ПРЕПАРАТ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ БАКТЕРИАЛЬНЫХ И/ИЛИ ПРОТОЗОЙНЫХ ИНФЕКЦИЙ ЖИВОТНЫХ Российский патент 2007 года по МПК A61K31/45 A61K31/115 A61K31/16 A61K31/415 A61K31/7036 A61K33/04 A61P31/00 

Изобретение относится к области ветеринарии и может быть использовано для профилактики и лечения заболеваний бактериальной и протозойной этиологии преимущественно у сельскохозяйственных животных, в частности таких, как сальмонеллез, колибактериоз, дизентерия, бронхопневмония, некробактериоз, микоплазмоз и др.

Известен препарат, содержащий тилозин (J.F. Prescott, J.D. Baggot /Antimikrobial Therapy in Veterinary Medicine/ Iowa State University Press, 1993, p.191-194), его применяют для лечения в основном микоплазмоза, но он малоэффективен при лечении бактериальных инфекций и, кроме того, для обеспечения терапевтической эффективности тилозин применяют в достаточно высокой дозе (порядка 20 мг/кг), что оказывает токсическое действие на животных и вызывает аллергические реакции у работающих людей, лечащих и ухаживающих за животными.

Известен широко используемый для лечения бактериальных инфекций животных синтетический антибиотик левомицетин (H.R. Edams /Veterinary Pharmacology and Therapeutics/ 7 edition/ Iowa State University Press, 1995, p.820-823). Он идентичен природному антибиотику хлорамфениколу. Левомицетин имеет широкий спектр бактериостатического действия. Его обычно применяют при таких заболеваниях животных, как сальмонеллез, колибактериоз, бронхопневмония. Механизм противомикробного действия связан с нарушением синтеза белков микроорганизмов. Он активен в отношении грамположительных (Staphylococcus spp., Streptococcus spp.) и грамотрицательных кокков (Neisseria gonorrhoeae, N.meningitides), грамотрицательных бактерий (Escherichia coli, Haemophilus influenza, Salmonella spp., Shigella spp., Klebsiella spp., Serratia spp., Yersinia spp., Proteus spp.), спирохет, некоторых вирусов. Но левомицетин не активен при микоплазмозе.

Известен еще синтетический препарат метронидазол (Субботин В.М., Субботина С.Г., Александров И.Д. Современные лекарственные средства в ветеринарии. Серия «Ветеринария и животноводство», Ростов-на-Дону: Феникс, 2000). Он обладает противопротозойным и противобактериальным действием, а также бактерицидным действием против патогенных анаэробных бактерий и имеет высокую способность проникать в ткани органов.

Также известен препарат для лечения бактериальных инфекций животных, осложненных микоплазмозом (патент РФ №2162690, МПК⁷ А 61 К 31/00), который принят в качестве прототипа. Он содержит (в мас.%): тилозин 0,25-50,0 и левомицетин 2,5-90,0, остальное составляют растворители (спирты, пропиленгликоли), стабилизаторы (лимонная кислота, аскорбиновая кислота, ЭДТУ, гидроокись натрия), консерванты (бензиловый спирт, метилпарабен, пропилпарабен) и наполнители - сахара (лактоза, глюкоза, фруктоза), цеолиты, мел, мука, аэросил. Получают известный препарат путем смешивания или растворения компонентов с последующей фильтрацией, стерилизацией и расфасовкой во флаконы или ампулы. Используют его в форме растворов (инъекционных и оральных), а также в виде порошков. Терапевтический эффект при совместном использовании тилозина и левомицетина повысился на 2,13% и 2,64% соответственно в сравнении с раздельным их применением, а за счет присутствия левомицетина снижено содержание тилозина. Недостатком известного препарата является ограниченность спектра его действия и повышенность размера доз.

Задачей изобретения было создание такого препарата для лечения инфекционных заболеваний животных, который имеет расширенный спектр терапевтического действия при уменьшенных дозах без увеличения кратности их применения за счет синергизма его компонентов.

Для решения поставленной задачи с достижением указанного технического результата патентуемый препарат для лечения бактериальных и/или протозойных инфекций животных включает левомицетин, тилозин, бензиловый спирт, пропиленгликоль и стабилизатор. Отличительной особенностью данного препарата является то, что он дополнительно содержит метронидазол, в качестве стабилизатора имеет формальдегидсульфоксилат натрия и сернистокислый натрий, а в качестве пропиленгликоля - 1,2-монопропиленгликоль при следующем соотношении компонентов (в мас.%): левомицетин 3,0-10,0; тилозин 2,5-10,0; метронидазол 2,5-5,0; формальдегидсульфоксилат натрия 0,02-2,0; сернистокислый натрий 0,02-2,0; бензиловый спирт 2,0-4,0; раствор хлористо-водородной кислоты 24,0; 1,2-монопропиленгликоль остальное.

Предлагаемый препарат конкретной рецептуры может быть получен и использован следующим образом.

Пример 1. Берут 700 мл 1,2-монопропиленгликоля (C₃H₉O₂) плотностью 1,036 г/см³ (т.е. 725 г), нагревают до температуры 90°С, выдерживают при этой температуре 20 мин и охлаждают до температуре 60°С. Делят раствор на две части: 400 мл и 300 мл. В часть раствора в 400 мл (414 г) добавляют 50 г левомицетина, тщательно перемешивают и охлаждают до температуры 45°С. Затем в раствор вводят при перемешивании 0,2 г сернистокислого натрия (Na₂SO₃), 2 г формальдегидсульфоксилата натрия (CH₃NaO₃S) и при постоянном перемешивании до полного растворения добавляют 59 г тилозина основания и 20 мл бензилового спирта (C₆H₅-CH₅OH) плотностью 1,05 г/см³ (т.е. 21 г). Отдельно готовят раствор метронидазола. Берут 240 мл горячего (60°С) 1 М раствора хлористо-водородной кислоты и растворяют в нем 50 г метронидазола. Раствор охлаждают до температуры 45°С и смешивают со спиртовым. До общей массы 1000 г в раствор добавляют остаток (вторую часть) 1,2-монопропиленгликоля.

Была проведена проверка стабильности препарата в среде серосодержащих солей по методу ускоренного старения (выдерживание образцов в термостате при температуре 40°С), причем натрий сернистокислый вводился в раствор до введения формальдегидсульфоксилата натрия. Анализ компонентов препарата по массе осуществлялся следующим образом. Тилозин определяли методом жидкостной хроматографии без предварительного его выделения из раствора. Левомицетин определяли методом объемного титрования с предварительной экстракцией из препарата этилацетатом при рН>9. Метронидазол определяли колориметрически по его окрашенному комплексу с n-Диметиламинобензальдегидом. Данные одного из таких испытаний приведены в таблице 1. Из табличных данных следует, что препарат стабилен, так как стабильна относительная масса его компонентов, причем препарат без изменений своих терапевтических свойств может храниться в течение одного года при обычной температуре (18-20°С).

Терапевтическую эффективность предлагаемого препарата преимущественно по рецептуре примера 1 и широкий спектр его действия может быть проиллюстрирован следующими примерами (2-9) его опытной проверки.

Пример 2. Проведен опыт на 175 поросятах двухмесячного возраста с клиническими признаками дизентерии. Бактериологическими исследованиями было установлено, что возбудителями дизентерии являются Spirulina hyodysenteriae, Bacteroides fragilis и Clostridium spp. Поросята были разделены на четыре группы. Молодняку первой группы один раз в двое суток вводили предлагаемый препарат в дозе 15 мг на 1 кг массы в виде раствора внутримышечно, поросятам второй группы давали левомицетин в порошке вместе с кормом в дозе 15 мг/кг массы два раза в сутки per. os., поросятам третьей группы вводили тилозин в дозе 10 мг/кг массы два раза в сутки внутримышечно, а четвертой - метронидазол в дозе 25 мг/кг массы один раз в сутки. Данные опыта представлены в таблице 2. В результате опыта было установлено, что терапевтическая эффективность предлагаемого препарата составила 95,7%, превосходила любого из трех применяемых раздельно его составляющих компонентов на 4,4-6,8% при сокращении длительности лечения в 2,0-2,3 раза при меньшей кратности доз.

Пример 3. Проведен опыт на 158 поросятах трехмесячного возраста, больных бронхопневмонией. Бактериологические исследования показали, что этиологическим фактором инфекции являлись микоплазмы и хламидии. Поросята были разделены на четыре группы. Животным первой группы один раз в сутки вводили предлагаемый препарат в дозе 10 мг/кг массы внутримышечно, второй - давали левомицетин в порошке вместе с кормом в дозе 15 мг/кг массы два раза в сутки, третьей - тилозин в дозе 10 мг/кг массы два раза в сутки внутримышечно, а четвертой - метронидазол в дозе 25 мг/кг массы один раз в сутки. Данные опыта представлены в таблице 3. В результате опыта было установлено, что терапевтическая эффективность предлагаемого препарата составила 97,5% и превосходила любого из трех его составляющих компонентов, применяемых раздельно, на 7,5-10,0% при сокращении длительности лечения в 6:5=1,2...7:5=1,4 раза при сохранении или уменьшении кратности доз в два раза.

Пример 4. Проведен опыт на 159 полугодовалых телятах, больных бронхопневмонией, возбудителями которой были микоплазмы, стафилококки, стрептококки. Телята были разделены на четыре группы. Животным первой группы один раз в сутки внутримышечно вводили предлагаемый препарат в дозе 15 мг/кг массы один раз в сутки, второй группе давали в порошке вместе с кормом в дозе 20 мг/кг массы левомицетин два раза в сутки, третьей - тилозин в дозе 5 мг/кг массы два раза в сутки внутримышечно, а четвертой - метронидазол в дозе 4 мг/кг массы два раза в сутки в таблетках. Данные опыта приведены в таблице 4. В результате опыта было установлено, что терапевтическая эффективность предлагаемого препарата составляла 98,1% и превосходила таковую любого из трех его составляющих компонентов, применяемых раздельно, на 3,7-9,2% при сокращении длительности лечения в 7:5=1,4 раза и уменьшении кратности доз в два раза.

Пример 5. Проведен опыт на 158 поросятах двухмесячного возраста с диагнозом сальмонеллез. Животные были разделены на четыре группы. Первой группе животных один раз в сутки вводили внутримышечно предлагаемый препарат в дозе 15 мг/кг массы, второй - давали левомицетин (порошок) в дозе 15 мг/кг массы два раза в сутки per. os., третьей - тилозин в дозе 5 мг/кг массы два раза в сутки внутримышечно, четвертой - метронидазол в дозе 25 мг/кг массы перорально два раза в сутки. Данные опыта приведены в таблице 5. В результате опыта было установлено, что терапевтическая эффективность предлагаемого препарата составляла 94,4% и превосходила таковую любого из трех его составляющих компонентов, применяемых раздельно, на 1,7-4,7% при сокращении длительности лечения 6:5=1,2...8:5=1,6 раза при уменьшении кратности доз в два раза.

Пример 6. Проведен опыт на 40000 цыплят бройлеров двухнедельного возраста, инфицированных микоплазмами и эшерихиями. Птицы были разделены на четыре группы. Первой группе цыплят давали предлагаемый препарат в виде введенного в корм порошка в дозе 5 мг/кг массы, второй - левомицетин в дозе 25 мг/кг массы, третьей - тилозин в дозе 5 мг/кг массы, а четвертой - метронидазол в дозе 10 мг/кг массы. Данные опыта приведены в таблице 6. В результате опыта было установлено, что при одинаковой длительности лечения (пять суток) терапевтическая эффективность предлагаемого препарата составляла 98,96% и превосходила таковую любого из трех составляющих компонентов, применяемых раздельно, на 2,91-4,09% при равном или меньшем размере суточной дозы.

Пример 7. Препарат, имеющий следующий состав, мас.%:

левомицетин - 3,0

тилозин - 2,5

метронидазол - 2,5

стабилизатор и растворитель - остальное (как в примере 1),

был испытан на поросятах 2-2,5-месячного возраста с диагнозом дизентерия, возбудителями которой были Spirulina hiodesenteia, Streptococcus faecalis. Диагноз был подтвержден клиническими, патологическими и лабораторными исследованиями. Лечение опытной группы в разовой дозе 1 мл на 10 кг живой массы (80.0 мг активнодействующих веществ суммарно) дважды в день показало терапевтическую эффективность не ниже, чем в примере 2. Она равнялась 95,0%, что выше, чем в случае раздельного применения левомицитина, тилозина и метродиназола в дозах, рекомендованных для лечения дизентерии. Данный состав является предельным по экономическим соображения (увеличивается расход компонентов препарата и трудовые затраты).

Пример 8. Препарат состава, мас.%: левомицетин - 10,0; тилозин - 10,0; метронидазол - 5,2; стабилизатор и растворитель - остальное, получить не удалось из-за выкристаллизации метронидазола.

Пример 9. Препарат состава, мас.%: левомицетин - 10,0; тилозин - 2,5; метронидазол - 5,0; стабилизатор и растворитель - остальное, был испытан на поросятах двухмесячного возраста с диагнозом сальмонеллез. В опыт по принципу аналогов было отобрано 105 поросят. Первую группу (30) поросят лечили патентуемым препаратом в дозе 1 мл на 10 кг живой массы 1 раз в сутки, вторую группу (30 поросят) - левомицетином в виде порошка для внутреннего применения, третью группу (25 поросят) - тилозином для инъекций, четвертую группу (20 поросят) - метронидазолом в таблетках. Препараты-компоненты применяли до выздоровления в дозах, рекомендованных для лечения. Лечебная эффективность патентуемого препарата составляла 93,3%, что на 5,3-13,3% выше, чем при раздельном применении компонентов препарата (в первой группе пало 2, во второй - 4, в третьей - 3 и в четвертой - 4 поросенка).

Предлагаемый препарат по сравнению с прототипом при лечении цыплят бройлеров при осложненном микоплазмозе (табл.7) с одинаковой длительностью лечения (пять суток) имеет меньшую суточную дозу в 6:5=1,2 раза при той же терапевтической эффективности. Кроме того, предлагаемый препарат обладает более широким спектром терапевтического действия (в частности, он активен в лечении дизентерии, вызванной ассоциацией серпулины с бактероидами, а также хламидиоза и некробактериоза) при уменьшенных дозах без увеличения кратности применения и высокой стабильностью (он сохраняет свои свойства в растворе до 1 года при температуре 18-20°С).

Высокая терапевтическая эффективность предлагаемого препарата обусловлена синергизмом его компонентов. Он имеет усиленное воздействие на анаэробов и простейших, а это позволяет использовать его в ветеринарии для эффективного лечения инфекций желудочно-кишечного тракта и верхних дыхательных путей животных, а также других заболеваний, возбудители которых чувствительны к предлагаемому препарату.

Применение предлагаемого препарата при лечении животных позволит уменьшить затраты труда ветеринарных специалистов (за счет уменьшения количества инъекций, уменьшения длительности лечения), а значит и снизить стоимость курса лечения.

Изобретение относится к ветеринарии и ветеринарной фармакологии. Препарат включает (в мас.%): левомицетин 3,0-10,0, тилозин 2,5-10,0, метронидазол 2,5-5,0, 1 М раствор хлористо-водородной кислоты 24,0, стабилизаторы - формальдегидсульфоксилат натрия 0,02-2,0 и сернистокислый натрий 0,02-2,0 и растворители - бензиловый спирт 2,0-4,0 и 1,2-монопропиленгликоль - остальное. Препарат стабилен (сохраняет свойства до 1 года при 18-20°С), имеет широкий спектр терапевтического действия: может быть использован для профилактики и лечения сальмонеллеза, колибактериоза, дизентерии, бронхопневмонии, некробактериоза, микоплазмоза, лептоспироза и других заболеваний у сельскохозяйственных животных. Препарат эффективен при низких дозах и в ряде случаев он эффективен даже при однократном применении, что снижает стоимость курса лечения.

Препарат для лечения бактериальных и/или протозойных инфекций животных, содержащий левомицетин, тилозин, бензиловый спирт, пропиленгликоль и стабилизатор, отличающийся тем, что он дополнительно содержит метронидазол, 1 М раствор хлористо-водородной кислоты, в качестве стабилизатора имеет формальдегидсульфоксилат натрия и сернистокислый натрий, а в качестве пропиленгликоля - 1,2-монопропиленгликоль при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Левомицетин3,0-10,0Тилозин2,5-10,0Метронидазол2,5-5,0Формальдегидсульфоксилат натрия0,02-2,0Сернистокислый натрий0,02-2,0Бензиловый спирт2,0-4,01 М раствор хлористо-водородной кислоты24,01,2-монопропиленгликольОстальное