СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ СУСПЕНЗИИ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ КОМПОЗИЦИИ НА ОСНОВЕ СУБСТАНЦИИ ГЕННО-ИНЖЕНЕРНОГО (РЕКОМБИНАНТНОГО) ИНСУЛИНА ЧЕЛОВЕКА Российский патент 2006 года по МПК A61K9/10 A61K38/28 A61P5/50 

Описание патента на изобретение RU2281756C2

Изобретение относится к области медицины, в частности к получению применяемых в терапии сахарного диабета препаратов инсулина пролонгированного действия, и может быть использовано в медицинской промышленности для изготовления суспензии отечественного генно-инженерного (рекомбинантного) протамина-инсулина человека во флаконах.

Известен способ приготовления суспензии свиного протамина-инсулина с концентрацией 100 МЕ/мл инсулина, предназначенной для розлива в картриджи. По этому способу в картриджи разливают препарат суспензии протамина-инсулина, приготовленной путем смешивания четырех растворов в инъекционной воде, а именно: раствора консервантов фенола и м-крезола; раствора протамина сульфата и глицерина; раствора инсулина и глицерина и фосфатного буферного раствора с последующей кристаллизацией при 20-25°С в течение 72 ч и розливом суспензии протамина-инсулина в картриджи; при этом на стадиях подготовки растворов их стерилизуют с помощью предфильтра с диаметром пор 0,45 мкм и фильтра с диаметром пор 0,22 мкм (патент РФ №2157698, МКИ А 61 К 38/28, опубл. 20.10.2000).

Недостатком способа является длительность процесса.

Известен наиболее близкий к заявленному способ приготовления суспензии генно-инженерного протамина-инсулина человека для картриджей и флаконов с дополнительным введением хлорида цинка и формированием кристаллов суспензии, состоящий в том, что предварительно готовят растворы, содержащие в расчете на 100 ME инсулина: 2,4 мг натрия фосфорнокислого двузамещенного, 0,7-0,8 мг м-крезола и 0,3-0,4 мг фенола (первый раствор); 0,7-0,8 мг м-крезола и 0,3-0,4 мг фенола (второй раствор); 0,3-0,4 мг протамина сульфата и 7,5-8,5 мг глицерина (третий раствор); инсулин, 4,0-40,0 мкг хлорида цинка и 7,5-8,5 мг глицерина (четвертый раствор); далее второй раствор смешивают с третьим и четвертым (пятый раствор), а затем в одну емкость стерильно фильтруют первый раствор и пятый, образовавшуюся взвесь разливают в картриджи и/или флаконы, укупоривают их, обкатывают на них колпачки. Кристаллизацию проводят в обкатанных картриджах или флаконах в течение 48 ч при температуре 15-30°С с четырехчасовым перемешиванием через 24 ч с момента розлива взвеси (патент РФ №2185152, МКИ А 61 К 9/10, опубл. 20.07.2002).

Однако и данный способ является достаточно длительным.

Изобретение решает задачу повышения эффективности технологического процесса приготовления суспензии фармацевтической композиции на основе отечественного генно-инженерного (рекомбинантного) инсулина человека, содержащей протамина сульфат, с концентрацией инсулина 100 МЕ/мл, предназначенной для розлива во флаконы.

Поставленная задача решается за счет того, что в способе приготовления фармацевтической композиции на основе генно-инженерного инсулина человека для флаконов, включающем получение водной суспензии инсулина с концентрацией 100 МЕ/мл, содержащей дополнительно хлорид цинка, протамина сульфат, натрий фосфорнокислый двузамещенный, глицерин, фенол и мета-крезол, проведение стерилизующей фильтрации, розлив и кристаллизацию, предварительно готовят при перемешивании буферный раствор с рН 8,3-8,5, содержащий 2,4 г/мл натрия фосфорнокислого двузамещенного, 1,4-1,6 мг/мл мета-крезола, 0,5-0,7 мг/мл фенола, 15-17 мг/мл глицерина и воду, затем готовят раствор инсулина последовательным введением 0,35-0,45 мг/мл протамина сульфата, субстанции инсулина человека, 1%-ного водного раствора хлористого цинка из расчета содержания цинка в лекарственной форме 0,025-0,035 мг/100 ME инсулина в воду, подкисленную до рН 3,1-3,3, растворы подвергают стерилизующей фильтрации, смешивают, а кристаллизацию проводят перед розливом выдерживанием полученной композиции при 12-16°С и перемешивании в течение 16-24 час.

Технический результат предлагаемого способа - сокращение длительности выдерживания фармацевтической композиции для формирования кристаллов суспензии с 48 час, как в известном способе, до 16-24 час, что повышает эффективность процесса.

Заявленный способ осуществляют следующим образом.

Предварительно готовят при перемешивании буферный раствор с рН 8,3-8,5, содержащий натрий фосфорнокислый двузамещенный, мета-крезол, фенол, глицерин и воду. Затем готовят раствор инсулина путем растворения при перемешивании в воде для инъекций, подкисленной до рН 3,1-3,3, сначала протамина сульфата, затем субстанции инсулина человека, а затем добавляют расчетное количество 1% раствора хлорида цинка. Проводят стерилизующую фильтрацию полученных растворов. Фильтрацию буферного раствора проводят при температуре раствора не выше 20°С на фильтровальной системе «Stericup Filter Units» («Миллипор», США), объем фильтрования 1000 мл, размер пор 0,22 мкм; фильтрацию раствора инсулин-цинк-протамин-сульфат проводят на одноразовой фильтровальной установке «Nalgene» («Nalge Company», США), объем фильтрования 250 мл, размер пор 0,22 мкм.

Отфильтрованный раствор инсулин-цинк-протамин-сульфат медленно вводят в буферный раствор при рН 7,2-7,4, перемешивают полученную суспензию со скоростью 60 об/мин в течение 16-24 час при 12-16°С для формирования кристаллов суспензии и направляют на розлив. Далее раствор разливают во флаконы на автоматическом поршневом медицинском дозаторе (АО «Медлабортехника», Украина).

Предлагаемый способ позволяет приготовить суспензию отечественного протамина-инсулина человека для флаконов эффективным и экономичным способом, при котором сохраняются все физико-химические и биологические свойства препарата (см. табл.). Для препарата получена Фармакопейная статья предприятия ФСП №42-0452-5916-04.

Получаемый препарат позволяет обеспечить здравоохранение новым эффективным и недорогим отечественным антидиабетическим средством и уменьшить проникновение на российский рынок дорогостоящих импортных препаратов инсулина. Срок хранения препарата без ухудшения его свойств составляет 2 года.

Заявленный способ иллюстрируют следующие примеры.

Пример 1.

В стеклянную емкость вместимостью 1,5 л, загружают 2,4 г натрия фосфорнокислого двузамещенного и 200 мл воды для инъекций. Раствор перемешивают до полного растворения соли. Затем вносят 15 г глицерина и перемешивают до однородности. В стакане емкостью 50 мл взвешивают 0,5 г фенола, добавляют 30 мл воды для инъекций, перемешивают и переносят раствор в емкость с натрием фосфорнокислым двузамещенным и глицерином, смывая стакан несколько раз водой для инъекций. В стакане емкостью 50 мл взвешивают 1,4 г м-крезола, добавляют 30 мл воды для инъекций, перемешивают и переносят раствор в емкость с натрием фосфорнокислым двузамещенным, глицерином и фенолом, смывая стакан несколько раз водой для инъекций. Объем полученного буферного раствора доводят водой для инъекций до 700 мл с рН 8,3.

В емкость объемом 500 мл, содержащую 100 мл подкисленной 0,1 N раствором HCl (1 мл) до рН 3,1 воды для инъекций, добавляют 350 мг протамина сульфата и перемешивают до полного растворения. 3, 67 г инсулина (при активности субстанции 27,5 МЕ/мл) суспендируют в 50 мл воды для инъекций, переносят, смывая водой, в емкость с раствором протамина сульфата, подкисляют 0,1 N раствором HCl (25-30 мл) и перемешивают до полного растворения инсулина при рН 3,1. В полученный раствор приливают 5 мл 1%-ного раствора хлористого цинка в расчете на содержание цинка в субстанции 0,3% и содержание в лекарственной форме 0,025 мг/100 ME. Объем раствора доводят до 250 мл.

Проводят стерилизующую фильтрацию полученных растворов.

В емкость вместимостью 1,5 л при перемешивании магнитной мешалкой (со скоростью 60 об/мин) переносят буферный раствор (700 мл, рН 8,3) и медленно приливают к нему раствор инсулина после стерилизующей фильтрации (250 мл, рН 3,1), через 25 минут контролируют рН, который должен быть 7,2-7,4. При отклонении от положенного значения, рН корректируют стерильным раствором 0,1 М соляной кислоты или 0,1 М раствором гидроксида натрия. Устанавливают рН 7,2.

Полученную композицию перемешивают со скоростью 60 об/мин в течение 16 час при 12°С и затем направляют на розлив. Свойства полученного препарата представлены в таблице.

Пример 2.

В стеклянную емкость вместимостью 1,5 л, загружают 2,4 г натрия фосфорнокислого двузамещенного и 200 мл воды для инъекций. Раствор перемешивают до полного растворения соли. Затем вносят 17 г глицерина и перемешивают до однородности. В стакане емкостью 50 мл взвешивают 0,7 г фенола, добавляют 30 мл воды для инъекций, перемешивают и переносят раствор в емкость с натрием фосфорнокислым двузамещенным и глицерином, смывая стакан несколько раз водой для инъекций. В стакане емкостью 50 мл взвешивают 1,6 г м-крезола, добавляют 30 мл воды для инъекций, перемешивают и переносят раствор в емкость с натрием фосфорнокислым двузамещенным, глицерином и фенолом, смывая стакан несколько раз водой для инъекций. Объем полученного буферного раствора доводят водой для инъекций до 700 мл с рН 8,5.

В емкость объемом 500 мл, содержащую 100 мл подкисленной 0,1 N раствором HCl (1-2 мл) до рН 3,3 воды для инъекций, добавляют 450 мг протамина сульфата и перемешивают до полного растворения. 3,67 г инсулина (при активности субстанции 27,5 МЕ/мл) суспендируют в 50 мл воды для инъекций, переносят смывая водой в емкость с раствором протамина сульфата, подкисляют 0,1 N раствором HCl (25-30 мл) и перемешивают до полного растворения инсулина при рН 3,3. В полученный раствор приливают 5 мл 1%-ного раствора хлористого цинка в расчете на содержание цинка в субстанции 0,3% и содержание в лекарственной форме 0,035 мг/100 МЕ. Объем раствора доводят до 250 мл водой для инъекций.

Проводят стерилизующую фильтрацию полученных растворов. В емкость вместимостью 1,5 л при перемешивании магнитной мешалкой (со скоростью 80 об/мин) переносят буферный раствор (700 мл, рН 8,5) и медленно приливают к нему раствор инсулина после стерилизующей фильтрации (250 мл, рН 3,3), через 25 минут контролируют рН, который должен быть 7,2-7,4. При отклонении от положенного значения, рН корректируют стерильным раствором 0,1 М соляной кислоты или 0,1 М раствором гидрооксида натрия. Устанавливают рН 7,4.

Полученную композицию перемешивают со скоростью 80 об/мин в течение 24 час при 16°С и затем направляют на розлив. Свойства полученного препарата представлены в таблице.

Таблица №1
Свойства суспензии генно-инженерного (рекомбинантного) инсулина человека во флаконах.
Тесты и нормыПримеры12После розлива Через 6 мес.Через 12 месЧерез 18 мес.Через 24 мес.После розлива Через 6 мес.Через 12 мес.Через 18 мес.Через 24 мес.ОписаниеСуспензия белого цвета, при стоянии взвесь оседает. Жидкость над осадком прозрачная, бесцветная. Осадок ресуспендируется при встряхивании++++++++++Размер кристалловПалочкообразные кристаллы размером более 1 мкм++++++++++рНПотенциометрически7,2-7,47,207,257,227,247,287,417,427,407,457,40Количество инсулина в надосадочной жидкостиВЭЖХ, %Не>10,350,350,360,400,480,210,230,250,310,38Количество дезамидо-инсулинаВЭЖХ, % А21Не >1,80,320,350,410,530,610,260,310,330,350,43Высокомолекулярные белкиВЭЖХ, %Не>20,300,320,350,410,410,110,120,150,200,25Количеств. определениеВЭЖХ, %95-105103,1102,95102,90102,80102,2103,23103,15103,12103,10103,01Примечание: + - удовлетворяет требованиям ФСП 42-0452-5916-04

Похожие патенты RU2281756C2

название год авторы номер документа
СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ РАСТВОРА ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ КОМПОЗИЦИИ НА ОСНОВЕ СУБСТАНЦИИ ГЕННО-ИНЖЕНЕРНОГО (РЕКОМБИНАНТНОГО) ИНСУЛИНА ЧЕЛОВЕКА 2004
  • Баирамашвили Дмитрий Ильич
  • Говорухина Елена Ивановна
  • Сизова Наталия Викторовна
  • Шибанова Елена Дмитриевна
  • Мирошников Анатолий Иванович
  • Иванов Вадим Тихонович
RU2275189C1
СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ СУСПЕНЗИИ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ КОМПОЗИЦИИ НА ОСНОВЕ СУБСТАНЦИИ ГЕННО-ИНЖЕНЕРНОГО (РЕКОМБИНАНТНОГО) ИНСУЛИНА ЧЕЛОВЕКА 2001
  • Хлябич Г.Н.
  • Пак М.Ф.
  • Пак Т.В.
  • Бондарева Л.Н.
  • Мазов М.Ю.
  • Колдышев А.Е.
RU2185152C1
СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПРЕПАРАТА ПЕНСУЛИН СС СУСПЕНЗИИ ИНСУЛИНА ДЛЯ КАРТРИДЖА 1999
  • Хлябич Г.Н.
  • Пак М.Ф.
  • Пак Т.В.
  • Поваляева Н.Н.
  • Бондарева Л.Н.
  • Новохатский А.С.
  • Рябцев М.Н.
RU2157698C1
СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ РАСТВОРА ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ КОМПОЗИЦИИ НА ОСНОВЕ СУБСТАНЦИИ ГЕННО-ИНЖЕНЕРНОГО (РЕКОМБИНАНТНОГО) ИНСУЛИНА ЧЕЛОВЕКА 2001
  • Хлябич Г.Н.
  • Пак М.Ф.
  • Пак Т.В.
  • Бондарева Л.Н.
  • Мазов М.Ю.
  • Колдышев А.Е.
RU2184533C1
ГОТОВАЯ ЛЕКАРСТВЕННАЯ ФОРМА ИНСУЛИНА ЧЕЛОВЕКА ПРОЛОНГИРОВАННОГО ДЕЙСТВИЯ 2003
  • Лазарев Алексей Павлович
  • Рыбачук Валентина Николаевна
  • Соляник Людмила Павловна
  • Прудиев Дмитрий Павлович
  • Сологуб Павел Павлович
  • Мельник Валерий Николаевич
  • Стадник Виктор Иванович
  • Власенко Николай Николаевич
  • Лесик Игорь Павлович
RU2252753C2
СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ БЫСТРОДЕЙСТВУЮЩЕГО РАСТВОРА ИНСУЛИНА ДЛЯ ИНЪЕКЦИЙ 2001
  • Баирамашвили Д.И.
  • Каратеева Р.И.
  • Сизова Н.В.
  • Говорухина Е.И.
  • Давыдов В.Л.
  • Мирошников А.И.
RU2202365C2
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КОМБИНИРОВАННОГО ПРЕПАРАТА ИНСУЛИНА ЧЕЛОВЕКА 2002
  • Лазарев Алексей Павлович
  • Пояркова Светлана Алексеевна
  • Луцив Владимир Романович
  • Мельник Валерий Николаевич
  • Рыбачук Валентина Николаевна
  • Стадник Виктор Иванович
  • Власенко Николай Николаевич
  • Соляник Людмила Павловна
  • Сологуб Павел Павлович
  • Прудиев Дмитрий Павлович
  • Лесик Игорь Павлович
RU2261108C2
ИНСУЛИНОВЫЕ ПРЕПАРАТЫ, СОДЕРЖАЩИЕ УГЛЕВОДЫ 1997
  • Кимер Лоне Легструп
  • Бальшмитт Пер
  • Енсен Стен
RU2204411C2
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЙ ПРЕПАРАТ, СОДЕРЖАЩИЙ КРИСТАЛЛИЧЕСКИЙ ИНСУЛИН И РАСТВОРЕННЫЙ ИНСУЛИН 2005
  • Берглунд Петтер
  • Хаммелев Шарлотта
  • Эскильдсен Лоне
  • Мадсен Йоханне
  • Ольсен Хелле Олунд
  • Кимер Лоне Лёгструп
RU2389503C2
СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ГОТОВОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ ИНСУЛИНА КОРОТКОГО ДЕЙСТВИЯ 2002
  • Лазарев Алексей Павлович
  • Пояркова Светлана Алексеевна
  • Луцив Владимир Романович
  • Мельник Валерий Николаевич
  • Рыбачук Валентина Николаевна
  • Стадник Виктор Иванович
  • Власенко Николай Николаевич
  • Соляник Людмила Павловна
  • Сологуб Павел Павлович
  • Прудиев Дмитрий Павлович
  • Лесик Игорь Павлович
RU2261107C2

Реферат патента 2006 года СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ СУСПЕНЗИИ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ КОМПОЗИЦИИ НА ОСНОВЕ СУБСТАНЦИИ ГЕННО-ИНЖЕНЕРНОГО (РЕКОМБИНАНТНОГО) ИНСУЛИНА ЧЕЛОВЕКА

Изобретение относится к области медицины, в частности к получению применяемых в терапии сахарного диабета препаратов инсулина пролонгированного действия, и может быть использовано в медицинской промышленности для изготовления суспензии отечественного генно-инженерного (рекомбинантного) протамина-инсулина человека во флаконах. Изобретение решает задачу повышения эффективности технологического процесса приготовления суспензии фармацевтической композиции на основе отечественного генно-инженерного (рекомбинантного) инсулина человека, содержащего протамина сульфат, с концентрацией инсулина 100 МЕ/мл, предназначенной для розлива во флаконы, за счет того, что в способе приготовления фармацевтической композиции на основе генно-инженерного инсулина человека для флаконов, включающем получение водной суспензии инсулина с концентрацией 100 МЕ/мл, содержащей дополнительно хлорид цинка, протамина сульфат, натрий фосфорнокислый двузамещенный, глицерин, фенол и мета-крезол, проведение стерилизующей фильтрации, розлив и кристаллизацию, предварительно готовят при перемешивании буферный раствор с рН 8,3-8,5, содержащий 2,4 г/мл натрия фосфорнокислого двузамещенного, 1,4-1,6 мг/мл мета-крезола, 0,5-0,7 мг/мл фенола, 15-17 мг/мл глицерина и воду, затем готовят раствор инсулина последовательным введением 0,35-0,45 мг/мл протамина сульфата, субстанции инсулина человека, 1%-ного водного раствора хлористого цинка из расчета содержания цинка в лекарственной форме 0,025-0,035 мг/100 ME инсулина в воду, подкисленную до рН 3,1-3,3, растворы подвергают стерилизующей фильтрации, смешивают, а кристаллизацию проводят перед розливом выдерживанием полученной композиции при 12-16°С и перемешивании в течение 16-24 час. 1 табл.

Формула изобретения RU 2 281 756 C2

Способ приготовления фармацевтической композиции на основе генно-инженерного инсулина человека для флаконов, включающий получение водной суспензии инсулина с концентрацией 100 МЕ/мл, содержащей дополнительно хлорид цинка, протамина сульфат, натрий фосфорнокислый двузамещенный, глицерин, фенол и метакрезол, проведение стерилизующей фильтрации, розлива целевого продукта и кристаллизации, отличающийся тем, что предварительно готовят при перемешивании буферный раствор с рН 8,3-8,5, содержащий 2,4 г/мл натрия фосфорнокислого двузамещенного, 1,4-1,6 мг/мл мета-крезола, 0,5-0,7 мг/мл фенола, 15-17 мг/мл глицерина и воду, затем готовят раствор инсулина последовательным введением 0,35-0,45мг/мл протамина сульфата, субстанции инсулина человека, 1%-ного водного раствора хлористого цинка из расчета содержания цинка в лекарственной форме 0,025-0,035 мг/100 ME инсулина в воду, подкисленную до рН 3,1-3,3, растворы подвергают стерилизующей фильтрации, смешивают, а кристаллизацию проводят перед розливом выдерживанием полученной композиции при 12-16°С и перемешивании в течение 16-24 ч.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2006 года RU2281756C2

СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ СУСПЕНЗИИ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ КОМПОЗИЦИИ НА ОСНОВЕ СУБСТАНЦИИ ГЕННО-ИНЖЕНЕРНОГО (РЕКОМБИНАНТНОГО) ИНСУЛИНА ЧЕЛОВЕКА 2001
  • Хлябич Г.Н.
  • Пак М.Ф.
  • Пак Т.В.
  • Бондарева Л.Н.
  • Мазов М.Ю.
  • Колдышев А.Е.
RU2185152C1
СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПРЕПАРАТА ПЕНСУЛИН СС СУСПЕНЗИИ ИНСУЛИНА ДЛЯ КАРТРИДЖА 1999
  • Хлябич Г.Н.
  • Пак М.Ф.
  • Пак Т.В.
  • Поваляева Н.Н.
  • Бондарева Л.Н.
  • Новохатский А.С.
  • Рябцев М.Н.
RU2157698C1
КОМПЛЕКС АНАЛОГА ИНСУЛИНА И ПРОТАМИНА, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ И СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ДИАБЕТА 1995
  • Майкл Розарио Де Фелиппис
RU2154494C2
Устройство для обнаружения поврежденного участка телеграфного тракта 1981
  • Иваненко Анатолий Федорович
  • Яске Виктор Михайлович
  • Тарнопольский Валерий Львович
  • Абугов Александр Григорьевич
SU1042194A2
US 5547930 А, 20.08.1996
WO 8303054 A1, 15.09.1983.

RU 2 281 756 C2

Авторы

Баирамашвили Дмитрий Ильич

Говорухина Елена Ивановна

Сизова Наталия Викторовна

Шибанова Елена Дмитриевна

Мирошников Анатолий Иванович

Иванов Вадим Тихонович

Даты

2006-08-20Публикация

2004-11-25Подача