ПРЕПАРАТ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ГНОЙНО-ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ (ВАРИАНТЫ) Российский патент 2000 года по МПК A61K35/76 A61K9/20 

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к средствам для специфической профилактики и лечения гнойно-воспалительных заболеваний стафилококковой, стрептококковой, псевдомонас аэругиноза, коли и протейной этиологии.

В настоящее время отмечается рост гнойно-воспалительных заболеваний, обусловленных стафилококковой, стрептококковой, псевдомонас аэругиноза, коли и протейной инфекцией. В большинстве случаев наблюдается устойчивость этих микроорганизмов ко многим антибиотикам, что создает большие трудности при лечении больных. В связи с этим поиск средств специфической профилактики и лечения заболеваний, вызванных стафилококками, стрептококками, синегнойной и кишечной палочкой, протеем, приобретает особую актуальность.

Наиболее близкими аналогами изобретения являются жидкие монофаги - стафилококковый, стрептококковый, псевдомонас аэругиноза, коли, протейный и пиобактериофаг комбинированный, представляющий собой смесь фильтров названных фаголизатов [1-6].

Жидкие формы бактериофагов менее удобны при их применении внутрь, так как жидкий фаг инактивируется в кислой среде желудка и имеет неприятные органолептические свойства, что ограничивает применение препарата особенно для детей младшего возраста. Недостатком жидких бактериофагов является и то, что используемая смесь фильтратов фагов содержит много балластных веществ - продуктов жизнедеятельности микробных клеток и остатков питательной среды, что может вызвать побочные реакции в организме.

Задача, решаемая изобретением, - создание новой лекарственной формы препарата стафилококкового или стрептококкового или коли или протейного или псевдомонас аэругиноза бактериофагов или их смеси (пиобактериофага комбинированного).

Технический результат - сохранение высокой литической активности бактериофагов защитной кислотоустойчивой оболочкой, отсутствие побочного действия при его применении и устранение неприятных вкусовых свойств, что ограничивает использование препарата.

Поставленная задача достигается тем, что средство для лечения гнойно-воспалительных заболеваний содержит очищенный концентрат стафилококкового или стрептококкового или коли или протейного или псевдомонас аэругиноза бактериофагов или их смесь (пиобактериофаг комбинированный) и целевую добавку при следующем соотношении, мас.ч.:
Очищенный концентрат бактериофага (стафилококкового или стрептококкового или коли или протейного или псевдомонас аэругиноза бактериофагов или их смесь (пиобактериофаг комбинированный) с литической активностью не менее 10^-7-10^-8 (масса жидкого концентрата до лиофильного высушивания - 100
Целевая добавка - 92 - 105
Сравнительный анализ заявляемого решения с прототипом показывает, что общим для них является наличие монофагов. Однако в отличие от прототипа, в заявляемом решении использован очищенный концентрат стафилококкового или стрептококкового или коли или протейного или псевдомонас аэругиноза бактериофагов или их смесь (пиобактериофаг комбинированный), а для получения таблетированной формы препарата средство содержит целевую добавку, включающую в качестве стабилизаторов молоко обезжиренное стерилизованное сухое и глюконат кальция, и наполнители - глюкозу, кальций стеариновокислый и тальк.

Применение очищенных концентратов стафилококкового или стрептококкового или коли или протейного или псевдомонас аэругиноза бактериофагов или их смеси позволяет изготовить новую лекарственную форму препарата с достаточной активностью и эффективностью. Таблетированная форма препарата является удобной для применения, обеспечивает сохранение литической активности бактериофагов в кислой среде желудка; при этом создается возможность использования кислотоустойчивой оболочки, что предотвращает инактивацию фагов.

Для приготовления препарата для лечения гнойно-воспалительных заболеваний берут концентрированные, очищенные методом ионообменной хроматографии или баромембранным разделением стафилококковый или стрептококковый или коли или протейный или псевдомонас аэругиноза бактериофаги или их смесь.

Концентрирование и очистку фаголизатов осуществляют двумя альтернативными методами:
1. Ионообменной хроматографией на волокнистой ДЭАЭ-целлюлозе в OH-форме, уравновешенной фосфатным буферным раствором концентрации 0,1 моль/дм³ pH 7,1±0,1, до тех же значений pH в промывной жидкости. На колонке, содержащей (100,0±5,0) г ДЭАЭ-целлюлозы, сорбируют фаг из (40±5) л стерильного фаголизата (профильтрованного через мембрану с размером пор 0,22 мкм). Элюцию фагов с колонки проводят в стерильные мерные флаконы вместимостью 500±10 мл. Концентраты монофагов исследуют на стерильность и литическую активность.

2. Ультрафильтрацией на установках с плоскокамерными разделительными аппаратами с мембранами с размером пор 100 кД. Концентрирование фага осуществляют в 10 раз по объему. Концентраты монофагов фильтруют через мембраны с размером пор 0,22 мкм и исследуют на стерильность и литическую активность.

Очищенные концентраты с литической активностью 10^-7-10^-8 (по Аппельману), полученные 1-м и 2-м способом, используют для лиофильного высушивания и приготовления таблеток фага.

Технология приготовления таблеток стафилококкового или стрептококкового, или коли, или протейного, или псевдомонас аэругиноза бактериофагов, или их смеси (пиобактериофага комбинированного) такова: жидкий очищенный концентрат стафилококкового или стрептококкового, или коли ,или протейного, или псевдомонас аэругиноза бактериофагов, или их смесь перемешивают с сухим обезжиренным стерилизованным молоком, глюконатом кальция, лактозой и лиофильно высушивают. Сухую массу перемалывают, смешивают с наполнителями и таблетируют. Таблетки покрывают кислотоустойчивой оболочкой из ацетилфталилцеллюлозы. Готовый препарат представляет собой таблетки массой (0,20±0,02) г серого цвета, покрытые оболочкой, круглые, диаметр 0,8 см, поверхность двояковыпуклая, гладкая.

Пример 1. Для приготовления препарата берут очищенные концентрированные методом ионообменной хроматографии или баромембранным разделением бактериофаги - стафилококковый или стрептококковый, или коли, или протейный, или псевдомонас аэругиноза бактериофаги, или их смесь. Концентраты монофагов исследуют на стерильность и литическую активность. Фракции очищенных концентратов с литической активностью 10^-7-10^-8 (по Аппельману) используют для лиофильного высушивания и приготовления таблеток фага. Технология приготовления таблеток стафилококкового или стрептококкового, или коли, или протейного, или псевдомонас аэругиноза бактериофагов, или их смеси (пиобактериофага комбинированного) такова: к 1 л очищенного концентрата бактериофага добавляют при температуре (22+2)^oC 400 мл молока обезжиренного стерилизованного сухого, 450 мл глюконата кальция, перемешивают и лиофилизируют. Сухую массу перемалывают и смешивают с наполнителями и таблетируют при следующем составе, мас.ч.: очищенный концентрат бактериофагов или их смесь (пиобактериофаг комбинированный) 100 (масса жидких концентратов до лиофильного высушивания), глюкозы 1,0, лактозы 5,0, молока стерилизованного обезжиренного сухого 40,0, кальция стеариновокислого 1,0, талька до 3,0, глюконата кальция 45,0.

Литическая активность таблеток стафилококкового, стрептококкового, коли, протейного, псевдомонас аэругиноза бактериофагов или их смеси (пиобактериофага комбинированного) по примеру 1 равна 10^-5,3.

Пример 2. Для приготовления препарата для лечения гнойно-воспалительных заболеваний очищенные концентраты смешивают со стабилизаторами и лиофилизируют. Сухую массу перемалывают, смешивают с наполнителями и таблетируют при следующем составе, мас.ч.: очищенный концентрат бактериофагов или их смесь (пиобактериофаг комбинированный) 100 (масса жидких концентратов до лиофильного высушивания), кальция стеариновокислого 1,0, талька до 3,0, глюкозы 2,0, молока стерилизованного обезжиренного сухого 40,0, глюконата кальция 42,0, лактозы 6,0.

Способ приготовления таблеток стафилококкового или стрептококкового, или коли, или протейного, или псевдомонас аэругиноза бактериофагов, или их смеси (пиобактериофага комбинированного) по примеру 2 аналогичен описанию технологии по примеру 1. Литическая активность таблеток по примеру 2 равна 10^-6.

Пример 3. Для приготовления препарата для лечения гнойно-воспалительных заболеваний очищенные концентраты смешивают со стабилизаторами и лиофилизируют. Сухую массу перемалывают, смешивают с наполнителями и таблетируют при следующем составе, мас. ч.: очищенный концентрат бактериофагов или их смесь (пиобактериофаг комбинированный) 100 (масса жидких концентратов до лиофильного высушивания), глюконата кальция 40,0, глюкозы 3,0, лактозы 8,0, молока стерилизованного обезжиренного сухого 36,5, кальция стеариновокислого 1,5, талька до 3,0.

Технология приготовления таблеток по примеру 3 аналогична описанию технологии по примеру 1. Литическая активность таблеток стафилококкового, стрептококкового, коли, протейного, псевдомонас аэругиноза бактериофагов или их смеси (пиобактериофага комбинированного) по примеру 3 равна 10^-6.

Из приведенных примеров и данных таблицы видно, что таблетки в предлагаемых составах обладают высокой литической активностью, которая составляет не менее 10^-5,3. При использовании очищенных концентратов стафилококкового или стрептококкового, или коли, или протейного, или псевдомонас аэругиноза бактериофагов, или их смеси литическая активность препаратов по сравнению с прототипом повышается (примеры 1 - 3). Предлагаемый препарат может найти широкое применение в клинической медицине для профилактики и лечения гнойно-воспалительных заболеваний. Таблетированная форма препарата обеспечивает сохранение высокой литической активности бактериофагов за счет кислотоустойчивого покрытия, предотвращающего инактивацию фагов в кислой среде желудка. Препарат не содержит балластных веществ, лишен неприятных вкусовых свойств, удобен в применении.

Полученная новая лекарственная форма препарата отвечает требованиям, предъявляемым к лечебно-профилактическим бактериофагам, а именно: препарат стерилен, безвреден и обладает высокой литической активностью.

Список литуратуры:
1. ФС 42-33ВС-87 "Бактериофаг коли жидкий".

2. ФС 42-88ВС-88 "Бактериофаг стрептококковый жидкий".

3. ФС 42-89ВС-88 "Бактериофаг псевдомонас аэругиноза жидкий".

4. ФС 42-100ВС-88 "Бактериофаг протейный жидкий".

5. ФС 42-103ВС-88 "Бактериофаг стафилококковый жидкий"
6. ФС 42-240ВС-89 "Пиобактериофаг комбинированный жидкий".

Изобретение относится к медицине и касается средств для лечения гнойно-воспалительных заболеваний. Таблетки с кислотоустойчивой оболочкой содержат очищенный концентрат стафилококкового или стрептококкового, или протейного, или коли, или псевдомонас аэругиноза, или их смеси бактериофага и целевую добавку. Предложенное средство имеет более высокую эффективность и не имеет неприятных вкусовых свойств. 6 с.п.ф-лы, 1 табл.

1. Препарат для лечения гнойно-воспалительных заболеваний, содержащий стафилококковый бактериофаг, отличающийся тем, что он представляет собой покрытую кислотоустойчивой оболочкой таблетированную форму, полученную из лиофилизата очищенного концентрата стафилококкового бактериофага с литической активностью не менее 10^-7 - 10^-8 и целевой добавки, взятых при следующем соотношении, мас.ч.:
Очищенный концентрат стафилококкового бактериофага с литической активностью не менее 10^-7 - 10^-8 (масса жидкого концентрата) - 100
Целевая добавка - 92 - 105
2. Препарат для лечения гнойно-воспалительных заболеваний, содержащий стрептококковый бактериофаг, отличающийся тем, что он представляет собой покрытую кислотоустойчивой оболочкой таблетированную форму, полученную из лиофилизата очищенного концентрата стрептококкового бактериофага с литической активностью не менее 10^-7 - 10^-8 и целевой добавки, взятых при следующем соотношении, мас.ч.:
Очищенный концентрат стрептококкового бактериофага с литической активностью не менее 10^-7 - 10^-8 (масса жидкого концентрата) - 100
Целевая добавка - 92 - 105
3. Препарат для лечения гнойно-воспалительных заболеваний, содержащий бактериофаг псевдомонас аэругиноза, отличающийся тем, что он представляет собой покрытую кислотоустойчивой оболочкой таблетированную форму, полученную из лиофилизата очищенного концентрата бактериофага псевдомонас аэругиноза с литической активностью не менее 10^-7 - 10^-8 и целевой добавки, взятых при следующем соотношении, мас.ч.:
Очищенный концентрат бактериофага псевдомонас аэругиноза с литической активностью не менее 10^-7 - 10^-8 (масса жидкого концентрата) - 100
Целевая добавка - 92 - 105
4. Препарат для лечения гнойно-воспалительных заболеваний, содержащий бактериофаг коли, отличающийся тем, что он представляет собой покрытую кислотоустойчивой оболочкой таблетированную форму, полученную из лиофилизата очищенного концентрата бактериофага коли с литической активностью не менее 10^-7 - 10^-8 и целевой добавки, взятых при следующем соотношении, мас.ч.:
Очищенный концентрат бактериофага коли с литической активностью не менее 10^-7 - 10^-8 (масса жидкого концентрата) - 100
Целевая добавка - 92 - 105
5. Препарат для лечения гнойно-воспалительных заболеваний, содержащий протейный бактериофаг, отличающийся тем, что он представляет собой покрытую кислотоустойчивой оболочкой таблетированную форму, полученную из лиофилизата очищенного концентрата протейного бактериофага с литической активностью не менее 10^-7 - 10^-8 и целевой добавки, взятых при следующем соотношении, мас. ч.:
Очищенный концентрат протейного бактериофага с литической активностью не менее 10^-7 - 10^-8 (масса жидкого концентрата) - 100
Целевая добавка - 92 - 105
6. Препарат для лечения гнойно-воспалительных заболеваний, содержащий стафилококковый, стрептококковый, псевдомонас аэругиноза, коли, протейный бактериофаг, отличающийся тем, что он представляет собой покрытую кислотоустойчивой оболочкой таблетированную форму, полученную из лиофилизатов очищенных концентратов бактериофагов с литической активностью не менее 10^-7 - 10^-8 и целевой добавки, взятых при следующем соотношении, мас.ч.:
Очищенный концентрат смеси бактериофагов с литической активностью не менее 10^-7 - 10^-8 (масса жидкого концентрата) - 100
Целевая добавка - 92 - 105