СПОСОБ ЭКСПРЕСС-ОЦЕНКИ СТЕПЕНИ БЕЗОПАСНОСТИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ ДЛЯ ИНЪЕКЦИЙ Российский патент 2008 года по МПК G01N33/15 G01N21/82 A61K9/08 

Изобретение относится к медицине, в частности к клинической фармакологии, и может быть применено для оценки степени безопасности лекарственных средств, предназначенных для инъекций в мягкие и жидкие ткани, а также при клинико-фармакологической и судебно-медицинской экспертизе качества лекарственных препаратов определенных производителей и серий.

Известен способ проведения экспертизы качества лекарственных форм для инъекций (растворов для инъекций) (Практическое руководство по регистрации лекарственных средств. - М.: Информационно-издательское агентство «Ремедиум», 2001. - С.73-76, 161-192.) посредством экспертизы соответствия их показателей качества требованиям фармакопейных статей.

Недостатком данного способа является ограниченная возможность выявления препаратов с низкой степенью постинъекционной безопасности для мягких и жидких тканей из-за отсутствия показателя качества лекарственных средств в виде их денатурирующей активности.

При оценке качества лекарств и степени постинъекционной безопасности их для определенных тканей нашего организма денатурирующая активность препаратов не учитывается и не оценивается. В этих условиях часть лекарственных средств для инъекций лишена денатурирующей активности и высоко безопасна для наших тканей, а другая часть лекарств может обладать денатурирующей активностью и иметь низкую безопасность для тканей в области инъекции, приводя к их повреждению. Причем, часть качественных лекарственных средств для инъекций может обладать умеренно или даже чрезмерно выраженной денатурирующей активностью, способной вызывать в области медикаментозного инфильтрата постинъекционное неспецифическое денатурирующее повреждение клеток и тканей посредством физико-химической денатурации их белков.

Кроме этого, в соответствии с общепринятыми способами оценки качества каждое лекарственное средство, предназначенное для инъекций, производится в соответствии только с одним стандартом качества, принятым для растворов для инъекций, независимо от перечня тканей нашего организма, в которые рекомендуется или возможно (по незнанию, по неопытности) инъекционное введение препарата. В то же время, в различных тканях процессы постинъекционного рассасывания медикаментозного инфильтрата имеют различную интенсивность и продолжительность, что определяет различную степень прямого физико-химического воздействия препаратов на различные ткани, включая различную степень их денатурации. Поэтому инъекционное введение одного и того же препарата в различные ткани ведет к различным постинъекционным последствиям физико-химического взаимодействия с ними. В каких-то тканях возможно обратимое воспаление, в каких-то - необратимое воспаление, химический ожог и даже некроз.

Так, некоторые жидкие ткани (например, кровь) в равных постинъекционных условиях чаще всего способны полностью сохранить свою жизнеспособность из-за того, что процессы постинъекционного рассасывания медикаментозного инфильтрата и процессы разведения препарата в этих тканях носят очень интенсивный характер, приводя к очень быстрому снижению концентрации действующих начал препарата, включая средство, обладающее денатурирующей активностью, существенное снижение концентрации которого ведет к утрате им денатурирующей активности. В этих условиях денатурирующее воздействие на тканевые белки носит несущественный, очень кратковременный и вполне обратимый характер. Часть мягких тканей (например, скелетная мышца) может значительно воспаляться из-за менее интенсивного рассасывания постинъекционного инфильтрата, но воспаление в них также может носить обратимый и условно-обратимый безопасный характер, поскольку рассасывание медикаментозного инфильтрата в них может завершиться раньше, чем денатурирующее воздействие достигнет чрезмерности своего проявления. Иные мягкие ткани (например, подкожно-жировая клетчатка) чаще других могут получать чрезмерное денатурирующее повреждение из-за превышения продолжительности рассасывания постинъекционного медикаментозного инфильтрата над минимальным промежутком времени, необходимым для проявления выраженной денатурирующей активности препарата в этой ткани.

В соответствии с указанными стандартами качества многие растворы лекарственных средств для инъекций содержат помимо основных действующих веществ различные стабилизирующие, консервирующие и вспомогательные средства, каждое из которых при определенной концентрации может обладать неспецифической денатурирующей активностью. Поэтому после инъекционного введения в жидкие и мягкие ткани растворов лекарственных средств, произведенных некоторыми заводами изготовителями в соответствии с требованиями фармакопейных статей, возможно появление постинъекционных некрозов из-за чрезмерной денатурирующей активности препарата.

Целью предлагаемого решения является повышение скорости и качества экспертизы лекарственных средств для инъекций за счет экстренного получения дополнительной информации о наличии у них денатурирующей активности.

Сущность изобретения заключается в том, что в способе проведения экспертизы качества растворов для инъекций посредством анализа соответствия показателей их качества требованиям фармакопейных статей, предварительно определяют период постинъекционного рассасывания в избранной ткани аналогичного объема раствора 0,9% натрия хлорида, после чего готовый для инъекции раствор лекарственного средства наслаивают на поверхность свежеприготовленного сырого яичного белка в прозрачной пробирке и на протяжении времени постинъекционного рассасывания медикаментозного инфильтрата в избранной ткани визуально в проходящем свете наблюдают за прозрачностью белка на границе сред, а при появлении ободка помутнения белесоватого цвета судят о низкой постинъекционной безопасности лекарственного средства.

Определение периода постинъекционного рассасывания медикаментозного инфильтрата в избранной ткани путем инъекции в нее аналогичного объема раствора 0,9% натрия хлорида представляет собой безопасный способ определения периода полного рассасывания растворов медикаментов в избранной ткани, поскольку раствор 0,9% натрия хлорида представляет собой лекарственное средство с высокой степенью постинъекционной безопасности. В целях безопасности исследование динамики рассасывания постинъекционного медикаментозного инфильтрата может быть осуществлено посредством ультразвукового исследования области инъекции. Определение продолжительности прямого физико-химического взаимодействия медикаментов с избранной тканью необходимо для оптимального моделирования процессов взаимодействия исследуемого средства с белком в лабораторных условиях.

Наслаивание готового для инъекций раствора лекарственного средства на поверхность свежеприготовленного сырого яичного белка позволяет эффективно и быстро выявлять потенциальную денатурирующую активность препаратов, поскольку представляет собой безопасную, нетрудоемкую и быстро создаваемую в лабораторных условиях модель эффективного выявления денатурирующей активности растворов лекарственных средств. Живая коллоидная белковая среда, получаемая из сырых яиц, представляет собой живую высокочувствительную белковую ткань быстрого приготовления и стандартного качества, которая при денатурирующем воздействии способна изменять свою оптическую плотность (прозрачность). Среда готовится за несколько секунд. Для ее приготовления достаточно разбить сырое яйцо и отделить белок от желтка. При этом данная ткань обладает более выраженными коллоидными свойствами, более высокими показателями вязкости, поверхностной активности и удельного веса, чем растворы большинства лекарственных средств для инъекций. Поэтому она размещается и надежно находится в нижней части пробирки независимо от внесения в нее исследуемого препарата, что облегчает и ускоряет процесс наслаивания на ее поверхность исследуемого раствора лекарственного средства и препятствует процессу механического смешивания взаимодействующих сред, способствуя ускорению и повышению точности экспресс-оценки степени постинъекционной безопасности лекарственных препаратов. Сырой свежеприготовленный яичный белок обладает стандартной оптической плотностью и прозрачностью. Это стандартизирует, облегчает и ускоряет визуальное исследование степени прозрачности среды в проходящем свете в условиях обычной лаборатории. Использование прозрачной пробирки обеспечивает эффективное и срочное визуальное исследование степени прозрачности среды в проходящем свете без дополнительных процедур, реактивов и специальных оптических устройств. Изучение прозрачности белковой среды на границе сред (между сырым белком и наслоенным на его поверхность раствором лекарственного средства) в условиях, исключающих активное механическое смешивание их, обеспечивает высокую скорость и точность выявления денатурирующей активности исследуемого препарата, поскольку наслаивание на поверхность без механического перемешивания сред ускоряет начало взаимодействия между ними при сохранении качества взаимодействующих сред и оптических свойств белка, а с другой стороны, исключает преждевременное разведение исследуемого препарата. Дело в том, что преждевременное снижение концентрации всех компонентов, входящих в состав лекарственного препарата, может стать причиной чрезмерно быстрой утраты препаратом денатурирующей активности без ее выявления, поскольку денатурирующая активность химических соединений определяется величиной их концентрации. При этом в низкой концентрации (в диапазоне от нуля до значения, обеспечивающего минимальную денатурирующую активность) соединения лишены денатурирующей активности, а в более высокой концентрации их денатурирующая активность растет с увеличением концентрации. Кроме этого, денатурирующая активность растворов лекарственных средств проявляется не вмиг, как например у концентрированной азотной кислоты или спирта этилового 96% в момент их соприкосновения с яичным белком. Денатурирующая активность растворов лекарственных средств для инъекций требует для своего визуального проявления несколько десятков секунд и даже минут непрерывного физико-химического взаимодействия их с белками тканей.

Использование для экспресс-оценки готового для инъекции раствора лекарственного средства повышает эффективность и достоверность полученных результатов, поскольку исключает оценку качества лекарственного препарата с иными свойствами. Дело в том, что значительная часть лекарственных препаратов готовится для инъекции путем разведении специальными прилагаемыми растворителями или водой для инъекций непосредственно у постели пациента и при этом каждый раз препарат может иметь различную концентрацию из-за его разведения различными объемами используемых растворителей.

Оценка прозрачности сырого яичного белка на границе его контакта с исследуемым раствором на протяжении промежутка времени, равного продолжительности рассасывания постинъекционного инфильтрата в избранной ткани, позволяет выявить существенное денатурирующее воздействие препарата на белки в тот отрезок времени, в который этот препарат в клинике контактирует с тканью пациента при выбранном пути введения. Визуально выявляемый ободок помутнения белесоватого цвета на границе сред свидетельствует о завершении существенной денатурации значительной части белка, возникшей вследствие его коагуляции. Подобное изменение прозрачности белковой среды происходит вследствие денатурирующего влияния кислот, спиртов, альдегидов, солей металлов и других соединений, которые могут оказаться как среди основных действующих веществ лекарственных препаратов, так и среди консервирующих, вспомогательных, формообразующих средств, а также средств, коррегирующих цвет и запах лекарственных препаратов. Денатурирующее влияние на белки и белково-липидные комплексы тканей повреждает их вплоть до ожога и некроза.

Выявление существенной денатурирующей активности препарата в виде определяемого на глаз помутнения сырого яичного белка, возникающего на границе сред в результате прямого физико-химического взаимодействия их друг с другом на протяжении промежутка времени, равного продолжительности рассасывания постинъекционного медикаментозного инфильтрата в избранной ткани у конкретного пациента, позволяет судить о низкой постинъекционной безопасности препарата потому, что подобная денатурирующая активность его может проявиться в отношении белков этой ткани в области постинъекционного медикаментозного инфильтрата в клинике. Подобное воздействие может стать причиной различной степени химического ожога ткани, причиной ее выраженного постинъекционного воспаления необратимого характера и даже причиной некроза ткани.

Пример. Пациентка М. 32 лет поступила с диагнозом «Поясничный остеохондроз с мышечно-тоническим синдромом». С целью купирования болевого синдрома ей были назначены ежедневные внутримышечные инъекции раствора диклофенака натрия. При выборе раствора диклофенака натрия для инъекций с участием врача-клинического фармаколога анализировались показатели качества, отраженные в паспорте и в сертификатах качества лекарственных средств определенных серий 3-х разных производителей: Haemofarm concern A.D., AGIO Pharmaceuticals LTD и ЗАО «Норбиофарм». Произведенный анализ показателей качества указанных лекарственных средств показал соответствие качества российского препарата требованиям фармакопейной статьи ФСП 42-0557-5931-04, а иностранных средств - предписанным стандартам качества. При этом было отмечено отсутствие в документах указания на денатурирующую активность, проявляющуюся в определенный промежуток времени взаимодействия их с живой белковой тканью.

В качестве средства лечения данной пациентки был выбран препарат «Диклоген в ампулах по 75 мг/3 мл для инъекций», выпускаемый индийским производителем AGIO Pharmaceuticals LTD (Серия DB-5042). Однако после первой же внутримышечной инъекции 3 мл препарата у пациентки возникло выраженное многочасовое постинъекционное воспаление области медикаментозного инфильтрата.

В связи с этим была проведена дополнительная экспресс-оценка степени безопасности препаратов указанных производителей. Предварительно с помощью ультразвукового исследования ягодичной области и внутримышечной инъекции в нее 3 мл раствора 0,9% натрия хлорида было определено, что полное рассасывание в ней указанного объема раствора происходит за 50 секунд. Затем было взято куриное яйцо высшей категории производства ЗАО «Птицефабрика Вараксино» выпуска предыдущего дня, яйцо разбито, белок был отделен от желтка и разлит по 1 мл в 4 прозрачные стеклянные пробирки объемом по 10 мл, установленные в вертикальном положении в лабораторный штатив и пронумерованные арабскими цифрами от 1 до 4. После этого были вскрыты 3 ампулы с разными препаратами и с помощью 3 шприцев объемом по 5 мл производства В.Brown Melsungen AG типа Luer Duo 22G×11/4 серии 6Н4048 по стенкам пробирок было произведено наслаивание по 1 мл каждого из этих препаратов на поверхность белка в одну из пробирок. В пробирку №1 был внесен препарат Haemofarm concern A.D. (серия 1171205), в пробирку №2 - препарат AGIO Pharmaceuticals LTD (Серия DB-5042), в пробирку №3 - препарат ЗАО «Норбиофарм» (серия 42082001), в пробирку №4 был в качестве контроля внесен 1 мл раствора 0,9% натрия хлорида изотонического производства ЗАО «РЕСТЕР» (серия 950706). По истечении 50 секунд, что соответствует продолжительности рассасывания постинъекционного медикаментозного инфильтрата в ягодичной мышце, создаваемого инъекцией 3 мл физиологического раствора, в проходящем свете установлено различное изменение прозрачности белка на границе сред. В пробирках №1 и №2 было выявлено наличие выраженного помутнения белка на границе сред, в пробирке №3 и №4 было констатировано сохранение полной прозрачности белка на границе сред.

На основании полученных результатов в течение нескольких минут было сделано заключение о низкой безопасности препаратов диклофенака таких производителей, как Haemofarm concern A.D. и AGIO Pharmaceuticals LTD и достаточно высокой безопасности препарата диклофенака для инъекций, произведенного ЗАО «Норбиофарм» под названием «Раствор ортофена 2,5% для инъекций», поэтому для дальнейшего лечения был выбран препарат «Раствор ортофена 2,5% для инъекций», произведенный ЗАО «Норбиофарм». Внутримышечные инъекции 3 мл данного средства производились ежедневно под контролем УЗИ на протяжении 3-х дней подряд. При этом постинъекционные медикаментозные инфильтраты в ягодичной мышце рассасывались за 50 секунд практически бесследно.

Таким образом, предложенный способ повышает качество экспертизы лекарственных средств для инъекций за счет получения срочной дополнительной информации о наличии у них денатурирующей активности.

Изобретение относится к медицине, в частности к клинической фармакологии, и может быть использовано для срочной оценки степени постинъекционной безопасности лекарственных препаратов, предназначенных для инъекции в мягкие и жидкие ткани. Предварительно определяют период постинъекционного рассасывания в избранной ткани аналогичного объема раствора 0,9% натрия хлорида, затем готовый для инъекции раствор лекарственного средства наслаивают на поверхность свежеприготовленного сырого яичного белка в прозрачной пробирке и на протяжении времени постинъекционного рассасывания медикаментозного инфильтрата в избранной ткани визуально в проходящем свете наблюдают за прозрачностью белка на границе сред, а при появлении ободка помутнения белесоватого цвета судят о низкой постинъекционной безопасности лекарственного средства. Данное изобретение способствует ускорению и повышению качества экспертизы постинъекционной безопасности лекарств за счет срочного выявления денатурирующей активности препаратов.

Способ экспресс-оценки степени безопасности лекарственных средств для инъекций, включающий анализ соответствия показателей качества растворов для инъекций требованиям фармакопейных статей, отличающийся тем, что предварительно определяют период постинъекционного рассасывания в избранной ткани аналогичного объема раствора 0,9%-ного натрия хлорида, затем готовый для инъекции раствор лекарственного средства наслаивают на поверхность свежеприготовленного сырого яичного белка в прозрачной пробирке и на протяжении времени постинъекционного рассасывания медикаментозного инфильтрата в избранной ткани визуально в проходящем свете наблюдают за прозрачностью белка на границе сред, а при появлении ободка помутнения белесоватого цвета судят о низкой постинъекционной безопасности лекарственного средства.