ЭМУЛЬГИРУЮЩИЕ СИСТЕМЫ, СОДЕРЖАЩИЕ ПРОИЗВОДНЫЕ АЗЕТИДИНА Российский патент 2009 года по МПК C07D205/04 C07D205/06 A61K31/397 A61P25/16 A61P25/18 

Описание патента на изобретение RU2348615C2

Настоящее изобретение относится к стабильным композициям производных азетидина.

Производные азетидина, применяемые в фармацевтических композициях по настоящему изобретению, могут быть описаны приведенными ниже общими формулами (Ia) или (Ib):

в которых Ar представляет собой ароматическую или гетероароматическую группу, необязательно замещенную одним или несколькими (C1-C4)алкилами, галогенами, группами NO2, CN, (C1-C4)алкокси или OH.

Подразумевается, что в приведенном выше определении производных азетидина ароматическая группа, в частности, означает фенильную или нафтильную группу, гетероароматическая группа - пиридильную, фурильную, тиенильную, тиазолильную, имидазолильную или оксазолильную группу, и галоген означает фтор, хлор, бром или йод.

Приведенное ниже соединение (Ic) представляет собой конкретный пример азетидина общей формулы (Ic):

В заявках на патент WO 00/15609, WO 01/64633, WO 00/64634 и WO 99/01451 были описаны производные азетидина общей формулы (Ia) или (Ib) и их применения. В частности, эти производные азетидина особенно полезны благодаря их высокому сродству к рецепторам каннабиноидов и, в частности, к рецепторам типа CB 1.

К сожалению производные азетидина представляют собой вещества, которые растворимы в воде лишь в очень небольшой степени. Вплоть до настоящего времени предусматривается введение производных азетидина общей формулы (Ia) или (Ib), в частности, пероральным путем, в форме таблеток, в виде композиций, содержащих, среди прочего, целлюлозу, лактозу и другие наполнители. Однако подобные препаративные формы не всегда достаточно хорошо подходят для таких мало растворимых в воде продуктов из-за слишком низкой биодоступности.

Системы, подходящие для солюбилизации и/или улучшения биодоступности гидрофобных активных ингредиентов, описаны в многочисленных документах. Однако было доказано, что испытанные до настоящего времени системы неэффективны при получении таких фармацевтических композиций, которые содержат описанные выше производные азетидина, являются стабильными и биодоступными и в которых растворимость производных азетидина повышена до эффективной концентрации.

В частности, в J. Pharm Sciences, 89(8), 967 (2000) и Pharmaceutical Technology Europe, p. 20, September 2000 упоминается композиция на основе триглицеридов со средней длиной цепи для плохо растворимых в воде активных ингредиентов. Однако испытания, выполненные с композициями на основе Миглиола® (Miglyol®), привели к неудовлетворительным результатам с точки зрения их биодоступности.

Более того, в международной заявке WO 95/24893 описаны композиции, содержащие усвояемое масло, липофильное ПАВ (поверхностно-активное вещество) и гидрофильное ПАВ, которые предназначены для препаративных форм, содержащих гидрофобные активные ингредиенты, и для улучшения биодоступности этих ингредиентов. В международной заявке на патент PCT/FR 02/04514 разъяснено, что приведенные выше производные азетидина обладают слишком слабой биодоступностью в композиции данного типа. В частности, композиция, содержащая такие производные азетидина, в системе Миглиол® (Miglyol®)/Каприол® (Capryol®)/Кремофор® (Cremophor®) являются неудовлетворительными с точки зрения фармакокинетики in vivo.

В настоящем исследовании обнаружено, и это составляет объект настоящего изобретения, что имеется возможность получить химически и физически стабильные фармацевтические композиции, содержащие производные общей формулы (Ia) или (Ib), необязательно в сочетании с другим активным ингредиентом, способным усилить действие производных азетидина общей формулы (Ia) или (Ib) в системе, содержащей:

(i) фосфолипид, солюбилизированный в жидком растворителе, или

(ii) комбинацию Миглиола, Каприола и Кремофора.

Действительно было обнаружено, что композиции соединений (Ia) или (Ib), которые содержат фосфолипиды, неожиданным образом позволяют получить очень хороший in vivo фармакокинетический профиль в отношении AUC, Cmax и изменения Cmax. Аналогичным образом и вопреки тому, что утверждалось ранее в PCT/FR 02/04514, наблюдалось, что композиции соединений (Ia) или (Ib) с микроэмульсиями, полученными путем комбинирования Миглиола, Каприола и Кремофора, позволяют получить очень хороший in vivo фармакокинетический профиль в отношении AUC и Cmax для одной из трех исследованных собак. Наблюдавшаяся рвота могла бы быть одной из причин неудачных результатов для двух других собак.

Предпочтительная композиция содержит соединение (Ic).

Фармацевтическая композиция предпочтительно содержит до 200 мг производного азетидина на грамм.

Далее фармацевтическая композиция может содержать дополнительную добавку, выбранную из стабилизаторов, консервантов, агентов для регулирования вязкости или агентов, которые могут изменять, например, органолептические свойства.

Для определенных видов лечения, как например для лечения ожирения, может быть выгодно вводить производные азетидина общей формулы (Ia) или (Ib) одновременно с сибутрамином, который вызывает синергический эффект в отношении уменьшения потребления пищи.

Сибутрамин и результаты его применения описаны в приведенных ниже ссылках: WO 90/061110; D.H. RYAN et al., Obesity Research, 3 (4), 553 (1995); H.C. JACKSON et al., British Journal of Pharmacology, 121, 1758 (1997); G. FANGHANEL et al., Inter. J. Obes., 24 (2), 144 (2000); G.A. BRAY et al., Obes. Res., 7(2), 189(1999).

Более того, для лечения других заболеваний, таких как шизофрения, или при лечении неврологических расстройств, таких как болезнь Паркинсона, может быть выгодно вводить производные азетидина общей формулы (Ia) или (Ib) одновременно с одним или несколькими агентами, которые активируют допаминергическую нейротрансмиссию в мозге. Эти комбинации делают возможным усиление результатов допаминергической монотерапии (леводопа, допаминергические агонисты и ингибиторы ферментов), а также дает возможность уменьшить побочные эффекты, в частности дискинезию.

Среди допаминергических агонистов могут быть, в частности, упомянуты следующие продукты: бромокриптин (bromocriptin) (Novartis), каберголин (cabergoline) (Pharmacia Corp.), адроголид (adrogolide) (Abbott Laboratories), BAM-1110 (Maruko Seiyaku Co Ltd), дуодопа (Duodopa®) (Neopharma), L-допа (L-dopa), допадоз (dopadose) (Neopharma), CHF 1512 (Chiesi), NeuroCell-PD (Diacrin Inc), PNU-95666 (Pharmacia & Upjohn), ропинирол (ropinirole) (GlaxoSmithKline Beecham), прамипексол (pramipexole) (Boehringer Ingelheim), ротиготин (rotigotine) (Discovery Therapeutics, Lohmann Therapie System), сферамин (spheramine) (Titan Pharmaceuticals), TV 1203(Teva pharmaceutical), уридин (uridine) (Polifarma).

Подразумевается, что композиции, содержащие дополнительный активный ингредиент, отличающийся от производного азетидина общей формулы (Ia) или (Ib) и способный усиливать его действие, могут содержать продукты, указанные в расположенных выше параграфах, и что упомянутые композиции попадают в рамки настоящего изобретения.

Активный ингредиент, являющийся производным азетидина, предпочтительно присутствует в количестве от 0,01 до 70% по массе от общей массы композиции.

В соответствии с другим аспектом настоящее изобретение относится к способу получения композиции, содержащей азетидин по первому аспекту изобретения, в котором получают, если это приемлемо, смесь основных наполнителей, после нагревания, если оно необходимо в случае твердых или полутвердых наполнителей, и затем, если это необходимо, получают смесь с дополнительными добавками, и после этого добавляют производные азетидина (Ia) или (Ib) и, когда это предусмотрено, активный ингредиент, способный усилить воздействие производных азетидина общей формулы (Ia) или (Ib), которые определены в п.1 формулы изобретения, и осуществляют перемешивание для получения гомогенной смеси.

В соответствии с дополнительным аспектом изобретение относится к набору, который включает определенную выше композицию, а также композицию, содержащую активный ингредиент, который способен усиливать действие производных азетидина (Ia) или (Ib).

Активный ингредиент набора, который способен усиливать действие производных азетидина, предпочтительно представляет собой сибутрамин.

В соответствии с последним аспектом изобретение относится к набору, который включает композицию по первому аспекту и композицию, содержащую агент, который активирует допаминергическую нейротрансмиссию в мозге.

В начальных доклинических исследованиях, выполненных на крысах, пероральное введение водной суспензии лекарственного соединения формулы (I) в 0,5% метилцеллюлозе/0,2% tween 80 (с дозировкой 10 мг/кг) приводило к очень низкой биодоступности (3%). Первый подход к составлению композиции заключался в применении раствора 25 мг/мл (Ic) в Миглиол 812N, который был выбран из-за более высокой растворимости лекарственного соединения в маслах (35,9 мг/мл в Миглиол 812). К тому же, данный наполнитель (триглицерид со средней длиной цепи) известен с точки зрения его хорошей усвояемости и регулятивной приемлемости. Эту композицию использовали для дальнейших доклинических исследований, которые вели к увеличению биодоступности лекарственного соединения формулы (Ic) у крыс (13 и 37% для доз 1 мг/кг и 10 мг/кг соответственно). Однако при первом исследовании на людях наблюдалось заметное влияние режима приема пищи и изменчивость от пациента к пациенту: в условиях голодания максимальная переносимая доза колебалась около 100 мг при индивидуальной изменчивости 50%, тогда как в случае приема пищи максимальная переносимая доза была в 10 раз меньше, причем изменчивость от пациента к пациенту снизилась до 30%.

На основе этих результатов были выдвинуты следующие требования для разработки новых композиций:

1. Разработать композицию с пониженной концентрацией лекарственного средства (10 мг/г вместо 25 мг/г).

2. Увеличить биодоступность.

3. Снизить изменчивость от пациента к пациенту.

4. Уменьшить влияние приема пищи (различия в условиях голодания/приема пищи).

Возможность разработки нестандартных композиций возникла благодаря применению наполнителей, способных увеличить растворимость активного начала.

Таким образом, для дальнейшей разработки композиции с целью улучшения стадий солюбилизации/абсорбции лекарственного средства были исследованы другие липидные наполнители. Усилия были сконцентрированы на «композициях на основе липидов», которые способны образовывать гомогенные и мелкодисперсные эмульсии, микроэмульсии или мицеллярные растворы in situ, благодаря поверхностно-активным свойствам наполнителей. В действительности Миглиол демонстрирует эмульгирующие свойства, но при соприкосновении с водной средой он образует гетерогенную и грубую эмульсию (крупные капли масла, видимые в микроскоп), что могло бы объяснить результаты in vivo.

«Композиции на основе липидов» включают различные вещества от чистых масел до смесей, которые содержат существенные количества поверхностно-активных веществ и дополнительных растворителей (более высокой полярности). В первую очередь была определена растворимость соединения (Ic) в разнообразных липидах и других фармацевтических дополнительных растворителях.

Для композиций соединения (Ic) были определены и выбраны три категории наполнителей:

- Амфифильные наполнители для введения в виде раствора (Phosal 50PG, Labrasol), способные к самопроизвольному эмульгированию при соприкосновении с физиологической средой (размер капелек 1-10 мкм).

-Амфифильные наполнители для введения в виде полутвердых матриц (Gelucire 44/14, витамин E TPGS) для солюбилизации лекарственного средства путем образования мицелл (размер капелек <20 нм).

- Смесь липидных наполнителей (Миглиол 812N), смешанная с ПАВ (Кремофор RH40 или EL) и дополнительным растворителем (Каприол 90): эта смесь способна к самопроизвольному образованию микроэмульсий in situ с жидкими средами желудка и кишечника (размер капелек <20 нм).

Все химические составы выбранных наполнителей, а также их физико-химические свойства и другие основные характеристики приведены далее.

Все идентифицированные опытные образцы композиций в настоящей работе оценивали с точки зрения поведения in vitro в физиологических условиях после разбавления и инкубирования с имитированными жидкими средами желудка и кишечника. Исследовались следующие параметры: микроскопический/макроскопический внешний вид полученной дисперсной системы частиц; определение доли солюбилизированного лекарственного средства до и после инкубирования композиции (в присутствии или в отсутствие кишечных ферментов); оценка коллоидной стабильности дисперсной системы после инкубирования.

Полученные результаты позволили провести первый отбор с целью выявления опытных образцов композиций, которые представляют потенциальный интерес для исследований in vivo.

Фиг.1: Водный раствор соединения (Ic): влияние размера фильтра на выделенные фракции соединения (Ic).

Фиг.2: Липидные композиции соединения (Ic): влияние среды на концентрацию соединения (Ic) после 2 ч перемешивания при 37°C и фильтрации (2 мкм).

Фиг.3: ФК (фармакокинетический) профиль соединения (Ic) в микроэмульсионной композиции у трех различных собак породы Beagle.

Фиг. 4: ФК профиль соединения (Ic) в композиции на основе Phosal 50PG у трех различных собак породы Beagle.

Фиг. 5: ФК профиль соединения (Ic) в композиции на основе Labrafil/Labrasol у трех различных собак породы Beagle.

Фиг. 6: ФК профиль соединения (Ic) в композиции на основе Миглиол 812N у трех различных собак породы Beagle.

Композиции опытных образцов

Введение: Описание наполнителей

(i) Витамин E TPGS (Eastman Chemicals): Витамин E TPGS (d-α-токоферил полиэтиленгликоль 1000 сукцинат) представляет собой водорастворимое производное природного витамина E не животного происхождения.

(ii) Phosal 50PG (Aventis Nattermann): Phosal 50PG представляет собой концентрат фосфатидилхолина с содержанием PC и пропиленгликоля не менее 50%.

Состав: Фосфатидилхолин приблизительно 56,8%

Пропиленгликоль: приблизительно 38%

Моно/диглицериды подсолнечника: приблизительно 3%

Жирные кислоты соевых бобов: приблизительно 2%

Аскорбил пальмитат: приблизительно 0,2%; этанол: до 100%

Продукт синтезируют исходя из соевого лецитина, его очисткой получают фосфолипон и затем солюбилизируют в системе жидкого носителя.

Кроме этого Nattermann Phospholipid GmbH продает другие фосфолипиды, которые солюбилизированы в различных формах. Например, Phosal® 53MCT, который представляет собой форму, состоящую из фосфатидилхолина, солюбилизированного в системе носителя, которая содержит триглицериды каприловой/капровой кислоты, спирт, глицерилстеарат, олеиновую кислоту и аскорбилпальмитат. Содержание фосфатидилхолина составляет около 56±3% по массе.

(iii) Labrasol (Gattefosse)

Labrasol® (каприлокапроил Макрогол-8 глицериды) представляет собой насыщенный полигликольсодержащий глицерид, состоящий из моно-, ди- и триглицеридов, а также из производных полиэтиленгликоля (PEG), содержащих один или два остатка жирных кислот.

Данное амфифильное масло, полученное из растительных и нефтехимических источников, растворимо в воде.

(iv) Labrafil (Gattefosse)

Labrafil® M1944CS (Глицерид олеиновой кислоты макрогол-6) представляет собой амфифильное масло, диспергируемое в воде (HLB 4), полученное из отборных растительных масел высокой чистоты. Данный наполнитель позволяет увеличить липофильный характер опытного образца композиции с целью улучшения солюбилизации активного ингредиента в жидких средах желудка и кишечника за счет образования мелкодисперсной системы. Помимо этого данный продукт, который способен смешиваться с холестерином и фосфолипидами, мог бы проходить через мембраны при помощи неактивного механизма (пассивной диффузии).

(v) Gelucire (Gattefosse)

Gelucire® 44/14 (Лауроил Макрогол-32 Глицериды) представляет собой насыщенный полигликолизированный глицерид, состоящий из моно-, ди- и триглицеридов, а также из производных полиэтиленгликоля (PEG), содержащих один или два остатка жирных кислот.

Gelucire® 44/14 получают реакцией гидрированного масла пальмовых косточек с PEG 1500.

(vi) Миглиол 812 описан как нелетучее масло, выделенное из твердой, высушенной фракции эндосперма Coco nucifera L. путем гидролиза, фракционирования полученных жирных кислот и повторной этерификации. Продукт состоит из смеси триглицеридов жирных кислот только с короткими и средними цепями, не менее 95% которых являются производными таких насыщенных кислот, как октановая (каприловая) и декановая (капровая).

Продукт представляет собой маслянистую жидкость от бесцветной до слегка желтоватой, практически без запаха и вкуса.

(vii) Кремофор RH40 представляет собой полиоксил 40 гидрированное касторовое масло. Этот продукт получают реакцией оксида этилена с гидрированным касторовым маслом. Он представляет собой белую полутвердую пасту, которая превращается в жидкость при 30°C. Продукт имеет очень слабый характерный запах и легкий вкус в водном растворе.

(viii) Кремофор EL представляет собой полиоксил 35 касторовое масло (полиоксиэтиленглицеринтририцинолеат, глицерин-полиэтиленгликоль рицинолеат).

Данный продукт получен реакцией этиленоксида с касторовым маслом (качества фармакопеи Германии). Кремофор EL представляет собой бледно-желтую, маслянистую жидкость (вязкость при 25°C: 700-850 сП), которая становится прозрачной при T>26°C. Он имеет незначительный, но характерный запах и может быть полностью превращен в жидкость нагреванием до 26°C.

(ix) Каприол 90 представляет собой монокаприлат пропиленгликоля. Этот продукт, который получают из растительных и нефтехимических источников, нерастворим в воде. Жидкость.

Данные растворимости

Первая стадия осуществляется для определения растворимости соединения (Ic) в разнообразных липидах и других фармацевтических дополнительных растворителях, включая растительные масла, липидные компоненты, поверхностно-активные вещества, гидрофильные компоненты и фосфолипиды. Протокол измерения растворимости приведен в таблицах.

Таблица 1Данные по растворимостиТорговое наименованиеХимическое описаниеРастворимость (мг/мл)РАСТИТЕЛЬНЫЕ МАСЛАСоевое масло31,8Арахисовое масло7,2ЛИПИДНЫЕ КОМПОНЕНТЫImwitor 988Глицерил монодикаприлат41,2Imwitor 742Глицерил монодикаприлат/капрат31,2Миглиол 812Триглицерид каприловой/капровой кислот35,9Labrafil M 1944 CSОлеил макрогол-6-глицериды30,3ПОВЕРХНОСТНО-АКТИВНЫЕ ВЕЩЕСТВАTween 80Полиэтиленоксида моноолеат50,6Кремофор RH40Полиэтиленоксид гидрированное касторовое масло80,6Span 20Сорбитан монолаурат31,6Span 85Сорбитан триолеат92,0ГИДРОФИЛЬНЫЕ КОМПОНЕНТЫPEG 400Полиэтиленгликоль 40078,1ПРОЧИЕЭтанол5,8HP β циклодекстрин0,05ТранскутолМоноэтиловый эфир диэтиленгликоля89,8

Таблица 2Дополнительные данные по растворимостиТорговое наименованиеХимическое описаниеРастворимость (мг/г)РАСТИТЕЛЬНЫЕ МАСЛАКокосовое масло18,6Касторовое масло16,1Сафлоровое масло14,8Кунжутное масло10,9Оливковое масло10,9ЛИПИДНЫЕ КОМПОНЕНТЫCrossential O94Олеиновая кислота19,6Crossential LN 75Линоленовая кислота45,4Edenor C8 98-100Каприловая кислота75,5Myvacet 9-45Перегнанные ацетилированные моноглицериды54,8Neobee M 20PG дикаприлат/дикапрат47,7LauroglycolPG монолаурат28,5Каприол 90Полиэтиленгликоль монокаприлат56,6ПОВЕРХНОСТНО-АКТИВНЫЕ ВЕЩЕСТВАMyrj 45POE стеарат86,9Brij 96POE олеиловый эфир85,7LabrasolКаприлокапроил макрогол-8 глицериды111,8ГИДРОФИЛЬНЫЕ КОМПОНЕНТЫPEG 1500Полиэтиленгликоль 1500<10Gelucire 44/14Лауроил макрогол-32 глицериды90,1Gelucire 50/13Стеароил макрогол-32 глицериды78,5ФОСФОЛИПИДЫPhospholipon 90Фосфатидилхолин 93%40Phosal 40 MDФосфатидилхолин 38±1,5% в глицерилстеарате, соевом масле и этиловом эфире линолевой кислоты12,5Phosal 75 SAФосфатидилхолин 75±3% в спирте, сафлоровом масле, глицерилстеарате, кокосовом масле и аскорбил пальмитате.<10Phosal 50 PGФосфатидилхолин ≥50% в пропиленгликоле11,7Phosal 53 MCT (нестабильный наполнитель, не рекомендуется, см. следующую стр.)Фосфатидилхолин 56±3% в триглицеридах каприловой/капровой кислот, спирте, глицерилстеарате, олеиновой кислоте и аскорбилпальмитате25,8

После определения растворимостей наша цель заключалась в выборе нескольких наполнителей с учетом растворимости активного ингредиента, их совместимости и способности увеличивать биодоступность лекарственного вещества (путем улучшения растворимости или абсорбции).

Что касается третьего критерия, затем наполнители выбирали на основании:

1. Их амфифильного характера (HLB>10) (Labrasol, Gelucire 44/14, Phosal 50PG, витамин E TPGS), способного солюбилизировать липофильный активный ингредиент и способного быть диспергированным или растворенным в жидких средах желудка и кишечника.

2. Их способности образовывать микроэмульсии в составе смеси in situ после разбавления жидкими средами желудка и кишечника, благодаря хорошему сочетанию масла, гидрофильного ПАВ (HLB>10) и дополнительного липофильного ПАВ (HLB<10) (Миглиол 812/Кремофор RH40/Каприол 90).

Что касается Phosal 53MCT, основная проблема, связанная с физической стабильностью наполнителя, привела к выбору в качестве альтернативы Phosal 50PG. На самом деле, наблюдаемое у наполнителя разделение фаз относилось не только к партиям, хранившимся в Aventis, но также и к партиям, хранившимся в Nattermann. Phosal 50PG демонстрировал очень хорошую физическую стабильность. Основные характеристики выбранных наполнителей приведены в таблице ниже.

Таблица 3Основные характеристики выбранных наполнителейТорговое наименование (Поставщик)Химическое описаниеХарактеристикиРастворимость (мг/г)Наполнители, способные образовывать тонкодисперсную эмульсию или мицеллярный раствор при контакте с жидкими физиологическими средамиLabrasol® (Gattefosse)Каприлокапроил макрогол-8 глицеридыЖидкость/HLB 13 DMF/Европейская монография111,8Labrafil M 1944 CS (Gattefosse)Олеил макрогол-6 глицеридыЖидкость/HLB 4 DMF/Европейская монография30,3Phosal® 50 PG (Natterman)Фосфатидилхолин ≥50% в пропиленгликолеВязкая жидкость/амфифильные свойства
GRAS статус
11,7
Gelucire® 44/14
(Gattefosse)
Лауроил макрогол-32 глицеридыВоскообразное твердое вещество/Т плавления 44°C/HLB 14
GRAS статус/европейская монография
90,1
Витамин E TPGS
(Eastman)
Витамин E d-α-токоферил-полиэтиленгликоль 1000 сукцинатВоскообразное твердое вещество/Т плавления 38°C/HLB 13
GRAS статус/USP монография
100
Смесь наполнителей, способная к самопроизвольной микроэмульсификации при контакте с жидкими физиологическими средамиМиглиол 812 (Condea)Триглицериды каприловой/капровой кислотМасляная фаза/жирные кислоты: C8 и C10
GRAS статус/европейская монография
37,4
Каприол® 90 (Gattefosse)Полиэтиленгликоль монокаприлатДополнительное ПАВ/жидкость/HLB 6
Статус пищевой добавки
56,6
Кремофор RH 40 (BASF)Полиоксил 40 гидрированное касторовое маслоПАВ/полутвердое/жидкость при 30°C HLB 14-16
FDA неактивные ингредиенты/USP монография
80,6

ОПИСАНИЕ ОПЫТНЫХ ОБРАЗЦОВ

Масляные растворы и полутвердые матрицы (двойные и тройные смеси)

Таблица 1Описание выбранных опытных образцовОпытный образец 1КомпонентХимическое описаниеКоличествоСоединение (Ic)100 мгGelucire 44/14Лауроил макрогол глицериды10 гОпытный образец 2КомпонентХимическое описаниеКоличествоСоединение (Ic)100 мгLabrasolКаприл капроил макрогол глицериды6 гLabrafil 1944 CS Олеил макрогол глицериды 4 гОпытный образец 3КомпонентХимическое описаниеКоличествоСоединение (Ic)100 мгPhosal 50 PGСмесь фосфолипидов и пропиленгликоля10 гОпытный образец 4КомпонентХимическое описаниеКоличествоСоединение (Ic)100 мгВитамин E TPGSd-альфа токоферил полиэтилен гликоль 1000 сукцинат10 г

Для опытного образца, содержащего Labrasol, максимальное количество Labrasol, которое следует включать в опытный образец, составляет 60% (по массе), поскольку при большем количестве усиливается опасность несовместимости с желатином оболочки капсулы. Композиции с более высоким содержанием Labrasol могли бы применяться в сочетании с капсулами, изготовленными не из желатина. Для дополнения массового состава данной композиции было решено применить Labrafil 1944 CS, представляющий собой липофильный компонент (HLB 4) в количестве 40% (по массе).

Системы, самопроизвольно образующие микроэмульсии: смеси Масло/ПАВ/дополнительное ПАВ (псевдотройная смесь)

Любая композиция, содержащая амфифильную пару ПАВ/дополнительное ПАВ приводит к формированию нескольких мицеллярных состояний. Наша цель заключалась в разработке опытных образцов композиций, способных самопроизвольно образовывать микроэмульсию с жидкими физиологическими средами. Микроэмульсии можно определить, как прозрачные изотропные, термодинамически стабильные жидкости. Как следствие микроэмульсии можно неограниченно разбавлять. Прозрачность является следствием их микроструктуры, которая состоит из микрокапелек, размером <100 нм.

Главные свойства микроэмульсий, представляющие фармацевтический интерес, - это значительная способность к солюбилизации лекарственных средств; способность выдерживать разбавление при сохранении молекул в виде мицеллярного раствора in situ; а также способность к диспергированию до размера капельки, который допускает более легкую абсорбцию.

Выбор наполнителей

На основании литературных данных и результатов по растворимости, полученных с описанными наполнителями для микроэмульсионных композиций, с целью разработки одного опытного образца микроэмульсии были выбраны следующие компоненты:

- Масляная фаза: Миглиол 812

- ПАВ: Кремофор RH 40

- Дополнительное ПАВ: Каприол 90

- Водная фаза: жидкие физиологические среды

Псевдотройная диаграмма

Вид этой диаграммы позволяет определить соотношение наполнителей, которое способно обеспечить область существования микроэмульсий. Поскольку микроэмульсии являются четвертичными системами, их графическое представление требует трехмерного отображения. Однако для упрощения представления применена псевдотройная диаграмма.

Полагают, что микроэмульсия является псевдотройной смесью следующих компонентов:

1. Водной фазы

2. Масляной фазы (Миглиол 812N)

3. ПАВ/дополнительного ПАВ (Кремофор RH 40/Каприол 90)

Протокол эксперимента:

Во-первых, определяют соотношение ПАВ/Дополнительное ПАВ: испытывают 4 различных соотношения (1:1; 2:1; 3:1 и 4:1).

Для каждого из соотношений строят псевдотройную диаграмму со следующими установочными параметрами:

- Процентное содержание масляной фазы (20%, 40%, 60% и 80%).

- Процентное содержание пары ПАВ/дополнительное ПАВ (100% минус процент масляной фазы).

Затем по каплям добавляют водную фазу. Таким образом, процентное содержание каждого «компонента» изменяется после каждого добавления воды.

Изменение внешнего вида смеси от мутного до полупрозрачного и наоборот, показывает границы области микроэмульсий. Кроме этого измерение размера капелек до и после неограниченного разбавления (Coulter Nanosizer N4+) позволяет подтвердить образование микроэмульсии.

Псевдотройную диаграмму получают в отсутствие активного ингредиента, затем получают вновь в присутствии активного ингредиента.

Результаты:

- Область микроэмульсий наблюдается при соотношении ПАВ/дополнительное ПАВ 3:1 и 4:1 (см. диаграммы). В этой области размер капелек составляет около 25 нм.

Область микроэмульсий получена для низкого исходного процентного содержания масляной фазы (20%) при любом соотношении ПАВ/дополнительное ПАВ (3:1 и 4:1) и высоком содержании воды (от 55 до 86%).

Исходные составы систем, самопроизвольно превращающихся в микроэмульсии, следующие:

Соотношение 3:1Соотношение 4:1Миглиол 81220%20%Каприол 9020%16%Кремофор RH 4060%64%

- Область микроэмульсий остается одной и той же в присутствии активного ингредиента и в его отсутствие (концентрация: 10 мг/г). Размер капелек одинаковый, около 25 нм.

Исходные составы систем, самопроизвольно превращающихся в микроэмульсии и содержащих (Ic), следующие:

Соотношение 3:1Соотношение 4:1Соединение (Ic)1%1%Миглиол 81220%20%Каприол 9020%16%Кремофор RH 4059%63%

Образование микроэмульсий было подтверждено определением изотропных характеристик.

Размер частиц

Для подтверждения образования микроэмульсии проверяют ее термодинамическую стабильность после хранения в жестких условиях и после значительного разбавления в воде или физиологических жидкостях.

Испытывают следующие образцы:

- Соотношение ПАВ/Дополнительное ПАВ 3:1 86% воды, 3% масляной фазы, 8% Кремофор RH40 и 3% Каприол 90.

- Соотношение ПАВ/Дополнительное ПАВ 4:1 86% воды, 3% масляной фазы, 9% Кремофор RH40 и 2% Каприол 90.

Стабильность микроэмульсии подтверждают измерением размера капелек до и после хранения в жестких условиях, а также после разбавления. Анализ (квазиупругое рассеяние света) проводят с помощью устройства Coulter Nanosizer N4+.

Хранение в жестких условиях

Образцы помещают в жесткие условия: 2 недели при 50°C, температурные циклы от -15 до +50°C в течение 24 часов.

После хранения в течение 2 недель при 50°C получены следующие результаты по размерам капелек (выраженные в нм), приведенные совместно с коэффициентом полидисперсности:

T=0Через 1 неделюЧерез 2 неделиСоотношение 3:124 (0,255)23 (0,255)25 (0,244)Соотношение 4:122 (0,278)22 (0,219)23 (0,233)

После проведения температурных циклов получены следующие результаты по размерам капелек (выраженные в нм), приведенные совместно с коэффициентом полидисперсности:

ДоПослеСоотношение 3:124 (0,255)23 (0,227)Соотношение 4:122 (0,276)23 (0,254)

При примененных воздействиях не наблюдается изменений в размере капелек: структура микроэмульсии не чувствительна к высокой температуре или к тепловому удару.

Конечная композиция с Кремофор EL

Для получения смеси Миглиол 812 (жидкость), Кремофор RH40 (полутвердое вещество при комнатной температуре, точка затвердевания 28°C) и Каприол 90 (жидкость) необходимо нагреть смесь до температуры 60°C, чтобы получить гомогенный раствор. Кроме этого нагревание смеси могло бы оказать сильное влияние на химическую стабильность соединения (Ic).

С учетом этих двух причин было сделано предложение заменить Кремофор RH40 на Кремофор EL (из того же семейства химических соединений).

Кремофор EL, т.е. полиоксил 35 касторовое масло, представляет собой жидкое ПАВ: для получения смеси не требуется нагревание.

Чтобы оценить применимость Кремофор EL в сравнении с Кремофор RH40 получают псевдотройную диаграмму для соотношения ПАВ/дополнительное ПАВ 3:1 и проводят испытание на способность к неограниченному разбавлению.

Экспериментальная работа с выбранными опытными образцами

Получение опытных образцов

Получение растворов соединения (Ic) (10 мг/г)

- Миглиол 812N (Condea, партия 508)

- PEG 400 - партия 5056

- Phosal 50PG (Aventis Nattermann, партия 228188)

- Labrafil 1944CS (Gattefosse, партия 15195)

- Labrasol (Gattefosse, партия 22478)

- Gelucire 44/14 (Gattefosse, партия 14236)

- Микроэмульсии (Кремофор RH40 или EL, Каприол 90, Миглиол 812N)

Взвешенное лекарственное соединение (50 мг) диспергируют в наполнителе (до 5 г) и затем оставляют при механическом перемешивании вплоть до растворения. Растворение лекарственного средства в Phosal 50PG является наиболее ответственной стадией (5 ч) из-за небольшой разницы между концентрацией раствора, которую необходимо получить (10 мг/г) и максимальной растворимостью соединения (Ic) в Phosal 50PG (11,5 мг/г).

Получение полутвердых матриц соединения (Ic) (10 мг/г)

- Соединение (Ic)

- Витамин E TPGS (Eastman Chemicals, партия 90001000)

Взвешенное лекарственное соединение (50 мг) диспергируют в расплавленном наполнителе (5 г) и затем оставляют при механическом перемешивании при 50-60°C вплоть до растворения. После этого массу выливают в форму суппозитория и оставляют охлаждаться в течение ночи. Для исследования стабильности расплавленную массу выливают в твердую желатиновую капсулу (размер 1) и хранят ночь при охлаждении. Затем желатиновую оболочку удаляют.

Поведение in vitro с имитацией жидких сред желудка и кишечника

Состав имитации жидкой среды

Для настоящего эксперимента выбирают следующие имитации среды:

- Желудочная среда USP, pH 1,2

- Кишечная среда при голодании, pH 6,8 (ссылка: Dressman et al., Pharm Res., 1998)

- Кишечная среда при приеме пищи, pH 5 (ссылка: Dressman et al., Pharm Res., 1998)

Таблица 2Состав имитаций желудочно-кишечной средыЖелудочная среда (G)Хлорид калия2 гХлористоводородная кислота 1Н100 млДеминерализованная водадо 1000 млКишечная среда при приеме пищи (IFed)на 500 млГидрофосфат калия0,029 М1,97 гГидроксид натриядо pH 6,8до pH 6,8Таурохолат натрия5 мМ1,34 гЛецитин1,5 мМ0,58 гХлорид калия0,22 М8,2 гС панкреатином или без него10 г или 05 г или 0Деминерализованная водадо 1 лдо 500 млКишечная среда при голодании (IFast)на 500 млУксусная кислотаГидроксид натриядо pH 5до pH 5Таурохолат натрия15 мМ4,03 гЛецитин4 мМ1,55 гХлорид калия0,19 М7,08 гС панкреатином или без него10 г или 05 г или 0Деминерализованная водадо 1 лдо 500 мл

Условия эксперимента и результаты

Все композиции соединения (Ic) (400 мг) разбавляют в соотношении 1:50 в желудочной среде, кишечной среде при голодании и кишечной среде при приеме пищи (20 мл), затем инкубируют в течение 2 часов при 37°C при механическом перемешивании (300 об/мин). Концентрацию лекарственного средства до и после фильтрации (0,2 или 2 мкм) определяют ВЭЖХ.

Определение коллоидной стабильности и свойств самопроизвольного эмульгирования.

Цель настоящего исследования заключается в оценке коллоидной стабильности и способности к самопроизвольному эмульгированию эмульсии/микроэмульсии/мицеллярного раствора композиции соединения (Ic) после инкубирования в желудочно-кишечных средах. Соответственно, образец фильтруют через фильтр 2 мкм (способный задерживать капельки масла >2 мкм, а также кристаллы лекарственного средства >2 мкм), затем определяют концентрацию с помощью ВЭЖХ. Размер фильтра (2 мкм) выбирают в результате экспериментов с фильтрами с различными размерами пор (0,45, 2 и 5 мкм), которые испытывают на водных растворах лекарственного средства. В действительности, как показано на Фиг.1, при любом размере пор фильтра (0,45, 2 и 5 мкм) наблюдается высокая степень задержки лекарственного вещества, что предполагает наличие крупных кристаллов >5 мкм. Размер пор фильтра (в исследованном диапазоне) не влияет на удержанную фильтром фракцию, тогда как состав среды оказывает радикальное влияние. В результате выделенная фильтром доля вещества составляет приблизительно 1% в случае желудочной среды, 2% в случае кишечной среды при голодании и 4,5-5,5% в случае кишечной среды при приеме пищи.

Данные, приведенные в расположенной ниже таблице и идущих далее чертежах, показывают, что все испытанные композиции показывают лучшие свойства по сравнению с образцом сравнения (Миглиол 812N и PEG400), подтверждая способность выбранных наполнителей к самопроизвольному эмульгированию в присутствии жидких сред желудка и кишечника. Микроэмульсии (3:1 и 4:1), мицеллярный раствор, полученный с витамином E TPGS и эмульсия, полученная с Phosal 50PG, оказываются наиболее гомогенными и стабильными системами в любой среде. Нанокристаллы стабильны в кишечной среде, тогда как в желудочной среде имеет место «флокуляция», ведущая к тому, что все лекарственное вещество удерживается фильтром. Эмульсии, полученные на основе Labrafil/Labrasol и Gelucire 44/14, после фильтрации показывали концентрацию лекарственного средства в пределах 20-60% (Labrafil/Labrasol) и 40-90% (Gelucire 44/14). Для всех новых композиций, за исключением Labrafil/Labrasol, не наблюдается влияние режима приема пищи (pH, концентрация лецитина и желчных солей).

Таблица 3Содержание соединения (Ic), оставшегося после фильтрации через фильтр 2 мкм, в случае предшествующей инкубации с жидкими средами желудка и кишечника (см. также Фиг.1)Наполнители/
среда
ЛекарствоPEG400Gelucire 44/14Labrafil/
Labrasol
МиглиолPhosal 50PGМикроэмульсия Кремофор/Каприол 3/1Микроэмульсия Кремофор/Каприол 4/1
Теоретическая концентрация200 мкг/млЖелудочная среда1,958,3182,284,10188,0188,3189,3Кишечная среда при приеме пищи pH 58,820,590123,62,3177,0187,1194,2Кишечная среда при голодании pH 6,84,214,5118,439,10,6175,7198,8195,6

In vitro поведение композиций с жидкими средами желудка и кишечника, выводы

В качестве общего вывода относительно свойств самопроизвольного эмульгирования и коллоидной стабильности полученных композиций лекарственного средства все испытанные композиции проявляют улучшение свойств по отношению к образцам сравнения (Миглиол 812N и PEG 400), подтверждая способность выбранных наполнителей к самопроизвольному эмульгированию в присутствии жидких сред желудка и кишечника. Микроэмульсии (3:1 и 4:1), а также эмульсии, полученные с Phosal 50PG, и мицеллярные растворы, полученные с витамином E TPGS, являются наиболее гомогенными и стабильными системами в любой среде. Для всех новых композиций не наблюдается влияния условий голодания/приема пищи на коллоидную стабильность, за исключением композиции на основе Labrafil/Labrasol, для которой отфильтрованная часть лекарственного средства понижается с 60 до 20% в кишечной среде при голодании.

В отношении людей предполагается, что для выбора наиболее подходящей дневной дозировки следует принять во внимание вес пациента, общее состояние здоровья, возраст и все факторы, которые могут оказать влияние на эффективность лечения. Предпочтительно композиции изготавливают таким образом, чтобы единичная лекарственная форма содержала от 0,1 до 50 мг активного ингредиента.

Среди производных азетидина общей формулы (Ia) или (Ib) особенно предпочтительными являются следующие продукты:

- 1-[бис(4-хлорфенил)метил]-3-[(3,5-дифторфенил)(метилсульфонил)метилен]азетидин;

-N-{1-[бис(4-хлорфенил)метил]азетидин-3-ил}-N-пирид-3-илметилсульфонамид;

- N-{1-[бис(4-хлорфенил)метил]азетидин-3-ил}-N-(3,5-дифторфенил)метилсульфонамид.

Имеется в виду, что композиции по настоящему изобретению, содержащие указанные соединения, являются особенно предпочтительными.

С другой стороны, в случае введения второго активного ингредиента композиция может содержать от 0,2 до 50 мг в случае, если сопутствующим ингредиентом является сибутрамин. Однако это количество, необязательно, может быть ниже и может изменяться от 0,2 до 10 мг.

В случае если сопутствующим ингредиентом является L-допа, композиция может содержать от 100 до 300 мг этого второго активного компонента, предпочтительно 250 мг.

Стабилизирующими агентами могут быть, например, антиоксиданты, выбранные, в частности, из α-токоферола, аскорбил пальмитата, BHT (бутилгидрокситолуола), BHA (бутилгидроксианизола), пропилгаллата или, например, яблочной кислоты.

Консерванты могут быть выбраны, в качестве примера, из метабисульфита натрия, пропиленгликоля, этанола или глицерина.

Среди агентов, способных регулировать вязкость, могут быть упомянуты, например, лецитины, фосфолипиды, пропиленгликоль альгинат, альгинат натрия или глицерин.

Агентами, способными изменить органолептические свойства композиции, в качестве примера, являются яблочная кислота, фумаровая кислота, глицерин, ванилин или ментол.

В случае применения подобных добавок их содержание может составлять от 0,001 до 5% по массе от общей массы композиции.

В соответствии с настоящим изобретением фармацевтическая композиция может быть получена, если это приемлемо, смешиванием основных наполнителей (после нагревания, если это необходимо в случае твердых или полутвердых наполнителей), и затем, если это необходимо, смешиванием с дополнительными добавками с последующим добавлением производного азетидина общей формулы (Ia) или (Ib) и, если это предусмотрено, активного ингредиента, способного усилить воздействие производного азетидина общей формулы (Ia) или (Ib), причем для получения гомогенной смеси осуществляется перемешивание.

Применение этого способа более подробно описано ниже в примерах.

Композиции по настоящему изобретению могут иметь жидкое, твердое или мазеобразное состояние.

В частности они удобны для воспроизведения в форме твердых желатиновых капсул, или мягких желатиновых капсул, или же в форме перорального раствора.

Композиции по настоящему изобретению особенно выгодны благодаря их хорошей стабильности как физической, так и химической, а также улучшению биодоступности, которое достигается при пероральном введении производных азетидина общей формулы (Ia) или (Ib).

В соответствии с другим вариантом по настоящему изобретению определенные выше предпочтительные композиции, содержащие, по крайней мере, один активный ингредиент общей формулы (Ia) или (Ib), могут вводиться до, одновременно с или после введения активного ингредиента, способного усилить воздействие производного азетидина общей формулы (Ia) или (Ib).

Подразумевается, что в область действия настоящего изобретения попадает набор, включающий, с одной стороны, композицию по настоящему изобретению, как определено выше, и, с другой стороны, композицию, которая содержит активный ингредиент, способный усилить действие производного азетидина общей формулы (Ia) или (Ib). Также подразумевается, что наборы могут содержать композицию, способную усилить действия производных азетидина общей формулы (Ia) или (Ib), композиции, которые содержат сибутрамин, или композиции, которые содержат агент, активирующий допаминергическую нейротрансмиссию в мозге.

Похожие патенты RU2348615C2

название год авторы номер документа
ПОЛУТВЕРДЫЕ СИСТЕМЫ, СОДЕРЖАЩИЕ ПРОИЗВОДНЫЕ АЗЕТИДИНА 2004
  • Пераккия Мария-Тереза
  • Коте Софи
  • Бобино Валери
RU2343915C2
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ТАКСОИДОВ 2011
  • Хамар Бакулеш Мафатлал
  • Гогиа Ашиш Премкумар
  • Ладдхха Риту Нитин
  • Хан Имран Ахмед
  • Патравале Вандана Бхарат
  • Моди Индравадан Амбалал
RU2603833C2
ЛЕКАРСТВЕННАЯ ДОЗИРОВАННАЯ ФОРМА, КОТОРАЯ СОДЕРЖИТ 6'-ФТОР-(N-МЕТИЛ- ИЛИ N, N-ДИМЕТИЛ-)-4-ФЕНИЛ-4', 9'-ДИГИДРО-3'Н-СПИРО[ЦИКЛОГЕКСАН-1, 1'-ПИРАНО[3, 4, b]ИНДОЛ]-4-АМИН 2011
  • Грюнинг Надя
  • Шиллер Марк
RU2589830C2
СТАБИЛИЗИРОВАННАЯ ЛИПИДНАЯ ПРЕПАРАТИВНАЯ ФОРМА ПРОМОТОРА АПОПТОЗА 2010
  • Кэтрон Натаниэль
  • Фикс Майкл
  • Фишер Кристина
  • Хэйт Энтони Р.
  • Химстра Кэтрин
  • Санзгири Ешвант
  • Шмитт Эрик
  • Тун Пин
  • Чжан Джефф
  • Чжоу Дэлян
RU2530642C2
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ 2011
  • Гонкалвеш Элизабете
  • Рапп Карин
  • Сютте Бертран
  • Штовассер Франк
  • Трупп Бьерн
  • Шабо Себастьян
  • Торан Жюльен
RU2639482C2
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ, СОДЕРЖАЩАЯ ЦИКЛОСПОРИН, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МЯГКИХ ЖЕЛАТИНОВЫХ КАПСУЛ 1998
  • Сингх Амарджит
  • Джейн Раджеш
RU2178293C2
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ, ВКЛЮЧАЮЩАЯ ЦИКЛОСПОРИН В КАЧЕСТВЕ АКТИВНОГО ИНГРЕДИЕНТА 2000
  • Сингх Амарджит
  • Джейн Раджеш
RU2207870C2
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ, ПРОДУКТ ТРАНСЭТЕРИФИКАЦИИ КУКУРУЗНОГО МАСЛА ГЛИЦЕРИНОМ И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ 1992
  • Биргит Хауер
  • Армин Майнцер
  • Ульрих Позански
  • Жекки Фондершер
RU2143919C1
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ СОСТАВЫ АНАЛОГОВ ЦИКЛОСПОРИНА 2019
  • Трепанье, Дэниел Джозеф
  • Уре, Дарен Рэймонд
  • Фостер, Роберт Томас
RU2810897C2
КОМПОЗИЦИИ АНТАГОНИСТОВ НЕЙРОКИНИНА-1 ДЛЯ ВНУТРИВЕННОГО ВВЕДЕНИЯ 2010
  • Ван Джианшенг
  • Гупта Пранав
  • Монтейт Дэвид
  • Бхаттачария Соуменду
RU2642234C2

Иллюстрации к изобретению RU 2 348 615 C2

Реферат патента 2009 года ЭМУЛЬГИРУЮЩИЕ СИСТЕМЫ, СОДЕРЖАЩИЕ ПРОИЗВОДНЫЕ АЗЕТИДИНА

Настоящее изобретение относится к стабильным фармацевтическим композициям, содержащим производные азетидина, в особенности N-{1-[бис(4-хлорфенил)метил]азетидин-3-ил}-N-(3,5-дифторфенил)метилсульфонамид, и способу их получения. Изобретение может быть использовано в медицине. Технический результат - получение новой стабильной фармацевтической композиции на основе производного азетидина. 2 н. и 3 з.п. ф-лы, 6 ил., 6 табл.

Формула изобретения RU 2 348 615 C2

1. Стабильная фармацевтическая композиция, включающая производное азетидина, представляющее собой N-{1-[бис(4-хлорфенил)метил]азетидин-3-ил}-N-(3,5-дифторфенил)метилсульфонамид, в системе, содержащей:

(i) фосфолипид или

(ii) комбинацию Миглиола, Каприола и Кремофора.

2. Фармацевтическая композиция по п.1, которая включает до 200 мг производного азетидина на 1 г.3. Фармацевтическая композиция по п.1 или 2, которая далее включает дополнительную добавку, выбранную из стабилизаторов, консервантов, агентов для регулирования вязкости или агентов, которые могут изменять органолептические свойства.4. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой активный ингредиент, являющийся производным азетидина, присутствует в количестве от 0,01 до 70% по отношению к общей массе композиции.5. Способ получения композиции по любому из пп.1-4, согласно которому получают, если это приемлемо, смесь основных наполнителей после нагревания, если это необходимо в случае твердых или полутвердых наполнителей, а затем, если это необходимо, смесь с дополнительными добавками и затем добавляют производное азетидина, которое определено в п.1, и осуществляют перемешивание для получения гомогенной смеси.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2009 года RU2348615C2

WO 03053431, 03.07.2003
WO 9524893, 21.09.1995
KIBBE А.Н
«Handbook of pharmaceutical excipients», American pharmaceutical association and pharmaceutical press, Washington, 2000
WO 0228346, 11.04.2002
WO 03018060, 06.03.2003
3-АЗЕТИДИНИЛАЛКИЛПИПЕРИДИНЫ ИЛИ ПИРРОЛИДИНЫ В КАЧЕСТВЕ АНТАГОНИСТОВ ТАХИКИНИНА, СПОСОБЫ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ, ПРОМЕЖУТОЧНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ НА ИХ ОСНОВЕ И СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ 1996
  • Александр Родерик Маккензи
  • Аллан Патрик Марчингтон
  • Дональд Стюарт Миддлетон
  • Сандра Дора Медоус
RU2158264C2

RU 2 348 615 C2

Авторы

Коте Софи

Пераккия Мария-Тереза

Бобино Валери

Даты

2009-03-10Публикация

2004-07-08Подача