СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ ДИАРЕЙНЫХ БОЛЕЗНЕЙ НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛЯТ И ПОРОСЯТ Российский патент 2003 года по МПК A61K35/66 A61K35/74 A61P1/00 

Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии и эпизоотологии, в частности к способам профилактики диареи телят и поросят.

Аналоги изобретения. В литературе есть сообщения о применении штаммов Вас. subtilis для профилактики и лечения дисбактериозов у телят (Топчий М.П. Применение препаратов из живых культур сенной палочки при дисбактериозах у телят. - Автореферат дисс. канд. биол. наук. Минск, 1979, 21 с.), повышения привесов в свиноводстве (СССР. 634729, кл. А 23 К 1/00, опублик. 27.12.78), стимуляции неспецифической реактивности (Резник С.Р., Смирнов В.В., Волынец А. К. , Вьюницкая В.А. Влияние перорального введения бактерии рода Вас. subtilis на фагоцитарную активность лейкоцитов крови. - Микробиологический журнал, 1982, т. 44, 4, с. 51-54).

Известен штамм бактерий "Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП", используемый для обеззараживания птичьего помета и навоза от патогенных микроорганизмов (патент Российской Федерации 2105810, С 12 N 1/20, 1998, заявка 94104662/13 от 11.03.1996 г. Однако данный штамм ранее не использован в качестве препарата профилактирующего диарейные болезни животных.

В основу изобретения положена задача разработки эффективного экологически безвредного препарата для профилактики диарейных болезней новорожденных телят и поросят.

Для надежной профилактики диареи новорожденных телят и поросят используют микробный препарат, представляющий собой суспензию штаммов бактерий "Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП" и "Bacillus subtilis ТНП-5-ДЕП". Суспензию штаммов бактерий "Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП и ТНП-5-ДЕП" дают индивидуально телятам сразу после рождения перорально 1 раз в сутки в течение 3 дней из расчета 1 разовая доза (10 мл) на голову. С лечебной целью препарат назначают в тех же дозах, 3 раза в сутки до исчезновения клинических признаков болезни. Для поросят доза составляет 5 мл на голову. Препарат обладает широким спектром антагонистической активности в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, возбудителей кишечных и кокковых инфекций. Нормализует кишечный микробиоценоз и повышает иммунобиологическую реактивность организма.

Морфологические признаки штаммов. В мазках культур, приготовленных с МПБ и МПА, окрашенных по Граму, представляют собой грамположительные палочки и короткие цепочки (2-3 палочки). Образуют споры овальной формы. Капсул не образуют.

Культуральные свойства штаммов. Штаммы хорошо растут в МПБ при 37^oС, на поверхности образуют пленку, которая при встряхивании опускается на дно. Бульон с небольшой опалесценцией. На МПА и картофельном агаре колонии - округлые серо-белого цвета. На МППБ образуют слабый осадок серо-белого цвета с легким помутнением среды. Растут на молоке с добавлением 2%, 4%, 6% NaCl, ферментируют глюкозу, мальтозу, левулезу без образования газа. Не продуцируют индол и сероводород.

Вирулентные свойства штаммов. Штаммы не вызывают гибели кроликов, морских свинок и белых мышей при подкожном и внутрибрюшинном введении в дозах соответственно 10 млн, 5 млн и 1 млн клеток. Не патогенны для животных и растений.

Штаммы бактерий "Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП" и "Bacillus subtilis ТНП-5-ДЕП" отличаются антагонистической активностью в отношении патогенных микроорганизмов.

Суспензию изготовляют из штаммов бактерий "Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП" и "Bacillus subtilis ТНП-5-ДЕП", депонированных в коллекции микроорганизмов Всероссийского государственного научно-исследовательского института контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов (ВГНКИ) (справки о депонировании штаммов от 6 февраля 2001 г. 180/15 и 181/15).

Получен патент 2105810 на изобретение "Штамм бактерий Bacillus subtilis, используемый для обеззараживания птичьего помета и навоза от патогенных микроорганизмов" от 27 февраля 1998 г. (заявка 96104662 от 11.03.1996 г.).

Штаммы могут быть получены в лаборатории по разработке микробных препаратов Якутского НИИ сельского хозяйства СО РАСХН и ВГНКИ.

Для профилактики диареи новорожденных телят суспензию штаммов бактерий "Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП и ТНП-5-ДЕП" назначают телятам сразу после рождения перорально 1 раз в сутки в течение 3 дней из расчета 1 разовая доза (10 мл) на голову. С лечебной целью препарат назначают в тех же дозах, 3 раза в сутки до исчезновения клинических признаков болезни. Для поросят доза составляет 5 мл, препарат применяют по той же схеме. Лабораторными и производственными опытами установлена способность штаммов бактерий "Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП и ТНП-5-ДЕП" подавлять жизнеспособность возбудителей кишечных и кокковых инфекций, нормализовать кишечный микробиоценоз.

Штаммы бактерий "Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП и ТНП-5-ДЕП", выращивают в мясопептонном агаре рН 7,0-7,2 в течение 5-7 суток при 37^oС, затем суспензируют в физиологическом растворе хлористого натрия в концентрации 5 млрд микробных клеток в 1 мл. Препарат готовят путем смешивания равных частей суспензии штаммов бактерий "Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП и ТНП-5-ДЕП".

Антагонистическую активность препарата определяют методом дисков. Для этого испытуемый микроорганизм высевают сплошным газоном на поверхность МПА в чашках. Стерильные диски из фильтровальной бумаги пропитывают суспензией штаммов бактерий "Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП" или "Bacillus subtilis ТНП-5-ДЕП", подсушивают в термостате и накладывают на поверхность агара, засеянной испытуемой культурой. Посевы культивируют при 37^oС через 24 часа ведут учет по зоне задержки роста вокруг дисков. Суспензия штаммов бактерий "Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП и ТНП-5-ДЕП" образуют зону задержки роста в диаметре 15-25 мм возбудителя кишечных инфекций - Е. coli. Штаммы бактерий "Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП и ТНП-5-ДЕП" проявляют выраженную антагонистическую активность в отношении грамположительных и грамотрицательных бактерий. В качестве тест-культур испытывают паспортизированные штаммы: St. aureus (штамм 209Р), Str. equi Н-34-ДЕП, Sal. abortus equi БН-12, E. Coli (штамм 1257), Sal. Pullorum (штамм 106), Sal. typhymurium, Sal. dublin, Shigella flexneri 6783.

Для определения профилактической эффективности отбирают 90 голов новорожденных телят в период массового отела коров. Первой группе (45 голов) дают индивидуально с первой порцией молозива по 10 мл суспензии штаммов бактерий "Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП и ТНП-5-ДЕП" 1 раз в сутки в течение 3 дней. Контрольная группа (45 голов) не получает препарат. В конце срока наблюдается (в течение 10-15 дней) среди телят, получавших препарат, признаки болезней желудочно-кишечного тракта не наблюдают. В контрольной группе признаки диареи отмечают до 33% телят.

Для определения профилактической эффективности препарата у поросят, отбирают по 80 голов свиноматок и делят на 2 группы: опытную и контрольную. Поросятам опытной группы (40 гол) дают индивидуально с первых часов жизни по 5 мл суспензии штаммов бактерий "Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП и ТНП-5-ДЕП" 1 раз в сутки в течение 3 дней. Контрольная группа (40 голов) не получает препарат. В конце срока наблюдения (в момент отъема) профилактическая эффективность от применения препарата составила 96,1%. При этом в опытной группе отмечено прибавление в весе на 32,4% по сравнению с контрольной.

Во время опыта исследуют фекалии на 1,3 и 10 день после рождения. В первые сутки жизни в кишечном биоценозе клинически здоровых новорожденных телят и поросят преобладают лактозопозитивные кишечные палочки, аэробные спорообразующие бактерии и энтерококки, слабо представлены микроорганизмы нормальной микрофлоры - бифидо- и лактобактерии. Применение суспензии штаммов бактерий "Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП и ТНП-5-ДЕП" с первых дней жизни способствует увеличению количества основных представителей нормальной флоры кишечника - бифидо- и лактобактерий по сравнению с контрольной группой.

Таким образом, применение суспензии штаммов бактерий "Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП и ТНП-5-ДЕП" с первых дней жизни подавляет развитие патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, нормализует кишечный микробиоценоз и может быть использован в качестве способа профилактики диареи новорожденных животных.

Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии. Способ включает назначение суспензии штаммов "Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП" и "Bacillus subtilis ТНП-5-ДЕП" в равных соотношениях. Способ предупреждает развитие диареи, нормализует кишечный микробиоценоз.

Способ профилактики диареи новорожденных телят и поросят путем назначения микробного препарата во внутрь с молозивом, отличающийся тем, что в качестве микробного препарата используют суспензию штаммов "Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП" и "Bacillus subtilis ТНП-5-ДЕП" в равных соотношениях.