АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫЙ ПРЕПАРАТ Российский патент 2006 года по МПК A61K31/18 A61P31/12 A61P37/04 C07C311/32 

Изобретение относится к антибактериальному средству на основе амида α-аминосульфоновой кислоты - N'-метил-1-фенил-N,N-диэтиламинометансульфонамида формулы

и может быть использовано в ветеринарии.

Наиболее близким по технической сущности является препарат, относящийся к амидам сульфоновых кислот - n-аминобензолсульфонамид - стрептоцид формулы

проявляющий антимикробную активность, см. М.Д.Машковский «Лекарственные средства», часть 2, Москва

«Медицина», 1985 г., с 275.

Недостатками известного препарата является то, что он, обладая антимикробной активностью, неактивен в отношении стафилококков, к тому же в связи с активным участием в метаболических процессах оказывает побочные действия и имеет противопоказания. При длительном употреблении обладает кумулятивным свойством, в почках могут образовываться труднорастворимые соединения, уменьшается содержание гемоглобина, возникает цианоз, агранулоцитоз, лейкопения. Более чувствительны к препарату молодые животные. Противопоказания к применению стрептоцида следующие: общий ацидоз, гепатит, гемолитическая анемия, агранулоцитоз, нефриты, нефрозы.

Известно, что N'-метил-1-фенил-N,N-диэтиламинометансульфонамид формулы

был использован в гальванотехнике в качестве поверхностно-активной добавки для улучшения эксплуатационных характеристик Zn-Ni-покрытий, см. Журнал «Защита металлов», том 28, 1992, с.862-866.

Применение одних и тех же соединений в качестве антибактериальных средств в течение продолжительного времени, как правило, сопровождается привыканием к ним микроорганизмов и появлением устойчивых к ним форм возбудителей. Это вызывает необходимость пополнения арсенала средств против патогенных возбудителей.

Задачей изобретения является пополнение арсенала средств против патогенных возбудителей препаратом, относящимся к классу амидов α-аминосульфоновых кислот, проявляющим антибактериальную активность без проявления кумулятивных свойств и патологических изменений в органах и тканях животных.

Техническая задача решается применением соединения N'-метил-1-фенил-1-N,N-диэтиламинометансульфонамида формулы

в качестве антибактериального препарата.

N'-метил-1-фенил-1-N,N-диэтиламинометансульфонамид получают путем взаимодействия комплекса диэтиламина с SO₂ (1:1) с последующим взаимодействием с бензальметиламином и добавлением воды.

Решение технической задачи позволяет пополнить данным препаратом арсенал средств против патогенных возбудителей, проявляющим антибактериальную активность без проявления кумулятивных свойств и патологических изменений в органах и тканях животных.

Пример

Получение N'-метил-1-фенил-1-N,N-диэтиламинометансульфонамида.

Ведут взаимодействие комплекса диэтиламина в количестве 5 г (0,036 моль) с SO₂ в соотношении (1:1), прибавляют 4,28 г (0,036 моль) бензальметиламина и затем постепенно вводят 0,65 г (0,036 моль) воды. Реакция экзотермична, сразу выпадает обильный осадок белого цвета. Осадок отделяют, промывают серным эфиром и перекристаллизовывают из ацетонитрила. Выход N'-метил-1-фенил-1-N,N-диэтиламинометансульфонамида составляет 94% от теоретического.

ИКС (KBr) в вазелиновом масле: 3265 см^-1 (N-H) ср.; 1215 см^-1 (SO₂) с; 1345 см^-1 (0,5 SO₂) с; 1035 см^-1 (SO₂) с.

Найдено, %: С 55,32; Н 7,73; N 10,90; S 12,34.

C₁₂H₂₀N₂O₂S.

Вычислено, %: С 56,25; Н 7,81; N 10,93; S 12,5.

Препарат представляет собой кристаллический порошок белого цвета, растворимый в воде и органических растворителях, выпускают по ТУ 9315-011-54861661-2003 «Этасульфон».

Определение бактериостатической активности in vitro в отношении грамположительных (стрептококки, стафилококки, листерии) и грамотрицательных (сальмонеллы, эшерихии) микроорганизмов проводят методом серийных последовательных разведений, см. Игудин Л.И. и др. «Стандарты, штаммы, методы контроля бактериальных и вирусных препаратов», М. 1982 г.

Для этого берут ряд пробирок с 4,5 мл питательной среды. В первую пробирку вносят 0,5 мл вещества (разведение 1:10). Смесь тщательно перемешивают и из нее переносят 0,5 мл смеси во вторую пробирку. После тщательного перемешивания 0,5 мл переносят в третью пробирку и т.д. В последнюю пробирку вещество не вносят, она является контролем роста культуры. Засев в пробирки проводят 0,1 мл суточной бульонной культурой (50000 микроорганизмов), а после засева пробирки встряхивают и термостатируют при 37°С. Опыты проводят с троекратной повторяемостью. Учет результатов ведут через 18-24-48 часов инкубации в термостате. Наименьшая концентрация вещества, при которой не происходит размножения микробов и пробирка остается прозрачной, служит показателем бактериостатической концентрации.

Бактериостатическая концентрация заявляемого вещества соответствует разбавлению 1:100 в г на 1 мл среды (см. таблица 1).

В результате эксперимента показано, что N'-метил-1-фенил-1-N,N-диэтиламинометансульфонамид проявляет бактериостатическую активность как в отношении грамположительных, так и в отношении грамотрицательных бактерий.

Для определения острой внутрижелудочной токсичности препарата его вводят мышам-самцам в соответствии с методикой МУ 2163-80 Испытательного центра ЦГСЭН в г.Москве. DL 50 составляет 2655.0 мг/кг живой массы.

Испытания заявляемого вещества под названием «Этасульфон», см. далее этасульфон, были неоднократно проведены на группах сельскохозяйственных животных от 10 до 50 голов. Этасульфон использовали для лечения и профилактики респираторных и желудочно-кишечных болезней.

Для лечения и профилактики респираторных болезней этасульфон вводят телятам, поросятам и ягнятам внутримышечно или аэрогенно в камерных условиях.

Внутримышечно вводят 5% водные растворы (на дистиллированной воде) из расчета 20 мг/кг живой массы поросятам и ягнятам, а телятам из расчета 10 мг/кг живой массы. Курс лечения два раза в сутки до клинического выздоровления.

При аэрогенном введении используют камеры-ингаляторы, габариты которых определяются из расчета на одного теленка 1-1,5 м³, ягненка и поросенка 0,3-0,5 м³ объема камеры. Необходимое количество для распыления этасульфона при лечебной и профилактической обработке определяют из расчета 0,7-0,75 г/м³ камеры. Расчетное количество этасульфона растворяют дистиллированной водой. Курс лечения - один раз в сутки до клинического выздоровления, а с профилактической целью животных обрабатывают один раз в течение 3-х суток. При необходимости курс лечебных обработок повторяют через 6-7 суток, профилактических - через 8-10 суток.

Как показали исследования на животных, симптомы бронхолегочных заболеваний исчезли через 4-5 дней со средней тяжестью заболевания, у тяжелобольных - через 10 дней, тогда как в контрольной группе состояние животных за время проведения исследований существенно ухудшилось.

Для лечения и профилактики желудочно-кишечных болезней животным выпаивают водные растворы этасульфона поросятам и ягнятам в 5% концентрации до 10-дневного возраста в объеме 5 и 10 мл/гол, а старше 10 дней - 10 и 20 мл/гол соответственно; телятам 1-60-дневного возраста в 5% концентрации в объеме 50-60 мл/гол. Курс лечения 2 раза в день до клинического выздоровления, а с профилактической целью выпаивают 1 раз в течение 3-х суток.

Как показали исследования на животных, симптомы диареи исчезли в течение 2 дней, тогда как в контрольной группе диарея не прекратилась до окончания исследований.

Этасульфон, по данным изучения экстрактов из внутренних органов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, не обладает кумулятивными свойствами.

По данным патологоанатомических исследований он не вызывает патологических изменений в организме животных при длительном (свыше 30 дней) использовании.

Таким образом, N'-метил-1-фенил-1-N,N-диэтиламинометансульфонамид («Этасульфон») обладает выраженной антимикробной активностью в отношении грамположительных и грамотрицательных бактерий, малотоксичен, не проявляет кумулятивных свойств, не вызывает патологических изменений в органах и тканях животных, противопоказаний для его использования не обнаружено, препарат успешно прошел испытания в сельском хозяйстве, в частности в ветеринарии.

Изобретение относится к медицине, в частности к антибактериальному средству на основе амида α-аминосульфоновой кислоты -N'-метил-1-фенил-1-N,N-диэтиламинометансульфонамида и может быть использовано в ветеринарии. Задачей изобретения является пополнение арсенала средств против патогенных возбудителей препаратом, относящимся к классу амидов α-аминосульфоновых кислот, проявляющим антибактериальную активность без проявления кумулятивных свойств и патологических изменений в органах и тканях животных. 1 табл.

Применение N'-метил-1-фенил-1-N,N-диэтиламинометансульфонамида формулы

в качестве антибактериального препарата.