СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СТРЕССОВОЙ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ ЛОШАДЕЙ МОЛОЧНЫХ ПОРОД Российский патент 2008 года по МПК A61B10/00 A01K67/02 

Изобретение относится к области биологии и может использоваться на лошадях молочных пород.

В настоящее время известно несколько способов определения стрессовой чувствительности животных.

В свиноводстве наиболее распространена галотановая проба. Для проведения галотановой пробы используют газ галотан (фторотан, 1-трифтор-2-хлор-2-бромэтан). Поросятам в возрасте 3-12 недель дают наркоз с помощью маски, в которую вводят смесь, состоящую из 94-98% кислорода и 2-6% галотана. Продолжительность обработки при концентрации галотана 5-6% - 1 мин, 2-3% - 3-5 мин. Через несколько минут после вдыхания газа у молодняка наступает стрессовое состояние, о котором судят по напряжению мышц.

Применение галотана для определения стресс-чувствительности имеет ряд недостатков. Галотановую пробу ставят только на молодняке свиней, главным образом в возрасте 2-3 мес. Галотан - сравнительно дорогой наркотик, использование его, особенно при нарушении техники безопасности, может нанести ущерб здоровью людей, работающих с ним. Кроме того, отход среди положительно реагирующих животных очень высок (до 3%). И, наконец, этот метод не может быть использован для определения степени реактивности животных на незначительные по силе и непродолжительно действующие стрессоры.

С.И.Плященко, В.Т.Сидоров (1987) [5] предлагают оценивать стресс-чувствительность путем определения уровня концентрации в крови фермента креатинфосфокиназы (КФК). У свиней, устойчивых к стрессу, уровень КФК в крови в 10 раз ниже, чем у чувствительных. Этот способ трудоемок, требует большого вложения денежных средств на его проведение, поэтому для применения на производстве он нерентабелен.

Опубликован способ, разработанный Ю.Д.Романовым и Л.В.Тращенковой (1989) [6]. Суть его заключается в том, что для определения стрессовой чувствительности у свиней используется неспецифическая реакция организма животных, которая возникает в виде посттрансфузионного иммунологического шока после введения определенной дозы 50%-ной суспензии эритроцитов доноров с антигеном Ac на строме. Способ выполнения - путем внутривенного введения 50%-ной суспензии эритроцитов с антигеном Ac системы А группы крови свиньям, имеющим в крови естественные неполные анти-Ac тела, при этом у некоторых животных возникает посттрансфузионный иммунологический шок легкой степени, по его наличию или отсутствию животных подразделяют на стресс-предрасположенных и стресс-устойчивых.

Методика сложна в выполнении и экономически не выгодна на производстве, так как требует больших затрат и сложного оборудования при производстве суспензии эритроцитов-доноров.

Э.П.Кокорина (1978) [2] разработала способ определения стресс-устойчивости коров, основанный на установлении интенсивности торможения рефлекса молокоотдачи, возникающего у животного в ответ на тормозное воздействие. Оценка стресс-устойчивости и стресс-чувствительности проводится непосредственно на скотном дворе без каких-либо изменений обычной технологии машинного доения. Стрессором служит доение коровы дояркой, ранее никогда не доившей данную корову («чужая» доярка).

Ф.Ф.Эйснер, Л.П.Резниченко разработали и апробировали методику оценки стресс-устойчивости коров по их ответной реакции на введение АКТГ. В результате исследований установлена связь между глюкокортикоидной реактивностью и удоем. Высокая молочная продуктивность в 90,9% случаев сочетается с высокой адренокортикальной реактивностью.

Ориентировочно стресс-чувствительность коров можно оценивать по изменению количества соматических клеток в молоке. У стресс-чувствительных животных число их при воздействии стрессора увеличивается в несколько раз (от 300 тыс. до 5 млн./мм³) (Плященко С.И., Сидоров В.Т. 1987).

Методики Кокориной и Эйснера-Резниченко не являются универсальными, так как апробированы только для дойных коров.

Рассмотренные способы определения стресс-устойчивости и стресс-чувствительности еще недостаточно отработаны, трудоемки и требуют определенных условий. Необходимы дальнейшие поиски более простых, надежных и объективных способов оценки чувствительности животных к воздействию стресс-факторов, широкие исследования по использованию этих методов в селекционной работе, направленной на выведение стресс-устойчивых пород, линий, гибридов, отличающихся крепким здоровьем, высокой продуктивностью и дающих качественную продукцию.

Известен более упрощенный способ определения стресс-чувствительности свиней, разработанный А.И.Кузнецовым и Ф.А.Сунагатуллиным (1991) [5], позволяющий в условиях промышленной технологии и крупных свиноферм быстро отселекционировать маточное поголовье по этому признаку. В основу этого метода определения стресс-чувствительности животных был взят принцип локального адаптационного синдрома (ЛАС). ЛАС является удобной моделью определения стрессовой чувствительности животных. Авторы этого метода предлагают для определения стрессовой чувствительности свиней применить в качестве раздражителя скипидар. При внутрикожном введении он вызывает яркий локальный адаптационный синдром в форме асептического воспаления участка кожи и окружающих тканей.

Анализ доступной нам литературы и практических источников по коневодству позволяет утверждать, что способы определения стрессовой чувствительности лошадей на сегодняшний день не созданы.

За прототип взят метод определения стрессовой чувствительности, разработанный Кузнецовым А.И. и Сунагатуллиным Ф.А., который применяется на свиньях.

Ремонтным свинкам в возрасте 6-7 месяцев внутрикожно в область середины наружной поверхности ушной раковины с помощью безыгольного инъектора вводится эфирное масло (скипидар) в дозе 0,1 мл, что вызывает местную неспецифическую ответную реакцию организма в виде асептического воспаления места введения. Через 24 часа по характеру реакции (величина припухлости, утолщение ушной раковины, температура, болезненность, гиперемия места введения) определяют чувствительность животных на инъекцию препарата:

воспалительный процесс в месте введения скипидара полностью отсутствует - стресс-устойчивые животные;

воспалительный процесс в месте введения препарата резко выраженный (утолщение ушной раковины увеличивается на 21-30 мм, ее температура - на 1,0-1,5°С выше нормы) - стресс-чувствительные животные;

воспалительный процесс в месте введения скипидара характеризуется утолщением ушной раковины на 10-12 мм, незначительным повышением местной температуры - стресс-сомнительные.

Методика Кузнецова А.И., Сунагатуллина Ф.А. разработана, апробирована и внедрена в производство только применительно к свиньям.

Целью настоящего изобретения является разработка способа определения стрессовой чувствительности лошадей.

В основу реализации поставленной задачи был взят принцип локального адаптационного синдрома (ЛАС). Известно, что особенности течения ЛАС, как правило, соответствуют характеру проявления общего адаптационного синдрома (М.Ковальчикова, К.Ковальчик, 1978 [1]). В этой связи ЛАС является удобной моделью в определении стрессовой чувствительности животных. Важным моментом в решении этой задачи был подбор дозируемого раздражителя. Поиск и анализ соответствующей литературы позволил нам остановиться на очищенном эфирном масле, которое широко используется в ветеринарной практике в разных формах с лечебной и профилактической целью (М.Д.Машковский, Д.К.Червяков с соавт., 1977 [4, 7]). Это средство легко дозируется, обладает сильными асептическими свойствами, при применении предотвращает распространение инфекции и не требует обработки места инъекции, удобно для применения с помощью безыгольных инъекторов. При внутрикожном введении вызывает яркий локальный адаптационный синдром в форме асептического воспаления участка кожи и окружающих тканей.

Для определения пороговой дозы введения эфирного масла и оптимального времени характера течения адаптационного синдрома провели следующие наблюдения. В условиях крестьянского хозяйства Карсакбаева К.Б. было сформировано пять групп полновозрастных дойных кобыл башкирской породы с известной молочной продуктивностью по 12 голов в каждой. В связи с тем, что адаптационные свойства у каждого животного на действие одного и того же раздражителя различные, группы формировали по принципу аналогов с учетом стрессовой чувствительности кобыл. Наиболее объективным показателем, отражающим уровень чувствительности кобыл к меняющимся условиям, является молочная продуктивность. С этой целью в каждой группе кобыл животные были разделены еще на три подгруппы в зависимости от молочной продуктивности: в первую подгруппу включали высокомолочных (1600 л и выше), во вторую - низкомолочных (менее 1200 л), в третью - со средней молочной продуктивностью (1201-1599 л). Всем кобылам внутрикожно в среднюю треть шеи вводили эфирное масло первой группе в дозе 0,025, второй - 0,05, третьей - 0,06, четвертой - 0,075 мл, пятой - 0,1.

В качестве показателей характера течения местного адаптационного синдрома использовали диаметр припухлости, утолщение кожной складки в сравнении с аналогичным участком кожи на противоположной стороне шеи. Для измерения утолщения кожной складки использовали штангенциркуль, диаметра припухлости - рулетку. Оценку локального адаптационного синдрома проводили в течение 144 ч через каждые 24 ч. Для удобства анализа, оценки и описания характер локального адаптационного синдрома оценивали в крестах:

0 - полное отсутствие местной реакции;

× - ограниченная, безболезненная припухлость округлой формы в диаметре до 5 см и утолщение кожной складки менее 10 мм;

×× - ограниченная припухлость в диаметре 6-10 см и утолщение кожной складки 11-15 мм;

××× - реакция сильно выражена, протекает с захватом обширной зоны, диаметр припухлости более 11 см, утолщение кожной складки 16 и более мм.

Результаты определения пороговой дозы применения эфирного масла и оптимального времени оценки характера течения адаптационного синдрома представлены в таблице 1. Из приведенных данных видно, что у кобыл первой группы во всех трех подгруппах после введения 0,025 мл эфирного масла ответная реакция не имела характерных, ярко выраженных отличий в зависимости от уровня их продуктивности. У высокомолочных и среднемолочных она была силой в один крест и сохранялась 48 часов. У низкомолочных - силой в два креста была 24 часа, силой в один крест продолжалась до 72 часов.

У лошадей второй и третьей группы после введения эфирного масла в дозе 0,05 и 0,06 мл ответная реакция была более выраженной, а в каждой подгруппе ее характер имел отличительные особенности в зависимости от молочной продуктивности. Через 24 часа ответная реакция у всех кобыл была силой в три креста. У низкомолочных она сохранялась до 72 часов. У высокомолочных после 24 часов реакция была менее выраженной и к 96-му часу она полностью исчезала. У животных со средней молочной продуктивностью после 24 часов реакция также была менее выраженной, однако она исчезала после 96 часов с момента введения препарата. У низкомолочных животных реакция сохранялась более 144 часов

Табл.1
1. Характеристика локального адаптационного синдрома у дойных кобыл с разной молочной продуктивностью на внутрикожное введение эфирного масла в область середины шеи в разных дозахГруппы животных, n=12Доза препарата, млМолочная продуктивность кобыл, лВремя оценки реакции с момента введения, часы24487296120144Характер течения локального адаптационного синдрома (в крестах)10,0251600 и более××00001201-1599××0000менее 1200××××00020,051600 и более××××××0001201-1599××××××××00менее 1200×××××××××××××30,061600 и более××××××0001201-1599××××××××00менее 1200×××××××××××××40,0751600 и более×××××××001201-1599×××××××××××менее 1200××××××××××××50,11600 и более×××××××××××××××××1201-1599×××××××××××××××××менее 1200××××××××××××××××××

У кобыл четвертой и пятой групп после введения препарата локальный адаптационный синдром был сильно выраженным и оценивался в три креста. Воспалительный процесс протекал с захватом обширной зоны и длился более 144 часов.

Таким образом, из анализа полученных результатов видно, что эфирное масло, введенное внутрикожно, вызывает локальный адаптационный синдром в форме асептического воспаления, продолжительность и степень выраженности которого зависят от дозы препарата и уровня молочной продуктивности кобыл. Оптимальной дозой эфирного масла, вызывающей характерный локальный адаптационный синдром, является 0,05-0,06 мл. В этой дозе препарат вызывает ярко выраженную воспалительную реакцию, особенности которой проявляются в зависимости от стрессовой чувствительности.

Анализируя полученные данные, можно сделать вывод, что при введении лошадям молочных пород в среднюю треть шеи безыгольным инъектором внутрикожно 0,05-0,06 мл эфирного масла (скипидара очищенного) вызывает местную неспецифическую ответную реакцию организма и через 96-120 часа позволяет определить стрессовую чувствительность по местной реакции: утолщение кожной складки 10 и более мм и диаметр припухлости 5 и более см - стресс-чувствительные; утолщение кожной складки до 10 мм и диаметр припухлости до 5 см - стресс-сомнительные; при отсутствии реакции - стресс-устойчивые.

Ответная реакция лошадей на скипидар и ее взаимосвязь с уровнем стрессовой чувствительности объясняется тем, что применяемая доза препарата является слабым раздражителем, вызывающим местную неспецифическую ответную реакцию. Известно, что любая ответная реакция организма контролируется нервной и эндокринной системами. Одной из главных особенностей центральной нервной системы является уравновешенность процессов возбуждения и торможения.

Животные, у которых процессы возбуждения и торможения сильные и уравновешенные, как правило, обладают высокой устойчивостью к действию отрицательных раздражителей. Поэтому в зависимости от силы отрицательного раздражителя они могут на него не реагировать совсем или реагировать слабо, сохраняя при этом высокую продуктивность. Следовательно, отрицательная реакция на введение скипидара у таких животных является объективным показателем низкой стрессовой чувствительности животного. Ярко выраженная реакция является показателем высокой стрессовой чувствительности животного.

Достоинствами предлагаемого способа определения стрессовой чувствительности лошадей является то, что его можно внедрить в промышленную технологию, он прост в исполнении, не трудоемок, дешев, позволяет выявить чувствительность на слабые отрицательные раздражители, безвреден для животных и исполнителей. С помощью этого способа можно быстро отселекционировать поголовье лошадей с низким уровнем стрессовой чувствительности.

Приведенная таблица 2 иллюстрирует описанный метод и характеризует связь изменений параметров с уровнем стрессовой чувствительности.

Молочная продуктивность кобыл с различной стрессовой чувствительностью представлена в таблице 3.

Из данных таблицы видно, что стресс-устойчивые кобылы более продуктивны. Суточная продуктивность у стресс-устойчивых кобыл выше на 43% чем у стресс-чувствительных при Р≤0,001. Удой за лактацию также выше, чем у стресс-чувствительных на 43%, при высокой степени достоверности. У стресс-сомнительных суточный удой составляет ниже на 22%, продуктивность за всю лактацию также ниже на 22% (при Р≤0,001), чем у стресс-устойчивых. Из вышеизложенного следует, что стресс-устойчивые кобылы более молочны, чем стресс-чувствительные.

Табл.2
2. Определение стрессовой чувствительности лошадейДоза препаратаВремя чтения реакциистресс-чувствительныестресс-сомнительныестресс-устойчивыеутолщение кожной складкидиаметр припухлостиутолщение кожной складкидиаметр припухлостиутолщение кожной складкидиаметр припухлости0,05-0,06 млчерез 108-120 ч11 мм и более5,1 см и болеедо 10 мм4-5 см--

Табл.3
3. Молочная продуктивность дойных кобыл с различной стрессовой чувствительностью (X±S_X)ПоказательСтрессовая чувствительностьстресс-устойчивыестресс-сомнительныестресс-чувствительныеКоличество животных, голов221214Молочная продуктивность за сутки, л10,73±0,408,34±1,09***6,08±0,68***Молочная продуктивность за весь период лактации, л1959,55±72,781523,58±199,26***1109,64± 125,39***Примечание: *** - Р≤0,001

Стоимость продукции, полученной от кобыл с различной стрессовой чувствительностью, представлена в таблице 4.

Табл.4
Стоимость продукции, полученной от кобыл с различной стрессовой чувствительностьюПоказательСтрессовая чувствительностьстресс-устойчивыестресс-сомнительныестресс-чувствительныеОбъем кумыса, произведенного из надоенного количества молока от одной кобылы, л17641372999Рыночная стоимость 1 л кумыса, руб.707070Стоимость общего объема кумыса произведенного от одной кобылы за лактацию, л1234809604069930

Из таблицы 4 видно, что при содержании стресс-устойчивых кобыл можно получить больше прибыли, так как при цене на кумыс 70 рублей за 1 литр от стресс-устойчивых животных за весь период лактации можно приготовить из него кумыс общей стоимостью 123480 рублей, от стресс-чувствительных - 69930 рублей в расчете на одну голову. Это на 46,6% меньше, чем от стресс-устойчивых. Исходя из этого можно сделать вывод, что своевременный отбор стресс-устойчивых животных для доения позволит получать больше прибыли от производства кумыса.

Морфологические и биохимические показатели стресс-устойчивых и стресс-чувствительных кобыл представлены в таблице 5.

Табл.5
Некоторые показатели крови подопытных животных (X±S_Х)ПоказательГруппы кобылстресс-устойчивые, n=22стресс-чувствительные, n=14Эритроциты, 10¹²/л8,59±0,098,25±0,13*Лейкоциты, 10⁹/л11,12±0,5712,27±0,82Гемоглобин, г/л174,56±2,72170,94±2,68*Общие липиды, г/л2,66±0,062,87±0,13*Глюкоза, ммоль/л3,05±0,102,52±0,05***Общий белок84,24±0,5979,86±1,09**Кальций, ммоль/л2,80±0,052,26±0,05***Фосфор, ммоль/л1,67±0,021,37±0,05***Примечание: * - Р≤0,05
** - Р≤0,01
*** -Р≤0,001

По материалам таблицы видно, что показатели крови стресс-устойчивых кобыл характеризовались более высоким содержанием общего количества эритроцитов, лейкоцитов и гемоглобина в сравнении со стресс-чувствительной группой животных. Так, уровень эритроцитов был на 4,0% (Р≤0,05), а гемоглобина на 2,1% (Р≤0,05) выше по сравнению со стресс-чувствительной группой. Данное явление на наш взгляд связано с наиболее активно протекающей дыхательной функцией крови, что закономерно сопровождается высокими функциональными возможностями организма. Это предположение подтверждается полученными данными основных показателей обмена веществ. Так, у стресс-устойчивых кобыл уровень глюкозы в крови был на 17,4% (Р≤0,05) выше, чем у стресс-чувствительных. Биохимические показатели сыворотки крови стресс-устойчивых животных в сравнении со стресс-чувствительными характеризовались повышением количества общего белка, липидов, кальция и неорганического фосфора.

Таким образом, необходимо отметить, что у стресс-устойчивых кобыл обменные процессы в организме протекают на более высоком уровне по сравнению со стресс-чувствительными животными, что и было подтверждено более высокими показателями молочной продуктивности кобыл.

Способ прост в исполнении и не требует больших дополнительных затрат при внедрении в промышленную технологию, дает возможность выявления чувствительности к слабым отрицательным раздражителям и что немало важно способ безвреден для животных и исполнителей.

Список использованной литературы

1. Ковальчикова М. Адаптация и стресс при содержании и разведении сельскохозяйственных животных /М.Ковальчикова, К.Ковальчик. - М.: Колос, 1978. - 81 с.

2. Кокорина Э.П. Рекомендации по оценке стрессоустойчивости коров при машинном доении. - Л.: Лениздат, 1978. - С.234.

3. Кузнецов А.И. Способ оценки свиней по стресс-чувствительности /А.И.Кузнецов, Ф.А.Сунагатуллин // Интенсификация селекционного процесса в свиноводстве: Сб. науч. тр. ЛСХИ. - Персиановка, 1989. - С.76.

4. Машковский М.Д. Лекарственные средства. - М.: Медицина, 1978. - Ч.II - 560 с.

5. Плященко С.И. Стрессы у сельскохозяйственных животных /С.И.Плященко, В.Т.Сидоров. - М.: Агропромиздат, 1987. - С.192.

6. Романов Ю.Д. Методы распространения свиней по стресс-устойчивости /Ю.Д.Романов, Л.В.Тращенкова // Зоотехническая наука в Белоруссии: Сб. науч. тр. - 1983. - Т.24. - С.7-13.

7. Червяков Д.К. Лекарственные средства в ветеринарии /Д.К.Червяков, П.Д.Евдокимов, А.С.Вишкер. - М., 1977. - С.85-86.

Изобретение относится к биологии и может быть использовано в коневодстве. Внутрикожное введение в среднюю треть шеи 0,05-0,06 мл скипидара очищенного дает возможность через 96-120 часов судить об уровне стрессовой чувствительности лошадей по утолщению кожной складки и диаметру припухлости: утолщение кожной складки 11 и более мм и диаметр припухлости 5,1 и более см - стресс-чувствительные; утолщение кожной складки до 10 мм и диаметр припухлости до 5 см - стресс-сомнительные; при отсутствии реакции - стресс-устойчивые. Способ позволяет отбирать при разведении лошадей молочных пород в племенное ядро стресс-устойчивых животных. 5 табл.

Способ определения стрессовой чувствительности лошадей молочных пород, отличающийся тем, что лошадям молочных пород вводят в среднюю треть шеи безыгольным инъектором внутрикожно 0,05-0,06 мл скипидара очищенного и через 96-120 ч определяют стрессовую чувствительность по местной реакции: при утолщении кожной складки 11 мм и более и диаметре припухлости 5,1 см и более - относят к стресс-чувствительным; при утолщении кожной складки до 10 мм и диаметре припухлости до 5 см - к стресс-сомнительным; при отсутствии реакции - к стресс-устойчивым животным.