СПОСОБ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ МЫТА ЛОШАДЕЙ Российский патент 1999 года по МПК A61K39/00 A61K39/09 C12N1/20 

Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии, эпизоотологии и иммунологии, в частности к способам специфической профилактики мыта лошадей.

Аналоги изобретения - способ профилактики мыта лошадей, включающий иммунизацию вакциной из штамма мытного стрептококка (заявка Франции FR N 2122560, A 61 K 39/09, 1972). Способ профилактики мыта лошадей (положительное решение ВНИИГПЭ от 5 августа 1997 г. на заявку N 95120338/13 (035594), который предусматривает иммунизацию лошадей вакциной из штамма мытного стрептококка Str. egui Н-34 с добавлением иммуномодулятора полирибонат.

В основу изобретения положена задача повышения иммуногенности инактивированной вакцины против мыта.

Для повышения напряженности иммунитета против мыта к инактивированной вакцине, изготовленной из штамма "Str. egui Н-34", добавляют в качестве иммуномодулятора штамм бактерий "Bacillus subtilis ТНП-3". Культуру штамма Вас. subtilis вводят одновременно с вакциной двухкратно с интервалом 10 дней в дозе 1 млрд. микробных клеток в 1 мл. Штамм бактерий Вас. subtilis обладает способностью снижать стресс и усиливать иммунологическую реактивность организма.

Введение вакцинного штамма с бактериями Вас. subtilis вызывает иммунитет высокой напряженности не менее чем у 90% вакцинированных лабораторных животных и лошадей.

Вакцину изготовляют из штамма "Str. egui Н-34", депонированного в коллекции микроорганизмов Всероссийского государственного научно-исследовательского института контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов (ВГНКИ) (справка о депонировании штамма от 17 декабря 1993 г. N 988/27). Получен патент РФ N 2080381 на изобретение "Штамм бактерий Streptococcus egui, используемый для изготовления диагностических и профилактических препаратов против мыта лошадей" от 27 мая 1997 г. Штамм может быть получен в лаборатории по разработке микробных препаратов Якутского НИИ сельского хозяйства СО РАСХН и ВГНКИ.

Для повышения эффективности вакцинации против мыта лошадей и повышения устойчивости к стрессорным воздействиям к вакцине в качестве иммуномодулятора добавляют "Вас. subtilis ТНП-3". Штамм "Вас. subtilis ТНП-3" выделен из мерзлотно-переходной, средне-суглинистой почвы Якутии. Депонирован в коллекции микроорганизмов Всероссийского государственного научно-исследовательского института контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов (ВГНКИ). Справка о депонировании выдана 17 октября 1994 г. за N 002/9. Получен патент РФ N 2105810 "Штамм бактерий Bacillus subtilis, используемый для обеззараживания птичьего помета и навоза от патогенных микроорганизмов" от 27 февраля 1998 г. Из литературных источников известна и лабораторными опытами подтверждена способность штамма Вас. subtilis стимулировать иммунобиологическую реактивность организма.

Штамм Str. egui Н-34 серогруппы C выращивают на мясопептонном бульоне, содержащем 10% сыворотку крови лошади и 1% глюкозы до накопления 3 млрд. микробных клеток в 1 мл. Бактериальную массу инактивируют формалином в течение 72-х часов, затем добавляют 3%-й раствор гидроокиси алюминия из расчета 10% к объему культуры. Через трое суток после внесения адьюванта на 1 мл вакцины добавляют 1 мл суспензии 5-7-суточной культуры штамма бактерий "Вас. subtilis ТНП-3", содержащего 1 млрд. микробных клеток.

Во втором случае в вакцины добавляют раствор полирибоната из расчета 0,5 мг на 1 кг живой массы.

Для определения напряженности иммунитета отбирают 60 белых мышей массой 18-20 г. Первую группу (20 голов) мышей иммунизируют инактивированной вакциной против мыта с бактерией Вас. subtilis в дозе 0,2 мл, а вторую группу (20 голов) иммунизируют инактивированной вакциной против мыта с полирибонатом в дозе 0,2 мл. Препараты вводят подкожно в область спины.

Через 14 дней после иммунизации 40 опытных и 20 контрольных белых мышей аналогичной массы заражают подкожно в область спины суточной культурой патогенного штамма мытного стрептококка в дозе 5 LD₅₀. В течение 10 дней наблюдения за животными из первой группы мышей заболели и погибли 2 гол., второй группы - 2 и контрольной группы - 17 голов.

Отбирают 40 жеребят 6-7-месячного возраста. Первую группу (15 голов) иммунизируют вакциной с бактерией Вас. subtilis, а вторую группу (15 голов) - вакциной с полирибонатом.

Препараты вводят внутримышечно в дозе 2 мл с интервалом 10 дней. Через 30 дней по 5 голов из каждой группы и 5 невакцинированных жеребят заражают минимальной инфицирующей дозой патогенной культуры мытного стрептококка.

Результаты контрольного заражения показали, что вакцина из штамма "Str. egui Н-34" с бактерией "Вас. subtilis" индуцирует иммунитет у 100% вакцинированных жеребят. Все невакцинированные жеребята заболевали типичной формой мыта.

Таким образом, иммунизация вакциной из штамма "Str. egui Н-34" с "Вас. subtilis" вызывает иммунитет высокой напряженности и может быть использована в качестве способа специфической профилактики мыта лошадей.

Изобретение относится к ветеринарной микробиологии, эпизоотологии и иммунологии, в частности к способам специфической профилактики мыта лошадей. Для повышения эффективности вакцинации против мыта лошадей к вакцине из штамма Str. egui H-34 добавляют штамм бактерий Bac. subtilis. Штамм Bac. subtilis вводят одновременно с вакциной с интервалом 10 дней в дозе 1 млрд. микробных клеток в 1 мл. Введение вакцины со штаммом Bac. subtilis вызывает иммунитет высокой напряженности не менее чем у 90% вакцинированных животных.

Способ специфической профилактики мыта лошадей путем иммунизации инактивированной вакциной из штамма Streptococcus egui Н-34, отличающийся тем, что для повышения иммуногенности в вакцину добавляют штамм бактерий Bacillus subtilis ТНП-3 в дозе 1 млрд.микробных клеток в 1 мл.