СПОСОБ ЗАМЕЩЕНИЯ ДЕФЕКТОВ КОСТНОЙ ТКАНИ Российский патент 2003 года по МПК A61B17/56 A61K35/32 

Известен способ замещения дефектов кости и стимуляции репаративного остеогенеза введением деминерализованного костного матрикса (ДКМ) в костную полость (Н. А. Тенилин. Лечение костных кист у детей и подростков. Автореф. канд. дисс. Н.Новгород, 1996). ДКМ представляет собой измельченную деминерализованную костную ткань с размером частиц от 100 до 300 мкм, которая вводится инъекционно в костную полость. Способ позволяет заполнять дефект костным матриксом, который является пластическим материалом для развития аутогенной костной ткани, а также оказывает остеоиндуктивное действие на остеорепарацию. Однако способ недостаточно эффективен при заполнении больших костных дефектов. В этих случаях требуется неоднократное (2-4 раза) введение ДКМ в костную полость.

Задача предлагаемого технического решения - ускорение остеорепарации.

Эта задача решается за счет того, что для замещения костных дефектов и стимуляции репаративного остеогенеза используется комбинация мелкодисперсного ДКМ с культурой аутофибробластов. Эффект мелкодисперсного ДКМ дополняется выраженным остеостимулирующим действием культуры аутофибробластов. В отличие от описанного в литературе экспериментального опыта стимуляции остеогенеза введением в область перелома ксенофибробластов (И. Г. Никитин. Влияние культуры клеток соединительно-тканного типа на процесс репаративного остеогенеза. //Актуальные вопросы травматологии и ортопедии. Материалы научно-практической конференции травматологов-ортопедов Республики Беларусь. Минск БГЭУ.- 2000.- Т. II.- С.353-357.), использование аутофибробластов с этой целью исключает реакцию отторжения пересаженных клеток. В области введения формируется депо аутологичных клеток - предшественников остеогенной ткани, которые благодаря выделению в процессе жизнедеятельности специфических факторов роста не только оказывают выраженное остеостимулирующее влияние, но и сами в дальнейшем под влиянием остеоиндуктивных факторов ДКМ претерпевают развитие в костную ткань. Способ может быть использован для замещения различных костных дефектов, стимуляции созревания регенерата при удлинении конечности и консолидации переломов.

Способ осуществляется следующим образом. Во время первичного оперативного вмешательства или специально за 4 недели до предполагаемого введения комплекса ДКМ с культурой аутофибробластов в область желаемой остеорепарации производится забор образца соединительной ткани размерами 1 х 1 см (кожа или надкостница пациента). Выращивание культуры аутофибробластов с концентрацией 4-5 млн. клеток на 1 мл матрикса осуществляется по стандартной методике. Однако последнее культивирование проводят на частицах аллогенного деминерализованного костного матрикса в течение суток. Засевают 4-5 млн. клеток на 1 мл частиц матрикса. Через сутки после пересева непосредственно перед операцией культуральную среду отбирают и матрикс с клетками заливают стерильным физиологическим раствором.

Введение комплекса ДКМ с культурой аутофибробластов в область костной полости, дефекта, зону регенерата или перелома производится под местным обезболиванием с помощью инъекции через иглу для внутрикостных вливаний. В зависимости от величины дефекта используется от 5 до 15 мл ДКМ, обогащенного культурой аутофибробластов. В случае введения в полость кисты достаточно однократной пломбировки дефекта из одной точки. При введении в область формирующегося дистракционного регенерата пункция осуществляется из трех точек с целью полноценного заполнения ДКМ зоны остеорепарации. По показаниям (большие дефекты костной ткани, массивные регенераты, замедленная консолидация переломов) введение ДКМ с культурой аутофибробластов можно повторять до 2-3 раз с интервалом 7-10 дней. Эффект от введения комплекса контролируется рентгенографически через 4 недели. На рентгенограммах видны признаки активной остеорепарации в зоне введения ДКМ с культурой аутофибробластов.

Клинический пример 1
Больная С., 23 лет. Диагноз: солитарная киста межвертельной области правой бедренной кости больших размеров, рецидив после костнопластического замещения патологического очага 8 лет назад. Больной произведена диагностическая пункция костной полости и диагноз верифицирован с помощью иммунологического и цитологического исследований. Во время пункции осуществлен забор участка кожи размерами 1 х 1 см для культивации фибробластов. После курса пункционного лечения больной в полость кисты введен комплекс ДКМ с культурой аутофибробластов объемом 15 мл. Больная выписана на амбулаторное лечение через 5 дней. Контрольное рентгенологическое обследование через 3 мес констатировало полное замещение полости костной тканью.

Клинический пример 2
Больная К., 14 лет. Диагноз: укорочение правой нижней конечности на 5 см на почве исхода врожденного вывиха бедра. С целью выравнивания длин нижних конечностей больной произведена остеотомия костей левой голени с фиксацией аппаратом Илизарова. На 5 день после операции начата дистракция с темпом 1 мм в сутки за 4 приема. Период дистракции составил 60 дней с образованием диастаза между отломками в 5,5 см, заполняющегося регенератом. За 4 недели до планируемого срока окончания дистракции у больной под местной анестезией взят участок кожи в области рубца, сформировавшегося после предшествующего вмешательства на тазобедренном суставе. Образец кожи культивирован и абсорбирован на ДКМ по описанной выше методике. Комплекс ДКМ с аутофибробластами в количестве 15 мл по окончании периода дистракции введен через внутрикостную иглу последовательно в 3 зоны регенерата из одного вкола. На контрольной рентгенограмме через 30 дней фиксации отмечается бурная оссификация регенерата вокруг зон введения ДКМ с культурой аутофибробластов. Срок фиксации в аппарате до формирования костной плотности регенерата составил 3,5 мес. Аппарат снят, разрешена дозированная возрастающая нагрузка на конечность.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет существенно активизировать остеорепарацию в зоне костных дефектов, сократить сроки и улучшить результаты лечения больных.

Изобретение относится к медицине, в частности к способам замещения костной ткани. Крошку деминерализованного костного матрикса вводят совместно с культурой аутофибробластов, культивируемых на частицах деминерализованного костного матрикса в течение суток перед введением больному, что стимулирует остеогенез без отторжения пересаженных клеток.

Способ замещения дефектов костной ткани путем введения крошки деминерализованного костного матрикса, отличающийся тем, что крошку деминерализованного костного матрикса вводят совместно с культурой аутофибробластов больного, культивируемых на частицах деминерализованного костного матрикса в течение суток перед введением больному.