СРЕДА ДЛЯ ХРАНЕНИЯ ТКАНЕЙ ГЛАЗА Российский патент 1999 года по МПК A61F9/00 

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано для длительного хранения тканей глаза (роговицы, хрусталика) с сохранением их оптических свойств.

В связи с появлением новейших диагностических приборов появилась возможность дополнительного исследования оптических свойств некоторых оболочек глаза, в частности хрусталика и роговицы. Необходимым условием таких исследований для кадаверных глаз (свежеэнуклеированных) является сохранение основных химических компонентов указанных тканей и их оптических свойств.

Чтобы биоткани глаза не утратили этих свойств применяют растворы: дистиллированную воду, физиологический раствор, раствор Рингера, раствор Тироде и другие.

Недостатком использования указанных растворов является то, что они приводят к изменению оптических свойств и осмотического давления тканей, что вызывает их набухание или сморщивание, а также при длительном хранении (от 1 до 15 ч) - к помутнению.

В связи с длительностью проводимых исследований (от 1 до 3-х суток) и с редкой возможностью получения кадаверных глаз с прозрачными хрусталиками в первые часы после смерти необходимо более длительное хранение тканей глаза.

Прототипом является раствор Рингера, который широко применяют в экспериментальной практике. Он содержит растворы солей NaCl, KCl, CaCl₂, NaHCO₃ /Збарский Б.И. Биологическая химия, 1972, с. 456/. Его используют для культивирования хрусталика и роговицы и для хранения кадаверных глаз /А. Пири, Р. ван. Гейнинген Биохимия глаза, 1968/.

Однако применение раствора Рингера часто приводит к набуханию, а затем и помутнению хрусталика и роговицы при длительном хранении /5 - 15 ч/.

Оптические ткани глаза /роговица, хрусталик/, как известно, омываются или находятся в той или иной связи с камерной влагой глаза, которая необходима для метаболизма тканей глаза, да и сама является частью оптического параметра глаза. Поэтому естественно было бы использовать жидкость, близкую по составу к камерной влаге.

Применяемый раствор Рингера отличается от камерной влаги ионным составом. В нем отсутствуют необходимые компоненты камерной влаги для метаболизма тканей глаза, особенно хрусталика и роговицы. Поэтому для длительного хранения тканей глаза требуются более специфические, сбалансированные растворы, наиболее близкие по своему составу к камерной влаге.

Предлагается среда для хранения тканей глаза, содержащая хлористые соли K, Ca, Mg, фосфатный буфер, глюкозу и аскорбиновую кислоту, и физиологический раствор при следующем соотношении компонентов, об. %:
1%-ный раствор CaCl₂ - 2,5 - 2,8
1%-ный раствор MgCl₂ - 0,5 - 0,6
1%-ный раствор KCl - 1,0 - 1,2
0,001 М фосфатный буфер - 10,0 - 10,2
1%-ный раствор глюкозы - 10,0 - 10,5
5%-ный раствор аскорбиновой кислоты - 0,5 - 0,6
0,9%-ный раствор NaCl - Остальное
pH 7,4 - 7,5
Смесь готовят следующим образом.

Примерно к 70 мл 0,9% NaCl добавляют 2,5 - 2,8 мл 1% CaCl₂, 0,5 - 0,6 мл 1% MgCl₂, 1,0 - 1,2 мл 1% KCl, 10,0 - 10,2 мл 0,001 М фосфатного буфера, 10,0 - 10,5 мл 1% раствора глюкозы. Смесь стерилизуют до внесения в нее аскорбиновой кислоты /она подвержена разложению при стерилизации/ при 132^oC и давлении 2 атм в течение 30 мин. В таком виде раствор можно хранить при 4^oC в течение месяца. Перед непосредственным применением в указанную смесь добавляют 0,5 - 0,6 мл стерильного 5%-ного раствора аскорбиновой кислоты промышленного производства /в ампулах/ и доводят до 100 мл стерильным физиологическим раствором /0,9% NaCl/.

В табл. 1 представлены результаты хранения тканей глаза /19 роговиц и 19 хрусталиков/ в течение 3-х суток при содержании в предлагаемом растворе ингредиентов в количестве нижнего и верхнего пределов интервала значений, указанного в формуле.

В экспериментальных исследованиях было установлено, что в предложенной среде при 0 - 4^oC ткани глаза сохраняют свои оптические свойства в течение 3-х суток.

В табл. 2 представлены сравнительные результаты хранения хрусталиков и роговиц по прототипу и с использованием предложенной среды.

Как видно из табл. 2, при хранении глаза по прототипу отмечено большое количество в них изменений. В предложенной среде изменений не наблюдалось.

В табл. 3 представлены результаты хранения тканей в предложенной среде в течение 6 суток.

Как видно из табл. 2, при использовании предлагаемой среды в течение 3-х суток не было обнаружено ни одного изменения в тканях глаза.

Отсутствие изменений оптических свойств роговиц и хрусталиков при хранении их в течение 3-х суток доказывает возможность применения предлагаемой среды в длительных экспериментальных исследованиях тканей глаза.

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии. Предлагается использовать среду для хранения тканей глаза, включающую физиологический раствор, содержащий 0,9%-ный раствор NaCl, и дополнительно содержащую 1%-ные растворы хлоридов кальция, магния, калия, 0,001 М раствор фосфатного буфера, 1%-ный раствор глюкозы, 5%-ный раствор аскорбиновой кислоты, при следующем соотношении компонентов, об.%: 1%-ный раствор CaCl₂ 2,5 - 2,8; 1%-ный раствор MgCl₂ 0,5 - 0,6; 1%-ный раствор KCl 1,0 - 1,2; 0,001 М фосфатный буфер 10,0 - 10,2, 1%-ный раствор глюкозы 10,0 - 10,5; 5%-ный раствор аскорбиновой кислоты 0,5 - 0,6; 0,9%-ный раствор NaCl - остальное. Среда обеспечивает увеличение срока сохранения оптических свойств глаза в послеоперационный период. 3 табл.

Среда для хранения тканей глаза, содержащая 0,9%-ный раствор NaCl, отличающаяся тем, что дополнительно содержит 1%-ные растворы хлоридов кальция, магния, калия, 0,001 М раствор фосфатного буфера, 1%-ный раствор глюкозы, 5%-ный раствор аскорбиновой кислоты и имеющей рН 7,4 - 7,5 при следующем соотношении компонентов, об.%:
1%-ный раствор CaCl₂ - 2,5 - 2,8
1%-ный раствор MgCl₂ - 0,5 - 0,6
1%-ный раствор КCl - 1,0 - 1,2
0,001 М фосфатный буфер - 10,0 - 10,2
1%-ный раствор глюкозы - 10,0 - 10,5
5%-ный раствор аскорбиновой кислоты - 0,5 - 0,6
0,9%-ный раствор NaCl - Остальное