СПОСОБ СТИМУЛЯЦИИ ОСТЕОИНДУКЦИИ Российский патент 2000 года по МПК A61K35/26 

Изобретение относится к медицине, а именно к транспланталогии, травматологии и ортопедии, и может быть использовано при пересадке деминерализованного костного матрикса в клинике.

Известен способ стимуляции остеоиндуктивных свойств деминерализованного костного матрикса (ДКМ) путем насыщения в вакууме имплантата ДКМ медикаментозным препаратом - ретаболилом (Fomichev N., Etitein Y. et al. - Demineralized bone graft with High osteogenous qualities. - 3-rd European Conference of Tissue Banking. Vienna, 1994, p. 52).

Авторы показали, что при насыщении ДКМ ретаболилом частота получения остеогенеза после имплантации составляет 94,5. Стимуляция остеогенеза и повышение остеогенных свойств увеличилось на 2,5% по сравнению с контролем (имплантация ДКМ без применения стимулятора-ретаболила).

Наиболее близким к предлагаемому решению является исследование по влиянию иммуностимулятора-зимозана на процесс репаративной регенерации после пересадки ДКМ (В. М. Денисов и др. "Некоторые иммунологические реакции при регенерации кости, индуцированной деминерализованным костным трансплантатом. - Сб. "Деминерализованный костный трансплантат и его применение". С.-Петербург, 1993. - С. 74-78). Авторы вводили животным после имплантации ДКМ зимозан в объеме 0,1 мм через двое суток после операции и в дальнейшем через сутки проводили еще три инъекции: 0,3-0,5-0,7 мл.

Через 2 недели содержание минеральных веществ в пересаженных ДКМ был выше, чем в контроле на 144,8%, через 2 месяца - на 22,7%. Авторы стимулировали процесс репаративной регенерации в первую фазу, которая длится у животных 3-4 недели (Stevenson S. et al. - Therespons to bone allograft current conceps review. - I.Bone I. Surg, 1992, 74-A (6): 939-950).

Частота положительных результатов не изучалась, т.е. судить об эффективности воздействия не представляется возможным.

При пересадке ДКМ без использования иммуномодулятора получение остеогенеза наблюдается в 87,5-92% (Urist M.R. et al. - Inductive substrates for bone formatien. - Clin. Orthop., 1968, N 59, p. 59-96; Linden Y. - Bone inductiv. S. Anat. , 1975, v. 119, N 2, p. 359-387), а при однократном курсе введения иммуностимулятора - тактивина сразу после операции - в 92% (см. описание эксперимента в настоящей заявке).

Таким образом, получается, что при использовании ДКМ в качестве пластического материала у восьми пациентов из 100 не достигается положительного результата костно-пластической операции.

Задачей изобретения является повышение эффективности способа.

Решение поставленной задачи позволяет получить остеогенез в 98% случаев. Это позволяет в клинике повысить конечные результаты костно-пластических операций, восстановить трудоспособность и избежать перевода на инвалидность значительного числа пациентов.

Поставленная задача решается за счет того, что иммуномодулятор (тактивин) вводят в день операции в течение четырех суток ежедневно; повторный курс проводят через 30 суток после операции во вторую фазу (цикл) остеогенеза - фазу (цикл) ремоделирования в течение пяти суток.

Способ осуществляется следующим образом.

С целью излучения остеоиндуктивных свойств крысам-реципиентам 3-4-месячного возраста (самцы) массой тела 250-260 г внутримышечно на внутреннюю поверхность бедра производилась эктопическая имплантация ДКМ, приготовленного по методике Юриста. В каждой серии было оперировано по 30 крыс. В контрольной серии эксперимента вводили иммуностимулятор - тактивин - внутрибришинно из расчета 0,01 мкг на массу тела крысы в день операции и далее ежедневно в течение четырех суток.

В опытной серии первый курс иммуностимуляции проводился аналогично контролю. Повторный курс проводили через 30 суток после операции теми же дозами в течение пяти суток.

Животных выводили из опыта через 30-60-90 суток после операции. Процесс остеогенеза в ДКМ изучали на гистологических препаратах, окрашенных гематоксилинэозином и по ван-Гизон.

В контрольной серии на гистологических препаратах через 30 суток после операции множественные очаги резорбции определяются по ходу расширенных гаверсовых каналов и в местах разволокнения. По краю образующихся полостей наблюдается пролиферация остеобластов и формирование молодой кости грубоволокнистого строения. В полостях резорбции детрит, элементы крови и фиброретикулярная ткань (фиг. 1). К 60-м суткам процессы резорбции продолжают преобладать над остеообразованием (фиг. 2). Через 90 суток процессы резорбции продолжают нарастать. На месте матрикса новообразованная кость пластинчатого строения. В костно-мозговой полости миэлоидный и жировой костный мозг. Имеются участки нерезорбированного матрикса (фиг. 3).

Процессы возникновения индуктивной активности отмечены в 92% случаев.

В опытной серии через 30 суток обнаруживаются многочисленные очаги остеокластической резорбции и новоообразования кости грубоволокнистого строения с остеобластами по периферии (фиг. 1a).

Через 60 суток отмечается увеличение участков очагов резорбции и объема индуцированной кости, преимущественно пластинчатого строения (фиг. 2a). Через 90 суток процесс остеогенеза превалирует, но еще остаются участки нерезорбированного матрикса (фиг. 3a).

Индуктивная активность отмечена в 98% случаев. Сравнительный анализ показал, что процессы остеоиндукции и новообразования костной ткани в имплантатах ДКМ протекают несколько быстрее при проведении повторного курса иммуностимуляции во второй фазе (ремодулирование) остеогенеза - через 30 суток после имплантации ДКМ. Особенно четко это прослеживается в сроки на 90-е сутки после имплантации: участки нерезорбированного матрикса прослеживаются на единичных препаратах, тогда как в контрольной серии встречаются на всех изученных препаратах.

Самым существенным фактом для решения поставленной задачи является то, что индуктивная активность отмечена в 98% случаев, тогда как в контроле - в 92%.

Пример. Беспородная белая крыса N 24. Масса животного 250 г.

В день операции животному введено 0,01 мкг тактивина на массу животного. Затем эту дозу вводили ежедневно в течение четырех суток. Через 30 суток после операции повторно вводили по 0,01 мкг тактивина на массу животного в течение пяти суток.

Изобретение относится к медицине, а именно к трансплантологии, травматологии и ортопедии, и может быть использовано при пересадке деминерализованного костного трансплантата. Предложено вводить тактивин в день операции и далее в течение четырех суток ежедневно; повторно курс проводят во второй цикл остеогенеза - цикл ремодулирования, через 30 суток после операции в течение пяти суток. Способ позволяет ускорить процесс остеоиндукции. 3 ил.

Способ стимуляции остеоиндукции у лабораторных животных путем использования иммуностимулятора, отличающийся тем, что в качестве иммуностимулятора используется тактивин, который вводят в день операции и далее в течение 4 суток ежедневно, повторно курс проводят в процессе цикла ремодулирования трансплантата через 30 суток после операции в течение 5 суток.