СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ТЯЖЕСТИ НАРУЖНОГО ГЕНИТАЛЬНОГО ЭНДОМЕТРИОЗА Российский патент 2003 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к медицине, а именно, к гинекологии, и может быть использовано для диагностики тяжести наружного генитального эндометриоза.

Актуальность изобретения определяется высокой частотой встречаемости наружного эндометриоза, которая по данным разных авторов составляет 12-50% [3, 6, 7]. Диагноз эндометриоза обычно устанавливается визуально по результатам инвазивного инструментального исследования (лапароскопии или лапаротомии) с последующим гистологическим исследованием биоптатов. При этом, во-первых, визуальная картина нередко является субъективной и не отражает глубину и распространенность эндометриоидного процесса [2]. Во-вторых, I и II стадии эндометриоза часто клинически не диагностируются [8, 9].

Известен способ диагностики наружного генитального эндометриоза, основанный на определении абсолютного количества макрофагов (абсолютное количество макрофагов в перитонеальной жидкости в норме достигает 5-7 млн. Halme J., Becker S., Hammond M. et al. // Amer. J. Obstet. Gynec. - 1981. - Vol.142. - P.890-893) в перитонеальной жидкости (ПЖ), и при абсолютном количестве макрофагов свыше 13 млн устанавливают наличие эндометриоза [4].

Недостатки способа:
- метод неспецифичен, так как количество макрофагов возрастает при любом воспалительном процессе, в том числе и не связанном с эндометриозом;
- невозможность установки тяжести течения процесса;
- не указывается точность способа.

Наиболее близким по техническому решению к заявляемому способу является способ диагностики наружного генитального эндометриоза путем определения спонтанного высвобождения гистамина из базофилов периферической крови. При значении этого показателя 49% и более диагностируют наружный генитальный эндометриоз [1].

Данный способ был выбран нами в качестве ближайшего аналога. Однако он имеет ряд недостатков:
- выделение базофилов требует забора большого количества крови (18 мл) из-за относительной малочисленности базофилов в периферической крови человека (0,5-1%) и низкого содержания в них гистамина;
- предлагаемый способ неспецифичен, так как повышение высвобождения гистамина базофилами происходит и при других патологических состояниях, в частности воспалениях и аллергических реакциях любого типа;
- способ не дает возможности установить степень тяжести заболевания и является только качественным;
- не указывается точность способа.

Указанные недостатки предлагается устранить в заявляемом способе.

Заявляемый технический результат достигается тем, что в перитонеальной жидкости женщин спектрофотометрически определяют уровень молекул средней массы (МСМ) (МСМ-компоненты плазмы крови с молекулярной массой 500-3000 Да, представляющие собой фрагменты незавершенного протеолиза. Термин МСМ впервые предложен Kjellstrand, 1979), который выражается в единицах оптической плотности, и на длине волны 280 нм при значениях экстинкции 0,100-0,210 е.о.п. диагностируют наружный генитальный эндометриоз I стадии; 0,211-0,310 - II стадии; 0,311-0,526 - III стадии; 0,527-0,726 - IV стадии, с точностью 88%.

Новизна заявляемого способа заключается в том, что впервые предлагается по уровню молекул средней массы ПЖ диагностировать стадию наружного генитального эндометриоза.

Ранее исследование уровня МСМ проводили в сыворотке периферической крови с целью диагностики стадий эндогенной интоксикации при хронической почечной недостаточности, гнойно-воспалительных заболеваниях ЛОР-органов, осложненных переломах в челюстно-лицевой хирургии [5]. Химическая природа МСМ до сих пор точно не установлена. Уровень МСМ принято определять спектрофотометрически путем обнаружения их в ультрафиолетовой области спектра (188-300 нм).

Способ осуществляется следующим образом.

Небольшой объем (2 мл) ПЖ центрифугируют в течение 5 мин. Далее определяют уровень МСМ стандартно (cкрининговый метод определения уровня МСМ (модификация способа А. Бабеля с соавт., 1974) (Камышников B.C. Справочник по клинико-биохимической лабораторной диагностике: В.2, Т.1. - Мн.: Беларусь, 2000, c. 346-348): 1 мл надосадочной жидкости и 0,5 мл 10 % раствора трихлоруксусной кислоты (ТХУ) вносят поочередно в чистую центрифужную пробирку (ТХУ используется с целью освобождения сыворотки от содержащихся в ней высокомолекулярных пептидов и белков). После перемешивания содержимого производят центрифугирование на обычной клинической центрифуге (типа ОПН-3) при 3000 об/мин в течение 30 минут. Отбирают 0,5 мл надосадочной жидкости и переносят в пробирку с 4,5 мл дистиллированной воды. Содержимое пробирки перемешивают и фотометрируют в ультрафиолетовой части спектра при длине волны от 280 нм, используя в качестве контрольной пробы содержимое пробирки с 4,5 мл дистиллированной воды и 0,5 мл 5% раствора ТХУ.

Результаты выражают в условных единицах, представляющих собой показатели оптической плотности, учтенные с точностью до третьего знака после запятой.

Чтение результатов осуществляется в соответствии с калибровочной кривой колориметра (калибровочная кривая колориметра. - Колориметр фотоэлектрический концентрационный КФК-2МП УХЛ4,2/Техническое описание и инструкция по эксплуатации. - 1990. С.26. - Измерение коэффициента пропускания): показатель 0,100 единиц оптической плотности (е.о.п.) означает 80%-ное пропускание светового потока, т.е. незначительное содержание среднемолекулярных веществ в ПЖ; показатель 0,700 е.о.п. означает пропускание светового потока лишь на 20%, т.е. высокий уровень МСМ в ПЖ, что характеризует наличие эндогенной интоксикации.

Отличительными признаками способа являются: установление диагностических параметров уровня МСМ для I стадии наружного генитального эндометриоза спектрофотометрически в пределах экстинкции 0,100-0,210 е.о.п.; для II стадии - 0,211-0,310 е. о. п. ; для III стадии - 0,311-0,526 е.о.п.; для IV стадии - 0,527-0,726 е.о.п.

Сущность заявляемого способа поясняется следующими примерами.

Пример 1. Больная В., 36 лет. Обратилась по поводу вторичного бесплодия. В анамнезе 1 своевременные роды, 2 медицинских аборта без осложнений, ВМС 4 года. В настоящее время состоит во втором браке, три года не применяет контрацепции, беременность не наступает. На момент осмотра предъявляет жалобы на умеренные тянущие боли внизу живота, усиливающиеся перед менструацией, альгоменорею. Обследована на предмет бесплодия: цикл - двухфазный, по данным гистеросальпингографии матка не изменена, маточные трубы умеренно извиты, свободно проходимы. Заболевания, передающиеся половым путем, - результат отрицательный. Муж обследован, здоров. Проба Миллера - положительная.

При влагалищном иследовании матка нормальных размеров, в боковых сводах болезненная тяжистость.

Клинический диагноз: Хронический сальпингит, подозрение на наружный эндометриоз. Рекомендована диагностическая лапароскопия, уточнение состояния маточных труб.

На лапароскопии: матка нормальных размеров, положения. Маточные трубы извиты, при ХГТ - проходимы. Яичники нормальных размеров, в правом - предовуляторный фолликул. Тазовая брюшина без патологических включений. Заключение: Хронический сальпингит.

Анализ взятой в момент лапароскопии перитонеальной жидкости по заявляемому способу показал содержание МСМ 0,290 е.о.п., что характерно для эндометриоза II стадии.

Поскольку диагноз эндометриоза визуально не подтвержден, а биопсия брюшины не проводилась, больная выписана с диагнозом хронического сальпингита. В рекомендациях - антибактериальные препараты, гормональная терапия эндометриоза не предусмотрена.

Ввиду отсутствия наступления беременности через 6 месяцев выполнена повторная контрольная лапароскопия, участок брюшины отправлен на гистологическое исследование, его результат - "эндометриоз брюшины".

Заключение: В конечном итоге подтвержден диагноз, установленный ранее по заявляемому способу.

Пример 2. Пациентка, 32 лет, поступила в отделение эндохирургии с предварительным диагнозом: Наружный эндометриоз III. Эндометриоидная киста левого яичника. Предъявляет жалобы на периодические ноющие боли внизу живота слева, диспареунию, НМФ в течение 6 мес. (альгоменорея, задержки menses от 40 до 52 дней, мажущие выделения после окончания менструации). При влагалищном исследовании: тело матки нормальных размеров, подвижное, чувствительное при смещении. Справа придатки не определяются. Слева пальпируется ограниченное в подвижности эластической консистенции образование до 4 см в диаметре, болезненное.

На лапароскопии: матка и правые придатки не изменены. Левая маточная труба распластана на яичнике, увеличенном до 4 см в диаметре за счет кисты, напоминающей эндометриоидную. В момент энуклеации излилось темное "шоколадного" цвета содержимое кисты. Яичник сформирован, капсула кисты отправлена на гистологическое исследование. На брюшине задних листков широких маточных связок - единичные поверхностные очаги эндометриоза площадью до 3 см². Заключение: Наружный эндометриоз III ст., эндометриоидная киста левого яичника.

Исследование перитонеальной жидкости по заявляемому способу показало, что содержание МСМ составляет 0,206 е.о.п., что соответствует наружному эндометриозу I стадии.

Гистологический ответ: капсула кисты желтого тела с отложением гемосидерина.

Предварительный диагноз наружного эндометриоза III стадии и эндометриоидной кисты яичника не подтвержден. Имеющаяся клиническая картина имела внешнее сходство с эндометриоидной кистой, хотя являлась лютеиновой.

Окончательный клинический диагноз: Наружный эндометриоз I стадии. Лютеиновая киста.

Заключение: Диагноз по заявляемому способу был подтвержден последующим гистологическим исследованием.

Пример 3. Больная А., 30 лет. В течение последних 6 месяцев беспокоят периодически ноющие боли внизу живота, НМФ (альгоменорея, пройоменорея). В анамнезе 1 своевременные роды и 2 медицинский аборта. Прошла курс противовоспалительной и антибактериальной терапии - без эффекта. При влагалищном исследовании: матка нормальных размеров, положения, чувствительна при смещении. Слева придатки не определяются. Справа пальпируется округлое образование до 3 см в диаметре, эластической консистенции, несколько ограничено в подвижности. Направлена на лапароскопию с целью удаления кисты правого яичника.

На 8-й день менструального цикла произведена лапароскопия, в ходе которой обнаружено: Брюшная полость свободна. Матка нормальных размеров. Левые придатки и правая маточная труба не изменены. Правый яичник увеличен до 3 см в диаметре за счет лютеиновой кисты с отложением гемосидерина. На брюшине малого таза эндометриоидных гетеротопий не обнаружено. Произведена энуклеация кисты правого яичника. Капсула кисты отправлена на гистологическое исследование. Заключение: Лютеиновая киста справа.

Анализ взятой в момент лапароскопии перитонеальной жидкости показал содержание МСМ 0,468 е.о.п., что диагностирует наружный эндометриоз III стадии. Результат гистологического исследования препарата - эндометриоз яичника, что подтвердило правильность диагноза, установленного по заявляемому способу.

Указанным способом обследовано 135 женщин, данные исследования приведены в таблице, диагноз верифицирован при помощи гистологического исследования биоптатов брюшины.

Преимущества заявляемого способа:
1. Отсутствие влияния воспаления на уровень молекул средней массы.

2. Малый объем (2 мл) перитонеальной жидкости, используемый для исследования.

3. Неинвазивность способа (способ не требует нарушения целостности гисто-гематических барьеров в отличие от гистологического исследования биоптатов брюшины).

4. Стандартизованность технологии оценки результатов.

5. Техническая простота способа (временные затраты - 15-20 мин).

6. Высокая точность способа (88%).

7. Возможность использования в качестве дифференциального теста при кистах различного происхождения.

8. Дешевизна способа (не требует дополнительных реактивов).

Точность способа:
Коэффициент достоверности р<0,001.

Использованная литература
1. Авторское свидетельство 1534397. Ионов И.Д., Волков Н.И., Сухих Г.Т., Пшеничникова Т. Я. Всероссийский НИИ по охране здоровья матери и ребенка. Способ диагностики наружного генитального эндометриоза. - Бюллетень "Изобретения". - 1990. - 1. - С.180.

2. Адамян Л.В., Кулаков В.И. Эндометриозы: Руководство для врачей. - М.: Медицина, 1998, с.9-13.

3. Баскаков В. П. Клиника и лечение эндометриоза. 2-е изд. - Л.: Медицина, 1990, 240 с.

4. Митькин В.В., Кулаков В.И., Сухих Г.Т. Особенности иммунологических показателей перитонеальной жидкости при эндометриозе // Акушерство и гинекология. - 1991. - 2. - С.6-10.

5. Патент 2117295. Малахова М.Я., Оболенский С.В. Способ диагностики септических состояний. - Бюллетень "Изобретения". - 1998. - 22. - С.344.

6. Стрижаков А.Н., Давыдов А.И. Эндометриоз. Клинические и теоретические аспекты. - М.: Медицина. - 1996. 330 с.

7. Эндометриоз. /Под ред. В.И. Кулакова, Л.В. Адамян. - В кн.: Международный конгресс по эндометриозу с курсом эндоскопии: Тезисы докладов: М., 1996, с.210-211.

8. Brosens I. , Vasquez G., Gordts S. // Fertil. and Steril. - 1984. - Vol.41. - P.21-25.

9. Murphy A., Green R., Robbic D. Et al. // Ibid. - 1986. - Vol.46. - P. 522-524.

Изобретение относится к области медицины, а именно к гинекологии, и может быть использовано для диагностики тяжести наружного генитального эндометриоза. Сущность способа состоит в том, что в перитонеальной жидкости спектрофотометрически определяют уровень молекул средней массы и на длине волны 280 нм и показателях экстинкции в пределах 0,100 - 0,210 е.о.п. - диагностируют наружный генитальный эндометриоз I стадии; 0,211 - 0,310 е.о. п. - наружный генитальный эндометриоз II стадии; 0,311 - 0,526 е.о.п. - наружный генитальный эндометриоз III стадии; 0,527 - 0,726 е.о.п. - наружный генитальный эндометриоз IV стадии. Техническим результатом является точная диагностика стадии эндометриоза, что позволяет проводить адекватную терапию патологического процесса и избежать осложнений, связанных с недооценкой тяжести заболевания. 1 табл.

Способ диагностики тяжести наружного генитального эндометриоза путем исследования биологических жидкостей, отличающийся тем, что в перитонеальной жидкости спектрофотометрически определяют уровень молекул средней массы и на длине волны 280 нм и показателях экстинкции в пределах 0,100 - 0,210 е.о.п. диагностируют наружный генитальный эндометриоз I стадии; 0,211 - 0,310 е.о.п. - наружный генитальный эндометриоз II стадии; 0,311 - 0,526 е.о.п. - наружный генитальный эндометриоз III стадии; 0,527 - 0,726 е.о.п. - наружный генитальный эндометриоз IV стадии.