это позволяет уложить весь цикл получения кристаллограмм с учетом подготовительной работы в один рабочий день лаборанта.

Источники информации.

1. Теодор И.Л., Мороз Л.А. и др. Применение метода кристаллических налетов в диагностике некоторых патологических процессов. - Лабораторное дело, 1985, N 5, c. 295 - 298.

2. Нефедова Н.Б., Цывенкова Л.А. - Вопр. охр. мат., 1985, N 10, c. 70.

3. Кристаллографический метод исследования биологических субстратов. Методические рекомендации. Мороз Л.А. и др. М., 1981.

Изобретение относится к области медицины, в частности диагностике различных заболеваний. Сущность его состоит в том, что при работе с биосубстратом в диагностических целях его смешивают с раствором хлорной меди, при этом для получения раствора используют ацетон. Технический результат изобретения заключается в ускорении получения кристаллограммы за счет замены этилового спирта на ацетон. 2 ил.

Способ получения кристаллограммы субстрата путем смешивания в соотношении 2 : 10 биосубстрата и 2%-ного раствора хлорной меди, смесь выдерживают в присутствии хлористого кальция в течение 6 ч, отличающийся тем, что раствор хлорной меди готовят с помощью ацетона.