СПОСОБЫ АКТИВАЦИИ КЛЕТОК-ПРЕДШЕСТВЕННИКОВ/СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК Российский патент 2007 года по МПК A61K31/395 A61K35/14 A61K35/28 

Перекрестная ссылка на «родственные» заявки на изобретение

Данная заявка подтверждает приоритетность параграфа 119(е) 35 U.S.C. в предварительной заявке США, имеющей порядковый № 60/309196, поданной 31 июля 2001, и предварительной заявки США, имеющей порядковый № 60/382155, поданной 20 мая 2002. Содержание названных заявок включено в описание цитированием.

Область техники

Изобретение относится к области клинической медицины и медицинской химии. Точнее, изобретение относится к созданию способов активации клеток-предшественников/стволовых клеток у субъекта путем введения определенных полиаминов.

Предпосылки к созданию изобретения

Клетки крови играют решающую роль в поддержании здоровья и жизнеспособности животных, включая человека. Белые клетки крови включают в себя нейтрофилы, макрофаги, эозинофилы и базофилы/тучные клетки, а также В- и Т-клетки иммунной системы. Белые клетки крови постоянно заменяются кроветворной системой в результате действия колониестимулирующих факторов (CSF) и различных цитокинов на стволовые клетки и клетки-предшественники в кроветворных тканях. Нуклеотидные последовательности, кодирующие ряд названных факторов роста, были клонированы и секвенированы. Возможно, наиболее широко известным из них является гранулоцитарный колониестимулирующий фактор (G-CSF), который одобрен для применения для нейтрализации негативных эффектов химиотерапии посредством стимуляции образования белых клеток крови и клеток-предшественников (активация периферических стволовых клеток крови). Обсуждение гемопоэтических эффектов упомянутого фактора можно обнаружить, например, в патенте США № 5582823, включенном в описание цитированием.

Описано, что некоторые другие факторы увеличивают количество белых клеток крови и клеток-предшественников как у человека, так и у животных. Названные агенты включают в себя гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (GM-CSF), Интерлейкин-1 (IL-1), Интерлейкин-3 (IL-3), Интерлейкин-8 (IL-8), PIXY-321 (слитый белок GM-CSF/IL-3), макрофагальный белок воспаления, фактор стволовых клеток, тромбопоэтин и связанный с ростом онкоген в виде индивидуальных агентов или в комбинации (Dale, D. et al. Am. J. of Hematol. (1998) 57:7-15; Rosenfeld, C., et al. Bone Marrow Transplantation (1997) 17:179-183; Pruijt, J. et al. Cur. Op. in Hematol. (1999) 6:152-158; Broxmeyer, H. et al. Exp. Hematol. (1995) 23:335-340; Broxmeyer et al. Blood Cells, Molecules and Diseases (1998) 24:14-30; Glaspy, J. et al. Cancer Chemother. Pharmacol. (1996) 38 (suppl): S53-S57; Vadhan-Raj, S. et al. Ann. Intern. Med. (1997) 126:673-81; King, A. et al. Blood (2001) 97:1534-1542; Glaspy, J. et al. Blood (1997) 90:2939-2951).

В то время как эндогенные факторы роста оказывают фармакологические эффекты, хорошо известные недостатки применения белков и пептидов в качестве фармакологических препаратов подчеркивают необходимость дополнять набор таких факторов роста агентами, которые являются небольшими молекулами. В другом аспекте такие небольшие молекулы оказываются благоприятными по сравнению с белками и пептидамитам, где требуется продукция в больших количествах.

В течение последних лет ряд циклических полиаминных противовирусных агентов был описан в серии патентов и заявок США. Упомянутые патенты, патенты США № 5021409; 6001826; 5583131; 5698546 и 5817807 введены в описание цитированием. Также цитируются публикация РСТ WO 00/02870, основанная на заявке, поданной 8 июля 1998, и публикация WO 01/44229, основанная на заявке, поданной 17 декабря 1999, в которых описаны дополнительные соединения. В названных публикациях описаны структурные особенности циклических полиаминных противовирусных агентов.

Структурные характеристики ряда нециклических аминных противовирусных агентов также описаны в серии заявок США, в настоящее время опубликованных в виде публикаций РСТ. Названные публикации - WO 00/56729, основанная на заявке, поданной 24 марта 2000; WO 02/22600, основанная на заявке, поданной 15 и 20 сентября 2000; WO 02/22599, основанная на заявке, поданной 15 и 22 сентября 2000, а также WO 02/34745, опубликованная 2 мая 2002, введены в описание цитированием в их полном объеме.

Кроме того, улучшенные способы получения некоторых циклических полиаминных соединений описаны в патентах США № 5612478; 5756728; 5801281 и 5606053 и публикации РСТ WO 02/26721, основанной на заявке, поданной 29 сентября 2000. Описания этих документов США также включены в описание цитированием в их полном объеме.

Ранее было установлено и описано в публикации РСТ WO 02/58653, основанной на заявке, поданной 1 февраля 2000, что некоторые из полиаминных противовирусных агентов, рассматриваемых в вышеупомянутых публикациях, вызывают увеличение количества белых клеток крови. В настоящее время обнаружено, что полиаминные противовирусные агенты, описанные в вышеупомянутых публикациях, также вызывают увеличение количества клеток-предшественников и/или стволовых клеток.

Развитие и созревание клеток крови представляет собой сложный процесс. Зрелые клетки крови происходят из кроветворных клеток-предшественников (прародительских клеток) и стволовых клеток, присутствующих в специфических кроветворных тканях, включая костный мозг. В этой окружающей их среде кроветворные клетки пролиферируют и подвергаются дифференцировке до поступления в кровообращение. Оказалось, что рецептор хемокина СХСR4 и его природный лиганд, фактор-1 стромальных клеток (SDF-1), являются важными факторами в упомянутом процессе (для ознакомления см. Maekawa, T. et al. Internal Med. (2000) 39:90-100; Nagasawa, T. et al. Int. J. Hematol. (2000) 72:408-411). Показано, что мыши, нокаутированные CXCR4 или SDF-1, проявляют дефекты кроветворения (Ma, Q. et al. Proc. Natl. Acad. Sci USA (1998) 95:9448-9453; Tachibana, K. et al. Nature (1998) 393:591-594; Zou, Y-R. et al. Nature (1998) 393:595-599). Также известно, что клетки-предшественники CD34+ экспрессируют CXCR4 и требуют SDF-1, продуцируемый стромальными клетками костного мозга, для хемоаттракции и приживления трансплантата (Peled, A. et al. Science (1999) 283:845-848) и что in vitro SDF-1 является хемотаксическим агентом как для CD34+-клеток (Aiuti, A. et al. J. Exp. Med. (1997) 185:111-120; Viardot, A. et al. Ann. Hematol. (1998) 77:194-197), так и для клеток-предшественников/стволовых клеток (Jo, D-Y. et al. J. Clin. Invest. (2000) 105:101-111). SDF-1 также является важным хемоаттрактантом, передающим сигнал через рецептор CXCR4, для некоторых других более коммитированных предшественников и зрелых клеток крови, включая Т-лимфоциты и моноциты (Bleul, C. et al. J. Exp. Med. (1996) 184:1101-1109), про- и пре-В-лимфоциты (Fedyk, E.R. et al. J. Leukoc. Biol. (1999) 66:667-673; Ma, Q. et al. Immunity (1999) 10:463-471) и мегакариоциты (Hodohara, K. et al. Blood (2000) 95:769-775; Riviere, C. et al. Blood (1999) 95:1511-1523; Majka, M. et al. Blood (2000) 96:4142-4151; Gear, A. et al. Blood (2001) 97:937-945; Abi-Younes, S. et al. Circ. Res. (2000) 86:131-138).

Таким образом, в заключение, оказалось, что SDF-1 способен контролировать местонахождение и дифференцировку клеток, несущих рецепторы CXCR4, являются ли эти клетки стволовыми клетками (то есть клетками, которые являются CD34+) и/или клетками-предшественниками (которые приводят к образованию точно установленных типов колоний в ответ на определенный стимул; которые могут быть CD34⁺ или CD34^-) или клетками, которые являются сравнительно более дифференцированными.

В последнее время значительное внимание было сконцентрировано на ряде CD34⁺-клеток, активированных в пуле клеток-предшественников периферической крови, используемых для трансплантации аутогенных стволовых клеток. Популяция CD34+ представляет собой компонент, который, как полагают, прежде всего отвечает за улучшенное время восстановления после химиотерапии, и клетки, которые, наиболее вероятно, ответственны за долговременное приживление трансплантата и восстановление кроветворения (Croop, J.M. et al. Bone Marrow Transplantation (2000) 26:1271-1279). Механизм, посредством которого приживляются CD34+-клетки, может быть обусловлен хемотаксическим действием SDF-1 на клетки, экспрессирующие CXCR4 (Voermans, C. Blood, 2001, 97, 799-804; Ponomaryov, T. et al. J. Clin. Invest. (2000) 106:1331-1339). Позднее было показано, что зрелые кроветворные стволовые клетки способны восстанавливать поврежденную сердечную ткань у мышей (Jackson, K. et al. J. Clin. Invest. (2001) 107:1395-1402; Kocher, A. et al. Nature Med. (2001) 7:430-436).

Таким образом, роль рецептора CXCR4 в позиционировании клеток и их дифференцировке приобретает большое значение.

Цитирование вышеупомянутых документов не рассматривается как признание того, что любой из приведенных соответствует предшествующему уровню техники. Все утверждения, относящиеся ко времени или представлению содержания приведенных документов, основаны на информации, доступной заявителям, и не допускают уточнения дат или содержания упомянутых документов. Кроме того, все документы, цитируемые в заявке, введены в описание цитированием в их полном объеме.

Изложение изобретения

Изобретение направлено на способы лечения животных, в частности ветеринарных субъектов и человека, для увеличения количества ряда клеток-предшественников и/или стволовых клеток. Клетки-предшественники и/или стволовые клетки можно собирать и использовать для трансплантации клеток. В способах согласно изобретению применяют полиамины, включая полиамины, описанные в патентах и публикациях, включенных выше в описание путем цитирования.

Поэтому в одном аспекте изобретение имеет отношение к способу повышения количества клеток-предшественников и/или стволовых клеток у субъекта, способу, который включает в себя введение названному субъекту количества соединения формулы (1) или его фармацевтической композиции, достаточного для повышения уровней клеток-предшественников и/или стволовых клеток. В другом аспекте клетки-предшественники и/или стволовые клетки костного мозга активируют для репарации миокарда.

Способы согласно изобретению также включают в себя обработку клеточных популяций ex vivo соединениями формулы (1) и введение обработанных популяций совместимому субъекту. Соединения формулы (1) можно использовать самостоятельно или в комбинации с другими соединениями и композициями для увеличения популяции стволовых клеток и/или клеток-предшественников в периферической крови. Также можно получить повышенное продуцирование белых клеток крови в костном мозге.

В дополнительных аспектах изобретение направлено на создание фармацевтических композиций, содержащих соединение формулы (1) для применения в целях увеличения количества клеток-предшественников и/или стволовых клеток у субъектов.

Соединения формулы (1) имеют формулу:

Z-линкер-Z' (1),

в которой Z означает циклический полиамин, содержащий 9-32 элементов кольца, 2-8 из которых являются атомами азота, причем указанные атомы азота отделены друг от друга по меньшей мере 2 атомами углерода, и в которой указанный гетероцикл может содержать дополнительные гетероатомы, помимо азота, и/или может быть слит с дополнительной кольцевой системой;

,

в которой А заключает в себе моноциклическую или бициклическую слитую систему колец, содержащую по меньшей мере один N, а В означает Н или органический фрагмент из 1-20 атомов;

Z' может быть изображен структурой, которая обозначена выше посредством Z, или, альтернативно, может иметь формулу

-N(R)-(CR₂)_n-X,

в которой каждый R независимо означает Н или алкил с прямой разветвленной цепью или циклический алкил (1-6С),

n означает 1 или 2, и

Х означает ароматическое кольцо, включающее в себя гетероароматические кольца, или означает меркаптан;

«линкер» представляет собой связь, алкилен (1-6С) или может включать в себя арил, слитый арил, атомы кислорода, содержащиеся в цепи алкилена, или может содержать кетогруппы или атомы азота или серы.

Ниже обсуждаются предпочтительные формы соединений изобретения.

Краткое описание рисунков

На фиг.1 представлен график получения миелоидных предшественников в ответ на лечение 1,1'-[1,4-фенилен-бис-(метилен)]-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадеканом (AMD3100) в комбинации с макрофагальным белком воспаления после введения G-CSF.

Способы осуществления изобретения

Соединения, используемые в изобретении, имеют общую формулу, описанную как формула (1) выше. Определенные аспекты являются предпочтительными; в их число включены соединения, описанные в вышеприведенных патентах США и других патентных документах.

Циклические полиаминные и нециклические аминные противовирусные агенты, описанные в вышеупомянутых документах, ингибируют репликацию HIV (ВИЧ) через ингибирование CXCR4, ко-рецептора, необходимого для слияния и проникновения Т-тропных штаммов ВИЧ, а также ингибируют связывание и передачу сигналов, индуцированных природным лигандом, хемокином SDF-1. Без ограничений, связанных с какой-либо теорией, соединения формулы (1), которые ингибируют связывание SDF-1 с CXCR4, вызывают увеличение количества стволовых клеток и/или клеток-предшественников благодаря такому ингибированию. Увеличение числа стволовых клеток и/или клеток-предшественников в крови облегчает лечение, смягчая воздействия, которые неблагоприятно действуют на костный мозг, такие, например, которые приводят к лейкопении. Эти воздействия являются известными побочными эффектами химиотерапии и лучевой терапии. Соединения формулы (1) также повышают успех трансплантации костного мозга, улучшают заживление ран и лечение ожогов и способствуют восстановлению поврежденной ткани органа. Они также противодействуют бактериальным инфекциям, которые широко распространены при лейкозе. Соединения формулы (1) используют, чтобы активировать и собрать клетки CD34+ путем афереза, в комбинациях с другими активирующими факторами или без них. Собранные клетки применяют при лечении, требующем трансплантации стволовых клеток.

Используемый в описании термин "клетки-предшественники" относится к клеткам, которые в ответ на стимул могут образовывать дифференцированные гемопоэтические или миелоидные клетки. Присутствие клеток-предшественников можно определять в образце по способности клеток образовывать колониеобразующие единицы различных типов, например CFU-GM (колониеобразующие единицы гранулоцита-макрофага); CFU-GEMM (колониеобразующие единицы гранулоцитов-эритроцитов-макрофагов-мегакариоцитов, полипотентные (КОЕГЭММ)); BFU-E (эритроидный предшественник, образующий «взрывообразные» колонии); HPP-CFC (высокопролиферативные потенциирующие колониеобразующие клетки) или другие типы дифференцированных колоний, которые можно получать в культуре, используя известные протоколы.

Используемый в описании термин «стволовые» клетки относится к менее дифференцированным формам клеток-предшественников. Обычно такие клетки часто оказываются позитивными в отношении CD34. Однако некоторые стволовые клетки не содержат упомянутый маркер. Названные клетки CD34+ можно исследовать, используя флуоресцентную сортировку активированных клеток (FACS), и, таким образом, их присутствие в образце можно оценивать, используя названный метод.

Вообще клетки CD34+ присутствуют в крови только в малом количестве, но в больших количествах содержатся в костном мозге. Хотя другие типы клеток, такие как эндотелиальные клетки и тучные клетки, также могут экспонировать названный маркер, CD34 рассматривают как показатель присутствия стволовых клеток.

Вообще в соединениях формулы (1) предпочтительными воплощениями Z и Z' являются циклические полиаминные фрагменты, состоящие из 9-24С, которые включают в себя 3-5 атомов азота. Особенно предпочтительными являются 1,5,9,13-тетраазациклогексадекан; 1,5,8,11,14-пентаазациклогексадекан; 1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан; 1,5,9-триазациклододекан; 1,4,7,10-тетраазациклододекан и тому подобные, включающие в себя такие циклические полиамины, которые сливаются в дополнительные ароматические или гетероароматические кольца, и/или содержащие гетероатом, помимо азота, включенного в кольцо. Структуры, в которых циклический полиамин содержит слитую дополнительную циклическую систему или один или более дополнительных гетероатомов, описаны в патенте США № 5698546 и WO 01/44229, приведенных выше в описании путем цитирования. Также предпочтительными являются

3,7,11,17-тетраазабицикло(13.3.1)гептадека-1(17),13,15-триен;

4,7,10,17-тетраазабицикло(13.3.1)гептадека-1(17),13,15-триен; 1,4,7,10-тетраазациклотетрадекан;

1,4,7-триазациклотетрадекан и

4,7,10-триазабицикло(13.3.1)гептадека-1(17),13,15-триен.

Если Z' не означает циклический полиамин, который обозначен Z, его структуры описаны в патенте США № 5817807, также включенном в описание путем цитирования.

Предпочтительные формы, в которых Z означает формулу

в которой А заключает в себе моноциклическую или бициклическую слитую систему колец, содержащую по меньшей мере один N, а В означает Н или органический фрагмент из 1-20 атомов, описаны в WO 00/56729; WO 02/22600; WO 02/34745 и WO 02/22599, цитируемых выше и включенных в описание посредством ссылок.

Предпочтительные формы линкерного фрагмента включают в себя формы, в которых линкер означает связь или в которых линкер заключает в себе ароматический фрагмент, фланкированный алкиленом, предпочтительно фрагментами метилена. Предпочтительные связующие группы включают в себя метилен, ограниченный структурами 1,3-фенилена, 2,6-пиридина, 3,5-пиридина, 2,5-тиофена, 4,4'-(2,2'-бипиримидина); 2,9-(1,10-фенантролина) и тому подобным. Особенно предпочтительным линкером является 1,4-фенилен-бис-(метилен).

Особо предпочтительные воплощения соединения формулы (1) включают в себя 2,2'-бициклам; 6,6'-бициклам; структуры описаны в патентах США № 5021409 и 6001826 и, в частности, 1,1'-[1,4-фенилен-бис-(метилен)]-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан рассмотрен в патенте США № 5583131 и обозначен в описании AMD3100.

Другие предпочтительные структуры включают в себя

N-[1,4,8,11-тетраазациклотетрадеканил-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-2-(аминометил)пиридин;

7,7'-[1,4-фенилен-бис-(метилен)]-бис-4,7,10,17-тетраазабицикло[13.3.1]гептадека-1(17),13,15-триен;

7,7'-[1,4-фенилен-бис-(метилен)]-бис-3,7,11,17-тетраазабицикло[13.3.1]гептадека-1(17),13,15-триен;

1,1'-[1,3-фенилен-бис-(метилен)]-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

1,1'-[1,4-фенилен-бис-(метилен)]-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

1,1'-[1,4-фенилен-бис-(метилен)]-бис-1,4,7,10-тетраазациклотетрадекан;

1,1'-[1,3-фенилен-бис-(метилен)]-бис-1,4,7,10-тетраазациклотетрадекан;

11,11'-(1,2-пропандиил)-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

N-[4-(1,4,7-триазациклотетрадекан)-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-2-(аминометил)пиридин;

N-[7-(4,7,10-триазабицикло[13.3.1]гептадека-1(17),13,15-триен)-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-2-(аминометил)пиридин;

N-[7-(4,7,10,17-тетраазабицикло[13.3.1]гептадека-1(17),13,15-триен]-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-2-(аминометил)пиридин;

N-[4-[4,7,10,17-тетраазабицикло[13.3.1]гептадека-1(17),13,15-триен)-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-2-(аминометил)пиридин;

3,3'-(бис-1,5,9,13-тетраазациклогексадекан);

3,3'-(бис-1,5,8,11,14-пентаазациклогексадекан)-метилен(или полиметилен)-ди-1-N-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

3,3'-бис-1,5,9,13-тетраазациклогексадекан;

3,3'-бис-1,5,8,11,14-пентаазациклогексадекан;

5,5'-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

2,5'-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

2,6'-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

11,11'-(1,2-этандиил)-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

11,11'-(1,2-пропандиил)-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

11,11'-(1,2-бутандиил)-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

11,11'-(1,2-пентандиил)-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

11,11'-(1,2-гександиил)-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

3,3'-бис-1,5,9,13-тетраазациклогексадекан;

3,3'-бис-1,5,8,11,14-пентаазациклогексадекан;

5,5'-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

2,5'-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

2,6'-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

11,11'-(1,2-этандиил)-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

11,11'-(1,2-пропандиил)-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

11,11'-(1,2-бутандиил)-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

11,11'-(1,2-пентандиил)-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

11,11'-(1,2-гександиил)-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

1,1'-[1,3-фенилен-бис-(метилен)]-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

1,1'-[1,4-фенилен-бис-(метилен)]-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

1,1'-[3,3'-бифенилен-бис-(метилен)]-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

11,11'-[1,4-фенилен-бис-(метилен)]-бис-1,4,7,11-тетраазациклотетрадекан;

1,11'-[1,4-фенилен-бис-(метилен)]-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

1,1'-[2,6-пиридин-бис-(метилен)]-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

1,1'-[3,5-пиридин-бис-(метилен)]-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

1,1'-[2,5-тиофен-бис-(метилен)]-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

1,1'-[4,4'-(2,2'-бипиридин)-бис-(метилен)]-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

1,1'-[2,9-(1,10-фенантролин)-бис-(метилен)]-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

1,1'-[1,3-фенилен-бис-(метилен)]-бис-1,4,7,10-тетраазациклотетрадекан;

1,1'-[1,4-фенилен-бис-(метилен)]-бис-1,4,7,10-тетраазациклотетрадекан;

1,1'-[5-нитро-1,3-фенилен-бис-(метилен)]-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

1,1'-[2,4,5,6-тетрахлор-1,3-фенилен-бис-(метилен)]-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

1,1'-[2,3,5,6-тетрафтор-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

1,1'-[1,4-нафтилен-бис-(метилен)]-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

1,1'-[1,3-фенилен-бис-(метилен)]-бис-1,5,9-триазациклододекан;

1,1'-[1,4-фенилен-бис-(метилен)]-1,5,9-триазациклододекан;

1,1'-[2,5-диметил-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

1,1'-[2,5-дихлор-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

1,1'-[2-бром-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

1,1'-[6-фенил-2,4-пиридин-бис-(метилен)]-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан;

7,7'-[1,4-фенилен-бис-(метилен)]-бис-3,7,11,17-тетраазабицикло[13.3.1]гептадека-1(17),13,15-триен;

7,7'-[1,4-фенилен-бис-(метилен)]-бис-[15-хлор-3,7,11,17-тетраазабицикло[13.3.1]гептадека-1(17),13,15-триен];

7,7'-[1,4-фенилен-бис-(метилен)]-бис-[15-метокси-3,7,11,17-тетраазабицикло[13.3.1]гептадека-1(17),13,15-триен];

7,7'-[1,4-фенилен-бис-(метилен)]-бис-3,7,11,17-тетраазабицикло[13.3.1]гептадека-13,16-триен-15-он;

7,7'-[1,4-фенилен-бис-(метилен)]-бис-4,7,10,17-тетраазабицикло[13.3.1]гептадека-1(17),13,15-триен;

8,8'-[1,4-фенилен-бис-(метилен)]-бис-4,8,12,19-тетраазабицикло[15.3.1]нонадека-1(19),15,17-триен;

6,6'-[1,4-фенилен-бис-(метилен)]-бис-3,6,9,15-тетраазабицикло[11.3.1]пентадека-1(15),11,13-триен;

6,6'-[1,3-фенилен-бис-(метилен)]-бис-3,6,9,15-тетраазабицикло[11.3.1]пентадека-1(15),11,13-триен;

17,17'-[1,4-фенилен-бис-(метилен)]-бис-3,6,14,17,23,24-гексаазатрицикло[17.3.1.1^8,12]тетракоса-1(23),8,10,12(24),19,21-гексаен;

N-[1,4,8,11-тетраазациклотетрадеканил-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-2-(аминометил)пиридин;

N-[1,4,8,11-тетраазациклотетрадеканил-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-N-метил-2-(аминометил)пиридин;

N-[1,4,8,11-тетраазациклотетрадеканил-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-4-(аминометил)пиридин;

N-[1,4,8,11-тетраазациклотетрадеканил-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-3-(аминометил)пиридин;

N-[1,4,8,11-тетраазациклотетрадеканил-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-(2-аминометил-5-метил))пиразин;

N-[1,4,8,11-тетраазациклотетрадеканил-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-2-(аминоэтил)пиридин;

N-[1,4,8,11-тетраазациклотетрадеканил-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-2-(аминометил)тиофен;

N-[1,4,8,11-тетраазациклотетрадеканил-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-2-(аминоэтил)меркаптан;

N-[1,4,8,11-тетраазациклотетрадеканил-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-2-аминобензиламин;

N-[1,4,8,11-тетраазациклотетрадеканил-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-4-аминобензиламин;

N-[1,4,8,11-тетраазациклотетрадеканил-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-4-(аминоэтил)имидазол;

N-[1,4,8,11-тетраазациклотетрадеканил-1,4-фенилен-бис-(метилен)]бензиламин;

N-[1,4,8,11-тетраазациклотетрадеканил-1,4-фенилен-бис-(метилен)]пурин;

N-[1,4,8,11-тетраазациклотетрадеканил-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-4-фенилпиперазин;

N-[4-(1,4,7-триазациклотетрадеканил-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-2-(аминометил)пиридин;

N-[7-(4,7,10,17-тетразабицикло[13.3.1]гептадека-1(17),13,15-триенил)-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-2-(аминометил)пиридин;

N-[7-(4,7,10-триазабицикло[13.3.1]гептадека-1(17),13,15-триенил)-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-2-(аминометил)пиридин;

N-[4-(4,7,10-триазабицикло[13.3.1]гептадека-1(17),13,15-триенил)-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-2-(аминометил)пиридин;

N-[1-(1,4,7-триазациклотетрадеканил)-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-2-(аминометил)пиридин;

N-[4-(4,7,10,17-тетраазабицикло[13.3.1]гептадека-1(17),13,15-триенил]-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-2-(аминометил)пиридин;

N-[3-(3,6,17-триазабицикло[13.3.1]гептадека-1(17),13,15-триенил]-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-2-(аминометил)пиридин;

N-[3-(3,6,17-триазабицикло[13.3.1]гептадека-1(17),13,15-триенил]-1,3-фенилен-бис-(метилен)]-2-(аминометил)пиридин;

N-[4-(4,7,17-триазабицикло[13.3.1]гептадека-1(17),13,15-триенил]-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-2-(аминометил)пиридин;

N-[7-(4,7,17-триазабицикло[13.3.1]гептадека-1(17),13,15-триенил]-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-2-(аминометил)пиридин;

N-[6-(3,6,9-триазабицикло[11.3.1]пентадека-1(15),11,13-триенил]-1,3-фенилен-бис-(метилен)]-2-(аминометил)пиридин;

N-[7-(4,10,17-триазабицикло[13.3.1]гептадека-1(17),13,15-триенил]-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-2-(аминометил)пиридин;

N-[4-(1,7-диазациклотетрадеканил)-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-2-(аминометил)пиридин;

N-[7-(4,10-диазабицикло[13.3.1]гептадека-1(17),13,15-триенил)-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-2-(аминометил)пиридин;

N-[4-(11-фтор-1,4,7-триазациклотетрадеканил)-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-2-(аминометил)пиридин;

N-[4-(11,11-дифтор-1,4,7-триазациклотетрадеканил)-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-2-(аминометил)пиридин;

N-[4-(1,4,7-триазациклотетрадекан-2-он)-ил-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-2-(аминометил)пиридин;

N-[12-(5-окса-1,9-диазациклотетрадеканил)-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-2-(аминометил)пиридин;

N-[4-(11-окса-1,7-диазациклотетрадеканил)-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-2-(аминометил)пиридин;

N-[4-(11-тиа-1,7-диазациклотетрадеканил)-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-2-(аминометил)пиридин;

N-[4-(11-сульфоксо-1,7-диазациклотетрадеканил)-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-2-(аминометил)пиридин;

N-[4-(11-сульфоно-1,7-диазациклотетрадеканил)-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-2-(аминометил)пиридин;

N-[4-(1,4,7-триазациклотетрадекан-3-он)ил))-1,4-фенилен-бис-(метилен)]-2-(аминометил)пиридин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[b]пиридин-9-ил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(6,7-дигидро-5Н-циклопента[b]пиридин-7-ил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(1,2,3,4-тетрагидро-1-нафталенил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(1-нафталенил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-[2-[(2-пиридинилметил)амино]этил]-N'-(1-метил-1,2,3,4-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-[2-[(1Н-имидазол-2-илметил)амино]-этил]-N'-(1-метил-1,2,3,4-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(1,2,3,4-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-[2-[(1Н-имидазол-2-илметил)амино]-этил]-N'-(1,2,3,4-тетрагидро-1-нафталенил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(2-фенил-5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-N'-бис-(2-пиридинилметил)-N'-(2-фенил-5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-5-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(1Н-имидазол-2-илметил)-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-5-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(1Н-имидазол-2-илметил)-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-[(2-амино-3-фенил)пропил]-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(1Н-имидазол-4-илметил)-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(2-хинолинилметил)-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(2-(2-нафтоил)аминоэтил)-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-[(S)-(2-ацетиламино-3-фенил)пропил]-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-[(S)-(2-ацетиламино-3-фенил)пропил]-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-[3-((2-нафталенилметил)амино)пропил]-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-[2-(S)-пирролидинилметил]-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-[2-(R)-пирролидинилметил]-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-[3-пиразолилметил]-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-[2-пирролилметил]-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-[2-тиофенилметил]-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-[2-тиазолилметил]-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-[2-фуранилметил]-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-[2-[(фенилметил)амино]этил]-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(2-аминоэтил)-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-3-пирролидинил-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-4-пиперидинил-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-[2-[(фенил)амино]этил]-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(7-метокси-1,2,3,4-тетрагидро-2-нафталенил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(6-метокси-1,2,3,4-тетрагидро-2-нафталенил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(1-метил-1,2,3,4-тетрагидро-2-нафталенил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(7-метокси-3,4-дигидронафталенил)-1-(аминометил)-4-бензамид;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(6-метокси-3,4-дигидронафталенил)-1-(аминометил)-4-бензамид;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(1Н-имидазол-2-илметил)-N'-(7-метокси-1,2,3,4-тетрагидро-2-нафталенил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(8-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидро-2-нафталенил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(1Н-имидазол-2-илметил)-N'-(8-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидро-2-нафталенил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(8-фтор-1,2,3,4-тетрагидро-2-нафталенил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(1Н-имидазол-2-илметил)-N'-(8-фтор-1,2,3,4-тетрагидро-2-нафталенил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-7-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(1Н-имидазол-2-илметил)-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-7-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-[2-[(2-нафталенилметил)амино]этил]-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-[2-(изобутиламино)этил]-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-[2-[(2-пиридинилметил)амино]этил]-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-[2-[(2-фуранилметил)амино]этил]-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(2-гуанидиноэтил)-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-[2-[бис-[(2-метокси)фенилметил)амино]этил]-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-[2-[(1Н-имидазол-4-илметил)амино]-этил]-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-[2-[(1Н-имидазол-2-илметил)амино]-этил]-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-[2-(фенилуреидо)этил]-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-[[N"-(н-бутил)карбоксамидо]метил]-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(карбоксамидометил)-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-[(N"-фенил)карбоксамидометил]-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(карбоксиметил)-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(фенилметил)-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(1Н-бензимидазол-2-илметил)-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(5,6-диметил-1Н-бензимидазол-2-илметил)-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин(гидробромид);

N-(2-пиридинилметил)-N'-(5-нитро-1Н-бензимидазол-2-илметил)-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-[(1H)-5-азабензимидазол-2-илметил)-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N-(4-фенил-1Н-имидазол-2-илметил)-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-[2-(2-пиридинил)этил]-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(2-бензоксазолил)-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(транс-2-аминоциклогексил)-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(2-фенилэтил)-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(3-фенилпропил)-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N'-(транс-2-аминоциклопентил)-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[[4-[[(2-пиридинилметил)амино]метил]фенил]метил]-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)глицинамид;

N-[[4-[[(2-пиридинилметил)амино]метил]фенил]метил]-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-(L)-аланинамид;

N-[[4-[[(2-пиридинилметил)амино]метил]фенил]метил]-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-(L)-аспартамид;

N-[[4-[[(2-пиридинилметил)амино]метил]фенил]метил]-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)пиразинамид;

N-[[4-[[(2-пиридинилметил)амино]метил]фенил]метил]-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-(L)-пролинамид;

N-[[4-[[(2-пиридинилметил)амино]метил]фенил]метил]-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-(L)-лизинамид;

N-[[4-[[(2-пиридинилметил)амино]метил]фенил]метил]-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)бензамид;

N-[[4-[[(2-пиридинилметил)амино]метил]фенил]метил]-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)пиколинамид;

N'-Бензил-N-[[4-[[(2-пиридинилметил)амино]метил]фенил]- метил]-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)мочевина;

N'-Фенил-N-[[4-[[(2-пиридинилметил)амино]метил]фенил]- метил]-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)мочевина;

N-(6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[бактериапиридин-9-ил)-4-[[(2-пиридинилметил)амино]метил]бензамид;

N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-4-[[(2-пиридинилметил)амино]метил]бензамид;

N,N'-бис(2-пиридинилметил)-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N,N'-бис(2-пиридинилметил)-N'-(6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[бактериапиридин-9-ил)]-1,4-бензолдиметанамин;

N,N'-бис(2-пиридинилметил)-N'-(6,7-дигидро-5Н-циклопента[бактериапиридин-7-ил)]-1,4-бензолдиметанамин;

N,N'-бис(2-пиридинилметил)-N'-(1,2,3,4-тетрагидро-1-нафталенил)-1,4-бензолдиметанамин;

N,N'-бис(2-пиридинилметил)-N'-[(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)метил]-1,4-бензолдиметанамин;

N,N'-бис(2-пиридинилметил)-N'-[(6,7-дигидро-5Н-циклопента[бактериапиридин-7-ил)метил]-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N-(2-метоксиэтил)-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-пиридинилметил)-N-[2-(4-метоксифенил)этил]-N'-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N,N'-бис(2-пиридинилметил)-1,4-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)бензолдиметанамин;

N-[(2,3-диметоксифенил)метил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N,N'-бис(2-пиридинилметил)-N-[1-(N"-фенил-N"-метилуреидо)-4-пиперидинил]-1,3-бензолдиметанамин;

N,N'-бис(2-пиридинилметил)-N-[N"-п-толуолсульфонилфенилаланил)-4-пиперидинил]-1,3-бензолдиметанамин;

N,N'-бис(2-пиридинилметил)-N-[1-[3-(2-хлорфенил)-5-метилизоксазол-4-оил]-4-пиперидинил]-1,3-бензолдиметанамин;

N-[(2-гидроксифенил)метил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[бактериапиридин-9-ил)]-1,4-бензолдиметанамин;

N-[(4-цианофенил)метил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[бактериапиридин-9-ил)]-1,4-бензолдиметанамин;

N-[(4-цианофенил)метил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[(4-ацетамидофенил)метил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[(4-феноксифенил)метил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[бактериапиридин-9-ил])-1,4-бензолдиметанамин;

N-[(1-метил-2-карбоксамидо)этил]-N,N'-бис-(2-пиридинилметил)-1,3-бензолдиметанамин;

N-[(4-бензилоксифенил)метил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[бактериапиридин-9-ил])-1,4-бензолдиметанамин;

N-[(тиофен-2-ил)метил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[бактериапиридин-9-ил)]-1,4-бензолдиметанамин;

N-[1-(бензил)-3-пирролидинил]-N,N'-бис(2-пиридинилметил)-1,3-бензолдиметанамин;

N-[[1-метил-3-(пиразол-3-ил)]пропил]-N,N'-бис(2-пиридинилметил)-1,3-бензолдиметанамин;

N-[1-(фенил)этил]-N,N'-бис(2-пиридинилметил)-1,3-бензолдиметанамин;

N-[(3,4-метилендиоксифенил)метил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[b]пиридин-9-ил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[1-бензил-3-карбоксиметил-4-пиперидинил]-N,N'-бис(2-пиридинилметил)-1,3-бензолдиметанамин;

N-[(3,4-метилендиоксифенил)метил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(3-пиридинилметил)-N'-(2-пиридинилметил)-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[b]пиридин-9-ил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[[1-метил-2-(2-толил)карбоксамидо]этил]-N,N'-бис(2-пиридинилметил)-1,3-бензолдиметанамин;

N-[(1,5-диметил-2-фенил-3-пиразолинон-4-ил)метил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[(4-пропоксифенил)метил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[b]пиридин-9-ил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[(1-фенил-3,5-диметилпиразолин-4-илметил)]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[1Н-имидазол-4-илметил]-N,N'-бис(2-пиридинилметил)-1,3-бензолдиметанамин;

N-[(3-метокси-4,5-метилендиоксифенил)метил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[b]пиридин-9-ил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[(3-цианофенил)метил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[b]пиридин-9-ил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[(3-цианофенил)метил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(5-этилтиофен-2-илметил)-N'-(2-пиридинилметил)-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[b]пиридин-9-ил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(5-этилтиофен-2-илметил)-N'-(2-пиридинилметил)-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[(2,6-дифторфенил)метил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[b]пиридин-9-ил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[(2,6-дифторфенил)метил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[(2-дифторметоксифенил)метил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[b]пиридин-9-ил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-дифторметоксифенилметил)-N'-(2-пиридинилметил)-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(1,4-бензодиоксан-6-илметил)-N'-(2-пиридинилметил)-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[b]пиридин-9-ил)-1,4-бензолдиметанамин;

N,N'-бис(2-пиридинилметил)-N-[1-(N"-фенил-N"-метилуреидо)-4-пиперидинил]-1,4-бензолдиметанамин;

N,N'-бис(2-пиридинилметил)-N-[N"-п-толуолсульфонилфенилаланил)-4-пиперидинил]-1,4-бензолдиметанамин;

N-[1-(3-пиридинкарбоксамидо)-4-пиперидинил]-N,N'-бис(2-пиридинилметил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[1-(циклопропилкарбоксамидо)-4-пиперидинил]-N,N'-бис(2-пиридинилметил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[1-(1-фенилциклопропилкарбоксамидо)-4-пиперидинил]-N,N'-бис(2-пиридинилметил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(1,4-бензодиоксан-6-илметил)-N'-(2-пиридинилметил)-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[1-[3-(2-хлорфенил)-5-метилизоксазол-4-карбоксамидо]-4-пиперидинил]-N,N'-бис(2-пиридинилметил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[1-(2-тиометилпиридин-3-карбоксамидо]-4-пиперидинил]-N,N'-бис(2-пиридинилметил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[(2,4-дифторфенил)метил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(1-метилпиррол-2-илметил)-N'-(2-пиридинилметил)-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[(2-гидроксифенил)метил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[(3-метокси-4,5-метилендиоксифенил)метил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(3-пиридинилметил)-N'-(2-пиридинилметил)-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[2-(N"-морфолинометил)-1-циклопентил]-N,N'-бис(2-пиридинилметил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[(1-метил-3-пиперидинил)пропил]-N,N'-бис(2-пиридинилметил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(1-метилбензимидазол-2-илметил)-N'-(2-пиридинилметил)-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[1-(бензил)-3-пирролидинил]-N,N'-бис(2-пиридинилметил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[[(1-фенил-3-(N''-морфолино)]пропил]-N,N'-бис(2-пиридинилметил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[1-(изопропил)-4-пиперидинил]-N,N'-бис(2-пиридинилметил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[1-(этоксикарбонил)-4-пиперидинил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[(1-метил-3-пиразолил)пропил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[1-метил-2-(N",N"-диэтилкарбоксамидо)этил]-N,N'-бис(2-пиридинилметил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[(1-метил-2-фенилсульфонил)этил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[(2-хлор-4,5-метилендиоксифенил)метил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[1-метил-2-[N"-(4-хлорфенил)карбоксамидо]этил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(1-ацетоксииндол-3-илметил)-N'-(2-пиридинилметил)-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[b]пиридин-9-ил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[(3-бензилокси-4-метоксифенил)метил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[b]пиридин-9-ил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(3-хинолинилметил)-N'-(2-пиридинилметил)-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[(8-гидрокси)-2-хинолинилметил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[b]пиридин-9-ил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-хинолинилметил)-N'-(2-пиридинилметил)-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[b]пиридин-9-ил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[(4-ацетамидофенил)метил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[b]пиридин-9-ил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[1Н-имидазол-2-илметил]-N,N'-бис(2-пиридинилметил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(3-хинолинилметил)-N'-(2-пиридинилметил)-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[b]пиридин-9-ил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(2-тиазолилметил)-N'-(2-пиридинилметил)-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[b]пиридин-9-ил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(4-пиридинилметил)-N'-(2-пиридинилметил)-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[b]пиридин-9-ил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[(5-бензилокси)бензо[b]пиррол-3-илметил]-N,N'-бис(2-пиридинилметил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(1-метилпиразол-2-илметил)-N'-(2-пиридинилметил)-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[b]пиридин-9-ил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[(4-метил)-1Н-имидазол-5-илметил]-N,N'-бис(2-пиридинилметил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[[(4-диметиламино)-1-нафталенил]метил]-N,N'-бис(2-пиридинилметил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[1,5-диметил-2-фенил-3-пиразолинон-4-илметил]-N,N'-бис(2-пиридинилметил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[1-[(1-ацетил-2-(R)пролинил]-4-пиперидинил]-N-[2-(2-пиридинил)этил]-N'-(2-пиридинилметил)-1,3-бензолдиметанамин;

N-[1-[2-ацетамидобензоил-4-пиперидинил]-4-пиперидинил]-N-[2-(2-пиридинил)этил]-N'-(2-пиридинилметил)-1,3-бензолдиметанамин;

N-[(2-циано-2-фенил)этил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[b]пиридин-9-ил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[(N"-ацетилтриптофанил)-4-пиперидинил]-N-[2-(2-пиридинил)этил]-N'-(2-пиридинилметил)-1,3-бензолдиметанамин;

N-[(N"-бензоилвалинил)-4-пиперидинил]-N-[2-(2-пиридинил)этил]-N'-(2-пиридинилметил)-1,3-бензолдиметанамин;

N-[(4-диметиламинофенил)метил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[b]пиридин-9-ил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(4-пиридинилметил)-N'-(2-пиридинилметил)-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(1-метилбензимидазол-2-илметил)-N'-(2-пиридинилметил)-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[b]пиридин-9-ил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[1-бутил-4-пиперидинил]-N-[2-(2-пиридинил)этил]-N'-(2-пиридинилметил)-1,3-бензолдиметанамин;

N-[1-бензоил-4-пиперидинил]-N-[2-(2-пиридинил)этил]-N'-(2-пиридинилметил)-1,3-бензолдиметанамин;

N-[1-(бензил)-3-пирролидинил]-N-[2-(2-пиридинил)этил]-N'-(2-пиридинилметил)-1,3-бензолдиметанамин;

N-[(1-метил)бензо[b]пиррол-3-илметил]-N-[2-(2-пиридинил)этил]-N'-(2-пиридинилметил)-1,3-бензолдиметанамин;

N-[1Н-имидазол-4-илметил]-N-[2-(2-пиридинил)этил]-N'-(2-пиридинилметил)-1,3-бензолдиметанамин;

N-[1-(бензил)-4-пиперидинил]-N-[2-(2-пиридинил)этил]-N'-(2-пиридинилметил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[1-метилбензимидазол-2-илметил]-N-[2-(2-пиридинил)этил]-N'-(2-пиридинилметил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[(2-фенил)бензо[b]пиррол-3-илметил]-N-[2-(2-пиридинил)этил]-N'-(2-пиридинилметил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-[(6-метилпиридин-2-ил)метил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(3-метил-1Н-пиразол-5-илметил)-N'-(2-пиридинилметил)-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,3-бензолдиметанамин;

N-[(2-метоксифенил)метил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,3-бензолдиметанамин;

N-[(2-этоксифенил)метил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[b]пиридин-9-ил)-1,4-бензолдиметанамин;

N-(бензилоксиэтил)-N'-(2-пиридинилметил)-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,3-бензолдиметанамин;

N-[(2-этокси-1-нафталенил)метил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,3-бензолдиметанамин;

N-[(6-метилпиридин-2-ил)метил]-N'-(2-пиридинилметил)-N-(5,6,7,8-тетрагидро-8-хинолинил)-1,3-бензолдиметанамин;

1-[[4-[[(2-пиридинилметил)амино]метил]фенил]метил]гуанидин;

N-(2-пиридинилметил)-N-(8-метил-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил)-1,4-бензолдиметанамин;

1-[[4-[[(2-пиридинилметил)амино]метил]фенил]метил]-гомопиперазин;

1-[[3-[[(2-пиридинилметил)амино]метил]фенил]метил]-гомопиперазин;

транс и цис-1-[[4-[[(2-пиридинилметил)амино]метил]фенил]-метил]-3,5-пиперидиндиамин;

N,N'-[1,4-фенилен-бис-(метилен)]-бис-4-(2-пиримидил)пиперазин;

1-[[4-[[(2-пиридинилметил)амино]метил]фенил]метил]-1-(2-пиридинил)метиламин;

2-(2-пиридинил)-5-[[(2-пиридинилметил)амино]метил]-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин;

1-[[4-[[(2-пиридинилметил)амино]метил]фенил]метил]-3,4-диаминопирролидин;

1-[[4-[[(2-пиридинилметил)амино]метил]фенил]метил]-3,4-диацетиламинопирролидин;

8-[[4-[[(2-пиридинилметил)амино]метил]фенил]метил]-2,5,8-триаза-3-оксабицикло[4.3.0]нонан; и

8-[[4-[[(2-пиридинилметил)амино]метил]фенил]метил]-2,5,8-триазабицикло[4.3.0]нонан.

Способы синтеза соединений, полезные для способа согласно изобретению, изложены в патентах США и заявках, включенных выше в описание путем цитирования.

Как представлено выше, AMD3100 является антагонистом хемокинового рецептора CXCR4 (Gerlach et al. J.Biol. Chem. (2001) 276:14153-14160). Названное соединение препятствует связыванию SDF-1 стромальных клеток костного мозга с CXCR4 на стволовых клетках, что приводит к высвобождению кроветворных стволовых клеток из костного мозга в кровообращение (Broxmeyer et al. Blood (2001) 98:811a (Abstract). В фазе 1 исследования в Университете в Вашингтоне, Сиэттл, однократная доза AMD3100 80 мкг/кг приводила к увеличению количества WBC до 17000/мкл и 6-кратному увеличению пика CD34⁺-клеток-предшественников/CD34⁺- стволовых клеток в кровотоке в пределах 6-часового интервала (Liles et al. Blood 2001 98:737a (Abstract). В другом недавнем исследовании мышам вводили rhG-CSF и рекомбинантный фактор стволовых клеток крысы (rrSCF) с тем, чтобы активировать большое количество стволовых клеток костного мозга в циркуляции, а затем индуцировали сердечный приступ. Комбинация rrSCF и rhG-CSF обеспечивала пик количества циркулирующих стволовых клеток после инъекций в течение 5 суток. На 27 день после оперативного вмешательства было отмечено 68%-ое улучшение выживаемости в леченой группе по сравнению с контролями. В то же время мертвая ткань замещалась регенерирующим миокардом, а все тестируемые функциональные параметры оказались улучшенными по сравнению с контролями (Orlic et al. PNAS (2001) 98:10344-10349).

Соединения согласно изобретению можно получать в виде пролекарств, то есть в защищенных формах, из которых соединения согласно изобретению высвобождаются после введения субъекту. Обычно защитные группы гидролизуются в биологических жидкостях, таких как кровь, таким образом высвобождая активное соединение, или окисляются или восстанавливаются in vivo с высвобождением активного соединения. Пролекарства обсуждаются Smith and Williams Introduction to the Principles of Drug Design, Smith, H. J.: Wright, 2^nd ed., London (1988).

Соединения согласно изобретению, так как они являются полиаминами, можно вводить в виде их аддитивных солей кислот или их комплексов с металлами. Подходящие аддитивные соли кислот включают в себя соли неорганических кислот, которые являются биосовместимыми, включая HCl, HBr, серную, фосфорную кислоту и тому подобное, а также органических кислот, таких как уксусная, пропионовая, масляная и тому подобные кислоты, а также кислот, содержащих более одной карбоксильной группы, таких как щавелевая, глутаровая, адипиновая кислота и тому подобное. Обычно при физиологическом значении рН соединения согласно изобретению находятся в формах аддитивных солей кислот. Особо предпочтительными являются хлоргидраты. Кроме того, при получении в виде очищенных форм соединения также можно кристаллизовать как гидраты.

Соединения согласно изобретению можно вводить как отдельные активные ингредиенты, в виде смесей различных соединений формулы (1) и/или в смеси с дополнительными активными ингредиентами, используемыми в терапевтических или питательных целях, такими как антибиотики, витамины, травяные экстракты, противовоспалительные средства, глюкоза, жаропонижающие средства, анальгетики, гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (GM-CSF), Интерлейкин-1 (IL-1), Интерлейкин-3 (IL-3), Интерлейкин-8 (IL-8), PIXY-321 (слитый белок GM-CSF/IL-3), макрофагальный белок воспаления, фактор стволовых клеток, тромбопоэтин, связанный с ростом онкоген, или химиотерапевтические средства и т.п.

Соединения согласно изобретению могут быть получены для введения животным с использованием общепринятых способов получения, хорошо известных в данной области. Препараты, которые подходят для определенных способов введения и для соединений типа соединений формулы (1), можно обнаружить в последнем издании Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA.

Предпочтительно, соединения вводят посредством инъекции, наиболее предпочтительно - внутривенной инъекции, а также посредством подкожной или внутрибрюшинной инъекции и т.п. Дополнительные парентеральные способы введения включают в себя внутримышечную и внутрисуставную инъекции. Для внутривенного или парентерального введения соединения готовят в подходящей жидкой форме с необходимыми наполнителями. Композиции могут содержать липосомы или другие подходящие носители. Для внутривенной инъекции готовят изотонические растворы, используя стандартные препараты, такие как раствор Хэнкса.

Кроме инъекции, также можно применять и другие способы введения. Соединения могут быть составлены в таблетки, капсулы, сиропы, порошки или другие подходящие формы для перорального введения. При применении соответствующих наполнителей названные соединения также можно вводить через слизистые оболочки, используя суппозитории или интраназальные спреи. Также может оказаться эффективным чрескожное введение при использовании подходящих смачивающих веществ и контроля скорости высвобождения.

Выбранный препарат и способ введения специально приспосабливают для индивидуального субъекта в соответствии с природой состояния, которое лечат у субъекта, и назначением лечащего врача.

Соответствующие диапазоны доз для соединений формулы (1) изменяют в соответствии с приведенными соображениями, но в основном соединения вводят в диапазоне приблизительно 0,1 - 5 мг/кг массы тела; предпочтительно приблизительно 1 - 300 мкг/кг массы тела; наиболее предпочтительно - около 10 - 100 мкг/кг массы тела. Таким образом, для человека с массой 70 кг диапазон доз составляет приблизительно от 0,7 мкг до 350 мг; предпочтительно - примерно от 700 мкг до 21 мг; наиболее предпочтительно - примерно от 700 мкг до 7 мг. Если соединения вводят перорально или чрескожно, дозировки могут быть более высокими по сравнению, например, с внутривенным введением.

Соединения можно вводить в виде однократной болюсной дозы, сверхурочной дозы при внутривенном или чрескожном введении или в виде многократных доз.

Кроме непосредственного введения субъекту, соединения формулы (1) можно применять в соответствии с методами обработки ex vivo, чтобы получить клеточные культуры, которые затем используются для пополнения клеток крови субъекта. Обработка ex vivo может быть проведена на аутогенных клетках, собранных из периферической крови или костного мозга, или из аллотрансплантата от подобранных доноров. Концентрация соединения или соединений формулы (1), отдельно или в комбинации с другими агентами, такими как макрофагальный белок воспаления, подбирается в обычном режиме.

Субъектами, положительно реагирующими на способ согласно изобретению, являются, в частности, медицинские и ветеринарные пациенты, включая человека. К другим пациентам, для которых способы согласно изобретению оказываются полезными, относятся кошки, собаки, крупные животные, птицы, такие как цыплята, и т.п. Вообще любой субъект, которому показано повышение количества клеток-предшественников и/или стволовых клеток, или же клетки-предшественники и/или стволовые клетки которого подходят для трансплантации стволовых клеток, соответствует для назначения способа согласно изобретению.

Типичные состояния, которые могут быть улучшены или на которые можно оказать благоприятное воздействие, применяя способ согласно изобретению, включают в себя нарушения кроветворения, такие как апластическая анемия, лейкозы, индуцированные лекарствами анемии и нарушения кроветворения после химиотерапии или лучевой терапии. Способ согласно изобретению также используют для повышения успешности трансплантации во время или после иммуносупрессивных терапий, а также для достижения более эффективного заживления ран и лечения бактериального воспаления. Кроме того, способ согласно изобретению используют для лечения субъектов с ослабленным иммунитетом или же индивидов, иммунная система которых нарушена. Пациенты с типичными состояниями, интенсивность симптомов которых снижается или на которые оказывает благоприятное воздействие способ согласно изобретению, включают в себя субъектов, которые инфицированы ретровирусами, а точнее тех, которые инфицированы вирусом иммунодефицита человека (HIV; ВИЧ). Таким образом, способ согласно изобретению направлен на широкий спектр состояний, при которых показано повышение количества клеток-предшественников и/или стволовых клеток у субъекта или при которых сбор клеток-предшественников и/или стволовых клеток для последующей трансплантации стволовых клеток будет целесообразным.

Соединения согласно изобретению также вводят, чтобы вызвать регенерацию миокарда путем активации стволовых клеток костного мозга.

Теперь, когда изобретение в основном описано, некоторые аспекты будет легче понять с помощью следующих примеров, которые представлены в качестве иллюстрации и, если не указано особо, не предназначены для ограничения данного изобретения.

Пример 1

Повышение уровней клеток-предшественников у мышей

Оценивали влияние подкожного (s.c.) введения 1,1'-[1,4-фенилен-бис-(метилен)]-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекана (AMD3100) мышам С3Н/Н3 J на количество гранулоцитарно-макрофагальных (CFU-GM), эритроидных (BFU-E) и полипотентных (КОЕГЭММ) клеток-предшественников в 1 мл крови. Для образования колоний in vitro предшественники стимулировали комбинацией 1 Ед/мл rhu Epo, 50 нг/мл SLE, кондиционированной средой мышиных клеток селезенки, содержащей 5% об./об. митогена лаконоса (PWMSCM), и 0,1 мМ гемина. Планшеты считали после 7 дней инкубации.

Наблюдали количество клеток-предшественников мобилизированных AMD3100 в зависимости от времени при однократной подкожной инъекции 5 мг/кг и результаты представлены в Таблице 1.

Таблица 1 Абсолютное число клеток-предшественников
в 1 мл крови
Метилцеллюлозная культураCFU-GMBFU-ECFU-GEMMКонтроль289,849,425,8AMD3100:15''791,6134,590,4AMD3100:33''1805,5209,3113,5AMD3100:120''828,7102,347,6

Чтобы оценить дозозависимые эффекты, AMD3100вводили в концентрации 1, 2,5, 5 и 10 мг/кг путем однократной подкожной инъекции и определяли количество предшественников в 1 мл крови за 1 час после введения, результаты представлены в Таблице 2.

Таблица 2 Абсолютное число клеток-предшественников
в 1 мл крови
Метилцеллюлозная культураCFU-GMBFU-ECFU-GEMMКонтроль188,11619AMD3100:10 мг/кг825,6120,579,8AMD3100:5 мг/кг608,492,869,5AMD3100:2,5 мг/кг687,698,970,6AMD3100:1 мг/кг4246227,1

Суммированное изменение по сравнению с 0 временем

 Предшественники
Метилцеллюлозная культураВремяGMBFU-ECFU-GEMM15''2,732,723,5130''6,234,244,412'2,862,071,85

Максимальной мобилизации клеток-предшественников достигали при использовании дозы 2,5-10 мг/кг AMD3100 приблизительно через 0,5-1 час после инъекции, что показано в Таблице 3.

Пример 2

Мобилизация клеток-предшественников мыши при комбинировании с MIP-1α и G-CSF

Исследовали способность AMD3100 в комбинации с макрофагальным белком воспаления мыши (mu) (MIP-1α) мобилизировать клетки-предшественники путем предварительного введения rhu G-CSF или без него. Ранее было показано, что MIP-1α способствует мобилизации клеток-предшественников у мышей и человека (Broxmeyer, H.E. et al. Blood Cells, Molecules and Diseases (1998) 24(2):14-30).

Группы мышей рандомизировали для введения с помощью подкожной инъекции контрольного разбавителя (физиологический раствор) или G-CSF в дозе 2,5 мкг на мышь дважды в день в течение двух дней. Через одиннадцать часов после последней инъекции физиологического раствора или G-CSF мышей делили на группы, которые получали MIP-1α, вводимый внутривенно в общей дозе 5 мкг, AMD3100, вводимый подкожно в дозе 5 мг/кг, или комбинацию MIP-1α и AMD3100 в тех же дозах. Через один час мышей умерщвляли, и определяли количество клеток-предшественников в 1 мл крови. Полученные результаты суммированы на чертеже.

В мобилизации клеток-предшественников AMD3100 действовал более эффективно, чем аддитивный способ, если его применяли в комбинации с макрофагальным белком воспаления мыши (mu) (MIP)-1α, при этом каждый вводили через 11 часов после введения rhu G-CSF или контрольного разбавителя (физиологического раствора) и за 1 час до взятия крови.

Пример 3

Клиническое повышение уровней клеток-предшественников

Исследование проводили на пяти здоровых волонтерах, имеющих исходное количество белых клеток крови от 4500 до 7500 клеток/мм³. Каждый пациент получал однократную подкожную (s.c.) инъекцию 80 мкг/кг AMD3100 (то есть 1,1'-[1,4-фенилен-бис-метилен)]-бис-1,4,8,11-тетраазациклотетрадекан) в 0,9% физиологическом растворе из исходного раствора 10 мг/мл AMD3100 в физиологическом растворе в стерильных условиях. Образцы крови отбирали с помощью катетера до введения дозы и через различные периоды времени вплоть до 24 часов после введения препарата.

Образцы крови оценивали относительно общего количества белых клеток крови, CD34-позитивных клеток-предшественников (с помощью анализа FACS) как процент общего количества белых клеток крови, а также абсолютного количества в 1 мл и статуса в кровообращении гранулоцитарно-макрофагальных (CFU-GM), эритроидных (BFU-E) и полипотентных (КОЕГЭММ) клеток-предшественников.

Как видно из таблиц 3 и 4, введение AMD3100 вызывало повышение количества белых клеток крови и CD34-позитивных клеток-предшественников у волонтеров, которое оказывалось максимальным через 6 часов после введения.

Таблица 3
AMD3100-индуцированная мобилизация белых клеток крови у разных волонтеров (х 10³ WBC)IDТестированиеИсходные данныеЛечение30
мин1
час2
часа4
часа6
час9
час2
дняР17,46,418,0214,821,423,226,222,37,07Р26,045,456,538,9313,518,019,219,68,03Р34,385,87,149,28Не определено18,1017,918,44,98Р45,085,314,377,3812,414,615,813,94,98Р54,535,026,088,43Не определено16,9019,319,004,57Таблица 4
AMD3100-индуцированная мобилизация CD34-позитивных клеток, выраженная как процент от общего количества WBC у разных волонтеровIDИсходные данныеЛечение1 час3 часа6 часов9 часов2 дняР1,07,04,07,11,11,08Р2,08,06,08,13,11,12Р3,07,16,06Не определено,11,07Р4,05,07,09,09,1,1Р5,12,12,13,2,2,16

В крови также исследовали упомянутые предшественники, активированные AMD3100.

Определяли абсолютное число неразделенных нуклеарных клеток и нуклеарных клеток низкой плотности в 1 мл крови (разделение в Fico-hypaque), а также абсолютное число в 1 мл и статус в круге кровообращения гранулоцитарно-макрофагальных (CFU-GM), эритроидных (BFU-E) и полипотентных (КОЕГЭММ) клеток-предшественников у нормальных доноров, которым подкожно вводили AMD3100. Вышеуказанные показатели оценивали перед введением и через 1, 3, 6, 9 и 24 часа после введения AMD3100. Все результаты относительно клеток-предшественников представлены на основании оценки 3 культуральных планшетов на анализ на точку.

Количество клеток-предшественников и статус в круге кровообращения, количества CFU-GM, BFU-E и КОЕГЭММ исследовали в метилцеллюлозных культурах при стимуляции клеток 1 Ед/мл рекомбинантного человеческого (rhu) эритропоэтина, 100 Ед/мл rhu гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (GM-CSF), 100 Ед/мл rhu Интерлейкина-3 (IL-3) и 50 нг/мл rhu steel-фактора (SLF=фактор стволовых клеток (SCF)). CFU-GM также оценивали в агаровых культурах после стимуляции 100 Ед/мл rhu GM-CSF и 50 нг/мл rhu SLE. В обоих типах исследований колонии оценивали после 14 часов инкубации в увлажненной атмосфере с 5% СО₂ и пониженном (5%) давлении О₂. Статус клеток-предшественников в круге кровообращения определяли, используя высокоспецифичный цитолитический способ, по активности [³Н]-тимидина, как описано ранее (Broxmeyer, H.E. et al. Exp. Hematol. (1989) 17:455-459.

Результаты представляли сначала как среднее суммарное изменение в абсолютном количестве нуклеарных клеток и предшественников за 1, 3, 6, 9 и 24 часа по сравнению с их количеством до инъекции (=Время (Т)0) для всех пяти доноров, что представлено в таблицах 5-7.

В таблицах ниже

STD - Стандартное отклонение

STE - Стандартная ошибка

PBL-US - периферическая кровь - неразделенная

PBL-LD - периферическая кровь - низкая плотность (разделение в Ficoll)

Р - Значимость с использованием 2-параметрического t-теста

Таблица 5
Суммарное изменение, сравниваемое с периодом временем=0 (Средняя величина из 5 клонов) Содержание нуклеарных клетокPBL-USPBL-LDСред-
нееSTDSTE%CHGPСред-
нееSTDSTE%CHGPT=01,000,000,000,0 1,000,000,000,0 T=11,690,000,0068,60,0171,860,000,0086,20,000T=32,800,510,23180,20,0002,860,280,12185,60,000T=63,260,610,27225,80,0003,660,430,19266,30,001T=93,090,690,31209,40,0003,641,180,53264,30,001T=241,070,650,297,00,5531,051,190,534,60,815

Таблица 6
Метилцеллюлозная культура CFU-GMBFU-ECFU-GEMMСред-нийSTDSTE%CHGPСред-нийSTDSTE%CHGPСред-
нийSTDSTE%CHGPT=01,000,000,000,0 1,000,000,000,0 1,000,000,000,0 T=14,770,000,00376,70,0011,990,000,0098,90,0022,320,000,00131,80,000T=313,661,560,701266,50,0013,210,500,22221,30,0044,330,440,20332,50,000T=621,715,782,582070,60,0006,011,250,56500,50,00610,070,590,27907,20,002T=910,475,092,28947,30,0004,342,991,34334,40,0005,254,542,03425,40,014T=241,563,011,3455,50,0051,261,020,4526,30,1941,533,041,3653,20,199

Таблица 7
Агаровая культура
CFU-GM СреднееSTDSTE%CHGPT=01,000,000,000,0 T=12,810,000,00180,80,001T=38,540,750,34754,10,000T=617,931,620,721692,80,000T=910,254,572,04924,90,000T=242,082,061,03108,30,073

В таком случае результаты представлены как суммарное изменение от уровней Т=0 для каждого индивидуального донора, как показано в таблицах 8-10.

Таблица 8
Суммарное изменение, сравниваемое с периодом временем=0 для каждого индивидуального пациента (Р) Содержание нуклеарных клетокPBL-USPBL-LDР1Р2Р3Р4Р5Р1Р2Р3Р4Р5T=01,001,001,001,001,001,001,001,001,001,00T=12,541,381,381,361,762,071,991,481,662,10T=33,552,742,022,463,232,833,252,172,823,20T=63,972,942,742,604,044,073,902,272,785,30T=93,273,302,692,243,963,654,432,472,485,17T=241,211,430,960,770,991,011,710,790,601,12

Таблица 9
ПредшественникиМетилцеллюлозная культура CFU-GMBFU-ECFU-GEMMP1P2P3P4P5P1P2P3P4P5P1P2P3P4P5Т=01,001,001,001,001,001,001,001,001,001,001,001,001,001,001,00Т=15,095,333,706,872,842,581,462,301,462,132,072,262,221,963,07T=37,1217,0215,0720,728,405,131,982,612,603,754,253,474,345,144,43T=614,6623,9620,9928,5420,399,143,674,543,349,357,479,356,529,1017,92T=96,2612,519,4214,0810,095,434,613,712,935,052,647,092,474,529,55T=241,101,911,431,511,831,061,881,140,791,441,122,620,690,982,25

Таблица 10 Агаровая культура CFU-GMР1Р2Р3Р4Р5Т=01,001,001,001,001,00T=13,053,741,672,712,87T=38,889,497,4710,466,40T=617,7724,0114,0413,0720,75T=9 10,287,7210,2212,78T=24 3,691,131,302,20

Точное количество нуклеарных клеток и клеток-предшественников в 1 мл крови и статус в кругу кровообращения (=% предшественников в фазе (S) синтеза ДНК клеточного цикла) предшественников для каждого из пяти доноров (#'s Р1, Р2, Р3, Р4 и Р5) представлено в таблицах 11 и 12.

Результаты для всех доноров хорошо согласуются с максимальным суммарным увеличением циркулирующих количеств клеток-предшественников, обнаруженных через 6 часов после введения AMD3100 донору-человеку. Предшественники демонстрировали низкую циркулируемость или отсутствие циркулируемости до введения и через 1, 3, 6, 9 и 24 часа после введения AMD3100.

Пример 4

Мобилизированные стволовые клетки костного мозга для восстановления миокарда

Взрослых крыс анестезировали и проводили торакотомию. Лигировали нисходящую ветвь левой коронарной артерии и повторно не перфузировали. В течение 4-6 часов после лигирования животным вводили предельное разведение AMD3100 или AMD-3100 плюс rhG-CSF. Контрольных крыс не лечили названными средствами. Животных проверяли с интервалами в одну неделю с помощью эхокардиографии и MRI. Эксперимент заканчивали через 2, 6-12 недель после оперативного вмешательства. В день умерщвления исследовали гемодинамические функции относительно терминального диастолического давления левого желудочка, развивающегося давления левого желудочка и скорости повышения и снижения давления левого желудочка. Затем сердце останавливали в диастоле и перфузировали через брюшную аорту, чтобы отмыть сохранившуюся кровь из сосудистой сети миокарда. За этим следовала перфузия сердца 10%-ным формалином. Брали несколько кусочков ткани из всего фиксированного сердца и кусочки ткани пропитывали парафином и делали срезы. Срезы окрашивали и исследовали методом световой микроскопии, чтобы установить размер инфаркта у леченых и контрольных животных. Тканевые срезы сердца, взятые через 2 недели после оперативного вмешательства, окрашивали антителами, специфичными в отношении незрелых развивающихся миоцитов и белков кровеносных сосудов, и исследовали методом конфокальной микроскопии. Иммуногистохимический анализ включал идентификацию факторов транскрипции и поверхностных маркеров, экспрессирующихся на ранних стадиях развития миоцитов. Результаты описанного эксперимента показывают, что если реагент AMD3100 вводить в течение часов после индукции ишемии сердца вместе с rhG-CSF или без него, реагент будет быстро мобилизировать стволовые клетки костного мозга и приводить к блокаде ремоделирования сердца и образования рубца и будет приводить к регенерации мертвого миокарда.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается применения соединения формулы Z-линкер-Z' (1), являющегося антагонистом хемокининового рецептора CXCR4, для получения лекарственного средства для мобилизации и сбора клеток-предшественников и/или стволовых клеток у субъекта. Заявленное решение также описывает способы повышения количества клеток-предшественников и стволовых клеток у животных с использованием соединений, которые связывают хемокиновый рецептор CXCR4. Применение соединения формулы (1) позволяет повысить эффективность лечения ВИЧ, смягчить неблагоприятные воздействия на костный мозг при химиотерапии. 18 з.п. ф-лы, 12 табл., 1 ил.

1. Применение соединения, которое является антагонистом хемокининового рецептора CXCR4, для получения лекарственного средства для мобилизации и сбора клеток-предшественников и/или стволовых клеток у субъекта.2. Применение по п.1, где указанное соединение имеет формулу

или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства, где Z означает циклический полиамин, содержащий 9-32 кольцевых элемента, 2-8 из которых являются атомами азота, причем указанные атомы азота отделены друг от друга по меньшей мере 2 атомами углерода, и где указанный гетероцикл необязательно содержит дополнительные гетероатомы, помимо азота, и/или может быть слит с дополнительной системой колец;

или Z означает формулу

где А содержит моноциклическую или бициклическую слитую систему колец, содержащую по меньшей мере один N, а В означает Н или органический фрагмент из 1-20 атомов,

Z' может быть либо представлен в виде, определяемом для Z выше, либо может иметь формулу

-N(R)-(CR2)n-X

в которой каждый R независимо означает Н или прямой, разветвленный или циклический алкил (1-6С), n равно 1 или 2, а Х означает ароматическое кольцо, включая гетероароматические кольца, или означает меркаптан; и

"линкер" представляет собой связь, алкилен (1-6С) или может содержать арил, слитый арил и/или атомы кислорода, заключенные в цепь алкилена, и/или может содержать кето-группы и/или атомы азота или серы.

-N(R)-(CR₂)_n-X

где каждый R, N и Х соответствуют тому, как определено в п.2.

в которой А содержит моноциклическую или бициклическую слитую систему колец, содержащую по меньшей мере один N, а В означает Н или органический фрагмент из 1-20 атомов.