СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РЕЦИДИВОВ В МОЧЕВОЙ ПУЗЫРЬ У БОЛЬНЫХ РАКОМ ПОЧЕЧНОЙ ЛОХАНКИ И МОЧЕТОЧНИКА ПОСЛЕ РАДИКАЛЬНОГО ХИРУРГИЧЕСКОГО ЛЕЧЕНИЯ Российский патент 2006 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к медицине, а именно к урологии, и может быть использовано для прогнозирования рецидивов в мочевой пузырь у больных раком почечной лоханки и мочеточника после радикального хирургического лечения.

Известен способ прогнозирования рецидивов в мочевой пузырь у больных раком почечной лоханки и мочеточника после радикального хирургического лечения, включающий определение глубины инвазии (Sobin L.H., Wrttekind С. TNM classification of malignant tumours, 5th ed. New York: International Union Against Cancer, Wiley-Liss, 1997:187-90) и степени дифференцировки рака (Mostofi F.K., Sobin L.H., Torioni H. Histological classification of tumours, 10th ed. Geneva: World Health Organization, 1973). Эти прогностические факторы являются наиболее информативными и в соответствии с современными рекомендациями позволяют выделить больных с высоким риском рецидивирования и рекомендовать им противорецидивное лечение.

Недостатками способа являются отсутствие характеристик, непосредственно указывающих на пролиферативную активность раковых клеток, и субъективизм исследования, что снижает точность прогнозирования.

Задачей изобретения является повышение точности прогнозирования рецидивов в мочевой пузырь у больных раком почечной лоханки и мочеточника после радикального хирургического лечения за счет количественной оценки пролиферативной активности раковых клеток путем расчета индекса пролиферации раковых клеток Ki-67 в биоптате новообразования.

Поставленная задача решается тем, что в известном способе прогнозирования рецидивов в мочевой пузырь у больных раком почечной лоханки и мочеточника после радикального хирургического лечения путем исследования биоптата новообразования, согласно изобретению оценивают индексы пролиферации Ki-67 раковых клеток биоптата не менее чем в пятнадцати полях зрения, определяют их минимальное, максимальное и среднее значения, рассчитывают показатель:

Р=0,06·Ki-67Min+0,18·Ki-67Max-0,11·Ki-67M, где:

Ki-67Min - минимальное значение индекса пролиферации Ki-67 после исследования 15 полей зрения,

Ki-67Max - максимальное значение индекса пролиферации Ki-67 после исследования 15 полей зрения,

Ki-67M - среднее значение индекса пролиферации Ki-67 после исследования 15 полей зрения;

и при значениях Р<3,75 прогнозируют отсутствие рецидивов.

Согласно результатам обследования 37 больных раком почечной лоханки и мочеточника выбранные характеристики, отражающие пролиферативную активность раковых клеток, оказались наиболее ценными прогностическими факторами. Предлагаемый способ включает количественную оценку этих характеристик, что позволяет более точно по сравнению с прототипом прогнозировать рецидивы в мочевой пузырь у больных раком почечной лоханки и мочеточника после радикального хирургического лечения. Чувствительность способа составляет 93%, специфичность - 89%.

Способ осуществляют следующим образом.

После радикального хирургического лечения из биоптата новообразования готовят срезы опухолевой ткани толщиной 5-7 мкм и после депарафинизации обрабатывают 3% раствором перекиси водорода и выдерживают в цитратном буфере в микроволновой печи. Далее ткань охлаждают и после обработки 5% конской сывороткой инкубируют с моноклональными антителами MIB-1 (1:100; Immunotech Inc., Westbrook, USA) в течение 12 часов при температуре +4°С. Затем производят обработку конским иммуноглобулином G и стрептавидином, конъюгированным с пероксидазой. Для визуализации ткань обрабатывают раствором 3-амино-9-этилкарбазола (АЕС, Sigma, Pool, UK). Интенсивное желто-коричневое окрашивание ядра раковой клетки оценивают как положительную реакцию на Ki-67 антиген. При увеличении × 600 подсчитывают количество Ki-67 антиген-положительных клеток в 15 полях зрения, в каждом из которых определяют значение индекса пролиферации Ki-67 (количество Ki-67 антиген-положительных клеток на 100 раковых клеток) и рассчитывают его среднее, минимальное и максимальное значения. Рассчитывают показатель Р=0,06×Ki-67Min+0,18×Ki-67Max-0,11×Ki-67M и при значениях Р<3,75 прогнозируют отсутствие рецидивов.

Способ иллюстрируется следующим примером.

Пример. Больная В., 39 лет, поступила в клинику урологии в плановом порядке через пять месяцев после двух эпизодов макрогематурии с жалобами на учащенное болезненное мочеиспускание. При поступлении состояние удовлетворительное, температура тела нормальная, АД 125/60 мм рт. ст., живот мягкий, при пальпации безболезненный во всех отделах, почки не пальпируются, поколачивание по пояснице безболезненно с обеих сторон. По данным обследования клинико-лабораторные показатели в пределах нормальных значений, микрогематурия, пиурия, бактериурия. По данным ультразвукового исследования в правой почке определяется пиелокаликоэктазия и тканевое образование в лоханке. На экскреторных урограммах форма, размер и положение почек обычные, выделение контраста слева - своевременное, справа - запаздывает, в правой лоханке определяется дефект наполнения, свидетельствующие о наличии новообразования. По данным рентгенографии костей и легких метастазы не выявлены.

Диагноз: рак лоханки правой почки, Т2-Т3, NX, MO, хр. цистит, обострение. Сопутствующие заболевания: хр. бронхит курильщика вне обострения. Произведена антибактериальная терапия для санации нижних мочевых путей и операция: радикальная нефроуретерэктомия справа с резекцией мочевого пузыря, послеоперационный период протекал спокойно, больная выписана в удовлетворительном состоянии через 12 дней. Гистологическое заключение: умеренно-дифференцированный переходно-клеточный рак, прорастающий мышцы лоханки и врастающий в околопочечную клетчатку (рТ3, G2).

В соответствии с прототипом больные раком почечной лоханки и мочеточника глубиной инвазии рТ3 и степенью дифференцировки G2 относятся к категории прогностически неблагоприятных пациентов с высоким риском рецидивирования в мочевой пузырь. В связи с этим в послеоперационном периоде им может быть рекомендовано адъювантное лечение - внутрипузырная химиотерапия или иммунотерапия. При исследовании показателей распределения индекса пролиферации Ki-67 в удаленной опухолевой ткани в соответствии с описанной методикой значения Ki-67M, Ki-67Min и Ki-67Max составили 17,1; 11,0 и 21,0 соответственно. Значение показателя Р=2,61, что позволяет прогнозировать отсутствие рецидивов. При последующем диспансерном наблюдении в течение 5 лет рецидивы выявлены не были.

Изобретение относится к лабораторной диагностике и может быть использовано для прогнозирования рецидивов в мочевой пузырь у больных раком почечной лоханки и мочеточника после радикального хирургического лечения. Сущность изобретения состоит в том, что оценивают индексы пролиферации Ki-67 раковых клеток биоптата не менее чем в пятнадцати полях зрения, определяют их минимальное, максимальное и среднее значения, рассчитывают показатель: Р=0,06×Ki-67Min+0,18×Ki-67Max-0,11×K1-67M, и при значениях Р<3,75 прогнозируют отсутствие рецидивов. Техническим результатом является повышение точности прогнозирования возникновения рецидивов.

Способ прогнозирования рецидивов в мочевой пузырь у больных раком почечной лоханки и мочеточника после радикального хирургического лечения путем исследования биоптата новообразования, отличающийся тем, что оценивают индексы пролиферации Ki-67 раковых клеток биоптата не менее чем в пятнадцати полях зрения, определяют их минимальное, максимальное и среднее значения, рассчитывают показатель

Р=0,06·Ki-67Min+0,18·Ki-67Max-0,11·Ki-67M,

где Ki-67Min - минимальное значение индекса пролиферации Ki-67 после исследования 15 полей зрения;

Ki-67Max - максимальное значение индекса пролиферации Ki-67 после исследования 15 полей зрения;

Ki-67M - среднее значение индекса пролиферации Ki-67 после исследования 15 полей зрения,

и при значениях Р < 3,75 прогнозируют отсутствие рецидивов.