Настоящее изобретение относится к композиции с регулируемым высвобождением физиологически активного соединения, способу ее получения и применению в качестве лекарственного препарата и тому подобное.
Биоразлагаемые полимеры, обладающие свойством регулируемого высвобождения, пригодны, например, в качестве основы для микрокапсул и тому подобное для содержания физиологически активного вещества. Известно, что в качестве таких биоразлагаемых полимеров применяются полимеры, содержащие полимолочную кислоту, сополимер молочной кислоты и гликолевой кислоты и тому подобное (патент Японии А-11-269094 и тому подобное).
В качестве подобных биоразлагаемых полимеров использовались таковые, полученные обычными способами, однако было установлено, что они сами по себе обладают низким качеством, пригодным для использования в качестве основы с регулируемым высвобождением, поскольку имеют низкое содержание концевых карбоксильных групп. Поэтому исследовали возможность гидролизовать биоразлагаемый полимер, описанный выше, имеющий более высокую молекулярную массу, чтобы регулировать среднемассовую молекулярную массу до подходящего уровня перед использованием в качестве основы для препарата с регулируемым высвобождением.
Однако полимеры, полученные в результате гидролиза и последующего промывания водой, проявляют тенденцию к первоначальному резкому выбросу физиологически активного соединения, что делает их непригодными для основы с регулируемым высвобождением, даже если они имеют подходящее значение среднемассовой молекулярной массы и содержание концевых карбоксильных групп. Следовательно, при данных обстоятельствах требуется соответственное усовершенствование.
В патенте Японии №-А-7-97334 раскрывается препарат с регулируемым высвобождением, состоящий из физиологически активного пептида или его соли и биоразлагаемого полимера, содержащего свободные гидроксильные группы на конце, и способ его получения.
В патентах Великобритании №№ 2209937, 2234169, 2234896, 2257909 и Европейском патенте 626170А2 раскрывается композиция, содержащая в качестве основы биоразлагаемый полимер, включающий не растворимую в воде соль, такую как памоат пептида, и белок, приготовленный отдельно, и способ получения такой композиции.
В заявке WO95/15767 раскрывается эмбонат (памоат) цетрореликса (антагонист LH-RH) и способ его получения и одновременно описывается, что даже при включении этого памоата в биоразлагаемый полимер способность высвобождения у пептида является такой же, как для одного памоата.
Целью настоящего изобретения является обеспечение новой композиции, содержащей физиологически активное соединение в высокой концентрации и способной обеспечивать постоянную скорость высвобождения в течение длительного периода времени за счет подавления первоначального интенсивного высвобождения фармацевтически активного соединения, и способ ее получения.
Заявители настоящего изобретения провели интенсивные исследования в плане вышеуказанных обстоятельств и в конечном итоге достигли успеха в получении полимера молочной кислоты или ее соли, который не приводит сразу же к первоначальному интенсивному высвобождению, за счет снижения содержания полимера молочной кислоты с более низкой молекулярной массой, в частности, имеющего среднемассовую молекулярную массу 5000 или ниже, в биоразлагаемом полимере, и установили, что препарат с регулируемым высвобождением, содержащий указанный полимер молочной кислоты или ее соли, может включать физиологически активное соединение в неожиданно высокой концентрации, и при этом можно достичь постоянной скорости высвобождения в течение длительного периода времени при подавлении первоначального интенсивного высвобождения.
Кроме того, заявители настоящей заявки установили, что, если физиологически активное соединение вводится в композицию в высокой концентрации при совместном присутствии физиологически активного соединения и оксинафтойной кислоты с образованием композиции и последующем их включении в полимер молочной кислоты или ее соли, то затем физиологически активное вещество высвобождается со скоростью, отличной от скорости высвобождения физиологически активного вещества из композиции, полученной из физиологически активного соединения и оксинафтойной кислоты при отсутствии полимера молочной кислоты или его соли, и скорость высвобождения можно регулировать свойствами биоразлагаемого полимера и добавленным количеством оксинафтойной кислоты и даже в высокой концентрации, первоначальное интенсивное высвобождение можно эффективно подавлять и достичь постоянного высвобождения в течение очень длительного периода времени.
Основываясь на этом знании, заявители настоящего изобретения дополнительно провели исследования и осуществили в результате настоящее изобретение.
Настоящее изобретение обеспечивает:
1) Композицию с регулируемым высвобождением, включающую (1) физиологически активное соединение или его соль в количестве примерно от 14% (мас./мас.) до примерно 24% (мас./мас.) от общей массы композиции, (2) оксинафтойную кислоту, выбранную из группы, состоящей из 3-окси-2-нафтойной кислоты и 1-окси-2-нафтойной кислоты или ее соли и (3) полимер молочной кислоты или ее соли, имеющий среднемассовую молекулярную массу от 15000 до 50000, в котором содержание полимеров с молекулярной массой от 5000 или ниже составляет 5% по массе или ниже, где молярное отношение оксинафтойной кислоты или ее соли к физиологически активному соединению или его соли составляет от 3:4 до 4:3.
2) Композицию с регулируемым высвобождением по п.1, где полимер молочной кислоты имеет среднемассовую молекулярную массу от 15000 до 30000.
3) Композицию с регулируемым высвобождением по п.1, где физиологически активное соединение представляет производное LH-RH.
4) Композицию с регулируемым высвобождением по п.3, где производное LH-RH представляет пептид формулы:
5-oxo-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-Y-Leu-Arg-Pro-Z
[в которой Y представляет DLeu, DAla, DTrp, DSer(tBu), D2Nal или DHis(ImBzl), и Z представляет NH-C2H5 или Gly-NH2] или их соли.
5) Композицию с регулируемым высвобождением по п.1, где физиологически активное соединение или его соль представляет производное LH-RH формулы:
5-oxo-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-DLeu-Leu-Arg-Pro-NH-C2H5
или его ацетат, и гирдоксинафтойная кислота представляет 3-окси-2-нафтойную кислоту или 1-окси-2-нафтойную кислоту.
6) Лекарственный препарат, включающий композицию с регулируемым высвобождением по п.1.
7) Препарат для профилактики или лечения рака простаты, гиперплазии простаты, эндометриоза, миомы матки, фибромы матки, преждевременного полового созревания, дисменореи или рака молочной железы или контрацептивное средство, включающие композицию с регулируемым высвобождением по п.3.
8) Средство для профилактики рецидива рака молочной железы после операции по поводу рака молочной железы в период пременопаузы, которое включает композицию с замедленным высвобождением по п.3.
9) Способ профилактики или лечения рака простаты, гиперплазии простаты, эндометриоза, миомы матки, фибромы матки, преждевременного полового созревания, дисменореи или рака молочной железы или способ контрацепции, включающий введение эффективного количества композиции с регулируемым высвобождением по п.3 млекопитающим.
10) Способ профилактики рецидива рака молочной железы после операции по поводу рака молочной железы в период пременопаузы, который включает введение млекопитающему эффективной дозы композиции с замедленным высвобождением по п.3.
11) Композицию с регулируемым высвобождением, включающую физиологически активное соединение или его соль и полимер молочной кислоты или ее соли, имеющий среднемассовую молекулярную массу от 15000 до 50000, в котором содержание полимеров с молекулярной массой 5000 или ниже, составляет примерно 5% по массе или ниже.
12) Композицию с регулируемым высвобождением, включающую физиологически активное соединение или его соль, оксинафтойную кислоту или ее соль и полимер молочной кислоты или ее соли, имеющий среднемассовую молекулярную массу от 15000 до 50000, в котором содержание полимеров с молекулярной массой 5000 или ниже составляет примерно 5% по массе или ниже.
13) Композицию с регулируемым высвобождением по п.11, включающую (1) физиологически активное соединение или его соль в количестве примерно от 3% (мас./мас.) до примерно 24% (мас./мас.) от общей массы композиции и (2) полимер молочной кислоты или ее соли, имеющий среднемассовую молекулярную массу от 15000 до 50000, в котором содержание полимеров с молекулярной массой 5000 или ниже составляет примерно 5% по массе или ниже.
14) Композицию с регулируемым высвобождением по одному из пп.11-13, где полимер молочной кислоты имеет содержание полимеров с молекулярной массой 3000 или ниже, равное примерно 1,5% по массе или ниже.
15) Композицию с регулируемым высвобождением по одному любому из пп.11-13, где полимер молочной кислоты имеет содержание полимеров с молекулярной массой 1000 или ниже, равное примерно 0,1% по массе или ниже.
16) Композицию с регулируемым высвобождением по любому из пп.11-15, где полимер молочной кислоты имеет среднемассовую молекулярную массу от 15000 до 40000.
17) Композицию с регулируемым высвобождением по любому из пп.11-15, где полимер молочной кислоты имеет среднемассовую молекулярную массу от 17000 до 26000.
18) Композицию с регулируемым высвобождением по любому из п.12, где оксинафтойная кислота является 3-окси-2-нафтойной кислотой или 1-окси-2-нафтойной кислотой.
19) Композицию с регулируемым высвобождением по пп.11 или 13, где физиологически активное вещество представляет физиологически активный пептид.
20) Композицию с регулируемым высвобождением по п.12, где физиологически активное вещество представляет физиологически активный пептид.
21) Композицию с регулируемым высвобождением по п.19, где физиологически активное вещество представляет производное LH-RH.
22) Композицию с регулируемым высвобождением по п.20, где физиологически активное вещество представляет производное LH-RH.
23) Композицию с регулируемым высвобождением по пп.21 или 22, где производное LH-RH представляет пептид формулы:
5-oxo-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-Y-Leu-Arg-Pro-Z
[в которой Y представляет DLeu, DAla, DTrp, DSer(tBu), D2Nal или DHis(ImBzl), и Z представляет NH-C2H5 или Gly-NH2] или их соли.
24) Композицию с регулируемым высвобождением по п.21, где производное LH-RH или его соль содержится в композиции с регулируемым высвобождением в количестве от 3% (мас./мас.) до 24% (мас./мас.).
25) Композицию с регулируемым высвобождением по п.22, где молярное отношение оксинафтойной кислоты или ее соли к производному LH-RH или его соли составляет от 3:4 до 4:3.
26) Композицию с регулируемым высвобождением по п.22, где производное LH-RH или его соль содержится в композиции с регулируемым высвобождением в количестве от 14% (мас./мас.) до 24% (мас./мас.).
27) Композицию с регулируемым высвобождением по любому из пп.11-13, которую используют для инъекций.
28) Способ получения композиции с регулируемым высвобождением по п.11, включающий удаление растворителя из смешанного раствора физиологически активного соединения или его соли и полимера молочной кислоты или ее соли, имеющего среднемассовую молекулярную массу от 15000 до 50000, в котором содержание полимеров с молекулярной массой 5000 или ниже составляет примерно 5% по массе или ниже.
29) Способ получения композиции с регулируемым высвобождением по п.12, включающий удаление растворителя из смешанного раствора физиологически активного соединения или его соли, оксинафтойной кислоты или ее соли и полимера молочной кислоты или ее соли, имеющего среднемассовую молекулярную массу от 15000 до 50000, в котором содержание полимеров с молекулярной массой 5000 или ниже составляет примерно 5% по массе или ниже.
30) Способ получения композиции с регулируемым высвобождением по п.29, включающий смешивание и диспергирование физиологически активного соединения или его соли в растворе в органическом растворителе, содержащим оксинафтойную кислоту или ее соль, и полимера молочной кислоты или ее соли, имеющего среднемассовую молекулярную массу от 15000 до 50000, в котором содержание полимеров с молекулярной массой 5000 или ниже составляет примерно 5% по массе или ниже, с последующим удалением указанного органического растворителя.
31) Способ получения композиции с регулируемым высвобождением по п.30, где физиологически активное вещество или его соль представляет водный раствор, содержащий физиологически активное вещество или его соль.
32) Способ получения по п.30, где соль физиологически активного соединения представляет соль со свободным основанием или кислотой.
33) Лекарственный препарат, включающий композицию с регулируемым высвобождением по любому из пп.11-13.
34) Препарат для профилактики или лечения рака простаты, гиперплазии простаты, эндометриоза, миомы матки, фибромы матки, преждевременного полового созревания, дисменореи или рака молочной железы или контрацептивное средство, включающее композицию с регулируемым высвобождением по п.21 или 22.
35) Средство для профилактики рецидива рака молочной железы после операции по поводу рака молочной железы в период пременопаузы, включающее композицию с регулируемым высвобождением по п.21 или 22.
36) Способ профилактики и лечения рака простаты, гиперплазии простаты, эндометриоза, миомы матки, фибромы матки, преждевременного полового созревания, дисменореи или рака молочной железы или способ контрацепции, включающий введение эффективного количества композиции с регулируемым высвобождением по п.21 или 22, млекопитающим, и
37) Способ профилактики рецидива рака молочной железы после операции по поводу рака молочной железы в период пременопаузы, включающий введение эффективного количества композиции с регулируемым высвобождением для млекопитающих по п.21 или 22 млекопитающим.
Кроме того, изобретение обеспечивает:
38) Композицию с регулируемым высвобождением по п.12, где количество оксинафтойной кислоты или ее соли составляет примерно от 1 до 7 моль, предпочтительно примерно от 1 до примерно 2 моль на 1 моль физиологически активного пептида или его соли.
39) Способ получения композиции с регулируемым высвобождением по п.29, включающий получение эмульсии типа В/М, в которой жидкость, содержащая физиологически активное соединение или его соль, представляет внутреннюю водную фазу, и раствор, содержащий полимер молочной кислоты или ее соли и оксинафтойную кислоту или ее соль, представляет масляную фазу, затем удаление растворителя.
40) Способ получения композиции с регулируемым высвобождением по п.29, включающий получение эмульсии типа В/М, в которой жидкость, содержащая оксинафтойную кислоту или ее соль, представляет внутреннюю водную фазу, и раствор, содержащий физиологически активное соединение или его соль и полимер молочной кислоты или ее соли, представляет масляную фазу, затем удаление растворителя.
41) Способ получения композиции с регулируемым высвобождением по п.39 или 40, где способ удаления растворителя представляет способ высушивания в воде,
и тому подобное.
Физиологически активное соединение, используемое в настоящем изобретении, особым образом не ограничивается, при условии, что оно является пригодным для фармации, и оно может быть не пептидом или пептидом. К пептидам не относятся агонисты, антагонисты, соединения, обладающие способностью ингибировать ферменты, и тому подобное. В качестве пептида предпочтительными являются, например, физиологически активные пептиды, и подходящими являются физиологически активные пептиды с молекулярной массой примерно от 300 до примерно 40000, предпочтительно примерно от 400 до примерно 30000, более предпочтительно примерно от 500 до примерно 20000 и тому подобное.
В качестве физиологически активного пептида можно упомянуть, например, гормон, высвобождающий лютеинизирующий гормон (LH-RH), инсулин, соматостатин, гормон роста, гормон, высвобождающий гормон роста (GH-RH), пролактин, эритропоэтин, аденокортикотропный гормон, меланоцит-стимулирующий гормон, тиреотропин-высвобождающий гормон, тиреостимулирующий гормон, лютеинизирующий гормон, фолликулостимулирующий гормон, вазопрессин, окситоцин, кальцитонин, гастрин, секретин, панкреозимин, холецистокинин, ангиотензин, человеческий плацентарный лактоген, человеческий хорионический гонадотропин, энкефалин, эндорфин, киоторфин, туфтзин, тимопоэтин, тимозимрин тимозина, гормональный фактор тимуса, кровяной фактор тимуса, фактор некроза опухоли, индуктор колоний, мотилин, динорфин, бомбезин, нейротензин, цирулеин, брадикинин, предсердный натрийуретический фактор, фактор роста нервов, фактор роста клеток, фактор питания нервов, пептиды и тому подобное, обладающие антагонистической активностью по отношению к эндосерину, и их производные, кроме того, их фрагменты или производные фрагментов и тому подобное.
Физиологически активное соединение, используемое в настоящем изобретении, может использоваться как само, но так и в виде его фармацевтически приемлемой соли.
В качестве такой соли, когда вышеуказанное физиологически активное соединение имеет основную группу, такую как аминогруппа, входят соли с неорганическими кислотами (также называемые неорганическими свободными кислотами) (например, карбоновая кислота, бикарбоновая кислота, соляная кислота, серная кислота, азотная кислота, борная кислота и тому подобное) и с органическими кислотами (также называемые органическими свободными кислотами) (например, янтарная кислота, уксусная кислота, пропионовая кислота, трифторуксусная кислота и тому подобное) и тому подобное.
Когда физиологически активное соединение имеет кислотную группу, такую как карбоксильная группа и тому подобное, то в перечень входят соли с неорганическими основаниями (также называемые неорганическими свободными основаниями) (например, щелочные металлы, такие как натрий, калий и тому подобное, щелочно-земельные металлы, такие как кальций, магний и тому подобное) и с органическими основаниями (также называемые органическими свободными основаниями) (например, органические амины, такие как триэтиламин, и тому подобное, основные аминокислоты, такие как аргинин, и тому подобное) и тому подобное. Физиологически активный пептид может образовать комплексное соединение с металлом (например, комплекс с медью, комплекс с цинком и тому подобное).
В качестве примеров предпочтительными физиологически активными пептидами являются производные LH-RH или его соли, эффективные при зависимых от гормонов заболеваниях, в частности, при зависимых от половых гормонов опухолях (например, раке простаты, раке матки, раке молочной железы, опухоли гипофиза и тому подобное), зависимых от половых гормонов заболеваниях, таких как гиперплазия простаты, эндометриоз, миома матки, преждевременное половое созревание, дисменорея, аменорея, предменструальный синдром, синдром ячеистого яичника и тому подобное, и при контрацепции (или реактивного действия после отмены препаратов, бесплодия), рецидиве рака молочной железы после операции по поводу рака молочной железы в период пременопаузы. Также в перечень входят производные LH-RH и его соли, эффективные при доброкачественных или злокачественных опухолях, чувствительных к LH-RH, но независимых от половых гормонов.
Конкретные примеры производных LH-RH и его солей включают пептиды, описанные в Treatment with GnRH analogs: Controversies and perspectives [published by The Parthenon Publishing Group Ltd., 1996], национальной публикации заявки на патент Японии (не прошедшей экспертизу) № 3-503165 и патентах Японии №№ А-3-101695, 7-97334 и 8-259460 и тому подобное.
В качестве производного LH-RH в перечень входят агонист LH-RH и антагонист LH-RH, и в качестве антагониста LH-RH используют, например, физиологически активные пептиды общей формулы [I]:
X-D2Nal-D4ClPhe-D3Pal-Ser-A-B-Leu-C-Pro-DAlaNH2
[в которой соответственно Х представляет N(4H2-фуроил)Gly или NAc, A представляет остаток, выбранный из NMeTyr, Tyr, Aph(Atz) и NMeAph(Atz), B представляет остаток, выбранный из DLys(Nic), DCit, DLys(AzaglyNic), DLys(AzaglyFur), DhArg(Et2), DAph(Atz) и DhCi, и С представляет Lys(Nisp), Arg или hArg(Et2)] или их соли и тому подобное.
В качестве агониста LH-RH используют, например, физиологически активные пептиды общей формулы [II]:
5-oxo-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-Y-Leu-Arg-Pro-Z
[в которой соответственно Y представляет остаток, выбранный из DLeu, DAla, DTrp, DSer(tBu), D2Nal и DHis(ImBzl), и Z представляет NH-C2H5 или Gly-NH2] или их соли и тому подобное. В частности, подходящим является пептид, в котором Y представляет DLeu, и Z представляет NH-C2H5 (т.е. пептид А представляет 5-oxo-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-DLeu-Leu-Arg-Pro-NH-C2H5; лейпролин) или его соли (например, ацетат).
Данные пептиды можно получить способами, описанными в вышеуказанной литературе или публикациях, или соответствующими способами.
Используемые в данном описании сокращения имеют следующие значения:
Когда с помощью сокращений представлены другие аминокислоты, то они основаны на сокращениях Комиссии по биохимической номенклатуре IUPAC-IUB (European Journal of Biochemistry), vol. 138, pp. 9-37 (1984) и обычных сокращениях, принятых в данной области, а также когда аминокислоты имеют оптические изомеры, то они находятся в форме L-аминокислот, если не указано иначе.
Оксинафтойную кислоту, используемую в настоящем изобретении, получают связыванием одной гидроксильной группы и одной карбоксильной группы с различными атомами углерода в нафталине. Следовательно, в целом существует 14 изомеров, которые различаются по положению гидроксильной группы по отношению к карбоксильным группам, находящимся в 1-ом положении и 2-ом положении нафталинового кольца. Из них можно использовать любой изомер, и также можно использовать их смесь в любом соотношении. Как описано далее, предпочтительными являются таковые, имеющие высокие значения константы диссоциации кислоты, или таковые, имеющие низкие значения pKa (pKa=-log10Ka, Ka представляет константу диссоциации кислоты). Предпочтительными являются таковые, имеющие низкую растворимость в воде.
Кроме того, предпочтительными являются таковые, которые растворяются в спиртах (например, этаноле, метаноле и тому подобное). Термин «растворимая в спиртах» означает, что растворимость в метаноле составляет 10 г/л или выше.
Что касается pKa вышеуказанных изомеров оксинафтойной кислоты, то это значение известно только для 3-окси-2-нафтойной кислоты (pKa=2,708, Chemical Handbook, Basic II, The Chemical Society of Japan, published on September 25, 1969), однако полезные сведения можно получить при сравнении значений pKa для трех изомеров оксибензойной кислоты. То есть значения pKa для м-оксибензойной кислоты и п-оксибензойной кислоты составляют 4 или выше, в то время как pKa о-оксибензойной кислоты (салициловой кислоты) является очень низким (= 2,754). Следовательно, из вышеуказанных 14 изомеров 3-окси-2-нафтойная кислота, 1-окси-2-нафтойная кислота и 2-окси-1-нафтойная кислота, в которых карбоксильная группа и гидроксильная группа находятся при смежных атомах углерода в нафталиновом кольце, являются предпочтительными. Кроме того, подходящей является 3-окси-2-нафтойная кислота, в которой гидроксильная группа находится при углероде в 3-ом положении нафталина, и карбоксильная группа находится при углероде во 2-ом положении.
Оксинафтойная кислота может быть в виде соли. Примерами таких солей являются соли с неорганическими основаниями (например, щелочных металлов, таких как натрий, калий и тому подобное, щелочно-земельных металлов, таких как кальций, магний и тому подобное) и с органическими основаниями (например, органических аминов, таких как триэтиламин и тому подобное, основных аминокислот, таких как аргинин и тому подобное) и тому подобное, или соли и комплексные соли с переходными металлами (например, цинком, железом, медью и тому подобное) и тому подобное.
Пример способа получения оксинафтоата, который представляет физиологически активным соединением, приводится ниже.
1) Раствор оксинафтойной кислоты в содержащем воду органическом растворителе пропускают через слабую основную ионообменную колонку для адсорбции и насыщают. Затем избыток оксинафтойной кислоты удаляют пропусканием через колонку содержащего воду органического растворителя, после чего проводят ионообмен с раствором физиологически активного соединения или его соли в содержащем воду органическом растворителе, и растворитель можно преимущественно удалить из полученного элюента. В качестве органического растворителя в данном содержащем воду органическом растворителе используют спирты (например, метанол, этанол и тому подобное), ацетонитрил, тетрагидрофуран, диметилформамид и тому подобное. В качестве метода удаления растворителя для осаждения соли можно использовать методы, известные сами по себе, или соответствующие методы. Например, в перечень входит метод выпаривания растворителя при одновременном контроле глубины вакуума с использованием роторного испарителя и тому подобное и другие методы.
2) Предварительно проводят ионообмен на сильной основной колонке для ионообменной хроматографии на гидроксильный ион и раствор физиологически активного соединения или его соли в содержащем воду органическом растворителе пропускают через эту колонку для превращения основной группы в группу гидроксильного типа. Добавляют оксинафтойную кислоту не более чем в эквивалентном количестве и растворяют в полученном элюенте, после чего раствор концентрируют для осаждения соли, которую, если необходимо, промывают водой и высушивают.
Полимер молочной кислоты, используемый в настоящем изобретении (в последующем в сокращенном виде полимер молочной кислоты по настоящему изобретению, в некоторых случаях) включает полимер, состоящий только из молочной кислоты, или сополимеры молочной кислоты и других мономеров (например, гликолевой кислоты и тому подобное) и, как правило, в котором содержание полимеров с молекулярной массой 5000 или ниже составляет примерно 5% по массе или ниже, предпочтительно содержание полимеров с молекулярной массой 5000 или ниже составляет примерно 5% или ниже, и содержание полимеров с молекулярной массой 3000 или ниже составляет примерно 1,5% по массе или ниже, еще более предпочтительно содержание полимеров с молекулярной массой 5000 или ниже составляет примерно 5 мас.% или ниже, содержание полимеров с молекулярной массой 3000 или ниже составляет примерно 1,5% по массе или ниже, и содержание полимеров с молекулярной массой 1000 или ниже составляет примерно 0,1% по массе или ниже.
Полимер молочной кислоты по настоящему изобретению имеет среднемассовую молекулярную массу, как правило, в пределах от 15000 до 50000, предпочтительно от 15000 до 30000, более предпочтительно от 17000 до 26000, наиболее предпочтительно от 17500 до 25500.
Кроме того, когда оксинафтойная кислота отсутствует в препарате с регулируемым высвобождением по настоящему изобретению, то полимер молочной кислоты по настоящему изобретению имеет среднемассовую молекулярную массу, как правило, от 15000 до 50000, предпочтительно от 15000 до 40000.
Полимер молочной кислоты с более высокой молекулярной массой, который представляет исходный материал для получения полимера молочной кислоты по настоящему изобретению, может быть промышленно доступным продуктом или полимером, полимеризованным известным методом, и имеет среднемассовую молекулярную массу, как правило, в пределах от 15000 до 500000, предпочтительно от 30000 до 100000. В качестве известного способа полимеризации можно упомянуть, например, способы, в которых молочную кислоту и, если необходимо, гликолевую кислоту полимеризуют конденсацией, например способ, в котором лактид и, если необходимо, вместе с гликолидом, полимеризуют с раскрытием цикла с использованием катализатора, такого как кислоты Льюиса или соли металлов, такие, например, как диэтилцинк, триэтилалюминий, октилат олова и тому подобное, способ, в котором лактид полимеризуют с раскрытием цикла в присутствии производного оксикарбоновой кислоты, в котором карбоксильная группа защищена, в вышеуказанном способе (например, международная публикация заявки на патент WO 00/35990 и тому подобное), кроме того, способ, в котором катализатор добавляют при нагревании к лактиду для индукции полимеризации с раскрытием цикла (например, J. Med. Chem., 16, 897 (1973) и тому подобное), например способ сополимеризации лактида с гликолидом, и другие способы.
В качестве способа полимеризации, в перечень входит полимеризация в массе, при которой лактид и тому подобное расплавляют и подвергают реакции полимеризации, и раствор для полимеризации, в котором растворен лактид и тому подобное, в подходящем растворителе подвергают реакции полимеризации, и среди прочих, с точки зрения промышленного производства, предпочтительно использовать полимер, полученный полимеризацией в растворе в качестве исходного соединения для полимера молочной кислоты по настоящему изобретению.
В качестве растворителя для растворения лактида в растворе для полимеризации, например, можно использовать ароматические углеводороды, такие как бензол, толуол, ксилол и тому подобное, декалин, диметилформамид и тому подобное.
Для гидролиза полимера молочной кислоты с более высокой молекулярной массой, полученного как описано выше, можно использовать метод гидролиза, известный сам по себе, например, преимущественно, чтобы полимер молочной кислоты с более высокой молекулярной массой растворили в подходящем растворителе, затем добавили воду и, если необходимо, кислоту для индукции реакции.
Преимущественно растворителем для растворения полимера молочной кислоты с более высокой молекулярной массой может быть таковой, способный растворять данный полимер в 10-кратном по массе или ниже количестве по отношению к полимеру молочной кислоты и, в частности, так же как галогенированные углеводороды, например хлороформ, дихлорметан и тому подобное, ароматические углеводороды, например, такие как толуол, о-ксилол, м-ксилол, п-ксилол и тому подобное, циклические эфиры, например, такие как тетрагидрофуран и тому подобное, ацетон, N,N-диметилформамид и тому подобное. Когда растворитель, который можно использовать при гидролизе полимера молочной кислоты, используют и при полимеризации полимера молочной кислоты с более высокой молекулярной массой, то полимеризацию и гидролиз можно проводить последовательно без выделения полимеризованного полимера молочной кислоты с более высокой молекулярной массой.
Используемое количество растворителя для растворения полимера молочной кислоты с более высокой молекулярной массой, как правило, составляет от 0,1- до 100-кратного, предпочтительно от 1- до 10-кратного по отношению к полимеру молочной кислоты, который представляет растворенное соединение.
Количество воды, которое следует добавить, как правило, составляет 0,001- до 1-кратного по массе, предпочтительно от 0,01- до 0,1-кратного по массе по отношению к полимеру молочной кислоты с более высокой молекулярной массой.
Что касается добавляемой кислоты, если это необходимо, то в перечень входят неорганические кислоты, например, такие как, соляная кислота, серная кислота, азотная кислота и тому подобное, органические кислоты, например, такие как молочная кислота, уксусная кислота, трифторуксусная кислота и тому подобное, и из перечисленных молочная кислота является предпочтительной.
Количество кислоты, которое следует добавить, как правило, составляет от 0- до 10-кратного по массе, предпочтительно от 0,1- до 1-кратного по массе по отношению к полимеру молочной кислоты с более высокой молекулярной массой.
Температура реакции при гидролизе обычно составляет от 0 до 150°С, предпочтительно от 20 до 80°С.
Время реакции гидролиза также различается в зависимости от среднемассовой молекулярной массы полимера молочной кислоты с более высокой молекулярной массой и температуры реакции и, как правило, составляет от 10 мин до 100 ч, предпочтительно от 1 ч до 20 ч.
О времени окончания гидролиза судят по среднемассовой молекулярной массе гидролизованного продукта. То есть при проведении гидролиза соответствующим образом отбирают пробы, определяют в пробе гельпроникающей хроматографией (ГПХ) среднемассовую молекулярную массу гидролизованного продукта и гидролиз останавливают, если подтверждается, что молекулярная масса составляет примерно от 15000 до 50000, предпочтительно примерно от 15000 до 30000, более предпочтительно примерно от 17000 до 26000, наиболее предпочтительно от 17500 до 25500.
Что касается способа осаждения содержащегося предназначаемого полимера молочной кислоты из раствора, содержащего гидролизованный продукт, полученный гидролизом полимера молочной кислоты с более высокой молекулярной массой, как описано выше, то в перечень входит способ, при котором раствору, содержащему данный гидролизованный продукт, предоставляют возможность контактировать с растворителем, способным осаждать предназначаемый полимер молочной кислоты, находящийся в нем, и другие методы.
В отношении предпочтительного варианта осуществления изобретения в качестве раствора, содержащего гидролизованный продукт, можно упомянуть таковые, полученные растворением примерно от 10 до 50 вес.% полимера молочной кислоты, имеющего среднемассовую молекулярную массу от 15000 до 50000, предпочтительно от 15000 до 30000, более предпочтительно от 17000 до 26000, наиболее предпочтительно от 17500 до 25500, в растворителе, способном растворять полимер молочной кислоты с более высокой молекулярной массой, таком как галогенированные углеводороды, например хлороформ, дихлорметан и тому подобное, ароматические углеводороды, например толуол, о-ксилол, м-ксилол, п-ксилол и тому подобное, циклические эфиры, например, такие как тетрагидрофуран и тому подобное, ацетон, N,N-диметилформамид, дихлорметан, ксилол и тому подобное. Когда оксинафтойная кислота отсутствует в композиции с регулируемым высвобождением по настоящему изобретению, то в перечень входят таковые, включающие примерно от 10 до 50 вес.% растворенных полимеров молочной кислоты, имеющих среднемассовую молекулярную массу от 15000 до 50000, предпочтительно от 15000 до 40000.
В качестве растворителя, который может осаждать предназначаемый полимер молочной кислоты, находящийся в растворе, содержащем гидролизованный продукт, можно перечислить спирты, например, такие как метанол, этанол и тому подобное, простые эфиры, например, такие как изопропиловый эфир и тому подобное, алифатические углеводороды, например, такие как гексан и тому подобное, воду и тому подобное.
Используемое количество растворителя, который может осаждать предназначаемый полимер молочной кислоты, как правило, составляет от 0,1- до 100-кратного по массе, предпочтительно от 1- до 10-кратного по массе по отношению к растворителю в содержащем гидролизованный продукт растворе.
В качестве предпочтительного конкретного примера комбинаций таких растворителей и их используемого количества можно упомянуть, например, воплощение, в котором к содержащему гидролизованный продукт раствору, где в качестве растворителя используют дихлорметан в 1-5-кратном количестве к массе растворенного вещества, добавляют изопропиловый эфир в качестве растворителя для снижения растворимости в 2-10-кратном количестве к массе дихлорметана, и другие воплощения.
Температура растворителя, который может осаждать предназначаемое растворенное вещество, полимер молочной кислоты, во время контактирования с содержащим гидролизованный продукт раствором, обычно находится в пределах от -20 до 60°С, предпочтительно от 0 до 40°С, и температура содержащего гидролизованный продукт раствора обычно равняется от 0 до 40°С, предпочтительно от 10 до 30°С.
Что касается способа контактирования растворителя с содержащим гидролизованный продукт раствором, то применяют способ, при котором содержащий гидролизованный продукт раствор вносят целиком и сразу же в растворитель, способ, при котором содержащий гидролизованный продукт раствор вносят по каплям в растворитель, способ, при котором растворитель вносят целиком и сразу же в содержащий гидролизованный продукт раствор, способ, при котором растворитель вносят по каплям в содержащий гидролизованный продукт раствор и тому подобное.
Полимер молочной кислоты по настоящему изобретению, полученный, как описано выше, является подходящим в качестве основы для композиции с регулируемым высвобождением, поскольку количество концевых карбоксильных групп находится в пределах, подходящих для основы для композиции с регулируемым высвобождением.
Относительное массовое содержание физиологически активного соединения в композиции по настоящему изобретению различается в зависимости от вида физиологически активного соединения, желаемого фармацевтического действия, продолжительности действия и тому подобное, и в случае физиологически активного пептида или его соли составляет примерно от 0,001 до примерно 50% по массе, предпочтительно примерно от 0,02 до примерно 40% по массе, более предпочтительно примерно от 0,1 до примерно 30% по массе, более предпочтительно примерно от 0,1 до примерно 24% по массе, наиболее предпочтительно примерно от 3 до примерно 24% по массе, и в случае физиологически активного соединения или его соли, не относящегося к пептидам, составляет примерно от 0,01 до примерно 80% по массе, предпочтительно примерно от 0,1 до примерно 50% по массе, к массе всей композиции.
Относительное массовое содержание физиологически активного соединения в композиции по настоящему изобретению, содержащей оксинафтойную кислоту или ее соль, изменяется в зависимости от вида физиологически активного соединения, желаемого фармацевтического действия, продолжительности действия и тому подобное, и в случае композиции с регулируемым высвобождением, содержащей физиологически активное соединение или его соль, оксинафтойную кислоту или ее соль и полимер молочной кислоты или ее соли, относительное массовое содержание составляет в случае физиологически активного пептида или его соли, примерно от 0,001 до примерно 50% по массе, предпочтительно примерно от 0,02 до примерно 40% по массе, более предпочтительно примерно от 0,1 до примерно 30% по массе, наиболее предпочтительно примерно от 14 до примерно 24% по массе и в случае физиологически активного соединения или его соли, не относящегося к пептидам, составляет примерно от 0,01 до примерно 80% по массе, предпочтительно примерно от 0,1 до примерно 50% по массе, к суммарной массе трех компонентов.
Даже если в состав композиции входит оксинафтоат, который представляет физиологически активное соединение, то используется то же самое массовое соотношение. В случае композиции с регулируемым высвобождением, содержащей соль физиологически активного пептида (условно называемого (А)) и оксинафтойную кислоту (условно называемую (В)), относительное массовое содержание (А) обычно составляет примерно от 5 до примерно 90% по массе, предпочтительно примерно от 10 до примерно 85% по массе, более предпочтительно примерно от 15 до примерно 80% по массе, наиболее предпочтительно примерно от 30 до примерно 80% по массе к массе соли (А) и (В).
В случае композиции с регулируемым высвобождением, содержащей физиологически активное соединение или его соль, оксинафтойную кислоту или ее соль и полимер молочной кислоты или ее соли, входящее в состав количество оксинафтойной кислоты или ее соли, находится в пределах примерно от 1/2 до примерно 2 моль, примерно от 3/4 до примерно 4/3 моль, наиболее предпочтительно примерно от 4/5 до примерно 6/5 моль на один моль физиологически активного соединения или его соли.
Воплощение композиции по настоящему изобретению будет описано ниже на примере композиции с регулируемым высвобождением, содержащей физиологически активное соединение, оксинафтойную кислоту и полимер молочной кислоты, в которой физиологически активное соединение имеет основные свойства. В данном случае физиологически активное соединение в виде основания и оксинафтойная кислота в виде кислоты находятся в композиции вместе, и в другом случае соединяются в композиции в виде свободных соединений или в еще одном случае соединяются в композиции в виде соли, и равновесие диссоциации в каждом случае удовлетворяется в водных условиях или в присутствии небольшого количества воды на определенной точке получения композиции. Поскольку соль, образованная оксинафтойной кислотой, слабо растворима в воде и полагается, что физиологически активное соединение слабо растворимо в воде, хотя и с вариациями в зависимости от свойств физиологически активного соединения, то равновесие диссоциации сдвигается в сторону образования такой слаборастворимой в воде соли.
Для получения композиции, содержащей основное физиологически активное соединение в высокой концентрации, желательно, чтобы большинство физиологически активных соединений было протонировано с получением вышеуказанной слаборастворимой в воде соли, с точки зрения вышеуказанного равновесия диссоциации. Для этой цели желательно соединить, по меньшей мере, физиологически активное соединение или его соль с примерно эквивалентным количеством оксинафтойной кислоты или ее соли.
Далее, механизм регулируемого высвобождения физиологически активного соединения, находящегося в композиции, будет описан ниже. В вышеуказанной композиции большинство физиологически активных соединений протонировано и находится в присутствии противоионов. Большую часть противоионов представляет оксинафтойная кислота (предпочтительно оксинафтойная кислота). После введения композиции в организм образуются олигомеры и мономеры за счет разрушения полимера молочной кислоты, однако когда полимер представляет полимер молочной кислоты-гликолевой кислоты, то образующийся олигомер (олигомер молочной кислоты-гликолевой кислоты) и мономер (молочная кислота или гликолевая кислота) обязательно имеют одну карбоксильную группу, которая также может представлять собой противоион физиологически активного соединения. Высвобождение физиологически активного соединения не сопровождается передвижением электрического заряда, т.е., оно высвобождается в виде соли, сохраняющей противоион, и в качестве примера подвижных противоионов можно привести оксинафтойную кислоту, олигомер молочной кислоты-гликолевой кислоты (такая молекулярная масса способствует передвижению) и мономер (молочную кислоту или гликолевую кислоту), как описано выше.
Когда много кислот находятся вместе, то в основном превалирует образование сильной кислой соли, хотя различия имеются в зависимости от соотношения композиции. Касательно значения pKa оксинафтойной кислоты, то, например, 3-окси-2-нафтойная кислота имеет pKa, равное 2,708 (CHEMICAL HANDBOOK, BASIC BOOK II, The Chemical Society of Japan, published on September 25, 1969). С другой стороны, несмотря на то что pKa карбоксильной группы олигомера молочной кислоты-гликолевой кислоты остается неизвестным, его можно рассчитать, основываясь на значении pKa молочной кислоты или гликолевой кислоты (=3,86 или 3,83) по принципу, что «изменение свободной энергии при введении заместителя может приближаться к аддитивному закону». Был установлен вклад заместителя в константу диссоциации (таблица 4.1. в "pKa Prediction for Organic Acid and Bases", D.D.Perrin, B.Dempsey and E.P.Serjeant, 1981). Поскольку значения pKa для гидроксильной группы и эфирной связи соответственно равняются:
Δ pKa (ОН) = -0,90 и
Δ pKa (эфирная связь) = -1,7,
то pKa карбоксильной группы олигомера молочной кислоты-гликолевой кислоты рассчитывается с учетом вклада эфирной связи, самой близкой к группе диссоциации следующим образом: pKa = pKa (молочная кислота или гликолевая кислота) - Δ pKa (ОН) + Δ pKa (эфирная связь) = 3,06 или 3,03. В результате, поскольку оксинафтойная кислота является более сильной кислотой, чем молочная кислота (pKa = 3,86), гликолевая кислота (pKa = 3,83) и, кроме того, олигомер молочной кислоты-гликолевой кислоты, предполагается, что в вышеуказанной композиции преобладает образование оксинафтойной кислоты и физиологически активного соединения и свойства этой соли в основном и определяют свойство контролируемого высвобождения физиологически активного соединения для композиции. Что касается вышеуказанного физиологически активного соединения, то к ним можно отнести уже перечисленные вышеуказанные физиологически активные соединения и тому подобное.
В данном случае образуется соль оксинафтойной кислоты и физиологически активного соединения, которая слабо растворима в воде, но не является полностью нерастворимой в воде, что оказывает влияние на механизм регулируемого высвобождения. То есть с учетом вышеуказанной константы диссоциации кислоты соль оксинафтойной кислоты, которая является более сильной кислотой, чем вышеупомянутый олигомер молочной кислоты-гликолевой кислоты, и мономер в начале высвобождения в основном находится в виде гидролизуемой соли физиологически активного соединения, и в результате растворимость и распределение соли в тканях становятся определяющими факторами скорости высвобождения физиологически активного соединения, следовательно, первоначальный характер высвобождения препарата можно регулировать входящим в состав композиции количеством оксинафтойной кислоты. Затем при уменьшении количества оксинафтойной кислоты и увеличении количества олигомеров и мономеров, образующихся при гидролизе полимера молочной кислоты, механизм высвобождения физиологически активного соединения, имеющего олигомер и мономер в качестве противоионов, постепенно становится доминирующим, и даже если оксинафтойная кислота в основном исчезает из «композиции», то высвобождение стабильного физиологически активного соединения сохраняется. Кроме того, таким же образом можно объяснить повышение эффективности включения физиологически активного соединения при получении композиции с регулируемым высвобождением и способность подавления первоначального интенсивного высвобождения сразу же после введения включенного физиологически активного соединения.
Роль оксинафтойной кислоты в композиции с регулируемым высвобождением, содержащей оксинафтоат физиологически активного пептида, также может быть объяснена вышеуказанным механизмом.
Термин «нерастворимость в воде» в данном описании означает случай, когда вышеуказанное соединение перемешивают при температуре 40°С или ниже в дистиллированной воде в течение 4 ч, и масса соединения, растворенного в 1 л данного раствора, составляет 25 мг или ниже.
Термин «низкая растворимость в воде» в данном описании означает случай, когда вышеуказанная масса составляет более 25 мг и 5 г или ниже. Когда вышеуказанное соединение представляет соль физиологически активного соединения, то масса физиологически активного соединения, растворенного при вышеуказанной операции, используется для вышеуказанного определения.
Несмотря на то что форма композиции с регулируемым высвобождением особым образом не ограничивается в данном описании, предпочтительной является форма мелких частиц и форма микросфер (также называемых микрокапсулами в случае композиции с регулируемым высвобождением, содержащей полимер молочной кислоты) является особенно предпочтительной. Термин микросферы означает инъекционные мелкие частицы в виде сфер, которые можно диспергировать в растворе. Можно провести контроль формы, например, с помощью сканирующего электронного микроскопа.
Способ получения композиции с регулируемым высвобождением (например, микрокапсул), содержащей физиологически активное соединение или его соль по настоящему изобретению и полимер молочной кислоты или ее соли по настоящему изобретению приводится ниже.
В последующем способе получения можно добавить, если необходимо, удерживающие средства (например, желатин, салициловую кислоту и тому подобное) методом, известным per se.
(I) СПОСОБ ВЫСУШИВАНИЯ В ВОДЕ
(i) Способ с эмульсией М/В
В данном способе вначале получают раствор полимера молочной кислоты по настоящему изобретению в органическом растворителе (ниже описан как биоразлагаемый полимер по настоящему изобретению в некоторых случаях). Органический растворитель, используемый для получения композиции с регулируемым высвобождением по настоящему изобретению, имеет точку кипения предпочтительно 120°С или ниже.
В качестве органического растворителя используют, например, галогенированные углеводороды (например, дихлорметан, хлороформ, дихлорэтан, трихлорэтан, четыреххлористый углерод и тому подобное), простые эфиры (например, этиловый эфир, изопропиловый эфир и тому подобное), эфиры жирных кислот (например, этилацетат, бутилацетат и тому подобное), ароматические углеводороды (например, бензол, толуол, ксилол и тому подобное), спирты (например, этанол, метанол и тому подобное), ацетонитрил и тому подобное. Из них предпочтительными являются галогенированные углеводороды и особенно подходящим является дихлорметан. Их можно использовать в смеси в соответствующей пропорции. В данном случае предпочтительными являются смешанные растворы галогенированных углеводородов и спиртов и, в частности, наиболее подходит смешанный раствор дихлорметана и этанола.
Концентрация биоразлагаемого полимера по настоящему изобретению в растворе в органическом растворителе варьирует в зависимости от молекулярной массы биоразлагаемого полимера по настоящему изобретению и вида органического растворителя, и когда, например, в качестве органического растворителя используется дихлорметан, то концентрация, как правило, составляет примерно от 0,5 до примерно 70% по массе, более предпочтительно от 1 до примерно 60% по массе, наиболее предпочтительно примерно от 2 до примерно 50% по массе.
Когда в качестве органического растворителя используется этанол в смеси с дихлорметаном, то соотношение двух растворителей обычно составляет примерно от 0,01 до примерно 50% (об./об.), более предпочтительно примерно от 0,05 до примерно 40% (об./об.), наиболее предпочтительно примерно от 0,1 до примерно 30% (об./об.).
В раствор в органическом растворителе биоразлагаемого полимера по настоящему изобретению, полученный таким образом, добавляют физиологически активное соединение и растворяют или диспергируют его. В данной операции добавляемое количество физиологически активного соединения контролируют таким образом, чтобы верхний предел весового отношения физиологически активного соединения к биоразлагаемому полимеру по настоящему изобретению составлял примерно до 1:1, предпочтительно примерно до 1:2.
Затем полученный раствор в органическом растворителе, содержащий композицию, включающую физиологически активное соединение или его соль и биоразлагаемый полимер по настоящему изобретению, добавляют в водную фазу с образованием эмульсии М(масляная фаза)/В(водная фаза), затем растворитель в масляной фазе выпаривают с получением микрокапсул. Объем водной фазы в данном случае обычно равняется примерно от 1-кратного до 10000-кратного, более предпочтительно примерно от 5-кратного до примерно 5000-кратного, наиболее предпочтительно примерно от 10-кратного до примерно 2000-кратного по отношению к объему масляной фазы.
В вышеуказанную внешнюю водную фазу можно добавить эмульгатор. Эмульгатор может быть любым соединением при условии, что оно, как правило, образует стабильную эмульсию М/В. В частности, используют анионогенные поверхностно-активные вещества (олеат натрия, стеарат натрия, лаурилсульфат натрия и тому подобное), неионогенные поверхностно-активные вещества (эфиры полиоксиэтиленсорбитана [Твин-80, Твин-60 производства Atlas Powder] и тому подобное), производные полиоксиэтилированного касторового масла [HCO-60, HCO-50 производства NIKKO Chemicals K.K.], поливинилпирролидон, поливиниловый спирт, карбоксиметилцелюлозу, лецитин, желатин, гиалуроновую кислоту и тому подобное. Можно использовать одно из них или несколько из них в комбинации. Используемая концентрация предпочтительно находится в пределах примерно от 0,01 до 10% по массе, более предпочтительно в пределах примерно от 0,05 до примерно 5% по массе.
В вышеуказанную внешнюю водную фазу можно добавить агент, контролирующий осмотическое давление. Контролирующий осмотическое давление агент может быть полезным при условии, что он поддерживает осмотическое давление при внесении в водный раствор.
В качестве агента, контролирующего осмотическое давление, используют, например, многоатомные спирты, одноатомные спирты, моносахариды, дисахариды, олигосахариды и аминокислоты и их производные и тому подобное.
В качестве вышеуказанных многоатомных спиртов используют, например, трехатомные спирты, такие как глицерин и тому подобное, пятиатомные спирты, такие как арабит, ксилит, адонит и тому подобное, шестиатомные спирты, такие как маннит, сорбит, дульцит и тому подобное, и другие спирты. Из них предпочтительными являются шестиатомные спирты, и, в частности, подходящим является маннит.
В качестве вышеуказанных одноатомных спиртов в перечень входят, например, метанол, этанол, изопропиловый спирт и тому подобное, и из них предпочтительным является этанол.
В качестве вышеуказанных моносахаридов используют, например, пентозы, такие как арабиноза, ксилоза, рибоза, 2-дезоксирибоза и тому подобное, и гексозы, такие как глюкоза, фруктоза, галактоза, манноза, сорбоза, рамноза, фукоза и тому подобное, предпочтительными из которых являются гексозы.
В качестве вышеуказанных олигосахаридов используют, например, триозы, такие как мальтотриоза, рафиноза и тому подобное, тетрозы, такие как стахиоза и тому подобное, и из них предпочтительными являются триозы.
В качестве производных вышеуказанных моносахаридов, дисахаридов и олигосахаридов используют, например, глюкозамин, галактозамин, глюкуроновую кислоту, галактуроновую кислоту и тому подобное.
Можно использовать любую из вышеуказанных аминокислот при условии, что они являются L-аминокислотами, которыми, например являются глицин, лейцин, аргинин и тому подобное. Из них предпочтительным является L-аргинин.
Данные агенты, контролирующие осмотическое давление, можно использовать одни или в смеси.
Указанные агенты, контролирующие осмотическое давление, используются в таких концентрациях, чтобы осмотическое давление внешней водной фазы равнялось примерно от 1/50- до примерно 5-кратного, предпочтительно примерно от 1/25- до примерно 3-кратного по отношению к осмотическому давлению физиологического раствора. Когда в качестве контролирующего осмотическое давление агента используют маннит, то его концентрация предпочтительно составляет от 0,5 до 1,5%.
В качестве метода удаления органического растворителя используют известный метод или соответствующий метод. Например, можно перечислить метод, в котором органический растворитель выпаривают при одновременном перемешивании с помощью мешалки пропеллерного типа или магнитной мешалки или тому подобное при нормальном давлении или постепенно уменьшающемся пониженном давлении, метод, в котором органический растворитель выпаривают при одновременном контроле глубины вакуума с использованием роторного испарителя и тому подобное, и другие методы.
Полученные таким образом микрокапсулы отделяют центрифугированием или фильтрованием, затем прилипшие к поверхности микрокапсул свободное физиологически активное соединение, эмульгатор и тому подобное отмывают несколько раз дистиллированной водой, вновь диспергируют в дистиллированной воде и тому подобное и сушат вымораживанием.
В способ получения можно добавить агент, предотвращающий коагуляцию, для предупреждения коагуляции частиц друг с другом. В качестве агента, предотвращающего коагуляцию, используют водорастворимые полисахариды, такие как маннит, лактоза, глюкоза, крахмалы (например, кукурузный крахмал и тому подобное) и тому подобное, аминокислоты, такие как глицин и тому подобное, белки, такие как фибрин, коллаген и тому подобное. Из них маннит является наиболее подходящим.
Добавляемое количество агента, предотвращающего коагуляцию, такого как маннит и тому подобное, обычно находится в пределах примерно от 0 до 24% по массе к общей массе микрокапсул.
После высушивания вымораживанием, если необходимо, воду и органический растворитель в микрокапсулах можно удалить нагреванием в условиях, не вызывающих слипания микрокапсул друг с другом, при пониженном давлении. Предпочтительно микрокапсулы нагревают при температуре около или несколько выше промежуточной точки стеклования биоразлагаемого полимера при определении с помощью дифференциального сканирующего калориметра в условиях возрастания температуры со скоростью 10-20°С в минуту. Более предпочтительно, когда нагревание проводят при температуре около промежуточной точки стеклования биоразлагаемого полимера или в пределах от промежуточной точки его стеклования до температуры примерно на 30°С выше промежуточной точки его стеклования. В частности, когда в качестве биоразлагаемого полимера используется полимер молочной кислоты-гликолевой кислоты, то нагревание предпочтительно проводят при температуре в пределах примерно от промежуточной точки стеклования до температуры на 10°С выше промежуточной точки стеклования, более предпочтительно при температуре в пределах примерно от промежуточной точки стеклования до температуры на 5°С выше промежуточной точки стеклования.
Несмотря на то что время нагревания варьирует в зависимости от количества микрокапсул и тому подобное, оно составляет примерно от 12 ч до примерно 168 ч, предпочтительно примерно от 24 ч до примерно 120 ч, более предпочтительно примерно от 48 ч до примерно 96 ч, после того как сами микрокапсулы нагреваются до данной температуры.
Метод нагревания особым образом не ограничивается при условии, что микрокапсулы можно однородно нагреть.
В качестве метода высушивания при нагревании используют, например, метод высушивания при нагревании в камере с постоянной температурой, в камере с псевдоожиженным слоем, движущейся камере или сушильной печи, метод высушивания при нагревании микроволнами и тому подобное. Из них предпочтительным является метод высушивания при нагревании в камере с постоянной температурой.
(ii) Способ с эмульсией В/М/В
Вначале получают раствор биоразлагаемого полимера по настоящему изобретению в органическом растворителе.
В качестве органического растворителя используют, например, галогенированные углеводороды (например, дихлорметан, хлороформ, дихлорэтан, трихлорэтан, четыреххлористый углерод и тому подобное), простые эфиры (например, этиловый эфир, изопропиловый эфир и тому подобное), эфиры жирных кислот (например, этилацетат, бутилацетат и тому подобное), ароматические углеводороды (например, бензол, толуол, ксилол и тому подобное), спирты (например, этанол, метанол и тому подобное), ацетонитрил и тому подобное. Из них предпочтительными являются галогенированные углеводороды, и особенно подходящим является дихлорметан. Их можно использовать в смеси в соответствующей пропорции. В данном случае предпочтительными являются смешанные растворы галогенированных углеводородов и спиртов, в частности, наиболее подходящим является смешанный раствор дихлорметана и этанола.
Концентрация биоразлагаемого полимера по настоящему изобретению в растворе в органическом растворителе варьирует в зависимости от его молекулярной массы и вида органического растворителя, и когда в качестве органического растворителя используется, например, дихлорметан, то концентрация, как правило, составляет примерно от 0,5 до примерно 70% по массе, более предпочтительно примерно от 1 до примерно 60% по массе, наиболее предпочтительно примерно от 2 до примерно 50% по массе.
Затем раствор физиологически активного соединения или его соли [в качестве растворителя, вода, смешанный раствор воды и спиртов (например, метанола, этанола и тому подобное)] добавляют к раствору в органическом растворителе (масляная фаза) биоразлагаемого полимера по настоящему изобретению. Данную смесь эмульгируют известным методом в гомогенизаторе или обработкой ультразвуком и тому подобное, с образованием эмульсии В/М.
Объем масляной фазы, которую следует смешать, составляет от примерно 1- до примерно 1000-кратного, предпочтительно от 2- до 100-кратного, более предпочтительно примерно от 3- до 10-кратного по отношению к объему внутренней водной фазы.
Пределы вязкости полученной эмульсии В/М, как правило, составляют примерно от 10 до 10000 сантипуаз, предпочтительно примерно от 100 до примерно 5000 сантипуаз, наиболее предпочтительно примерно от 500 до 2000 сантипуаз при температуре от 12°С до 25°С.
Затем полученную эмульсию В/М, состоящую из физиологически активного соединения и биоразлагаемого полимера по настоящему изобретению, добавляют в водную фазу с образованием эмульсии В(внутренняя водная фаза)/М(масляная фаза)/В(внешняя водная фаза), затем растворитель в масляной фазе выпаривают с получением микрокапсул. В данной операции объем внешней водной фазы, как правило, составляет примерно от 1-кратного до примерно 10000-кратного, более предпочтительно примерно от 5-кратного до примерно 5000-кратного, наиболее предпочтительно примерно от 10-кратного до примерно 2000-кратного по отношению к объему масляной фазы.
Во внешнюю водную фазу можно добавить вышеуказанный эмульгатор, агент, контролирующий осмотическое давление, и последующий способ получения является аналогичным описанному в разделе (I)(i).
(II) СПОСОБ РАЗДЕЛЕНИЯ ФАЗ
Когда микрокапсулы получают данным способом, то постепенно добавляют агент для коацервации при одновременном перемешивании в раствор в органическом растворителе, содержащий композицию, состоящую из физиологически активного соединения, описанного в разделе (I) в способе высушивания в воде, и биоразлагаемого полимера по настоящему изобретению, для осаждения и затвердевания микрокапсул. Количество агента для коацервации составляет примерно от 0,01- до примерно 1000-кратного, предпочтительно примерно от 0,05- до примерно 500-кратного, наиболее предпочтительно примерно от 0,1- до примерно 200-кратного по отношению к объему масляной фазы.
Агент для коацервации особым образом не ограничивается при условии, что он выбран из соединений на основе полимеров, минерального масла или растительного масла, которые смешиваются с органическим растворителем и не растворяют биоразлагаемый полимер по настоящему изобретению. В частности, используют, например, силиконовое масло, кунжутное масло, соевое масло, кукурузное масло, масло семян хлопчатника, кокосовое масло, льняное масло, минеральное масло, н-гексан, н-гептан и тому подобное. Их можно использовать в виде смеси двух или более агентов.
Полученные таким образом микрокапсулы выделяют, затем несколько раз промывают гептаном для удаления агента для коацервации и тому подобное, но не композицию, состоящую из физиологически активного соединения и биоразлагаемого полимера по настоящему изобретению, и остаток высушивают при пониженном давлении. Альтернативно промывание проводят таким же образом, как описано в разделе (I)(i) в вышеуказанном способе высушивания в воде, затем высушивают вымораживанием, далее высушивают при нагревании.
(III) СПОСОБ ВЫСУШИВАНИЯ РАСПЫЛЕНИЕМ
Для получения микрокапсул данным способом раствор в органическом растворителе или дисперсию, содержащие композицию, состоящую из биоразлагаемого полимера по настоящему изобретению и физиологически активного соединения, описанного в разделе (I) в вышеуказанном способе высушивания в воде, распыляют в сушильной камере распылительной сушки (устройство для высушивания распылением) с использованием распылительного сопла, и органический растворитель в микронизированных жидких каплях выпаривают в течение очень короткого периода времени с получением микрокапсул. В качестве такого распылительного сопла можно использовать сопло с двумя жидкостями, сопло высокого давления и ротационное дисковое сопло и тому подобное. После этого, если необходимо, можно провести промывание таким образом, как в вышеуказанном способе высушивания в воде (I), затем высушивают вымораживанием, далее высушивают при нагревании.
Касательно иной формы агента, чем вышеуказанные микрокапсулы, раствор в органическом растворителе или дисперсия, содержащие композицию, состоящую из физиологически активного соединения, описанного в способе высушивания в воде в способе получения микрокапсул (I), и биоразлагаемого полимера по настоящему изобретению, можно высушить до твердого состояния выпариванием органического растворителя или воды при одновременной регуляции глубины вакуума с использованием роторного испарителя, затем размельчить с помощью струйной мельницы и тому подобное с получением мелких частиц (микрочастиц).
Затем мелко измельченные частицы можно промыть таким же образом, как описано в способе высушивания в воде в способе получения микрокапсул (I), затем высушить вымораживанием, далее высушить при нагревании.
Способ получения композиции с регулируемым высвобождением (например, микрокапсул), содержащей физиологически активное соединение или его соль по настоящему изобретению, оксинафтойную кислоту или ее соль и полимер молочной кислоты или ее соли по настоящему изобретению, приводится ниже, однако в случае без включения оксинафтойной кислоты получение можно проводить таким же образом.
(I) СПОСОБ ВЫСУШИВАНИЯ В ВОДЕ
(i) Способ с эмульсией М/В
В данном способе вначале готовят раствор оксинафтойной кислоты или ее соли и полимера молочной кислоты или ее соли в органическом растворителе. Органический растворитель, используемый при получении композиции с регулируемым высвобождением по настоящему изобретению, имеет точку кипения предпочтительно 120°С или ниже.
В качестве органического растворителя используют, например, галогенированные углеводороды (например, дихлорметан, хлороформ, дихлорэтан, трихлорэтан, четыреххлористый углерод и тому подобное), простые эфиры (например, этиловый эфир, изопропиловый эфир и тому подобное), эфиры жирных кислот (например, этилацетат, бутилацетат и тому подобное), ароматические углеводороды (например, бензол, толуол, ксилол и тому подобное), спирты (например, этанол, метанол и тому подобное), ацетонитрил и тому подобное. В качестве органического растворителя для полимера молочной кислоты или ее соли, особенно подходящим является дихлорметан.
В качестве органического растворителя для оксинафтойной кислоты или ее соли предпочтительными являются спирты. Их можно растворить по отдельности перед смешиванием или два соединения можно растворить в органическом растворителе, смешанном в подходящей пропорции. Из них предпочтительными являются смешанные растворы галогенированных углеводородов и спиртов и, в частности, наиболее подходящим является смешанный раствор дихлорметана и этанола.
Когда в качестве органического растворителя используется этанол в смеси с дихлорметаном, то содержание этанола в смешанном органическом растворителе из дихлорметана и этанола, как правило, составляет примерно от 0,01 до примерно 50% (об./об.), более предпочтительно примерно от 0,05 до примерно 40% (об./об.), наиболее предпочтительно примерно от 0,1 до примерно 30% (об./об.).
Концентрация полимера молочной кислоты в растворе в органическом растворителе варьирует в зависимости от молекулярной массы полимера молочной кислоты и вида органического растворителя, и когда в качестве органического растворителя используют, например, дихлорметан, то концентрация обычно составляет примерно от 0,5 до примерно 70% по массе, более предпочтительно примерно от 1 до примерно 60% по массе, наиболее предпочтительно примерно от 2 до примерно 50% по массе.
Концентрация оксинафтойной кислоты или ее соли в органическом растворителе составляет, в случае когда в качестве органического растворителя используют смесь дихлорметана и этанола, как правило, примерно от 0,01 до примерно 10% по массе, более предпочтительно примерно от 0,1 до примерно 5% по массе, наиболее предпочтительно примерно от 0,5 до примерно 3% по массе.
В полученный таким образом раствор оксинафтойной кислоты или ее соли и полимера молочной кислоты в органическом растворителе добавляют и растворяют или диспергируют физиологически активное соединение или его соль. Затем полученный раствор в органическом растворителе, содержащем композицию, состоящую из физиологически активного соединения или его соли, оксинафтойной кислоты или ее соли и полимера молочной кислоты или ее соли, добавляют в водную фазу с образованием эмульсии М(масляная фаза)/В(водная фаза), затем растворитель в масляной фазе выпаривают или диспергируют в водной фазе с получением микрокапсул. Объем водной фазы в данном случае, как правило, составляет примерно от 1-кратного до примерно 10000-кратного, более предпочтительно примерно от 5-кратного до примерно 5000-кратного, наиболее предпочтительно примерно от 10-кратного до примерно 2000-кратного по отношению к объему масляной фазы.
В вышеуказанную внешнюю водную фазу можно добавить эмульгатор. Данный эмульгатор может быть любым соединением при условии, что оно, как правило, может образовать стабильную эмульсию М/В. Конкретно используют, например, анионогенные поверхностно-активные вещества (олеат натрия, стеарат натрия, лаурилсульфат натрия и тому подобное), неионогенные поверхностно-активные вещества (эфиры полиоксиэтиленсорбитана [Твин-80, Твин-60 производства Atlas Powder], производные полиоксиэтилированного касторового масла [HCO-60, HCO-50 производства Nikko Chemicals] и тому подобное), поливинилпирролидон, поливиниловый спирт, карбоксиметилцеллюлозу, лецитин, желатин, гиалуроновую кислоту и тому подобное. Можно использовать одно из них или несколько из них в комбинации. Используемая концентрация предпочтительно находится в пределах от 0,01 до 10% по массе, более предпочтительно примерно от 0,05 до примерно 5% по массе.
В вышеуказанную внешнюю водную фазу можно добавить агент, контролирующий осмотическое давление. Контролирующий осмотическое давление агент может быть полезным при условии, что он поддерживает осмотическое давление при внесении в водный раствор.
В качестве агента, контролирующего осмотическое давление, используют, например, многоатомные спирты, одноатомные спирты, моносахариды, дисахариды, олигосахариды и аминокислоты и их производные и тому подобное.
В качестве вышеуказанных многоатомных спиртов можно использовать, например, трехатомные спирты, такие как глицерин и тому подобное, пятиатомные спирты, такие как арабит, ксилит, адонит и тому подобное, шестиатомные спирты, такие как маннит, сорбит, дульцит и тому подобное, и другие спирты. Из них предпочтительными являются шестиатомные спирты и, в частности, подходящим является маннит.
В качестве вышеуказанных одноатомных спиртов можно перечислить, например, метанол, этанол, изопропиловый спирт и тому подобное, и из них предпочтительным является этанол.
В качестве вышеуказанных моносахаридов используют, например, пентозы, такие как арабиноза, ксилоза, рибоза, 2-дезоксирибоза и тому подобное, и гексозы, такие как глюкоза, фруктоза, галактоза, манноза, сорбоза, рамноза, фукоза и тому подобное, и из них предпочтительными являются гексозы.
В качестве вышеуказанных олигосахаридов используют, например, триозы, такие как мальтотриоза, рафиноза и тому подобное, тетрозы, такие как стахиоза и тому подобное, предпочтительными из которых являются триозы.
В качестве производных вышеуказанных моносахаридов используют моносахариды, дисахариды и олигосахариды, например глюкозамин, галактозамин, глюкуроновую кислоту, галактуроновую кислоту и тому подобное.
Можно использовать любую из вышеуказанных аминокислот при условии, что они являются L-аминокислотами, например, такими как глицин, лейцин, аргинин и тому подобное. Из них предпочтительным является L-аргинин.
Указанные агенты, контролирующие осмотическое давление, можно использовать одни или в смеси.
Данные контролирующие осмотическое давление агенты можно использовать в таких концентрациях, чтобы осмотическое давление внешней водной фазы равнялось примерно от 1/50- до примерно 5-кратного, предпочтительно примерно от 1/25- до примерно 3-кратного по отношению к осмотическому давлению физиологического раствора. Когда в качестве агента, контролирующего осмотическое давление, используют маннит, то его концентрация предпочтительно составляет от 0,5 до 1,5%.
В качестве способа удаления органического растворителя используют известный способ или соответствующий способ. Например, можно использовать способ, в котором органический растворитель выпаривают при одновременном перемешивании с помощью мешалки пропеллерного типа или магнитной мешалки, устройства, продуцирующего ультразвуковые волны и тому подобное при нормальном давлении или постепенно уменьшающемся пониженном давлении, способ, в котором органический растворитель выпаривают при одновременном контроле глубины вакуума с использованием роторного испарителя и тому подобное, способ, в котором органический растворитель постепенно удаляют с использованием пленки для диализа и другие способы.
Полученные таким образом микрокапсулы отделяют центрифугированием или фильтрованием, затем прилипшие к поверхности микрокапсул свободное физиологически активное соединение или его соль, оксинафтойную кислоту или ее соль, удерживающее препарат вещество, эмульгатор и тому подобное несколько раз отмывают дистиллированной водой, вновь диспергируют в дистиллированной воде и тому подобное и высушивают вымораживанием.
В способ получения можно добавить агент, предотвращающий коагуляцию, для предупреждения коагуляции частиц друг с другом. В качестве агента, предотвращающего коагуляцию, используют, например, водорастворимые полисахариды, такие как маннит, лактоза, глюкоза, крахмалы (например, кукурузный крахмал и тому подобное) и тому подобное, аминокислоты, такие как глицин и тому подобное, белки, такие как фибрин, коллаген и тому подобное. Из них маннит является наиболее подходящим.
Добавляемое количество агента, предотвращающего коагуляцию, такого как маннит и тому подобное, как правило, составляет от 0 до примерно 24% по массе к общей массе микрокапсул.
После сушки вымораживанием, если необходимо, воду и органический растворитель в микрокапсулах можно удалить нагреванием в условиях, не вызывающих слипания микрокапсул друг с другом при пониженном давлении. Предпочтительно микрокапсулы нагревают при температуре около или несколько выше промежуточной точки стеклования полимера молочной кислоты при определении дифференциальным сканирующим калориметром в условиях возрастания температуры от 10 до 20°С в минуту. Более предпочтительно, когда нагревание проводят при температуре около промежуточной точки стеклования полимера молочной кислоты или в пределах от промежуточной точки стеклования полимера молочной кислоты до температуры примерно на 30°С выше промежуточной точки его стеклования. В частности, когда в качестве полимера молочной кислоты используется полимер молочной кислоты-гликолевой кислоты, нагревание предпочтительно проводят при температуре в пределах примерно от промежуточной точки стеклования до температуры на 10°С выше промежуточной точки стеклования, более предпочтительно при температуре в пределах примерно от промежуточной точки стеклования до температуры на 5°С выше промежуточной точки стеклования.
Несмотря на то что время нагревания варьирует в зависимости от количества микрокапсул и тому подобное, оно составляет примерно от 12 ч до примерно 168 ч, предпочтительно примерно от 24 ч до примерно 120 ч, наиболее предпочтительно примерно от 48 ч до примерно 96 ч, после того как сами микрокапсулы нагреваются до данной температуры.
Метод нагревания особым образом не ограничивается при условии, что микрокапсулы можно однородно нагреть.
В качестве способа высушивания при нагревании используют, например, способ высушивания при нагревании в камере с постоянной температурой, в камере с псевдоожиженным слоем, движущейся камере или сушильной печи, способ высушивания при нагревании микроволнами и тому подобное. Из них предпочтительным является способ высушивания при нагревании в камере с постоянной температурой.
(ii) Способ с эмульсией В/М/В (1)
Вначале получают раствор полимера молочной кислоты или ее соли в органическом растворителе.
Органический растворитель и концентрация полимера молочной кислоты или ее соли в растворе в органическом растворе являются такими же, как в вышеуказанном разделе (I)(i). Когда используют смешанный органический растворитель, то соотношение двух соединений является таким же, как описано в вышеуказанном разделе (I)(i).
Физиологически активное соединение или его соль растворяют или диспергируют в полученном таким образом растворе полимера молочной кислоты или ее соли в органическом растворителе. Затем к раствору в органическом растворителе (масляная фаза), содержащему композицию, состоящую из физиологически активного соединения или его соли и полимера молочной кислоты или ее соли, добавляют раствор оксинафтойной кислоты или ее соли [в качестве растворителя вода, водный раствор спиртов (например, метанола, этанола и тому подобное), водный раствор пиридина, водный раствор диметилацетамида и тому подобное]. Данную смесь эмульгируют известным способом в гомогенизаторе или обработкой ультразвуком и тому подобное с образованием эмульсии В/М.
Затем полученную эмульсию В/М, состоящую из физиологически активного соединения или его соли, оксинафтойной кислоты или ее соли и полимера молочной кислоты или ее соли, добавляют в водную фазу с получением эмульсии В(внутренняя водная фаза)/М(масляная фаза)/В(внешняя водная фаза), затем растворитель в масляной фазе выпаривают с получением микрокапсул. В данной операции объем внешней водной фазы, как правило, составляет примерно от 1- до примерно 10000-кратного, более предпочтительно примерно от 5-кратного до примерно 5000-кратного, наиболее предпочтительно примерно от 10-кратного до примерно 2000-кратного по отношению к объему масляной фазы.
Во внешнюю водную фазу можно добавить вышеуказанный эмульгатор, контролирующий осмотическое давление агент, и последующий способ получения является таким же, как описано в разделе (I)(i).
(iii) Способ с эмульсией В/М/В (2)
Вначале готовят раствор оксинафтойной кислоты или ее соли и полимера молочной кислоты или ее соли в органическом растворителе и полученный таким образом раствор в органическом растворителе обозначают как масляную фазу. Данный способ получения является таким же, как описан в вышеуказанном разделе (I)(i). Альтернативно оксинафтойную кислоту или ее соль и полимер молочной кислоты можно приготовить по отдельности в виде растворов в органическом растворителе перед их смешиванием. Концентрация полимера молочной кислоты в растворе в органическом растворителе варьирует в зависимости от молекулярной массы полимера молочной кислоты и вида органического растворителя, и когда в качестве органического растворителя используют, например, дихлорметан, то концентрация, как правило, составляет примерно от 0,5 до примерно 70% по массе, более предпочтительно примерно от 1 до примерно 60% по массе, наиболее предпочтительно примерно от 2 до примерно 50% по массе.
Затем готовят раствор или дисперсию физиологически активного соединения или его соли [в качестве растворителя вода, смеси воды и спиртов (например, метанола, этанола или тому подобное) и тому подобное].
Добавляемая концентрация физиологически активного соединения или его соли, как правило, составляет от 0,001 мг/мл до 10 г/мл, более предпочтительно от 0,1 мг/мл до 5 г/мл, более предпочтительно от 10 мг/мл до 3 г/мл.
Когда вышеуказанное физиологически активное соединение имеет основную группу, такую как аминогруппа, то соли физиологически активного соединения включают соль с неорганической кислотой (также называемый неорганической свободной кислотой) (например, карбоновая кислота, бикарбоновая кислота, соляная кислота, серная кислота, азотная кислота, борная кислота и т.д.) и органической кислотой (также называемой свободной органической кислотой) (например, янтарная кислота, уксусная кислота, пропионовая кислота, трифторуксусная кислота и т.д.).
Когда физиологически активное соединение имеет кислотную группу, такую как карбоксильная группа, то соли физиологически активного соединения включают соль с неорганическим основанием (также называемым неорганическим свободным основанием) (например, щелочные металлы, такие как натрий, калий и тому подобное, щелочно-земельные металлы, такие как кальций, магний и тому подобное) и органическим основанием (также называемым органическим свободным основанием) (например, органические амины, такие как триэтиламин и тому подобное, основные аминокислоты, такие как аргинин и тому подобное). Кроме того, физиологически активные пептиды могут образовать комплексное соединение с металлом (например, комплекс с медью, комплекс с цинком и тому подобное). Когда физиологически активное соединение представляет производное LH-RH, то особенно предпочтительно добавить уксусную кислоту.
В качестве вспомогательного средства для растворения и стабилизатора можно использовать известные соединения. Можно проводить нагревание, встряхивание, перемешивание и тому подобное для растворения и диспергирования физиологически активного соединения и использовать добавки до той степени, при которой не нарушается активность, и полученный таким образом водный раствор называют внутренней водной фазой.
Полученные внутреннюю водную фазу и масляную фазу, описанные выше, эмульгируют известным методом, таким как в гомогенизаторе или обработкой ультразвуком и тому подобное, с получением эмульсии В/М.
Объем смешанной масляной фазы равняется примерно от 1- до 1000-кратного, предпочтительно от 2- до 100-кратного, более предпочтительно примерно от 3- до 10-кратного по отношению к объему внутренней водной фазы.
Вязкость полученной эмульсии В/М, как правило, равняется примерно от 10 до 10000 сантипуаз, предпочтительно примерно от 100 до примерно 5000 сантипуаз, наиболее предпочтительно примерно от 500 до 2000 сантипуаз при температуре от 12 до 25°С.
Затем полученную эмульсию В/М, состоящую из физиологически активного соединения или его соли, оксинафтойной кислоты или ее соли и полимера молочной кислоты или ее соли, добавляют в водную фазу с образованием эмульсии В(внутренняя водная фаза)/М(масляная фаза)/В(внешняя водная фаза), затем растворитель в масляной фазе выпаривают или диспергируют во внешней водной фазе с получением микрокапсул. В данной операции объем внешней водной фазы, как правило, равняется примерно от 1-кратного до примерно 10000-кратного, более предпочтительно примерно от 5-кратного до примерно 5000-кратного, наиболее предпочтительно примерно от 10-кратного до примерно 2000-кратного по отношению к объему масляной фазы.
Во внешнюю водную фазу можно добавить вышеуказанный эмульгатор, агент, контролирующий осмотическое давление, и последующий способ получения является аналогичным описанному в разделе (I)(i).
(II) СПОСОБ РАЗДЕЛЕНИЯ ФАЗ
Когда микрокапсулы получают данным способом, то постепенно добавляют агент для коацервации при одновременном перемешивании в раствор в органическом растворителе, содержащий композицию, состоящую из физиологически активного соединения или его соли, описанного в разделе (I) в способе высушивания в воде, оксинафтойной кислоты или ее соли и полимера молочной кислоты или ее соли, для осаждения и затвердевания микрокапсул. Количество агента для коацервации составляет примерно от 0,01- до примерно 1000-кратного, предпочтительно примерно от 0,05- до примерно 500-кратного, наиболее предпочтительно примерно от 0,1- до примерно 200-кратного по отношению к объему масляной фазы.
Агент для коацервации особым образом не ограничивается при условии, что он выбран из соединений на основе полимеров, минерального масла или растительного масла, которые смешиваются с органическим растворителем, но не растворяют физиологически активное соединение или его соль, оксинафтойную кислоту или ее соль и полимер молочной кислоты или ее соли. В частности, используют, например, силиконовое масло, кунжутное масло, соевое масло, кукурузное масло, масло семян хлопчатника, кокосовое масло, льняное масло, минеральное масло, н-гексан, н-гептан и тому подобное. Их можно использовать в виде смеси двух или более агентов.
Полученные таким образом микрокапсулы выделяют, затем несколько раз промывают гептаном для удаления агента для коацервации и тому подобное, но не композицию, состоящую из физиологически активного соединения или его соли, оксинафтойной кислоты или ее соли и полимера молочной кислоты или ее соли, и остаток высушивают при пониженном давлении. Альтернативно промывание проводят таким же образом, как описано в разделе (I)(i) в вышеуказанном способе высушивания в воде, затем высушивают вымораживанием, далее высушивают при нагревании.
(III) СПОСОБ ВЫСУШИВАНИЯ РАСПЫЛЕНИЕМ
Для получения микрокапсул данным методом раствор в органическом растворителе, содержащий физиологически активное соединение или его соль, оксинафтойную кислоту или ее соль и полимер молочной кислоты или ее соли, описанный в разделе (I) в вышеуказанном способе высушивания в воде, распыляют в сушильной камере распылительной сушки (устройство для высушивания распылением) с использованием распылительного сопла и органический растворитель в микронизированных жидких каплях выпаривают в течение очень короткого периода времени с получением микрокапсул. В качестве такого распылительного сопла можно использовать сопло с двумя жидкостями, сопло высокого давления и ротационное дисковое сопло и тому подобное. После этого, если необходимо, можно провести промывание таким образом, как в вышеуказанном способе высушивания в воде (I), затем высушивают вымораживанием, далее высушивают при нагревании.
Касательно иной формы агента, чем вышеуказанные микрокапсулы, то раствор в органическом растворителе, содержащий физиологически активное соединение или его соль, оксинафтойную кислоту и полимер молочной кислоты или ее соли, описанный в способе высушивания в воде в способе получения микрокапсул (I), можно высушить до твердого состояния выпариванием органического растворителя или воды при одновременной регуляции глубины вакуума с использованием роторного испарителя и тому подобное, затем размельчить с помощью струйной мельницы и тому подобное с получением мелких частиц (также называемых микрочастицами).
Затем мелко измельченные частицы можно промыть таким же образом, как описано в способе высушивания в воде в способе получения микрокапсул (I), затем высушивать вымораживанием, далее высушивать при нагревании.
Полученные таким образом микрокапсулы или мелкий порошок могут обеспечить высвобождение лекарственного препарата, соответствующее скорости разрушения использованного полимера молочной кислоты или полимера молочной кислоты-гликолевой кислоты.
Затем в качестве примера будет приведен способ получения композиции с регулируемым высвобождением, содержащей оксинафтоат, который представляет физиологически активное соединение по настоящему изобретению. В способе получения предпочтительно используют физиологически активный пептид в качестве физиологически активного соединения.
(IV) ДВУХСТАДИЙНЫЙ СПОСОБ
Физиологически активное соединение или его соль добавляют в раствор оксинафтойной кислоты или ее соли в органическом растворителе таким образом, чтобы удовлетворялось массовое соотношение, указанное в вышеупомянутом определении составляющего количества для физиологически активного соединения, для получения раствора в органическом растворителе, содержащего оксинафтоат физиологически активного соединения.
Данный органический растворитель является таким же, как описан в разделе (I)(i). Когда используют смешанный органический растворитель, то соотношение двух растворителей является таким же, как описано в вышеуказанном разделе (I)(i).
В качестве способа удаления органического растворителя для осаждения композиции, содержащей оксинафтоат, который в данном случае является физиологически активным соединением, используют способ, известный сам по себе, или соответствующий способ. Например, можно использовать способ, в котором органический растворитель выпаривают при одновременном контроле глубины вакуума с помощью роторного испарителя и тому подобное.
Полученный таким образом раствор в органическом растворителе композиции, содержащей оксинафтоат, который является физиологически активным соединением, готовят вновь, и в результате можно получить композицию с регулируемым высвобождением (микросферы из мелких частиц).
В качестве органического растворителя используют, например, галогенированные углеводороды (например, дихлорметан, хлороформ, дихлорэтан, трихлорэтан, четыреххлористый углерод и тому подобное), простые эфиры (например, этиловый эфир, изопропиловый эфир и тому подобное), эфиры жирных кислот (например, этилацетат, бутилацетат и тому подобное), ароматические углеводороды (например, бензол, толуол, ксилол и тому подобное) и тому подобное. Их можно использовать в смеси в соответствующей пропорции. Из них предпочтительными являются галогенированные углеводороды, и наиболее подходящим является дихлорметан.
Затем раствор в органическом растворителе, содержащий оксинафтоат физиологически активного соединения, добавляют в водную фазу с получением эмульсии М(масляная фаза)/В(водная фаза), затем растворитель в масляной фазе выпаривают с получением микросфер. В данном случае объем водной фазы, как правило, равняется примерно от 1- до примерно 10000-кратного, более предпочтительно примерно от 5-кратного до примерно 5000-кратного, наиболее предпочтительно примерно от 10-кратного до примерно 2000-кратного по отношению к объему масляной фазы.
Во внешнюю водную фазу можно добавить вышеуказанный эмульгатор, контролирующий осмотическое давление агент, и последующий способ получения является таким же, как описан в разделе (I)(i).
В качестве способа удаления органического растворителя используют известный способ или соответствующий способ. Например, можно использовать способ, в котором органический растворитель выпаривают при одновременном перемешивании с помощью мешалки пропеллерного типа или магнитной мешалки и тому подобное при нормальном давлении или постепенно уменьшающемся пониженном давлении, способ, в котором органический растворитель выпаривают при одновременном контроле глубины вакуума с использованием роторного испарителя и тому подобное, и другие способы.
Полученные таким образом микросферы отделяют центрифугированием или фильтрованием, затем прилипшие к поверхности микросфер свободное физиологически активное соединение, оксинафтойную кислоту, эмульгатор и тому подобное несколько раз отмывают дистиллированной водой, вновь диспергируют в дистиллированной воде и тому подобное и высушивают вымораживанием.
В способе получения можно добавить агент, предотвращающий коагуляцию, для предупреждения коагуляции частиц друг с другом. В качестве агента, предотвращающего коагуляцию, используют, например, водорастворимые полисахариды, такие как маннит, лактоза, глюкоза, крахмалы (например, кукурузный крахмал и тому подобное) и тому подобное, аминокислоты, такие как глицин и тому подобное, белки, такие как фибрин, коллаген и тому подобное. Из них маннит является наиболее подходящим.
Затем после сушки вымораживанием, если необходимо, воду и органический растворитель в микросферах можно удалить нагреванием в условиях, не вызывающих слипания микрокапсул друг с другом при пониженном давлении.
Несмотря на то что время нагревания варьирует в зависимости от количества микросфер и тому подобное, оно составляет примерно от 12 ч до примерно 168 ч, предпочтительно примерно от 24 ч до примерно 120 ч, наиболее предпочтительно примерно от 48 ч до примерно 96 ч, после того как сами микросферы нагреваются до данной температуры.
Способ нагревания особым образом не ограничивается при условии, что микросферы можно однородно нагреть.
В качестве метода высушивания при нагревании используют, например, метод высушивания при нагревании в камере с постоянной температурой, камере с псевдоожиженным слоем, движущейся камере или сушильной печи, метод высушивания при нагревании микроволнами и тому подобное. Из них предпочтительным является метод высушивания при нагревании в камере с постоянной температурой. Полученные микросферы находятся в виде относительно однородных сфер, имеют небольшое сопротивление при инъекционном введении и не забивают иглу. Поскольку можно использовать тонкую иглу, то инъекция у пациента является безболезненной.
(V) ОДНОСТАДИЙНЫЙ СПОСОБ
Физиологически активное соединение или его соль добавляют в раствор оксинафтойной кислоты или ее соли в органическом растворителе таким образом, чтобы удовлетворялось массовое соотношение, указанное в вышеупомянутом определении составляющего количества для физиологически активного соединения, для получения раствора в органическом растворителе, содержащего оксинафтоат физиологически активного соединения, и получают композицию с регулируемым высвобождением (микросферы или мелкие частицы).
Данный органический растворитель является таким же, как описано в разделе (I)(i). Когда используют смешанный органический растворитель, то их соотношение является таким же, как описано в вышеуказанном разделе (I)(i).
Затем раствор в органическом растворителе, содержащий оксинафтоат физиологически активного соединения, добавляют в водную фазу с получением эмульсии М(масляная фаза)/В(водная фаза), затем растворитель в масляной фазе выпаривают с получением микросфер. В данном случае объем водной фазы, как правило, равняется примерно от 1- до примерно 10000-кратного, более предпочтительно примерно от 5-кратного до примерно 5000-кратного, наиболее предпочтительно примерно от 10-кратного до примерно 2000-кратного по отношению к объему масляной фазы.
Во внешнюю водную фазу можно добавить вышеуказанный эмульгатор, агент, контролирующий осмотическое давление, и последующий способ получения является таким же, как описан в разделе (IV).
Композиция по настоящему изобретению может иметь любую форму, такую как микросферы, микрокапсулы, мелкие частицы (микрочастицы) и тому подобное, микрокапсулы являются подходящими.
Композицию с регулируемым высвобождением по настоящему изобретению можно вводить как саму по себе или ее можно использовать в качестве исходного соединения и на его основе готовить различные лекарственные формы перед введением в виде инъекционного или имплантируемого препарата внутримышечно, подкожно, в органы и тому подобное, препаратов для применения через слизистую в нос, прямую кишку, матку и тому подобное, препаратов для перорального введения (например, капсул (твердых капсул, мягких капсул и тому подобное), твердых препаратов, таких как гранулы, порошок и тому подобное, жидких препаратов, таких как сироп, эмульсия, суспензия и тому подобное) и тому подобное.
Например, при использовании композиций с регулируемым высвобождением по настоящему изобретению в виде инъекционного раствора, раствор можно приготовить в виде водной суспензии с диспергирующим агентом (например, поверхностно-активными веществами такими, как Твин-80, НСО-60 и тому подобное, полисахаридами, такими как гиалуронат натрия, карбоксиметилцеллюлоза, альгинат натрия и тому подобное), консервантами (например, метилпарабеном, пропилпарабеном и тому подобное), изотонирующим агентом (например, хлоридом натрия, маннитом, сорбиом, глюкозой, пролином и тому подобное) или диспергировать с растительным маслом, таким как кунжутное масло, кукурузное масло и тому подобное, с получением масляной суспензии, которые можно непосредственно использовать в виде инъекции с регулируемым высвобождением.
Размер частиц композиции с регулируемым высвобождением по настоящему изобретению при использовании в виде суспензии для инъекции может преимущественно находиться в пределах, удовлетворяющих степени дисперсии и прохождению через иглу, и составляет, например, примерно от 0,1 до 300 мкм, предпочтительно примерно от 0,5 до 150 мкм, наиболее предпочтительно примерно от 1 до 100 мкм, в качестве среднего размера частиц.
Для стерилизации композиции по настоящему изобретению можно перечислить метод проведения всего процесса получения в стерильных условиях, метод стерилизации γ-лучами, метод добавления консерванта и тому подобное, но методы стерилизации не ограничиваются перечисленными.
Композицию с регулируемым высвобождением по настоящему изобретению можно использовать в качестве безопасного лекарственного препарата и тому подобное для млекопитающих (например, человека, крупного рогатого скота, свиней, собак, кошек, мышей, крыс, кроликов и тому подобное), поскольку она обладает низкой токсичностью.
Доза композиции с регулируемым высвобождением по настоящему изобретению в значительной мере различается в зависимости от вида и содержания физиологически активного соединения, которое является основным действующим препаратом, лекарственной формы, продолжительности высвобождения физиологически активного соединения, целевых заболеваний, целевых животных и тому подобное, и преимущественно может представлять эффективное количество физиологически активного соединения. Доза для введения физиологически активного соединения, которое представляет основной лекарственный препарат, в случае, когда композиция с регулируемым высвобождением представляет препарат для высвобождения в течение 6 месяцев, предпочтительно выбрана из примерно от 0,01 до 10 мг/кг, более предпочтительно примерно от 0,05 до 5 мг/кг для взрослого человека.
Доза композиции с регулируемым высвобождением для введения выбрана предпочтительно из примерно от 0,05 до 50 мг/кг, более предпочтительно примерно от 0,1 до 30 мг/кг для взрослого человека.
Частота введения может быть соответствующим образом выбрана в зависимости от вида и содержания физиологически активного соединения, которое является основным действующим препаратом, лекарственной формы, продолжительности высвобождения физиологически активного соединения, целевых заболеваний, целевых животных и тому подобное, и составляет, например, один раз в несколько недель, раз в месяц, один раз в несколько месяцев (например, 3, 4 или 6 месяцев и тому подобное) и тому подобное.
Композицию с регулируемым высвобождением по настоящему изобретению можно использовать в качестве профилактического или лечебного средства в отношении различных заболеваний в зависимости от вида входящего в ее состав физиологически активного соединения, и в случае когда физиологически активное соединение представляет, например, производное LH-RH, то ее можно использовать в качестве препарата для профилактики или лечения зависимых от гормонов заболеваний, в частности, зависимых от половых гормонов заболеваний, таких как зависимые от половых гормонов опухоли (например, рак простаты, рак матки, рак молочной железы, опухоли гипофиза и тому подобное), гиперплазии простаты, эндометриоза, миомы матки, преждевременного полового созревания, дисменореи, аменореи, предменструального синдрома, синдрома ячеистого яичника и тому подобное и в качестве препарата для профилактики рецидива рака молочной железы после операции по поводу рака молочной железы в период пременопаузы, в качестве препарата для профилактики или лечения болезни Альцгеймера и иммунодефицита и тому подобное, и в качестве средства контрацепции (или когда используется реактивное действие после отмены препаратов, профилактики или лечения бесплодия) и тому подобное. Кроме того, композицию с регулируемым высвобождением по настоящему изобретению можно также использовать в качестве препарата для профилактики или лечения доброкачественных или злокачественных опухолей, которые зависят от LH-RH, но не зависят от половых гормонов.
Следовательно, можно проводить профилактику или лечить зависимые от гормонов заболевания, в частности, зависимые от половых гормонов опухоли (например, рак простаты, рак матки, рак молочной железы, опухоли гипофиза и тому подобное), зависимые от половых гормонов заболевания, такие как простатомегалия, эндометриоз, гистеромиома, преждевременное половое созревание, дисменорея, аменорея, предменструальный синдром, синдром ячеистого яичника и тому подобное; и можно предупреждать беременность введением млекопитающему эффективной дозы средства для лечения или профилактики по настоящему изобретению, и также можно проводить профилактику рецидив рака молочной железы после проведения операции по поводу рака молочной железы в период пременопаузы.
Последующие примеры и ссылочные примеры проиллюстрируют настоящее изобретение в деталях, и ни коем образом они не ограничивают объем настоящего изобретения.
[Примеры]
Значения среднемассовой молекулярной массы и содержание каждого полимера в последующих примерах и ссылочных примерах представляют значения среднемассовой молекулярной массы по отношению к полистиролу, определение которого проводилось гель-проникающей хроматографией (ГПХ) с использованием одного диспергированного полистирола в качестве стандарта, и по этим данным определяли содержание каждого полимера. Во всех случаях определение проводили на хроматографе для ГПХ высокого давления (производства Tosoh Corp.; HLC-8120 GPC) и на колонках Super H 4000×2 и Super H 2000 (все производства Tosoh Corp.) и использовали в качестве подвижной фазы тетрагидрофуран при скорости потока 0,6 мл/мин. Метод определения основан на показателе дифференциального преломления.
Ссылочный пример А1: синтез полимера молочной кислоты с высокой молекулярной массой
К 230 мл безводного ксилола добавляли 4,1 мл 1,0 моль/л раствора диэтилцинка в гексане, 1,35 г трет-бутиллактата и 230 г DL-лактида, и проводили реакцию полимеризации при температуре 120-130°С в течение примерно 2 ч. После завершения реакции в реакционный раствор выливали 120 мл дихлорметана и к этому добавляли 230 мл трифторуксусной кислоты для снятия защиты. После завершения реакции в реакционный раствор добавляли 300 мл дихлорметана, затем реакционный раствор выливали в 2800 мл изопропилового эфира для осаждения предназначаемого соединения, затем повторяли осаждение со смесью дихлорметан/изопропиловый эфир с получением полимера молочной кислоты со среднемассовой молекулярной массой, равной примерно 40000.
Ссылочный пример В1:
Полученный в ссылочном примере А1 полимер растворяли в 600 мл дихлорметана и промывали водой до тех пор, пока раствор не становился нейтральным, затем добавляли 70 г 90% водного раствора молочной кислоты, и соединения взаимодействовали при 40°С. Когда среднемассовая молекулярная масса растворенного в реакционном растворе полимера достигала примерно 20000, раствор охлаждали до комнатной температуры и вливали 600 мл дихлорметана для остановки реакции, затем раствор промывали водой, пока реакционный раствор не становился нейтральным. После промывания водой реакционный раствор концентрировали и высушивали с получением полимера молочной кислоты. Количество концевых карбоксильных групп в полученном полимере молочной кислоты составляло примерно 80 мкмоль на 1 г полимера, и содержание полимеров с молекулярной массой 5000 или ниже равнялось 7,29 мас.%.
Ссылочный пример С1:
Полученный в ссылочном примере А1 полимер растворяли в 600 мл дихлорметана и промывали водой до тех пор, пока раствор не становился нейтральным, затем добавляли 70 г 90% водного раствора молочной кислоты, и взаимодействие осуществляли при 40°С. Когда среднемассовая молекулярная масса растворенного в реакционном растворе полимера достигала примерно 20000, раствор охлаждали до комнатной температуры и вливали 600 мл дихлорметана для остановки реакции, затем раствор промывали водой, пока реакционный раствор не становился нейтральным, затем реакционный раствор добавляли по каплям в 2800 мл изопропилового эфира для осаждения предназначаемого полимера молочной кислоты. Полученный декантированием осадок растворяли в 600 мл дихлорметана, затем концентрировали и высушивали с получением 160 г полимера молочной кислоты. Количество концевых карбоксильных групп полученного полимера молочной кислоты составляло 70 мкмоль на 1 г полимера. Среднемассовая молекулярная масса использованного полимера молочной кислоты с более высокой молекулярной массой, среднемассовая молекулярная масса полимера молочной кислоты после гидролиза, среднемассовая молекулярная масса полученного предназначаемого полимера молочной кислоты и молекулярные фракции представлены в таблице 1.
Ссылочные примеры С2-6:
Полимеры молочной кислоты по настоящему изобретению получали таким же образом, как в ссылочном примере С1. Среднемассовая молекулярная масса использованного полимера молочной кислоты с более высокой молекулярной массой, среднемассовая молекулярная масса полимера молочной кислоты после гидролиза, среднемассовая молекулярная масса полученного предназначаемого полимера молочной кислоты и молекулярные фракции представлены в таблице 1.
Как становится очевидным из данных таблицы 1, полимер молочной кислоты по настоящему изобретению, полученный способом по настоящему изобретению, имеет фракцию полимеров с молекулярной массой 5000 или ниже на уровне примерно 5% по массе или ниже, фракцию полимеров с молекулярной массой 3000 или ниже на уровне примерно 1,5% по массе или ниже и фракцию полимеров с молекулярной массой 1000 или ниже на уровне 0,1% по массе или ниже.
[Пример А] Композиция, содержащая оксинафтойную кислоту
Пример А1
Смешивали раствор, полученный растворением 144,4 г полимера DL-молочной кислоты (среднемассовая молекулярная масса: 22500, количество карбоксильных групп по данным количественного определения метки: 66,7 мкмоль/г) в 111,7 г дихлорметана, и 147,2 г раствора, полученного растворением 7,5 г 3-окси-2-нафтойной кислоты в 175,1 г дихлорметана и 13,5 г этанола, и нагревали до 28,7°С. Взвешивали порцию в 274,4 г данного раствора в органическом растворителе и смешивали с водным раствором, полученным растворением 24,89 г ацетата пептида А в 23,47 г дистиллированной воды и нагревали до 54,5°С, затем смесь перемешивали в течение 5 мин для грубого эмульгирования, затем эмульгировали с использованием гомогенизатора при 10046 об/мин в течение 5 мин с образованием эмульсии В/М. Затем данную эмульсию В/М охлаждали до 15,0°С, затем выливали в 25 л 0,1% водного раствора (мас./мас.) поливинилового спирта (EG-40 производства Nippon Synthetic Chemical Industry Co., Ltd.), заранее охлажденного до 15,0°С в течение 3 мин 26 сек, и перемешивали при 7000 об/мин с использованием HOMOMIC LINE FLOW (производства Tokushu Kika K.K.) с получением эмульсии В/М/В. Данную эмульсию В/М/В выдерживали в течение 30 мин примерно при 15°С, затем перемешивали в течение 2,5 ч без контроля температуры для выпаривания дихлорметана и этанола или диспергирования дихлорметана и этанола во внешней водной фазе, вызывая отвержение масляной фазы, затем просеивали через сито с размером пор 75 мкм, микрокапсулы постоянно осаждались при 2000 об/мин с использованием центробежного сепаратора (Н-600S, производства Kokusanenshinki) и собирали осажденные микрокапсулы. Собранные микрокапсулы вновь диспергировали в небольшом количестве дистиллированной воды, просеивали через сито с размером пор 90 мкм, затем к этому добавляли 15,4 г маннита для растворения, затем раствор высушивали вымораживанием с получением порошка. Полученная масса порошка из микрокапсул составляла 101,6 г, что соответствует выходу, равному 72,7%, и содержание пептида А равнялось 15,88%, а содержание 3-окси-2-нафтойной кислоты - 2,82%.
Экспериментальный пример А1
Примерно 45 мг микрокапсул, описанных в примере А1, диспергировали в 0,3 мл среды для дисперсии (дистиллированная вода, содержащая 0,15 мг карбоксиметилцеллюлозы, 0,3 г полисорбата-80 и 15 мг маннита) и дисперсию вводили через иглу 22G семидневным крысам самцам SD подкожно в область спины. В определенное время после введения крыс убивали и извлекали оставшиеся в месте введения микрокапсулы и количественно определяли пептид А, содержащийся в них, и эту величину делили на исходное содержание с получением относительного остаточного содержания, представленного в таблице 2.
Как становится очевидным из данных таблицы 2, микрокапсулы из примера А1, полученные добавлением 3-окси-2-нафтойной кислоты, могут содержать физиологически активное соединение в высокой концентрации, даже если их получают в объеме примерно 125 г, и одновременно имеется выраженный эффект подавления интенсивного первоначального высвобождения физиологически активного соединения. Кроме того, физиологически активное соединение высвобождается из микрокапсул с постоянной скоростью в течение очень продолжительного периода времени.
[Пример В] Композиция, не содержащая оксинафтойную кислоту
Пример В1
4,00 г полимера DL-молочной кислоты (среднемассовая молекулярная масса: 18300, содержание карбоксильных групп по данным количественного определения метки: 86 мкмоль/г) растворяли в 6,77 г дихлорметане с получением раствора. Весь этот раствор в органическом растворителе взвешивали и смешивали с водным раствором, полученным растворением 1,04 г ацетата пептида А в 0,92 г дистиллированной воды, и нагревали до 60°С, затем смесь эмульгировали на гомогенизаторе при 25000 об/мин в течение 20 сек с образованием эмульсии В/М. Затем данную эмульсию В/М выливали в 1 л 0,1% водного раствора (мас./мас.) поливинилового спирта (EG-40, производства Nippon Synthetic Chemical Industry Co., Ltd.), предварительно выдержанного при 18,0°С в течение 20 сек, и перемешивали при 7000 об/мин с использованием гомогенезатора с получением эмульсии В/М/В. Данную эмульсию В/М/В перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч для выпаривания дихлорметана и этанола или диспергирования дихлорметана и этанола во внешней водной фазе, вызывая отвержение масляной фазы, затем просеивали через сито с размером пор 75 мкм, затем промывали чистой водой и микрокапсулы осаждали с использованием центробежного сепаратора (05PR-22: HITACHI) при 2500 об/мин в течение 5 мин и собирали осажденные микрокапсулы. Собранные микрокапсулы вновь диспергировали в небольшом количестве дистиллированной воды и к этому добавляли 0,50 г маннита для растворения, затем раствор высушивали вымораживанием с получением порошка. Выделенная масса порошка из микрокапсул составляла 2,12 г, что соответствует выходу, равному 38,2%, и содержание пептида А составляло 12,98%.
Экспериментальный пример В2
4,40 г полимера DL-молочной кислоты (среднемассовая молекулярная масса: 18300, количество карбоксильных групп по данным количественного определения метки: 86 мкмоль/г) растворяли в 7,40 г дихлорметана с получением раствора. Весь этот раствор в органическом растворителе взвешивали и смешивали с водным раствором, полученным растворением 0,60 г ацетата пептида А в 0,552 г дистиллированной воды и нагревали до 60°С, затем смесь эмульгировали на гомогенизаторе при 25000 об/мин в течение 20 сек с образованием эмульсии В/М. Затем данную эмульсию В/М выливали в 1 л 0,1% водного раствора (мас./мас.) поливинилового спирта (EG-40, производства Nippon Synthetic Chemical Industry Co., Ltd.), предварительно выдержанного при 18,0°С в течение 20 сек, и перемешивали при 7000 об/мин с использованием гомогенизатора с получением эмульсии В/М/В. Данную эмульсию В/М/В перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч для выпаривания дихлорметана и этанола или диспергирования дихлорметана и этанола во внешней водной фазе, вызывая отвержение масляной фазы, затем просеивали через сито с размером пор 75 мкм, затем промывали чистой водой и микрокапсулы осаждали с использованием центробежного сепаратора (05PR-22: HITACHI) при 2500 об/мин в течение 5 мин и собирали осажденные микрокапсулы. Собранные микрокапсулы вновь диспергировали в небольшом количестве дистиллированной воды и к этому добавляли 0,50 г маннита для растворения, затем раствор высушивали вымораживанием, затем высушивали в вакууме при 50°С в течение 48 ч с получением порошка. Выделенная масса порошка из микрокапсул составляла 3,04 г, что соответствует выходу, равному 55,3%, и содержание пептида А составляло 9,21%.
Экспериментальный пример В3
8,10 г полимера DL-молочной кислоты (среднемассовая молекулярная масса: 21900; содержание карбоксильных групп по данным количественного определения метки: 75,8 мкмоль/г) растворяли в 14,15 г дихлорметана с получением раствора. Весь этот раствор в органическом растворителе взвешивали и смешивали с водным раствором, полученным растворением 0,93 г ацетата пептида А в 0,95 г дистиллированной воды и нагревали до 60°С, затем смесь эмульгировали на гомогенизаторе при 25000 об/мин в течение 20 сек с образованием эмульсии В/М. Затем данную эмульсию В/М выливали в 1 л 0,1% водного раствора (мас./мас.) поливинилового спирта (EG-40, производства Nippon Synthetic Chemical Industry Co., Ltd.), предварительно выдержанного при 18,0°С в течение 20 сек, и перемешивали при 7000 об/мин с использованием гомогенизатора с получением эмульсии В/М/В. Данную эмульсию В/М/В перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч для выпаривания дихлорметана и этанола или диспергирования дихлорметана и этанола во внешней водной фазе, вызывая отвержение масляной фазы, затем просеивали через сито с размером пор 75 мкм, затем промывали чистой водой и микрокапсулы осаждали с использованием центробежного сепаратора (05PR-22: HITACHI) при 2500 об/мин в течение 5 мин и собирали осажденные микрокапсулы. Собранные микрокапсулы вновь диспергировали в небольшом количестве дистиллированной воды и к этому добавляли 1,00 г маннита для растворения, затем раствор высушивали вымораживанием, затем высушивали в вакууме примерно при 50°С в течение 30 ч с получением порошка. Выделенная масса порошка из микрокапсул составляла 5,44 г, что соответствует выходу, равному 54,17%, и содержание пептида А составляло 8,03%.
Экспериментальный пример В4
205,5 г полимера DL-молочной кислоты (среднемассовая молекулярная масса: 21400; содержание карбоксильных групп по данным количественного определения метки: 76,1 мкмоль/г) растворяли в 354,3 г дихлорметана с получением раствора, который профильтровывали под давлением через фильтр с размером пор 0,2 мкм (Emeflow, DFA4201FRP), температуру выдерживали при 28,8°С. Взвешивали 380,4 г данного раствора в органическом растворителе и смешивали с водным раствором, полученным растворением 16,11 г ацетата пептида А в 16,22 г дистиллированной воды, и нагревали до 55,4°С, и смесь грубо эмульгировали в течение 1 мин, затем эмульгировали с использованием минимиксера при 10150 об/мин в течение 2 мин с образованием эмульсии В/М. Затем данную эмульсию В/М охлаждали до 18°С, затем выливали в 25 л 0,1% (мас./мас.) водного раствора поливинилового спирта (EG-40 производства Nippon Synthetic Chemical Industry Co., Ltd.), предварительно выдержанного при 18,7°С в течение 3 мин 10 сек и перемешивали при 7001 об/мин с использованием HOMOMIC LINE FLOW (производства Tokushu Kika K.K.) с получением эмульсии В/М/В. Данную эмульсию В/М/В выдерживали в течение 30 мин примерно при 18,5°С, затем перемешивали в течение 2 ч 30 мин без контроля температуры для выпаривания дихлорметана и этанола или диспергирования дихлорметана и этанола во внешней водной фазе, вызывая отвержение масляной фазы, затем просеивали через сито с размером пор 75 мкм, микрокапсулы непрерывно осаждали с использованием центробежного сепаратора (Н-600S; отечественный центробежный сепаратор) и собирали осажденные микрокапсулы. Собранные микрокапсулы вновь диспергировали в небольшом количестве дистиллированной воды и просеивали через сито с размером пор 90 мкм, затем к этому добавляли 18,85 г маннита для растворения, затем раствор высушивали вымораживанием с получением порошка. Выделенная масса порошка из микрокапсул составляла 117,6 г, что соответствует выходу, равному 68,54% и содержание пептида А составляло 7,76%.
Экспериментальный пример В5
4,80 г полимера DL-молочной кислоты (среднемассовая молекулярная масса: 28800; количество карбоксильных групп по данным количественного определения метки: 78,1 мкмоль/г) растворяли в 7,8 г дихлорметана с получением раствора. Весь этот раствор в органическом растворителе взвешивали и смешивали с водным раствором, полученным растворением 1,20 г ацетата пептида А в 1,2 г дистиллированной воды и смесь эмульгировали на гомогенизаторе при 25000 об/мин в течение 20 сек с образованием эмульсии В/М. Затем данную эмульсию В/М выливали в 1,2 л 0,1% водного раствора (мас./мас.) поливинилового спирта (EG-40, производства Nippon Synthetic Chemical Industry Co., Ltd.), предварительно выдержанного при 15,0°С в течение 20 сек, и перемешивали при 7000 об/мин с использованием гомогенизатора с получением эмульсии В/М/В. Данную эмульсию В/М/В перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч для выпаривания дихлорметана и этанола или диспергирования дихлорметана и этанола во внешней водной фазе, вызывая отвержение масляной фазы, затем просеивали через сито с размером пор 75 мкм, затем промывали чистой водой и микрокапсулы осаждали с использованием центробежного сепаратора (05PR-22: HITACHI) при 2200 об/мин в течение 5 мин и собирали осажденные микрокапсулы. Собранные микрокапсулы вновь диспергировали в небольшом количестве дистиллированной воды и к этому добавляли 0,30 г маннита для растворения, затем раствор высушивали вымораживанием с получением порошка. Выделенная масса порошка из микрокапсул составляла 3,42 г, что соответствует выходу, равному 53,56%, и содержание пептида А составляло 11,08%.
Экспериментальный пример В1
Примерно 69 мг микрокапсул, описанных в примере В1, диспергировали в 0,3 мл среды для дисперсии (дистиллированная вода, содержащая 0,15 мг карбоксиметилцеллюлозы, 0,3 мг полисорбата-80 и 15 мг маннита) и дисперсию вводили через иглу 22G крысам самцам в возрасте 7 дней SD подкожно в области спины. В определенное время после введения крыс умерщвляли и извлекали оставшиеся в месте введения микрокапсулы, и количественно определяли пептид А, содержащийся в них, и эту величину делили на исходное содержание с получением относительного остаточного содержания, представленного в таблице 3.
Как следует из данных таблицы 3, микрокапсулы из примера В1, полученные при включении пептида А, могут в высокой концентрации содержать физиологически активное соединение и одновременно эффективно подавлять интенсивное первоначальное выделение физиологически активного соединения. Кроме того, при той же композиции из другой партии данные микрокапсулы высвобождали физиологически активное соединение с постоянной скоростью в течение очень продолжительного периода времени.
Экспериментальный пример В2
Примерно 73 мг микрокапсул, описанных в примере В2, диспергировали в 0,3 мл среды для дисперсии (дистиллированная вода, содержащая 0,15 мг карбоксиметилцеллюлозы, 0,3 мг полисорбата-80 и 15 мг маннита) и дисперсию вводили через иглу 22G крысам самцам в возрасте 7 дней SD подкожно в области спины. В определенное время после введения крыс умерщвляли и извлекали оставшиеся в месте введения микрокапсулы и количественно определяли пептид А, содержащийся в них, и эту величину делили на исходное содержание с получением относительного остаточного содержания, представленного в таблице 4.
Как следует из данных таблицы 4, микрокапсулы из примера В2, полученные включением только пептида А, могут содержать физиологически активное соединение, эффективно подавлять первоначальное интенсивное высвобождение физиологически активного соединения и высвобождают препарат примерно с постоянной скоростью в течение длительного периода времени.
Экспериментальный пример В3
Примерно 112 мг микрокапсул, описанных в примере В3, диспергировали в 0,3 мл среды для дисперсии (дистиллированная вода, содержащая 0,15 мг карбоксиметилцеллюлозы, 0,3 мг полисорбата-80 и 15 мг маннита) и дисперсию вводили через иглу 22G крысам самцам в возрасте 7 дней SD подкожно в области спины. В определенное время после введения крыс умерщвляли и извлекали оставшиеся в месте введения микрокапсулы и количественно определяли пептид А, содержащийся в них, и эту величину делили на исходное содержание с получением относительного остаточного содержания, представленного в таблице 5.
Как следует из данных таблицы 5, микрокапсулы из примера В3, полученные включением только пептида А, могут содержать физиологически активное соединение, эффективно подавлять первоначальное интенсивное высвобождение физиологически активного соединения и высвобождают препарат примерно с постоянной скоростью в течение длительного периода времени.
Экспериментальный пример В4
Примерно 116 мг микрокапсул, описанных в примере В4, диспергировали в 0,3 мл среды для дисперсии (дистиллированная вода, содержащая 0,15 мг карбоксиметилцеллюлозы, 0,3 мг полисорбата-80 и 15 мг маннита) и дисперсию вводили через иглу 22G крысам самцам в возрасте 7 дней SD подкожно в области спины. В определенное время после введения крыс умерщвляли и извлекали оставшиеся в месте введения микрокапсулы и количественно определяли пептид А, содержащийся в них, и эту величину делили на исходное содержание с получением относительного остаточного содержания, представленного в таблице 6.
Как следует из данных таблицы 6, микрокапсулы из примера В4, полученные включением только пептида А, могут содержать физиологически активное соединение, эффективно подавлять первоначальное интенсивное высвобождение физиологически активного соединения и высвобождают препарат примерно с постоянной скоростью в течение длительного периода времени.
Экспериментальный пример В5
Примерно 48,7 мг микрокапсул, описанных в примере В5, диспергировали в 0,3 мл среды для дисперсии (дистиллированная вода, содержащая 0,15 мг карбоксиметилцеллюлозы, 0,3 мг полисорбата-80 и 15 мг маннита) и дисперсию вводили через иглу 22G крысам самцам в возрасте 7 дней SD подкожно в области спины. В определенное время после введения крыс умерщвляли и извлекали оставшиеся в месте введения микрокапсулы и количественно определяли пептид А, содержащийся в них, и эту величину делили на исходное содержание с получением относительного остаточного содержания, представленного в таблице 7.
Как следует из данных таблицы 7, микрокапсулы из примера В5, полученные включением только пептида А, могут содержать физиологически активное соединение, эффективно подавлять первоначальное интенсивное высвобождение физиологически активного соединения. Кроме того, микрокапсулы высвобождают физиологически активное соединение с постоянной скоростью в течение длительного периода времени.
Ссылочный пример С7
Раствор, полученный растворением 206,6 г полимера DL-молочной кислоты (среднемассовая молекулярная масса: 21900) в 354,8 г дихлорметана нагревали и выдерживали примерно при 30°С. Взвешивали порцию данного раствора массой 381,5 г и смешивали с водным раствором, полученным растворением 15,8 г лейпрорелина ацетата в 16,6 г водного раствора ледяной уксусной кислоты (0,6 г ледяной уксусной кислоты растворяли в 31,75 г дистиллированной воды) и нагревали примерно до 55°С и затем эмульгировали с использованием минимиксира (производства Tokushu Kika K.K.) с образованием эмульсии В/М (скорость вращения примерно 10000 об/мин). Затем данную эмульсию В/М охлаждали до 18,0°С, выливали в 25 л водного раствора, содержащего 0,1% (мас./мас.) поливинилового спирта (EG-40, производства Nippon Synthetic Chemical Industry Co., Ltd.) и 1% маннита, который предварительно выдерживали примерно при 18,0°С и затем вторично эмульгировали с использованием HOMOMIC LINE FLOW (производства Tokushu Kika K.K.) с образованием эмульсии В/М/В (скорость вращения турбины: примерно 7000 об/мин; скорость вращения циркуляционного насоса: примерно 2000 об/мин). Данную эмульсию В/М/В высушивали в воде в течение 3 ч, пропускали через сито с размером пор 75 мкм и затем микросферы постоянно осаждали с использованием центробежного сепаратора (H-600S, отечественный центробежный сепаратор) (скорость вращения: примерно 2000 об/мин; скорость потока: примерно 600 мл/мин) и собирали осажденные микросферы. Собранные микросферы вновь суспендировали в небольшом количестве дистиллированной воды, просеивали через стандартное сито, имеющее размер пор 90 мкм, к которым добавляли 18,9 г маннита и лиофилизовали с использованием лиофилизатора (Triomaster производства Kyouwa Sinkuu K.K.) с получением порошка (порошок из микросфер). Содержание лейпрорелина ацетата в полученных микросферах составляло 8,2%; и извлечение равнялось примерно 75%. С успехом эмульсию В/М можно получить добавлением уксусной кислоты и диспергирование полученных микрокапсул можно улучшить добавлением маннита во внешнюю водную фазу.
Экспериментальный пример С1
Примерно 110 мг микрокапсул, полученных в ссылочном примере С7, диспергировали в 0,3 мл среды для дисперсии (дистиллированная вода, содержащая 0,15 мг карбоксиметилцеллюлозы, 0,3 мг полисорбата-80 и 15 мг маннита) и дисперсию вводили через иглу 22G крысам самцам в возрасте 7 дней SD подкожно в области спины. В определенное время после введения крыс умерщвляли и извлекали оставшиеся в месте введения микрокапсулы и количественно определяли пептид А, содержащийся в них, и эту величину делили на исходное содержание с получением относительного остаточного содержания, представленного в таблице 8.
Как следует из данных таблицы 8, микрокапсулы из ссылочного примера С7, полученные включением только пептида А, могут содержать физиологически активное соединение с высокой эффективностью включения и обладают хорошей диспергируемостью и также подавляют первоначальное интенсивное высвобождение физиологически активного соединения. Кроме того, данные микрокапсулы высвобождают физиологически активное соединение с постоянной скоростью в течение очень продолжительного периода времени.
Промышленная применимость
Композиция с постоянным высвобождением по настоящему изобретению может содержать физиологически активное соединение в высокой концентрации, подавлять первоначальное интенсивное высвобождение и достигать постоянной скорости высвобождения в течение продолжительного периода времени.
Настоящее изобретение относится к области медицины и описывает композицию с регулируемым высвобождением, включающую (1) производное LH-RH формулы 5-oxo-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-DLeu-Leu-Arg-Pro-NH-C2H5, или его ацетат, или его соль в количестве примерно от 14% (мас./мас.) до примерно 24% (мас./мас.) от общей массы всей композиции, (2) 3-окси-2-нафтойной кислоты или ее соли и (3) полимер молочной кислоты или ее соли, имеющий среднемассовую молекулярную массу от 15000 до 50000, в котором содержание полимеров с молекулярной массой от 5000 или ниже составляет 5% по массе или ниже, причем молярное отношение 3-окси-2-нафтойной кислоты или ее соли к производному LH-RH или его соли равняется от 3:4 до 4:3. Кроме того, описан способ получения композиции и лекарственный препарат, включающий регулируемую композицию. Данная композиция обеспечивает постоянную скорость высвобождения в течение длительного периода времени за счет подавления первоначального интенсивного высвобождения фармацевтически активного соединения. 8 н. и 9 з.п. ф-лы, 8 табл.
Приоритет по пунктам:
| Дифференциальный индуктивный преобразователь перемещений | 1982 |
|
SU1048301A1 |
| Печь для непрерывного получения сернистого натрия | 1921 |
|
SU1A1 |
| WO 00/35990 А1, 22.06.2000. | |||
