СПОСОБ ПОДГОТОВКИ РАСТВОРА ВЕРОГРАФИНА ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ ЛЕГКОЙ ФРАКЦИИ ЭРИТРОЦИТОВ Российский патент 1999 года по МПК G01N33/50 

Изобретение относится к медицине, а конкретно - к лабораторной технике выявления легкой фракции эритроцитов, что может быть использовано врачами-лаборантами клинико-диагностических, гематологических и гемостазиологических лабораторий для диагностики анемических синдромов и расстройства системы гемостаза (синдрома диссеминированного внутрисосудистого свертывания - ДВС - синдрома).

Известен способ подготовки раствора верографина для обнаружения легкой фракции эритроцитов, взятый за прототип и описанный А.М.Лившицем в ж. Клин. лаб. диагностика (1992, N 9-10, с. 25 - 27). Этот способ осуществляют путем смешивания в мерном цилиндре исходного (ампульного) раствора верографина с дистиллированной водой под контролем ареометра. При этом в мерный цилиндр помещают дистиллированную воду и доливают исходный (ампульный) раствор верографина до необходимой удельной плотности смеси под контролем ареометра. Доведение раствора верографина до заданной удельной плотности может быть многоступенчатой операцией, требующей многократного подливания верографина или воды в цилиндр, соответственно повторного вынимания ареометра и тщательного перемешивания измеряемого раствора.

Однако способ имеет недостатки. Это макрометод, который требует значительного количества (около 50 мл) исходного (ампульного) раствора верографина для того, чтобы в мерном цилиндре можно было приготовить смесь верографина с водой заданной удельной плотности (ареометры имеют достаточно крупные размеры). Приготовленный в большом количестве верографин быстро портится, так как его плотность значительно ниже, чем исходного (ампульного) раствора. Плотность приготовленного раствора вскоре может неконтролируемо меняться за счет испарения воды, развития в среде микроорганизмов и грибков. По этой причине реагент вскоре вынуждены выбрасывать. В целом это является экономически невыгодным, а сама процедура приготовления раствора верографина заданной удельной плотности с помощью мерного цилиндра и ареометра - чрезмерно трудоемка и требует много времени.

Задачей настоящего изобретения является упрощение процедуры приготовления раствора верографина в воде заданной удельной плотности, а также экономия верографина.

Эта задача решается за счет того, что для приготовления раствора верографина заданной плотности применяют микрометод - смешиваемые жидкости отмеривают с помощью цифрового электронного или механического пипеточного микродозатора, а объем добавляемого к воде исходного (ампульного) верографина рассчитывают по формуле
(1 + X) • Y = ( 1 • 0,998) + Z • X,
где 1 - объем воды в мл (1 мл);
X - объем исходного (ампульного) верографина, добавляемого к воде (мл);
Y - заданная плотность смеси воды с ампульным верографином (г/см³);
0,998 - удельная плотность воды при 20^oC (г/см³);
Z - удельная плотность исходного (ампульного) верографина (г/см³).

Смысл уравнения заключается в следующем: масса объема смеси (1 мл воды + X мл ампульного верографина) с запланированной удельной плотностью смеси (Y) в левой части уравнения равна массе 1 мл воды + масса добавленного (X мл) ампульного верографина исходной удельной плотности (Z).

При этом смесь верографина с водой готовится по мере необходимости для использования раствора в течение одного рабочего дня. Общий объем приготовленной смеси составляет около 1,5 мл. Этого достаточно, чтобы выполнить 20 - 25 анализов.

Способ осуществляют следующим образом. В пробирку с помощью цифрового электронного или механического пипеточного микродозатора помещают 1 мл дистиллированной воды и добавляют вычисленный (X) объем ампульного верографина, исходная плотность которого (Z) заранее определена с помощью пикнометра на аналитических весах известным методом. Из партии приобретенного препарата достаточно определить удельную плотность ампульного верографина один раз. Полученную величину используют всякий раз при подготовке раствора верографина заданной удельной плотности. Объем добавляемого ампульного верографина (X) определяют исходя из запланированной удельной плотности рабочего раствора верографина (Y). Смесь тщательно перемешивают и используют для определения легкой фракции эритроцитов.

Вышеизложенное поясняется примером 1. Необходимо получить рабочий раствор верографина в воде с удельной плотностью 1,128 г/см³ (Y). Плотность исходного (ампульного) верографина по результатам определения с помощью пикнометра составляет 1,340 г/см³ (Z). Составляем уравнение, которое принимает следующий вид:
(1 + X) • 1,128 = (1 • 0,998) + 1,340 • X
Преобразуем уравнение:
1,128 + 1,128 X = 0,998 + 1,340 X;
1,128 - 0,998 = 1,340 X - 1,128 X.

Находим X:
0,130 = 0,212 X;
X = 0,130 : 0,212 = 0,613.

Следовательно, для получения рабочего раствора верографина с заданной удельной плотностью 1,128 г/см³ к 1 мл воды следует добавить с помощью цифрового пипеточного микродозатора 0,613 мл ампульного верографина (613 мкл) с исходной плотностью 1,340 г/см³. Общий объем смеси составляет 1,613 мл. Смесь используют в течение рабочего дня. При этом пробирку тщательно закрывают для предотвращения испарения воды.

Предлагаемое техническое решение позволяет максимально быстро готовить раствор верографина заданной удельной плотности, значительно экономить препарат и может быть эффективно использовано в гемостазиологических лабораториях для диагностики диссеминированного внутрисосудистого свертывания крови (ДВС-синдрома) - выявления легкой фракции эритроцитов, а также быть полезным в гематологических клиниках для обнаружения атипично легких эритроцитов при диагностике предлейкозных анемических синдромов, аутоиммунной гемолитической анемии, гипопластической анемии.

Способ может быть использован в медицине, конкретно в лабораторных методах выявления легкой фракции эритроцитов. Способ заключается в смешивании ампульного раствора верографина с водой. Новым в способе является то, что определяют удельную плотность исходного ампульного верографина, смешиваемые жидкости отмеривают с помощью цифрового пипеточного дозатора, а объем добавляемого к воде ампульного раствора верографина рассчитывают по формуле: (1 + X • Y = (1 • 0,998) + Z • X, где 1 - объем воды в мл (1 мл); X - объем исходного (ампульного) верографина, добавляемого к воде (в мл); Y - заданная плотность смеси воды с ампульным верографином (г/см³); 0,998 - удельная плотность воды при 20^oC (г/см³); Z - удельная плотность исходного (ампульного) верографина (г/см³). Способ более прост в исполнении, более экономичен в расходовании верографина и позволяет максимально быстро готовить раствор верографина заданной удельной плотности.

Способ подготовки раствора верографина для обнаружения легкой фракции эритроцитов, включающий смешивание ампульного раствора верографина с водой, отличающийся тем, что определяют удельную плотность исходного ампульного верографина, смешиваемые жидкости отмеривают с помощью цифрового пипеточного микродозатора, а объем добавляемого к воде ампульного раствора верографина рассчитывают по формуле
(l х X) • Y = (l • 0,998) + Z • X,
где l - объем воды, мл (1 мл);
X - объем исходного (ампульного) верографина, добавляемого к воде, мл;
Y - заданная плотность смеси воды с ампульным верографином, г/см³;
0,998 - удельная плотность воды при 20^oC, г/см³;
Z - удельная плотность исходного ампульного верографина, г/см³.