ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ СОСТАВЫ АНАЛОГОВ ЦИКЛОСПОРИНА Российский патент 2023 года по МПК A61K9/107 A61K38/13 A61K47/10 A61K47/14 A61K47/26 A61P1/16 A61P31/20 

Перекрестная ссылка на родственные заявки

[0001] Настоящая заявка испрашивает приоритет на основании заявки на патент США №62/771453, поданной 26 ноября 2018 года, содержание которой полностью включено в настоящую заявку посредством ссылки.

Область техники

[0002] Настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям (например, самомикроэмульгирующимся системам доставки лекарственного средства «СМЭСДЛС» (self-microemulsifying drug delivery systems)) аналогов циклоспорина A (например, CRV431, неиммуносупрессивного аналога циклоспорина A). В некоторых вариантах реализации изобретения СМЭСДЛС являются стабильными, могут легко солюбилизировать CRV431 и способны обеспечивать высокую экспозицию CRV431 в организме.

Уровень техники

[0003] CRV431 представляет собой низкомолекулярный ингибитор циклофилина, проходящий клинические испытания для лечения заболеваний печени, включая фиброз печени и гепатоцеллюлярную карциному. В доклинических исследованиях CRV431 продемонстрировал противовирусную активность в отношении целого ряда вирусов, включая вирус гепатита B, гепатита C и ВИЧ (вирус иммунодефицита человека), и противофиброзную активность в печени в ряде моделей in vivo. CRV431 (показанный на фиг. 1B) представляет собой производное циклоспорина A (CsA) (показанного на фиг. 1A) - нейтрального циклического пептида, состоящего из одиннадцати аминокислот, в котором аминокислоты 1 и 3 химически модифицированы, как показано на фиг. 1B.

Сущность изобретения

[0004] Согласно настоящему изобретению предложен стабильный состав СМЭСДЛС CRV431, обеспечивающий хорошую растворимость производного циклоспорина A (например, CRV431) и значительную экспозицию в крови у людей после однократной пероральной дозы у здоровых субъектов.

[0005] Согласно одному аспекту настоящего изобретения предложена самомикроэмульгирующаяся система доставки лекарственного средства (СМЭСДЛС), содержащая производное или аналог циклоспорина A, такое как CRV431:

(CRV431),

или его фармацевтически приемлемую соль.

[0006] В некоторых вариантах реализации изобретения указанная система дополнительно содержит полиоксилкасторовое масло (известное также как гидрогенизированное касторовое масло полиоксил 40, макроголглицерола гидроксистеарат и ПЭГ(полиэтиленгликоль)-40 гидрогенизированное касторовое масло, такое как Кремофор® RH40 и Коллифор® RH40). В некоторых вариантах реализации изобретения указанная система дополнительно содержит этанол. В некоторых вариантах реализации изобретения система дополнительно содержит моноэтиловый эфир диэтиленгликоля (известный также как 2-(2-этоксиэтокси)этанол, такой как Транскутол®). В некоторых вариантах реализации изобретения система дополнительно содержит пропиленгликоль (ПГ). В некоторых вариантах реализации изобретения система дополнительно содержит монолинолеат глицерина, такой как Майзин® CC. В некоторых вариантах реализации изобретения система дополнительно содержит витамин E.

[0007] В некоторых вариантах реализации изобретения указанная система содержит витамин E, Майзин® CC, пропиленгликоль, Транскутол®, этанол и Кремофор® RH40 в массовом отношении 1/1/5/5/2,4/4 или 1/1,5/2,5/5/2,4/5. В некоторых вариантах реализации изобретения система содержит CRV431 в концентрации от примерно 10 мг/мл до примерно 90 мг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения система содержит CRV431 в концентрации примерно 90 мг/мл.

[0008] Согласно настоящему изобретению также предложена фармацевтическая композиция, содержащая:

(a) производное циклоспорина A, такое как CRV431, в концентрации 90 мг/мл:

(CRV431);

(b) витамин E;

(c) Майзин® CC;

(d) пропиленгликоль;

(e) Транскутол®;

(f) этанол и

(g) Кремофор® RH40, в которой витамин E, Майзин® CC, пропиленгликоль, Транскутол®, этанол и Кремофор® RH40 находятся в массовом отношении, соответственно, примерно (0,75-1,5)/(0,5-2)/(2-5)/(2-5)/(2-2,4)/(4-8).

[0009] Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложен способ лечения заболевания у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества самомикроэмульгирующейся системы доставки лекарственного средства или терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, описанной в настоящем изобретении.

[0010] Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложен способ предотвращения заболевания у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества самомикроэмульгирующейся системы доставки лекарственного средства или терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, описанных в настоящем изобретении.

[0011] В некоторых вариантах реализации изобретения указанное заболевание представляет собой тяжелое заболевание печени. В некоторых вариантах реализации изобретения указанное заболевание представляет собой гепатит B (вирус гепатита В - ВГВ), фиброз печени или гепатоцеллюлярную карциному. В некоторых вариантах реализации изобретения указанное заболевание представляет собой гепатит B (ВГВ). В некоторых вариантах реализации изобретения указанное заболевание представляет собой гепатоцеллюлярную карциному.

[0012] Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложена самомикроэмульгирующаяся система доставки лекарственного средства для лечения или предотвращения заболевания у субъекта.

[0013] Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложено применение терапевтически эффективного количества самомикроэмульгирующейся системы доставки лекарственного средства или терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению для лечения или предотвращения заболевания у субъекта.

[0014] Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложено применение терапевтически эффективного количества самомикроэмульгирующейся системы доставки лекарственного средства или терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению для получения лекарственного препарата для лечения или предотвращения заболевания у субъекта.

[0015] В некоторых вариантах реализации изобретения указанное заболевание представляет собой тяжелое заболевание печени. В некоторых вариантах реализации изобретения указанное заболевание представляет собой гепатит B (ВГВ), фиброз печени или гепатоцеллюлярную карциному. В некоторых вариантах реализации изобретения указанное заболевание представляет собой гепатит B (ВГВ). В некоторых вариантах реализации изобретения указанное заболевание представляет собой гепатоцеллюлярную карциному.

[0016] В некоторых вариантах реализации изобретения площадь под кривой (AUC (от англ. area under curve)) на графике зависимости концентрации CRV431 в крови субъекта от времени составляет от примерно 5000 нг⋅ч/мл до примерно 150000 нг⋅ч/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения максимальная концентрация (С_макс) CRV431 в крови субъекта составляет от примерно 1500 нг/мл до примерно 2500 нг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения время (Т_макс) достижения максимальной концентрации CRV431 в крови субъекта составляет от примерно 0,5 часа до примерно 8 часов. В некоторых вариантах реализации изобретения период полувыведения (T_1/2) CRV431 из крови субъекта составляет от примерно 10 часов до примерно 200 часов. В некоторых вариантах реализации изобретения концентрация CRV431 в печени субъекта относительно концентрации CRV431 в крови субъекта составляет от примерно 1 до примерно 20.

[0017] В некоторых вариантах реализации изобретения терапевтически эффективное количество СМЭСДЛС составляет от примерно 0,5 мг/кг до примерно 5 мг/кг.

[0018] В некоторых вариантах реализации изобретения таким образом облегчается симптом заболевания у субъекта и/или снижается тяжесть заболевания у субъекта. В некоторых вариантах реализации изобретения тем самым улучшается функция печени у субъекта. В некоторых вариантах реализации изобретения тем самым уменьшается нагрузка вируса, вызывающего заболевание.

[0019] В некоторых вариантах реализации изобретения фармацевтическая композиция или СМЭСДЛС стабильны при комнатной температуре. В некоторых вариантах реализации изобретения фармацевтическая композиция или СМЭСДЛС стабильны в течение от по меньшей мере примерно 25 дней до по меньшей мере примерно 200 дней. В некоторых вариантах реализации изобретения частицы, образованные фармацевтической композицией или СМЭСДЛС, диспергированной в водном растворе, имеют размер от примерно 15 нм до примерно 40 нм.

[0020] Вышеизложенные и другие аспекты настоящего изобретения далее будут описаны более подробно в отношении описания и методологии, приводимых в данном документе. Следует понимать, что изобретение может быть осуществлено в различных формах и не должно рассматриваться как ограниченное вариантами реализации изобретения, изложенными в данном документе. Эти варианты реализации изобретения представлены для того, чтобы описание было подробным и полным и полностью передавало объем изобретения специалистам в данной области техники.

Краткое описание чертежей

[0021] На фиг. 1A показана химическая структура циклоспорина A.

[0022] На фиг. 1В показана химическая структура CRV431.

[0023] Фиг. 2 представляет собой псевдотройную фазовую диаграмму, показывающую область микроэмульсии масло/вода для соотношений Кремофора® RH40, Майзина® CC и сорастворителей.

[0024] Фиг. 3 представляет собой график стабильности СМЭСДЛС CRV431 серии 1, полученный с помощью ЖХ-ИЭР-МС (жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии с ионизацией электрораспылением).

[0025] Фиг. 4 представляет собой график стабильности СМЭСДЛС серии 2 в сравнении с серией 1.

[0026] Фиг. 5 и 6 представляют собой графики измерений диаметра частиц СМЭСДЛС CRV431 в водной дисперсии.

[0027] Фиг. 7A представляет собой график фармакокинетики CRV431 у людей с линейной шкалой.

[0028] Фиг. 7B представляет собой график фармакокинетики CRV431 у людей с логарифмической шкалой для дозы 75 мг.

[0029] Фиг. 7C представляет собой график фармакокинетики CRV431 у людей с логарифмической шкалой для дозы 225 мг.

[0030] Фиг. 8 представляет собой график уровней CRV431 в цельной крови и печени у крыс линии Спрег-Доули.

Подробное описание изобретения

Основные определения

[0031] Терминология, употребляемая в изобретении, приводится исключительно с целью описания конкретных вариантов реализации изобретения и не предназначена для ограничения изобретения. Формы единственного числа, используемые в описании вариантов реализации изобретения и прилагаемой формуле изобретения, также не исключают возможности наличия форм во множественном числе, если в контексте явным образом не указано иное. Также, при использовании в настоящем изобретении «и/или» относится к любым и всем возможным сочетаниям одного или более связанных перечисленных элементов и охватывает их. Кроме того, термин «примерно», используемый в настоящем изобретении в отношении измеряемой величины, такой как количество соединения, доза, время, температура и подобных, охватывает варианты 20%, 10%, 5%, 1 %, 0,5% или даже 0,1% от указанного количества.

[0032] Кроме того, понятно, что термины «содержит» и/или «содержащий», используемые в данном описании изобретения, устанавливают наличие заданных признаков, целых чисел, стадий, действий, элементов и/или компонентов, но не исключают наличие или добавление одного или более других признаков, целых чисел, стадий, действий, элементов, компонентов и/или их групп. Если не указано иное, все термины, включая технические и научные термины, используемые в описании, имеют те же значения, которое обычно понимает под ними специалист в области техники, к которой относится данное изобретение.

[0033] Термин «по существу состоит из» (и грамматические варианты) применительно к композициям в настоящем изобретении, означает, что композиция может содержать дополнительные компоненты при условии, что дополнительные компоненты существенно не изменяют композицию. Термин «существенно измененный» применительно к композиции относится к увеличению или уменьшению терапевтической эффективности композиции по меньше мере примерно на 20% или более по сравнению с эффективностью композиции, состоящей из перечисленных компонентов.

[0034] Подразумевается, что «вирус гепатита B» (или «ВГВ»), используемый в настоящем изобретении, включает все его подтипы (adw, adr, ayw и ayr) и/или генотипы (A, B, C, D, E, F, G и H). Раскрытую в настоящем изобретении СМЭСДЛС можно применять для лечения ВГВ.

[0035] Используемое в настоящем изобретении «терапевтически эффективное количество» относится к количеству, которое обеспечивает некоторое облегчение, смягчение и/или ослабление по меньшей мере одного клинического симптома у субъекта. Специалистам в данной области техники будет понятно, что терапевтическое действие необязательно должно быть полным или лечебным при условии, что субъект получает некоторую пользу.

[0036] «Осуществление лечения» включает любой эффект, например, ослабление, снижение, модуляцию или устранение, что приводит к улучшению состояния, заболевания, расстройства и т.п. «Осуществление лечения» или «лечение» болезненного состояния включает: (1) подавление болезненного состояния, т.е. прекращение развития болезненного состояния или его клинических симптомов; (2) облегчение болезненного состояния, т.е. вызов временного или длительного регресса болезненного состояния или его клинических симптомов; или (3) снижение или ослабление симптомов болезненного состояния.

[0037] В некоторых вариантах реализации изобретения лечение можно назначить после развития одного или более симптомов. В других вариантах реализации изобретения лечение можно назначить в отсутствие симптомов. Также лечение можно продолжить после устранения симптомов.

[0038] Используемые в настоящем изобретении термины «профилактика», «предотвращать» и «предотвращение» относятся к тому, чтобы клинические симптомы болезненного состояния не развивались у субъекта, который может быть подвержен или предрасположен к болезненному состоянию, но еще не испытывает или не проявляет симптомы болезненного состояния. В некоторых вариантах реализации изобретения профилактику можно назначить в отсутствие симптомов. Например, профилактику можно назначить восприимчивому пациенту до наступления симптомов (например, имея в виду историю симптомов и/или имея в виду генетические или другие факторы восприимчивости). Профилактику также можно продолжить после устранения симптомов, например, чтобы замедлить их повторение.

[0039] «СМЭСДЛС» относится к самомикроэмульгирующейся системе доставки лекарственного средства.

Растворимость CRV431

[0040] Согласно настоящему изобретению предложен состав самомикроэмульгирующейся системы доставки лекарственного средства (СМЭСДЛС) для пероральной доставки производного соединения циклоспорина A (CsA), такого как CRV431, неиммуносупрессивного аналога циклоспорина A. В некоторых вариантах реализации изобретения по сравнению с циклоспорином A CRV431 может быть плохо растворим в липидных растворителях и, таким образом, вызывает затруднение в разработке состава с достаточной пероральной биодоступностью для клинического применения. Следовательно, в настоящем изобретении предложена система СМЭСДЛС для доставки CRV431 пациентам (например, людям).

[0041] Как изложено в настоящем изобретении, растворимость CRV431, производного соединения циклоспорина A, определяли в целом ряде традиционных поверхностно-активных веществ, масел и сорастворителей. Псевдотройную фазовую диаграмму строили с наиболее растворимыми вспомогательными веществами и составами прототипов, и разрабатывали серию 1 и серию 2. Фармакокинетику после введения однократных пероральных доз в 1 и 3 мг/кг СМЭСДЛС CRV431 исследовали на здоровых добровольцах, используя жидкостную хроматографию и масс-спектрометрию с ионизацией электрораспылением (ЖХ-ИЭР-МС).

[0042] Максимальная лекарственная нагрузка составов серии 1 составляла менее 40 мг/мл. Корректирование соотношений вспомогательных веществ позволило разработать составы серии 2, которые обладали более высокой емкостью лекарственной нагрузки и стабильностью CRV431 в сравнении с серией 1. Дополнительная корректировка позволила разработать состав СМЭСДЛС, содержащий до 90 мг/мл CRV431, и который давал средний размер частиц микроэмульсии в 25 нм при диспергировании в водной среде. Фармакокинетика СМЭСДЛС CRV431 в настоящем изобретении показала превосходную экспозицию во всем организме и пропорциональные дозе эффекты у людей, и высокие уровни лекарственного средства в печени крыс.

[0043] В некоторых вариантах реализации изобретения состав СМЭСДЛС, раскрытый в настоящем изобретении, можно применять для эффективного клинического испытания CRV431. Например, составы, раскрытые в настоящем изобретении, можно направить на лечение заболеваний печени, включая гепатит B (ВГВ), фиброз печени и гепатоцеллюлярную карциному.

[0044] Было установлено, что растворимость в воде CRV431 примерно в 4-раза больше чем CsA (115 против 30 мкг/мл), и что также нашло отражение в вычисленной площади полярной поверхности (308 против 273 ангстрем). Не желая быть связанными какой-либо конкретной теорией, авторы настоящего изобретения полагают, что хотя можно ожидать, что увеличение растворимости в воде приведет к более низкому связыванию с белками плазмы (более высокому содержанию свободной фракции), CRV431 по-прежнему считается мало растворимым в воде и, следовательно, без ограничения теорией, едва ли будет обладать значимой клинической ценностью в составе твердой таблетки. Вычисленный log P для CRV431 (3,98) остается очень высоким и, следовательно, можно предположить, что его растворимость в липиде будет сходна с циклоспорином A. Однако фактическая растворимость CRV431 в различных липидных поверхностно-активных веществах и маслах намного меньше, чем у циклоспорина A (таблица 3). Не желая быть связанными теорией, авторы настоящего изобретения полагают, что собственная растворимость CRV431 в любом приведенном составе СМЭСДЛС будет значительно меньше, чем у CsA, что приведет к более низкой нагрузке. Не желая быть связанными теорией, авторы настоящего изобретения отмечают, что для получения состава СМЭСДЛС микроэмульсия СМЭСДЛС должна по меньшей мере содержать смесь масла/поверхностно-активного вещества. В эту смесь можно добавить различные сорастворители для улучшения растворимости лекарственного средства.

[0045] В некоторых вариантах реализации изобретения поверхностно-активное вещество с наивысшей растворимостью CRV431 включало Кремофор® RH40, Лаурогликоль™ 90 и Каприол™ 90. Как Лаурогликоль™ 90, так и Каприол™ 90 являются нерастворимыми в воде поверхностно-активными веществами, и, не желая быть связанными теорией, авторы настоящего изобретения полагают, что они не подходят для получения микроэмульсий масло в воде. Было установлено, что смеси либо Лаурогликоля™ 90, либо Каприола™ 90 с такими вспомогательными веществами, как масло и сорастворители, образуют скорее масляную каплю в воде, чем смешивающиеся дисперсии (данные не показаны). Таким образом, благодаря растворимости CRV431 в Кремофоре® RH40, Кремофор® RH40 был выбран в качестве поверхностно-активного вещества. Исходя из растворимости CRV431 в исследованных маслах и сорастворителях, для разработки прототипа СМЭСДЛС были выбраны вспомогательные вещества: витамин E; Майзин® CC; этанол; Транскутол®; пропиленгликоль, наряду с Кремофором® RH40. Псевдотройную фазовую диаграмму строили, нанося процентное содержание в составе Майзина® CC (масло) в сравнении с Кремофором® RH40 (поверхностно-активное вещество) в сравнении со смесями сорастворителей в отсутствие лекарственного средства (фиг. 2). Эти исследования показали, что при соотношениях сочетаний Кремофора® RH40/Майзина® CC менее 3 микроэмульсии не образуются (белые непрозрачные при визуальном осмотре). Граница раздела фаз для образования микроэмульсии (прозрачная в водной дисперсии) четко обозначена и составляет примерно 40% от общей площади фазовой диаграммы.

[0046] Исходя из псевдотройной фазовой диаграммы, получали состав прототипа СМЭСДЛС (таблица 4: состав №1), содержащий Кремофор® RH40/Майзин® CC/ПГ/этанол/витамин E в соотношении 9/3/3/2/1 и содержащий 50 мг/мл CRV431. Состав СМЭСДЛС сохранялся прозрачным в течение нескольких дней, после чего становились заметными прозрачные кристаллы, которые прилипали ко дну стеклянного сосуда. Разрабатывали серию СМЭСДЛС (серия 1, таблица 5), в которой долю сорастворителя Транскутола® увеличивали, тем самым пытаясь вызвать дополнительную растворимость и уменьшить образование кристаллов. Все составы серии 1 образовывали микроэмульсии при диспергировании в воде; однако они также были неустойчивы при комнатной температуре. В общем, не желая быть связанными теорией, отметим, что с увеличением уровня Транскутола® увеличивалась неустойчивость состава. Вероятно, это меньше связано с увеличением Транскутола® и больше связано со снижением других сорастворителей, в которых CRV431 также умеренно растворим. Исходя из результатов серии 1, получали составы серии 2 для исследования составов с большей стабильностью.

[0047] Не желая быть связанными теорией, отметим, что, поскольку псевдотройная диаграмма (фиг. 2) показывает, что зона микроэмульсии также существует при более низких соотношениях поверхностно-активного вещества и масла, обоснование разработки составов СМЭСДЛС CRV431 серии 2 предполагало увеличение вспомогательных сорастворителей, в которых CRV431 наиболее растворим (витамин E, пропиленгликоль, Транскутол® и этанол), и снижение до минимума компонентов поверхностно-активного вещества и масла, в которых CRV431 наименее растворим, при сохранении способности образовывать прозрачную микроэмульсию при диспергировании в воде.

[0048] Все СМЭСДЛС серии 2 обладают значительно увеличенной стабильностью (фиг. 4) по сравнению с первоначальным составом прототипа (9/3/3/2/1). Некоторые СМЭСДЛС не имели заметной потери лекарственного средства после 77 дней хранения при комнатной температуре и, следовательно, считаются стабильными. Не желая быть связанными теорией, отметим, что повышенная стабильность объясняется как результат повышенной растворимости CRV431 в этих СМЭСДЛС, так что CRV431 не находится в своих пределах растворимости, как это было в случае СМЭСДЛС серии 1. В действительности СМЭСДЛС 1/1/5/5/2/4 и 1/1,5/2,5/5/2,4/5 (витамин E/Майзин® CC/пропиленгликоль/Транскутол®/этанол/Кремофор® RH40 (масс./масс./масс./масс./масс./масс.)) также легко получали при 75 мг/мл. Поскольку цель разработки состава состояла в увеличении лекарственной нагрузки CRV431, массовое отношение этанола увеличивали с 2 до 2,4. В некоторых вариантах реализации изобретения клинический состав СМЭСДЛС получают и доставляют пациентам в виде мягких гелевых капсул, поэтому дополнительное увеличение количества этанола не рассматривалось, так как это количество этанола приближается к пределам совместимости с мягким гелем.

[0049] Было установлено, что СМЭСДЛС CRV431 (1/1/5/5/2,4/4) имеет предел растворимости 90-100 мг/мл, и считается стабильной. Когда СМЭСДЛС CRV431 1/1/5/5/2,4/4 и 1/1,5/2,5/5/2,4/5 (витамин E/Майзин® CC/пропиленгликоль/Транскутол®/этанол/Кремофор® RH40 (масс./масс./масс./масс./масс./масс.)) диспергировали в водной среде получали размер частиц примерно 25 нм, что соответствует заявленному размеру частиц (30 нм) СМЭСДЛС Неорал®.

[0050] Фармакокинетику СМЭСДЛС CRV431 (1/1/5/5/2,4/4) исследовали на здоровых людях при дозах 1 и 3 мг/кг. Наблюдали превосходные показатели экспозиции и пропорциональности дозе. По сравнению с заявленными экспозициями циклоспорина A (2,5 мг/кг) у здоровых людей С_макс CRV431 была незначительно выше, чем Неорала®, и общая экспозиция (AUC) была примерно в 14 раз больше, чем Неорала®, который представляет собой пероральный препарат циклоспорина A, который сразу же образует микроэмульсию в водной среде и включает Кремофор® RH40 в качестве неактивного компонента. Не желая быть связанными теорией, авторы настоящего изобретения полагают, что, по-видимому, это преимущественно является следствием большей разницы в периоде полувыведения CRV431, примерно 100 часов, по сравнению с циклоспорином A, который, как сообщается, изменяется от 6,3 часа у здоровых субъектов до 20,4 часа в случае тяжелого заболевания печени.

[0051] В исследованиях повторного введения на крысах уровни CRV431 в печени (10 мкг/г ткани) были по меньшей мере в 6,5 раз выше, чем в цельной крови.

СМЭСДЛС согласно настоящему изобретению

[0052] Относительное массовое отношение разных компонентов в СМЭСДЛС согласно настоящему изобретению может варьироваться. В некоторых вариантах реализации СМЭСДЛС согласно настоящему изобретению может содержать витамин E в массовом отношении между примерно 0,75 и примерно 1,5 (например, примерно 0,75, примерно 1, примерно 1,25, примерно 1,5) относительно отличных от CRV431 компонентов в СМЭСДЛС. Например, СМЭСДЛС может содержать витамин E в массовом отношении между примерно 0,75 и примерно 1,5 (например, примерно 0,75, примерно 1, примерно 1,25, примерно 1,5) относительного одного или более Майзина® CC, пропиленгликоля, Транскутола®, этанола и Кремофора® RH40 в СМЭСДЛС. В некоторых вариантах реализации изобретения СМЭСДЛС может содержать витамин E в массовом отношении, примерно, по меньшей мере или не более 0,75, 0,80, 0,85, 0,90, 0,95, 1,00, 1,05, 1,10, 1,15, 1,20, 1,25, 1,30, 1,35, 1,40, 1,45, 1,50 или число или диапазон между любыми двумя из этих значений, относительно одного или более других отличных от CRV431 компонентов (включая, но не ограничиваясь ими, Майзин® CC, пропиленгликоль, Транскутол®, этанол и Кремофор® RH40) в СМЭСДЛС.

[0053] В некоторых вариантах реализации изобретения СМЭСДЛС согласно настоящему изобретению может содержать Майзин® CC в массовом отношении между примерно 0,5 и примерно 2 (например, примерно 0,5, примерно 0,75, примерно 1, примерно 1,25, примерно 1,5, примерно 1,75, примерно 2) относительно отличных от CRV431 компонентов в СМЭСДЛС. Например, СМЭСДЛС может содержать Майзин® CC в массовом отношении между примерно 0,75 и примерно 1,5 (например, примерно 0,75, примерно 1, примерно 1,25, примерно 1,5) относительно одного или более витамина E, пропиленгликоля, Транскутола®, этанола и Кремофора® RH40 в СМЭСДЛС. В некоторых вариантах реализации изобретения СМЭСДЛС может содержать Майзин® CC в массовом отношении, примерно, по меньшей мере или не более 0,75, 0,8, 0,85, 0,9, 0,95, 1, 1,05, 1,1, 1,15, 1,2, 1,25, 1,3, 1,35, 1,4, 1,45, 1,5, 1,55, 1,6, 1,65, 1,7, 1,75, 1,8, 1,85, 1,9, 1,95, 2 или число или диапазон между любыми двумя из этих значений, относительно одного или более других отличных от CRV431 компонентов (включая, но не ограничиваясь ими, витамин Е, пропиленгликоль, Транскутол®, этанол и Кремофор® RH40) в СМЭСДЛС.

[0054] В некоторых вариантах реализации изобретения СМЭСДЛССМЭСДЛС согласно настоящему изобретению может содержать пропиленгликоль в массовом отношении между примерно 2 и примерно 5 (например, примерно 2, примерно 2,25, примерно 2,5, примерно 2,75, примерно 3, примерно 3,25, примерно 3,5, примерно 3,75, примерно 4, примерно 4,25, примерно 4,5, примерно 4,75, примерно 5) относительно отличных от CRV431 компонентов в СМЭСДЛС. Например, СМЭСДЛС может содержать пропиленгликоль в массовом отношении между примерно 0,75 и примерно 1,5 (например, примерно 0,75, примерно 1, примерно 1,25, примерно 1,5) относительно одного или более витамина E, Майзина® CC, Транскутола®, этанола и Кремофора® RH40 в СМЭСДЛС. В некоторых вариантах реализации изобретения СМЭСДЛС может содержать пропиленгликоль в массовом отношении примерно, по меньшей мере или не более 2, 2,1, 2,2, 2,3, 2,4, 2,5, 2,6, 2,7, 2,8, 2,9, 3, 3,1, 3,2, 3,3, 3,4, 3,5, 3,6, 3,7, 3,8, 3,9, 4, 4,1, 4,2, 4,3, 4,4, 4,5, 4,6, 4,7, 4,8, 4,9, 5 или число или диапазон между любыми двумя из этих значений, относительно одного или более других отличных от CRV431 компонентов (включая, но не ограничиваясь ими, витамин E, Майзин® CC, Транскутол®, этанол и Кремофор® RH40) в СМЭСДЛС.

[0055] В некоторых вариантах реализации изобретения СМЭСДЛС согласно настоящему изобретению может содержать Транскутол® в массовом отношении между примерно 2 и примерно 5 (например, примерно 2, примерно 2,25, примерно 2,5, примерно 2,75, примерно 3, примерно 3,25, примерно 3,5, примерно 3,75, примерно 4, примерно 4,25, примерно 4,5, примерно 4,75, примерно 5) относительно отличных от CRV431 компонентов в СМЭСДЛС. Например, СМЭСДЛС может содержать Транскутол® в массовом отношении между примерно 0,75 и примерно 1,5 (например, примерно 0,75, примерно 1, примерно 1,25, примерно 1,5) относительно одного или более витамина E, Майзина® CC, пропиленгликоля, этанола и Кремофора® RH40 в СМЭСДЛС. В некоторых вариантах реализации изобретения СМЭСДЛС может содержать Транскутол® в массовом отношении, примерно, по меньшей мере или не более 2, 2,1, 2,2, 2,3, 2,4, 2,5, 2,6, 2,7, 2,8, 2,9, 3, 3,1, 3,2, 3,3, 3,4, 3,5, 3,6, 3,7, 3,8, 3,9, 4, 4,1, 4,2, 4,3, 4,4, 4,5, 4,6, 4,7, 4,8, 4,9, 5 или число или диапазон между любыми двумя из этих значений, относительно одного или более других отличных от CRV431 компонентов (включая, но не ограничиваясь ими, витамин E, Майзин® CC, пропиленгликоль, этанол и Кремофор® RH40) в СМЭСДЛС.

[0056] В некоторых вариантах реализации СМЭСДЛС согласно настоящему изобретению может содержать этанол в массовом отношении между примерно 2 и примерно 2,4 (например, примерно 2; примерно 2,25; примерно 2,4) относительно отличных от CRV431 компонентов в СМЭСДЛС. Например, СМЭСДЛС может содержать этанол в массовом отношении между примерно 0,75 и примерно 1,5 (например, примерно 0,75, примерно 1, примерно 1,25, примерно 1,5) относительно одного или более витамина E, Майзина® CC, пропиленгликоля, Транскутола® и Кремофора® RH40 в СМЭСДЛС. В некоторых вариантах реализации изобретения СМЭСДЛС может содержать этанол в массовом отношении, примерно, по меньшей мере или не более 2,1, 2,11, 2,12, 2,13, 2,14, 2,15, 2,16, 2,17, 2,18, 2,19, 2,2, 2,21, 2,22, 2,23, 2,24, 2,25, 2,26, 2,27, 2,28, 2,29, 2,3, 2,31, 2,32, 2,33, 2,34, 2,35, 2,36, 2,37, 2,38, 2,39, 2,4 или число или диапазон между любыми двумя из этих значений, относительно одного или более других отличных от CRV431 компонентов (включая, но не ограничиваясь ими, витамин E, Майзин® CC, пропиленгликоль, Транскутол® и Кремофор® RH40) в СМЭСДЛС.

[0057] В некоторых вариантах реализации изобретения СМЭСДЛС согласно настоящему изобретению может содержать Кремофор® RH40 в массовом отношении между примерно 4 и примерно 8 (например, примерно 4, примерно 4,25, примерно 4,5, примерно 4,75, примерно 5, примерно 5,25, примерно 5,5, примерно 5,75, примерно 6, примерно 6,25, примерно 6,5, примерно 6,75, примерно 7, примерно 7,25, примерно 7,5, примерно 7,75, примерно 8) относительно отличных от CRV431 компонентов в СМЭСДЛС. Например, СМЭСДЛС может содержать Кремофор® RH40 в массовом отношении между примерно 0,75 и примерно 1,5 (например, примерно 0,75, примерно 1, примерно 1,25, примерно 1,5) относительно одного или более витамина E, Майзина® CC, пропиленгликоля, Транскутола® и этанола в СМЭСДЛС. В предпочтительных вариантах реализации СМЭСДЛС согласно настоящему изобретению может содержать Кремофор® RH40 в массовом отношении между примерно 4 и примерно 6. В некоторых вариантах реализации изобретения СМЭСДЛС может содержать Кремофор® RH40 в массовом отношении, примерно, по меньшей мере или не более 4, 4,1, 4,2, 4,3, 4,4, 4,5, 4,6, 4,7, 4,8, 4,9, 5, 5,1, 5,2, 5,3, 5,4, 5,5, 5,6, 5,7, 5,8, 5,9, 6, 6,1, 6,2, 6,3, 6,4, 6,5, 6,6, 6,7, 6,8, 6,9, 7, 7,1, 7,2, 7,3, 7,4, 7,5, 7,6, 7,7, 7,8, 7,9, 8 или число или диапазон между любыми двумя из этих значений, относительно одного или более других отличных от CRV431 компонентов (включая, но не ограничиваясь ими, витамин E, Майзин® CC, пропиленгликоль, Транскутол® и Кремофор® RH40) в СМЭСДЛС. В некоторых вариантах реализации СМЭСДЛС содержит витамин E, Майзин® CC, пропиленгликоль, Транскутол®, этанол и Кремофор® RH40 в массовом отношении примерно (0,75-1,5)/(0,5-2)/(2-5)/(2-5)/(2-2,4)/(4-8).

[0058] В некоторых вариантах реализации СМЭСДЛС согласно настоящему изобретению может содержать CRV431 в концентрации между примерно 1 мг/мл и примерно 100 мг/мл (например, примерно 5 мг/мл, примерно 10 мг/мл, примерно 15 мг/мл, примерно 20 мг/мл, примерно 25 мг/мл, примерно 30 мг/мл, примерно 35 мг/мл, примерно 40 мг/мл, примерно 45 мг/мл, примерно 50 мг/мл, примерно 55 мг/мл, примерно 60 мг/мл, примерно 65 мг/мл, примерно 70 мг/мл, примерно 75 мг/мл, примерно 80 мг/мл, примерно 85 мг/мл, примерно 90 мг/мл, примерно 95 мг/мл, примерно 100 мг/мл). В предпочтительных вариантах реализации СМЭСДЛС согласно настоящему изобретению может содержать CRV431 в концентрации примерно 10 мг/мл до примерно 90 мг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения СМЭСДЛС может содержать производное соединение циклоспорина A (CsA), такое как CRV431, в концентрации, примерно, по меньшей мере или не более 1 мг/мл, 2 мг/мл, 3 мг/мл, 4 мг/мл, 5 мг/мл, 6 мг/мл, 7 мг/мл, 8 мг/мл, 9 мг/мл, 10 мг/мл, 11 мг/мл, 12 мг/мл, 13 мг/мл, 14 мг/мл, 15 мг/мл, 16 мг/мл, 17 мг/мл, 18 мг/мл, 19 мг/мл, 20 мг/мл, 21 мг/мл, 22 мг/мл, 23 мг/мл, 24 мг/мл, 25 мг/мл, 26 мг/мл, 27 мг/мл, 28 мг/мл, 29 мг/мл, 30 мг/мл, 31 мг/мл, 32 мг/мл, 33 мг/мл, 34 мг/мл, 35 мг/мл, 36 мг/мл, 37 мг/мл, 38 мг/мл, 39 мг/мл, 40 мг/мл, 41 мг/мл, 42 мг/мл, 43 мг/мл, 44 мг/мл, 45 мг/мл, 46 мг/мл, 47 мг/мл, 48 мг/мл, 49 мг/мл, 50 мг/мл, 51 мг/мл, 52 мг/мл, 53 мг/мл, 54 мг/мл, 55 мг/мл, 56 мг/мл, 57 мг/мл, 58 мг/мл, 59 мг/мл, 60 мг/мл, 61 мг/мл, 62 мг/мл, 63 мг/мл, 64 мг/мл, 65 мг/мл, 66 мг/мл, 67 мг/мл, 68 мг/мл, 69 мг/мл, 70 мг/мл, 71 мг/мл, 72 мг/мл, 73 мг/мл, 74 мг/мл, 75 мг/мл, 76 мг/мл, 77 мг/мл, 78 мг/мл, 79 мг/мл, 80 мг/мл, 81 мг/мл, 82 мг/мл, 83 мг/мл, 84 мг/мл, 85 мг/мл, 86 мг/мл, 87 мг/мл, 88 мг/мл, 89 мг/мл, 90 мг/мл, 91 мг/мл, 92 мг/мл, 93 мг/мл, 94 мг/мл, 95 мг/мл, 96 мг/мл, 97 мг/мл, 98 мг/мл, 99 мг/мл, 100 мг/мл или число или диапазон между любыми двумя из этих значений.

[0059] В некоторых вариантах реализации изобретения массовое отношение компонентов СМЭСДЛС за исключением CRV431 согласуется с другими компонентами СМЭСДЛС за исключением CRV431. В некоторых вариантах реализации изобретения СМЭСДЛС согласно настоящему изобретению получают, объединяя (например, смешивая) компоненты СМЭСДЛС за исключением CRV431 (например, витамин E, Майзин® CC, пропиленгликоль, Транскутол®, этанол и Кремофор® RH40) в массовом отношении, раскрытом в настоящем изобретении, в виде смеси перед объединением CRV431 со смесью (например, растворяя CRV431 в смеси или добавляя смесь к CRV431), получая СМЭСДЛС с CRV431 любой концентрации (например, 90 мг/мл), описанной в настоящем изобретении. В некоторых вариантах реализации изобретения СМЭСДЛС согласно настоящему изобретению получают, объединяя (например, смешивая) компоненты СМЭСДЛС за один раз.

[0060] В некоторых вариантах реализации изобретения СМЭСДЛС стабильна при комнатной температуре. В некоторых вариантах реализации изобретения СМЭСДЛС стабильна при 4°C, 5°C, 6°C, 7°C, 8°C, 9°C, 10°C, 11°C, 12°C, 13°C, 14°C, 15°C, 16°C, 17°C, 18°C, 19°C, 20°C, 21°C, 22°C, 23°C, 24°C, 25°C, 26°C, 27°C, 28°C, 29°C, 30°C¸ 31°C, 32°C, 33°C, 34°C, 35°C, 36°C, 37°C, 38°C, 39°C, 40°C, 45°C, 50°C, 55°C, 60°C или число или диапазон между любыми двумя из этих значений.

[0061] Описанная в настоящем изобретении СМЭСДЛС стабильна при хранении. Например, СМЭСДЛС может быть стабильна в течение нескольких часов, нескольких дней, нескольких месяцев или нескольких лет. В некоторых вариантах реализации изобретения СМЭСДЛС стабильна приблизительно от одного месяца до приблизительно трех лет. В некоторых вариантах реализации изобретения СМЭСДЛС стабильна от по меньшей мере примерно 25 дней до по меньшей мере примерно года. СМЭСДЛС может быть стабильна в течение, в течение примерно, в течение по меньшей мере или в течение самое большее, 25 дней, 26 дней, 27 дней, 28 дней, 29 дней, 30 дней, 31 дня, 32 дней, 33 дней, 34 дней, 35 дней, 36 дней, 37 дней, 38 дней, 39 дней, 40 дней, 41 дня, 42 дней, 43 дней, 44 дней, 45 дней, 46 дней, 47 дней, 48 дней, 49 дней, 50 дней, 51 дня, 52 дней, 53 дней, 54 дней, 55 дней, 56 дней, 57 дней, 58 дней, 59 дней, 60 дней, 61 дня, 62 дней, 63 дней, 64 дней, 65 дней, 66 дней, 67 дней, 68 дней, 69 дней, 70 дней, 71 дня, 72 дней, 73 дней, 74 дней, 75 дней, 76 дней, 77 дней, 78 дней, 79 дней, 80 дней, 81 дня, 82 дней, 83 дней, 84 дней, 85 дней, 86 дней, 87 дней, 88 дней, 89 дней, 90 дней, 91 дня, 92 дней, 93 дней, 94 дней, 95 дней, 96 дней, 97 дней, 98 дней, 99 дней, 100 дней, 111 дней, 112 дней, 113 дней, 114 дней, 115 дней, 116 дней, 117 дней, 118 дней, 119 дней, 120 дней, 121 дня, 122 дней, 123 дней, 124 дней, 125 дней, 126 дней, 127 дней, 128 дней, 129 дней, 130 дней, 131 дня, 132 дней, 133 дней, 134 дней, 135 дней, 136 дней, 137 дней, 138 дней, 139 дней, 140 дней, 141 дня, 142 дней, 143 дней, 144 дней, 145 дней, 146 дней, 147 дней, 148 дней, 149 дней, 150 дней, 151 дня, 152 дней, 153 дней, 154 дней, 155 дней, 156 дней, 157 дней, 158 дней, 159 дней, 160 дней, 161 дня, 162 дней, 163 дней, 164 дней, 165 дней, 166 дней, 167 дней, 168 дней, 169 дней, 170 дней, 171 дня, 172 дней, 173 дней, 174 дней, 175 дней, 176 дней, 177 дней, 178 дней, 179 дней, 180 дней, 181 дня, 182 дней, 183 дней, 184 дней, 185 дней, 186 дней, 187 дней, 188 дней, 189 дней, 190 дней, 191 дня, 192 дней, 193 дней, 194 дней, 195 дней, 196 дней, 197 дней, 198 дней, 199 дней, 200 дней, или число или диапазон между любыми двумя из этих значений. СМЭСДЛС может быть стабильна в течение, в течение примерно, в течение по меньшей мере или в течение самое большее, 1 месяца, 2 месяцев, 3 месяцев, 4 месяцев, 5 месяцев, 6 месяцев, 7 месяцев, 8 месяцев, 9 месяцев, 10 месяцев, 11 месяцев, 12 месяцев, 13 месяцев, 14 месяцев, 15 месяцев, 16 месяцев, 17 месяцев, 18 месяцев, 19 месяцев, 20 месяцев, 21 месяца, 22 месяцев, 23 месяцев, 24 месяцев, 2,5 лет, 3 лет, или число или диапазон между любыми двумя из этих значений. СМЭСДЛС можно считать стабильной, например, если CRV431 не кристаллизуется или не выпадает в осадок по существу, и/или в такой степени, которая визуально наблюдается.

[0062] СМЭСДЛС можно считать стабильной, например, если CRV431 в СМЭСДЛС не кристаллизуется или не выпадает в осадок в такой степени, что концентрация CRV431, солюбилизированного в СМЭСДЛС, уменьшается более чем на 0,1%, 0,2%, 0,3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, или число или диапазон между любыми двумя из этих значений. СМЭСДЛС можно считать стабильной, например, если CRV431 в СМЭСДЛС не кристаллизуется или не выпадает в осадок в такой степени, что концентрация CRV431, солюбилизированного в СМЭСДЛС, уменьшается более чем на 0,1 мг/мл, 0,2 мг/мл, 0,3 мг/мл, 4 мг/мл, 5 мг/мл, 6 мг/мл, 7 мг/мл, 8 мг/мл, 9 мг/мл, 1 мг/мл, 2 мг/мл, 3 мг/мл, 4 мг/мл, 5 мг/мл, 6 мг/мл, 7 мг/мл, 8 мг/мл, 9 мг/мл, 10 мг/мл, или число или диапазон между любыми двумя из этих значений.

[0063] В некоторых вариантах реализации изобретения диаметр частиц, образованных СМЭСДЛС, диспергированной в водном растворе, составляет от примерно 15 нм до примерно 40 нм. В некоторых вариантах реализации изобретения диаметр частиц, образованных СМЭСДЛС, диспергированной в водном растворе, составляет, составляет примерно, составляет по меньшей мере или составляет не более 15 нм, 16 нм, 17 нм, 18 нм, 19 нм, 20 нм, 21 нм, 22 нм, 23 нм, 24 нм, 25 нм, 26 нм, 27 нм, 28 нм, 29 нм, 30 нм, 31 нм, 32 нм, 33 нм, 34 нм, 35 нм, 36 нм, 37 нм, 38 нм, 39 нм, 40 нм, или число или диапазон между любыми двумя из этих значений.

Применение фармацевтических композиций согласно настоящему изобретению

[0064] Активное соединение по настоящему изобретению (например, как часть композиции СМЭСДЛС) можно необязательно вводить в сочетании (или совместно) с одним или более другими активными соединениями и/или агентами, полезными при лечении вирусных инфекций, как описано в настоящем изобретении. Введение двух или более соединений «в сочетании» или «совместно» означает, что два или более соединений вводят достаточно близко по времени для наличия совместного эффекта, например аддитивного и/или синергического эффекта. Два или более соединений можно вводить одновременно (параллельно) или последовательно, или может быть два или более событий, происходящих в пределах короткого периода времени до или после друг друга. Одновременное введение можно выполнять смешивая соединения перед введением или вводя соединения в один и тот же момент времени, но в разные анатомические области или с применением разных способов введения. В некоторых вариантах реализации изобретения другой противовирусный агент(ы) можно необязательно вводить параллельно.

[0065] Например, в некоторых вариантах реализации изобретения фармацевтические композиции (например, композиции СМЭСДЛС) согласно настоящему изобретению можно вводить в одном временном промежутке с другим активным агентом (например, другим противовирусным агентом или усиливающим агентом). В некоторых вариантах реализации изобретения «в одном временном промежутке» означает, что введение одного терапевтического агента (например, фармацевтической композиции по настоящему изобретению) происходит в пределах периода времени до или после введения другого терапевтического агента (например, дополнительного противовирусного агента) таким образом, чтобы терапевтический эффект одного терапевтического агента перекрывался с терапевтическим эффектом другого терапевтического агента. В некоторых вариантах реализации изобретения терапевтический эффект одного терапевтического агента полностью перекрывается с терапевтическим эффектом другого терапевтического агента. В некоторых вариантах реализации изобретения «в одном временном промежутке» означает, что введение одного терапевтического агента происходит в пределах периода времени до или после введения другого терапевтического агента таким образом, что существует синергический эффект между одним терапевтическим агентом и другим терапевтическим агентом. «В одном временном промежутке» может варьироваться в зависимости от различных факторов, включая, но не ограничиваясь ими, возраст, пол, вес, генетический фон, медицинское показание, историю болезни и историю лечения субъекта, которому следует вводить терапевтические агенты; заболевание или состояние, подлежащее лечению или улучшению; требуемый терапевтический результат; дозировку, частоту дозирования и продолжительность дозирования терапевтических агентов; фармакокинетику и фармакодинамику терапевтических агентов; и способ(ы), посредством которых вводят терапевтические агенты. В некоторых вариантах реализации изобретения «в одном временном промежутке» означает в пределах 15 минут, в пределах 30 минут, в пределах часа, в пределах двух часов, в пределах четырех часов, в пределах шести часов, в пределах восьми часов, в пределах 12 часов, в пределах 18 часов, в пределах 24 часов, в пределах 36 часов, в пределах 2 дней, в пределах 3 дней, в пределах 4 дней, в пределах 5 дней, в пределах 6 дней, в пределах недели, в пределах 2 недель, в пределах 3 недель, в пределах 4 недель, в пределах 6 недель или в пределах 8 недель. В некоторых вариантах реализации изобретения многократное введение одного терапевтического агента может происходить в одном временном промежутке с однократным введением другого терапевтического агента. В некоторых вариантах реализации изобретения в одном временном промежутке может изменяться в ходе цикла лечения или в пределах режима дозирования.

[0066] В некоторых вариантах реализации изобретения СМЭСДЛС согласно настоящему изобретению можно применять для лечения заболевания, например, заболевания печени, такого как тяжелое заболевание печени, гепатит B (ВГВ), фиброз печени или гепатоцеллюлярная карцинома. Неограничивающие примеры заболевания печени включают внутрипеченочный холестаз (синдром Алажиля, билиарный цирроз печени), жировую печень (алкогольную жировую печень, синдром Рейе), тромбоз печеночной вены, гепатолентикулярную дегенерацию, гепатомегалию, абсцесс печени (амебный абсцесс печени), цирроз печени (алкогольный, билиарный и экспериментальный), алкогольные заболевания печени (жировую печень, гепатит, цирроз), паразитарные (эхинококкоз печени, фасциолез, амебный абсцесс печени), желтуху (гемолитическую, гепатоцеллюлярную и холестатическую), холестаз, портальную гипертензию, увеличение печени, асцит, гепатит (алкогольный гепатит, гепатит у животного, хронический гепатит (аутоиммунный, гепатит B, гепатит C, гепатит D, лекарственный), токсический гепатит, вирусный гепатит человека (гепатит A, гепатит B, гепатит C, гепатит D, гепатит E), болезнь Вильсона, гранулематозный гепатит, вторичный билиарный цирроз, печеночную энцефалопатию, варикозное расширение вен, первичный билиарный цирроз, первичный склерозирующий холангит, гепатоцеллюлярную аденому, гемангиомы, желчные камни, печеночную недостаточность (печеночную энцефалопатию, острую печеночную недостаточность), и новообразования в печени (ангиомиолипому, кальцифицированные метастазы печени, кистозные метастазы печени, эпителиальные опухоли, фиброламеллярную гепатокарциному, фокальную нодулярную гиперплазию, аденому печени, гепатобилиарную цистаденому, гепатобластому, гепатоцеллюлярную карциному, гепатому, рак печени, гемангиоэндотелиому печени, мезенхимальную гамартому, мезенхимальные опухоли печени, нодулярную регенеративную гиперплазию, доброкачественные опухоли печени (кисты печени [простые кисты, поликистозную болезнь печени, гепатобилиарную цистаденому, кисту общего желчного протока], мезенхимальные опухоли [мезенхимальную гамартому, детскую гемангиоэндотелиому, гемангиому, печеночную пурпуру, липомы, воспалительную псевдоопухоль, различные], эпителиальные опухоли [эпителия желчных протоков (гамартому желчных протоков, аденому желчных протоков), гепатоцита (аденому, фокальную нодулярную гиперплазию, нодулярную регенеративную гиперплазию)], злокачественные опухоли печени [гепатоцеллюлярную, гепатобластому, гепатоцеллюлярную карциному, холангиоцеллюлярную, холангиокарциному, цистаденокарциному, опухоли кровеносных сосудов, ангиосаркому, саркому Капоши, гемангиоэндотелиому, эмбриональную саркому, фибросаркому в печени, лейомиосаркому, рабдомиосаркому, карциносаркому, тератому, карциноид, сквамозно-клеточную карциному, первичную лимфому]), печеночную пурпуру, эритропеченочную порфирию, печеночную порфирию (острую интермиттирующую порфирию, позднюю кожную порфирию), синдром Цельвегера). В некоторых вариантах реализации изобретения указанное заболевание печени представляет собой гепатит, цирроз, холестаз или печеночную недостаточность.

[0067] В некоторых вариантах реализации изобретения в ходе или после лечения симптом заболевания у субъекта облегчается и/или тяжесть заболевания у субъекта снижается. Неограничивающие примеры симптома включают кожу и глаза, которые выглядят желтоватыми (желтушность), боль в животе и отечность, отечность ног и голеностопа, кожный зуд, темный цвет мочи, светлый цвет кала, или кровянистый кал или кал цвета смолы, хроническое утомление, тошноту или рвоту, потерю аппетита, тенденцию к появлению гематом. Тяжесть заболевания может возрастать (или снижаться) на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100 или число или диапазон между любыми двумя из этих значений, единиц оценки тяжести заболевания (например, модель для конечной стадии заболевания печени (шкала MELD (model for end-stage liver disease))). В некоторых вариантах реализации изобретения в ходе или после лечения улучшается функция печени у субъекта. Например, функция печени у субъекта улучшается на 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80% 90%, 100% или число или диапазон между любыми двумя из этих значений. В некоторых вариантах реализации изобретения в ходе или после лечения нагрузка вируса, вызывающего заболевание, снижается. Например, нагрузка вируса, вызывающего заболевание, может снижаться на, на примерно, на по меньшей мере или на не более 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80% 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 100% или число или диапазон между любыми двумя из этих значений.

[0068] Применительно к лечению заболеваний или расстройств «эффективное количество» определяют, ссылаясь на рекомендованные дозировки СМЭСДЛС. Выбранная дозировка будет изменяться в зависимости от активности выбранного соединения, способа введения, тяжести подлежащего лечению заболевания, и состояния, и предшествующей медицинской истории пациента, подлежащего лечению. Однако в компетентности специалиста в данной области техники начать с доз соединения(й) на уровнях ниже, чем необходимо для достижения требуемого терапевтического эффекта, и постепенно увеличивать дозировку до достижения требуемого эффекта. При необходимости эффективную суточную дозу можно разделить на несколько доз в целях введения, например, от двух до четырех доз в день. Однако понятно, что определенный уровень дозы для любого конкретного пациента будет зависеть от ряда факторов, включая вес тела, общее состояние здоровья, режим питания, время, и способ введения, и сочетание с другими лекарственными средствами, и тяжесть подлежащего лечению заболевания.

[0069] В некоторых вариантах реализации СМЭСДЛС согласно настоящему изобретению вводят, например, в дозировке от примерно 1 мг/кг до примерно 13 мг/кг, например в дозировке от примерно 1 мг/кг до примерно 10 мг/кг. Например, указанное соединение можно вводить указанному субъекту в дозировке, или примерно, по меньшей мере или не более 1 мг/кг, 1,1 мг/кг, 1,2 мг/кг, 1,3 мг/кг, 1,4 мг/кг, 1,5 мг/кг, 1,6 мг/кг, 1,7 мг/кг, 1,8 мг/кг, 1,9 мг/кг, 2 мг/кг, 2,1 мг/кг, 2,2 мг/кг, 2,3 мг/кг, 2,4 мг/кг, 2,5 мг/кг, 2,6 мг/кг, 2,7 мг/кг, 2,8 мг/кг, 2,9 мг/кг, 3 мг/кг, 3,1 мг/кг, 3,2 мг/кг, 3,3 мг/кг, 3,4 мг/кг, 3,5 мг/кг, 3,6 мг/кг, 3,7 мг/кг, 3,8 мг/кг, 3,9 мг/кг, 4 мг/кг, 4,1 мг/кг, 4,2 мг/кг, 4,3 мг/кг, 4,4 мг/кг, 4,5 мг/кг, 4,6 мг/кг, 4,7 мг/кг, 4,8 мг/кг, 4,9 мг/кг, 5 мг/кг, 6 мг/кг, 7 мг/кг, 8 мг/кг, 9 мг/кг, 10 мг/кг, 11 мг/кг, 12 мг/кг, 13 мг/кг или число или диапазон между любыми двумя из этих значений. В качестве альтернативы или дополнительно указанное соединение вводят указанному субъекту в количестве примерно, по меньшей мере или не более 25 мг, 50 мг, 75 мг, 100 мг, 125 мг, 150 мг, 175 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 350 мг, 400 мг, 450 мг, 500 мг, 600 мг, 700 мг, 800 мг, 900 мг, 1000 мг или число или диапазон между любыми двумя из этих значений. СМЭСДЛС согласно настоящему изобретению можно вводить, например, в виде однократной дозы, ежесуточно или еженедельно. В любом из вариантов реализации изобретения, в настоящем изобретении, СМЭСДЛС можно вводить перорально.

[0070] Количество дозировок на курс лечения может различаться. В некоторых вариантах реализации изобретения количество дозировок на курс лечения может составлять, составлять примерно, по меньшей мере или самое большее 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 или число или диапазон между любыми двумя из этих значений. Дозировку можно вводить несколько дней, несколько недель или несколько месяцев после непосредственно предшествующей дозировки, например 1 день, 2 дня, 3 дня, 4 дня, 5 дней, 6 дней, 1 неделю, 2 недели, 3 недели, 4 недели, 1 месяц, 2 месяца, 3 месяца, 4 месяца, 5 месяцев, 6 месяцев, 7 месяцев, 8 месяцев, 9 месяцев, 10 месяцев, 11 месяцев, 12 месяцев, один год, два года, три года, четыре года, пять лет или более, или число или диапазон между любыми двумя из этих значений.

[0071] Количество курсов лечения, получаемых субъектом, может различаться. В некоторых вариантах реализации изобретения количество курсов лечения может составлять, составлять примерно, по меньшей мере или самое большее, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, или число или диапазон между любыми двумя из этих значений. Курс лечения можно проводить несколько дней, несколько недель или несколько месяцев после непосредственно предшествующего курса лечения, например 1 день, 2 дня, 3 дня, 4 дня, 5 дней, 6 дней, 1 неделю, 2 недели, 3 недели, 4 недели, 1 месяц, 2 месяца, 3 месяца, 4 месяца, 5 месяцев, 6 месяцев, 7 месяцев, 8 месяцев, 9 месяцев, 10 месяцев, 11 месяцев, 12 месяцев, или число или диапазон между любыми двумя из этих значений.

[0072] В некоторых вариантах реализации изобретения СМЭСДЛС, описанную в настоящем изобретении, можно вводить, например, в виде однократной дозы, еженедельно, или каждые две недели, или каждые три недели, или ежемесячно. СМЭСДЛС согласно настоящему изобретению можно вводить раз в сутки в течение 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 дней, или более. Например, СМЭСДЛС, содержащую 5 мг CRV431, можно вводить ежесуточно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 10 мг CRV431, можно вводить ежесуточно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 15 мг CRV431, можно вводить ежесуточно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 20 мг CRV431, можно вводить ежесуточно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 25 мг CRV431, можно вводить ежесуточно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 50 мг CRV431, можно вводить ежесуточно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 100 мг CRV431, можно вводить ежесуточно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 150 мг CRV431, можно вводить ежесуточно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 200 мг CRV431, можно вводить ежесуточно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 300 мг CRV431, можно вводить ежесуточно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 350 мг CRV431, можно вводить ежесуточно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 400 мг CRV431, можно вводить ежесуточно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 450 мг CRV431, можно вводить ежесуточно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 500 мг CRV431, можно вводить ежесуточно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 750 мг CRV431, можно вводить ежесуточно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 1000 мг CRV431, можно вводить ежесуточно. СМЭСДЛС согласно настоящему изобретению можно вводить раз в сутки в течение 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 дней или более. СМЭСДЛС согласно настоящему изобретению можно вводить раз в сутки в течение 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 недель, или более. Например, СМЭСДЛС, содержащую 5 мг CRV431, можно вводить еженедельно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 10 мг CRV431, можно вводить еженедельно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 15 мг CRV431, можно вводить еженедельно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 20 мг CRV431, можно вводить еженедельно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 25 мг CRV431, можно вводить еженедельно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 50 мг CRV431, можно вводить еженедельно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 100 мг CRV431, можно вводить еженедельно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 150 мг CRV431, можно вводить еженедельно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 200 мг CRV431, можно вводить еженедельно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 300 мг CRV431, можно вводить еженедельно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 350 мг CRV431, можно вводить еженедельно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 400 мг CRV431, можно вводить еженедельно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 450 мг CRV431, можно вводить еженедельно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 500 мг CRV431, можно вводить еженедельно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 750 мг CRV431, можно вводить еженедельно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 1000 мг CRV431, можно вводить еженедельно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 1250 мг CRV431, можно вводить еженедельно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 1500 мг CRV431, можно вводить еженедельно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 1750 мг CRV431, можно вводить еженедельно. Например, СМЭСДЛС, содержащую 2000 мг CRV431, можно вводить еженедельно.

[0073] В некоторых вариантах реализации изобретения после введения дозировки площадь под кривой (AUC) на графике зависимости концентрации CRV431 в крови субъекта от времени составляет от примерно 5000 нг⋅ч/мл до примерно 150000 нг⋅ч/мл. AUC на графике зависимости концентрации CRV431 в крови субъекта от времени может составлять, составлять примерно, по меньшей мере или самое большее, 5000 нг⋅ч/мл, 10000 нг⋅ч/мл, 11000 нг⋅ч/мл, 12000 нг⋅ч/мл, 13000 нг⋅ч/мл, 14000 нг⋅ч/мл, 15000 нг⋅ч/мл, 16000 нг⋅ч/мл, 17000 нг⋅ч/мл, 18000 нг⋅ч/мл, 19000 нг⋅ч/мл, 20000 нг⋅ч/мл, 30000 нг⋅ч/мл, 40000 нг⋅ч/мл, 50000 нг⋅ч/мл, 60000 нг⋅ч/мл, 70000 нг⋅ч/мл, 80000 нг⋅ч/мл, 90000 нг⋅ч/мл, 100000 нг⋅ч/мл, 110000 нг⋅ч/мл, 120000 нг⋅ч/мл, 130000 нг⋅ч/мл, 140000 нг⋅ч/мл, 150000 нг⋅ч/мл, или число или диапазон между любыми двумя из этих значений.

[0074] В некоторых вариантах реализации изобретения максимальная концентрация (С_макс) CRV431 в крови субъекта после введения однократной дозировки (например, однократной дозировки, описанной в настоящем изобретении, включая однократную дозу CRV431 в количестве 1 мг/кг или 3 мг/кг или число или диапазон между 1 мг/кг или 3 мг/кг) составляет от примерно 1500 нг/мл до примерно 2500 нг/мл. Например, С_макс может составлять, составлять примерно, по меньшей мере или самое большее, 1500 нг/мл, 1550 нг/мл, 1600 нг/мл, 1650 нг/мл, 1700 нг/мл, 1750 нг/мл, 1800 нг/мл, 1850 нг/мл, 1900 нг/мл, 1950 нг/мл, 2000 нг/мл, 2050 нг/мл, 2100 нг/мл, 2150 нг/мл, 2200 нг/мл, 2250 нг/мл, 2300 нг/мл, 2350 нг/мл, 2400 нг/мл, 2450 нг/мл, 2500 нг/мл, или число или диапазон между любыми двумя из этих значений. В некоторых вариантах реализации изобретения С_макс CRV431 в крови субъекта измеряют после многократных дозировок СМЭСДЛС согласно настоящему изобретению. Например, С_макс после многократного дозирования может составлять, составлять примерно, по меньшей мере или самое большее, 1500 нг/мл, 1550 нг/мл, 1600 нг/мл, 1650 нг/мл, 1700 нг/мл, 1750 нг/мл, 1800 нг/мл, 1850 нг/мл, 1900 нг/мл, 1950 нг/мл, 2000 нг/мл, 2050 нг/мл, 2100 нг/мл, 2150 нг/мл, 2200 нг/мл, 2250 нг/мл, 2300 нг/мл, 2350 нг/мл, 2400 нг/мл, 2450 нг/мл, 2500 нг/мл, 3000 нг/мл, 3500 нг/мл, 4000 нг/мл, 4500 нг/мл, 5000 нг/мл, или число или диапазон между любыми двумя из этих значений.

[0075] В некоторых вариантах реализации изобретения время (Т_макс) достижения максимальной концентрации CRV431 после введения дозировки в крови субъекта составляет от примерно 0,5 часа до примерно 8 часов. Т_макс может составлять, составлять примерно, по меньшей мере или самое большее, 0,5 часа, 1 час, 1,5 часа, 2 часа, 2,5 часа, 3 часа, 3,5 часа, 4 часа, 4,5 часа, 5 часов, 5,5 часа, 6 часов, 6,5 часа, 7 часов, 7,5 часа, 8 часов, или число или диапазон между любыми двумя из этих значений.

[0076] В некоторых вариантах реализации изобретения период полувыведения (T_1/2) CRV431 из крови субъекта составляет от примерно 10 часов до примерно 200 часов. T_1/2 может составлять, составлять примерно, по меньшей мере или самое большее, 10 часов, 11 часов, 12 часов, 13 часов, 14 часов, 15 часов, 16 часов, 17 часов, 18 часов, 19 часов, 20 часов, 25 часов, 30 часов, 35 часов, 40 часов, 45 часов, 50 часов, 60 часов, 70 часов, 80 часов, 90 часов, 100 часов, 110 часов, 120 часов, 130 часов, 140 часов, 150 часов, 160 часов, 170 часов, 180 часов, 190 часов, 200 часов, или число или диапазон между любыми двумя из этих значений.

[0077] В некоторых вариантах реализации изобретения концентрация CRV431 в печени субъекта относительно концентрации CRV431 в крови субъекта составляет от примерно 1 до примерно 20.

Примеры

[0078] Изобретение дополнительно проиллюстрировано следующими примерами, которые не следует толковать как ограничивающие объем или сущность настоящего изобретения конкретными процедурами, описанными в настоящем изобретении. Следует понимать, что примеры представлены в целях иллюстрации конкретных вариантов реализации изобретения и не предназначены для ограничения объема изобретения. Кроме того, следует понимать, что можно осуществлять различные другие варианты реализации изобретения, его модификациям и эквивалентам, которые сами собой могут возникнуть у специалистов в данной области техники без отступления от сущности настоящего изобретения и/или объема прилагаемой формулы изобретения.

Пример 1 - Разработка самомикроэмульгирующейся системы доставки лекарственного средства

Лекарственные средства и реактивы

[0079] CRV431 синтезировали до чистоты 97,3% в ходе модификации CsA и хранили при 5°C. CsA получали от IVAX (Опава, Чешская республика). Лаурогликоль™ 90, Лабразол®, Лабрафил® M 2125, Лабрафил® 1944, Пецеол™, Лабрафак™ WL 1349, Каприол™ 90, Майзин® CC и Транскутол® приобретали в Gattefosse (Монреаль, Канада). Пропиленгликоль, фильтрованную воду, ацетонитрил, метанол, сцинтилляционные флаконы и 12x75 мл боросиликатные пробирки приобретали в Fischer Scientific (Питтсбург, США). Безводный этанол приобретали в Commercial Alcohols (Торонто, Канада). Витамин E, Твин® 80, Твин® 40, Твин® 20, касторовое масло, диметилсульфоксид, Кремофор® EL и Кремофор RH 40 приобретали в Sigma-Aldrich (Сент-Луис, США). Спан® 80 приобретали в EMD Millipore Corporation (Берлингтон, США). Полиэтиленгликоль 400 (ПЭГ 400) приобретали в BDH Incorporated (Миссиссога, Канада).

Физико-химические свойства

[0080] Чтобы определить растворимость в воде CRV431 и CsA, 20 мМ исходные растворы лекарственных средств в диметилсульфоксиде (ДМСО) разбавляли в 30 раз для достижения конечной концентрации 666 мкМ в фосфатно-солевом буферном растворе (ФСБР, pH 7,4), помещали в аппарат для встряхивания на всю ночь и центрифугировали при 3300 об/мин в течение 5 минут, получая осадок нерастворимого лекарственного средства. Собирали надосадочную жидкость, разбавляли 1:1 метанолом, и концентрации лекарственных средств измеряли с помощью ВЭЖХ (высокоэффективная жидкостная хроматография) (серия Agilent 1100, УФ-детектирование) по градуировочным кривым. Площадь полярной поверхности и log P вычисляли, используя Molinspiration Cheminformatics (V2018.10, США). Связывание с белками плазмы определяли в ходе анализов равновесного диализа. Готовили образцы лекарственных средств в плазме для достижения конечной концентрации 5 мкМ в плазме крови человека, в 500 раз разбавляя 2,5 мМ исходные растворы лекарственных средств в ДМСО. Добавляли растворы плазмы (300 мкл) и ФСБР, pH 7,4 (500 мкл), в смежные камеры устройств для быстрого равновесного диализа (Thermo Scientific; 8K НОММ (номинальное отсечение по молекулярной массе)). Планшеты закрывали полимерной пленкой и взбалтывали на орбитальном шейкере при 225 об/мин при 37°C в течение 4,5 часа. Собирали образцы плазмы и ФСБР, и лекарственные средства экстрагировали методом осаждения с помощью сульфата цинка/метанола. После центрифугирования при 3300 об/мин в течение 10 минут растворимые лекарственные средства в метанольных надосадочных жидкостях анализировали с помощью жидкостной хроматографии (ЖХ) и масс-спектрометрии с ионизацией электрораспылением (ИЭР) (ЖХ-ИЭР-МС) (серия Agilent 1100, Санта-Клара, США) и определяли количество по градуировочным кривым.

Растворимость во вспомогательных веществах

[0081] Растворимость CRV431 измеряли в группах поверхностно-активных веществ, масел и сорастворителей для получения составов СМЭСДЛС, подходящих для применения в водных дисперсиях и мягких гелевых капсулах. CRV431 (50 мг) добавляли на дно 75x125 мм стеклянной пробирки и доводили до отметки в 1 мл вспомогательное вещество. Образец помещали на качающее устройство и визуально оценивали растворимость после смешивания в течение ночи. Если растворимости не достигали, добавляли вспомогательное вещество с шагом в 0,5 мл, с последующим смешиванием в течение ночи до достижения прозрачного раствора. Визуальную оценку проводили для дифференцирования растворимости между вспомогательными веществами и относительно CsA.

Построение псевдотройных фазовых диаграмм

[0082] Для построения псевдотройной фазовой диаграммы смеси, содержащие разные композиции Кремофора® RH40 (поверхностно-активное вещество), Майзина® CC (масло) и сорастворителей (витамин E, пропиленгликоль, Транскутол® и этанол), оценивали с целью определения границы раздела фаз между образованием микроэмульсии (прозрачной для глаз) и образованиями, отличными от микроэмульсии, (мутные для глаз) для различных соотношений вспомогательных веществ.

Разработка СМЭСДЛС CRV431

[0083] Добавляли CRV431 (50-100 мг) на дно 75×125 мм стеклянной пробирки. Отдельно объединяли вспомогательные вещества (например, витамин E, Майзин® CC, пропиленгликоль, Транскутол®, этанол и Кремофор® RH40) и тщательно перемешивали перед добавлением к CRV431, и доводили до отметки в 1 мл. Готовили несколько серий составов СМЭСДЛС и определяли растворимость лекарственного средства, стабильность (с помощью ЖХ-ИЭР-МС), и образование и стабильность (визуальный осмотр) микроэмульсии в водной среде.

Количественное определение с помощью ЖХ-ИЭР-МС CRV431 в составах СМЭСДЛС

[0084] Для всех анализов составов СМЭСДЛС отбирали по 10 мкл и добавляли к 10 мл метанола в сцинтилляционном флаконе. Встряхивали образец в течение 10 секунд для перемешивания и добавляли 1 мл этого раствора к 9 мл метанола в другом сцинтилляционном флаконе (общее разбавление в 10000 раз). Также готовили 5 мкг/мл стандарт CRV431 в метаноле. Переносили образцы (1 мл) в инъекционные флаконы и анализировали с помощью жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии с ионизацией электрораспылением (ЖХ-ИЭР-МС) на Agilent HP 1100 LC-MS. Помещали образцы в автосемплер, выдерживаемый при 5°C. Впрыскивали образцы и стандарт CRV431 (1 мкл) в колонку Zorbax SB-C18 для обращенно-фазовой ВЭЖХ (1,8 мкм картридж типа НТ для быстрого разделения, 4,6×30 мм), выдерживаемую при 75°C, используя градиентную систему ацетонитрил-вода, содержащую 0,02 % ледяной уксусной кислоты и 20 мкМ ацетат натрия (таблица 1).

Таблица 1. Условия градиентного элюирования CRV431

Время (мин) dH₂O* (%) Ацетонитрил (ACN)* Скорость потока (мл/мин) 0,0 55 45 1,0 6,0 25 75 1,0 8,1 0 100 1,0 10,0 0 100 1,0 10,1 55 45 1,0 *также содержит 0,02 % ледяной уксусной кислоты + 20 мкМ ацетат натрия

[0085] Натриевый аддукт CRV431 (1326 масса/заряд) анализировали с помощью масс-спектрометрии (МС), используя ионизацию электрораспылением (ИЭР) в режиме определения положительных ионов. ИЭР-МС выполняли при заданной температуре газа N₂ 350°C и сушильном газе 12 л/мин. Устанавливали напряжения фрагментора и капилляра 260 и 4000 вольт, соответственно. Устанавливали давление в распылителе 40 psi (275790 Па). Элюирование CRV431 обычно наблюдали через 6,0 минут. Концентрацию составов вычисляли, сравнивая площадь пика с одноточечным стандартом (5 мкг/мл).

Исследование дисперсии

[0086] Примерно 5 мл выбранной среды (вода, 0,1 н HCl или фосфатный буфер (pH 6,8)) помещали во флакон и добавляли четыре (4) капли (около 40 мг) СМЭСДЛС 1/1/5/5/2,4/4 (витамин E/Майзин® CC/пропиленгликоль/Транскутол®/этанол/Кремофор® RH40 (масс./масс./масс./масс./масс./масс.)). Сначала за смесью наблюдали после переворачивания и после одного часа добавления СМЭСДЛС 1/1/5/5/2,4/4 (витамин E/Майзин® CC/пропиленгликоль/Транскутол®/этанол/Кремофор® RH40 (масс./масс./масс./масс./масс./масс.)). Также эту же самую процедуру проводили с СМЭСДЛС 1/1,5/2,5/5/2,4/5.

Размер частиц

[0087] Средний диаметр частиц как СМЭСДЛС 1/1/5/5/2,4/4, так и СМЭСДЛС 1/1,5/2,5/5/2,4/5 (витамин E/Майзин® CC/пропиленгликоль/Транскутол®/этанол/Кремофор® RH40 масс./масс./масс./масс./масс./масс.)) измеряли при 25°C с помощью динамического рассеяния света (Zetasizer Nano, Malvern Instruments, Малверн, Великобритания) под углом 173°. Каждый образец измеряли в трех анализах. Значения выражали как среднее ± стандартное отклонение. Среднее значение составляло примерно 25 нм.

Фармакокинетика СМЭСДЛС CRV431 1/1,5/2,5/5/2,4/5 (витамин E/Майзин® CC/пропиленгликоль/Транскутол®/этанол/Кремофор® RH40 (масс./масс./масс./масс./масс./масс.)) у людей

[0088] СМЭСДЛС CRV431 давали перорально 6 здоровым добровольцам натощак в виде однократной дозы либо 1, либо 3 мг/кг (75 мг или 225 мг). Исследование проводили в центре клинических исследований экспериментальных лекарств (Celerion, Аризона, США) как часть клинического исследования однократных нарастающих доз (SAD (single-ascending-dose)) фазы 1 и следовали всем этическим руководствам Управления по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA (Food and Drug Administration)). Пациентов отбирали в соответствии со стандартизированными критериями включения/исключения для исследования SAD фазы 1. В исследование включали здоровых добровольцев в возрасте 18-55 лет без признаков продолжающегося заболевания (как определено исследователем), или любого употребления никотина (за 30 дней до скрининга), или веществ, вызывающих привыкание, (в пределах 2 предшествующих лет), или применения рецептурного лекарственного препарата для лечения хронического заболевания (в пределах 30 дней), или применения рецептурного лекарственного препарата для лечения острого заболевания (в пределах 14 дней), или системных безрецептурных лекарственных препаратов, включая витамины и растительные/природные добавки, (в пределах 7 дней до введения исследуемой дозы). СМЭСДЛС распределяли (примерно 3 мл) в 100 мл прозрачном сосуде Gibco и добавляли 15-кратный избыток фильтрованной воды (степень чистоты для ВЭЖХ). Смесь осторожно перемешивали путем вращения сосуда в течение 1-2 минут до полного диспергирования. Дозу СМЭСДЛС в воде помещали в холодильник и вводили перорально в пределах 2 часов. Отбирали образцы цельной крови (0,5 мл) венепункцией в пробирки для сбора крови с K2-ЭДТА (этилендиаминтетрауксусной кислотой) через 0,5, 1, 2, 4, 6, 8, 12, 24, 48 и 72 часа. Образцы сразу же замораживали и анализировали с помощью ЖХ-ИЭР-МС в пределах 5 дней. Кратко, образцы цельной крови размораживали и экстрагировали методом осаждения с помощью сульфата цинка/метанола. Количественный анализ осуществляли утвержденным методом ЖХ-ИЭР-МС по градуировочной кривой с 7 точками для цельной крови. Некомпартментный анализ осуществляли, чтобы вычислить фармакокинетические параметры (С_макс, AUC, t_1/2 и Т_макс), используя коммерческое программное обеспечение (WinNonlin Professional Edition, версия 7,0, программное обеспечение Pharsight).

Фармакокинетика СМЭСДЛС CRV431 на крысах

[0089] Вводили СМЭСДЛС CRV431 1/3/3/2/9 (витамин E/Майзин® CC/пропиленгликоль/этанол/Кремофор® RH40 (масс./масс./масс./масс./масс.)) серии 1 (50 мг/мл) крысам Спрег-Доули (n = 6) через желудочный зонд в расчете 30 мг/кг/день в течение 7 дней. На 7 день через 12 часов после дозы животных умерщвляли, извлекали и замораживали цельную кровь и печень. Определяли количество CRV431 в цельной крови, используя ЖХ-ИЭР-МС (как и в случае фармакокинетических исследованиях у людей). Для определения количества CRV431 в печени один грамм образцов ткани печени добавляли к 9 мл однородного раствора (1% муравьиная кислота в воде) и гомогенизировали, используя TissueLyser (Qiagen) при 30 Гц в течение 10 минут. Отбирали аликвоты и анализировали с помощью ЖХ-ИЭР-МС, как описано выше.

Физико-химические свойства CRV431

[0090] Физико-химические свойства CRV431 и CsA, проиллюстрированные в таблице 2, указывают на то, что CRV431 обладает более высокой растворимостью в воде по сравнению в CsA, что отражается в большей свободной фракции в плазме и большей площади полярной поверхности (PSA (polar surface area)). Значения log P у обоих лекарственных средств высоки. Не желая быть связанными теорией, отметим, что ни CsA, ни CRV431 не подходят для разработки для перорального введения в виде сухой таблетки.

Таблица 2. Физико-химические свойства CRV431 и CsA

Соединение Растворимость в ФСБР MolIns Log P MolIns PSA Свободная фракция в плазме CRV431 115,0 мкМ 3,98 308 7,6 % CsA 31,9 мкМ 3,61 278 0,14 %

Растворимость во вспомогательных веществах

[0091] Растворимость CRV431 измеряли в группах поверхностно-активных веществ, масел и сорастворителей, используемых для коммерческого получения составов СМЭСДЛС, подходящих для применения в водных дисперсиях и мягких гелевых капсулах для пероральных лекарственных форм.

Выбор вспомогательных веществ для разработки СМЭСДЛС

[0092] Исходя из растворимости CRV431 в Кремофоре® RH40, Кремофор® RH40 выбрали в качестве поверхностно-активного вещества. Для масляной фазы нашли, что CRV431 имеет наибольшую растворимость в витамине E, затем в Майзине® CC. При этом для сорастворителей растворимость CRV431 была наивысшей в этаноле, затем в Транскутоле® и пропиленгликоле. Таким образом, все из вышеперечисленных вспомогательных веществ выбрали для предварительной разработки прототипа состава.

Таблица 3. Растворимость CRV431 и CsA во вспомогательных веществах при 21°C

Категория Вспомогательное вещество Растворимость CRV431 (мг/мл) Растворимость циклоспорина A (мг/мл) Поверхностно-активное вещество Твин® 80 < 10 > 100 Поверхностно-активное вещество Твин® 40 < 10 > 100 Поверхностно-активное вещество Твин® 20 < 10 > 100 Поверхностно-активное вещество Лаурогликоль™90 30 не определена Поверхностно-активное вещество Лабразол® < 10 не определена Поверхностно-активное вещество Кремофор® RH40 30 > 50 Поверхностно-активное вещество Кремофор® EL < 10 не определена Поверхностно-активное вещество Лабрафил® M2125 < 10 > 100 Поверхностно-активное вещество Лабрафил® 1944 < 10 не определена Поверхностно-активное вещество Спан® 80 < 10 не определена Поверхностно-активное вещество Каприол™ 25 не определена Масло Пецеол™ < 10 не определена Масло Миглиол 812 < 10 > 100 Масло Майзин® CC < 20 100 Масло Витамин E 25 не определена Масло Касторовое масло < 10 > 100 Масло Лабрафак™ WL 1349 < 10 > 100

Сорастворитель Пропиленгликоль 30 > 100 Сорастворитель Транскутол® 40 не определена Сорастворитель ПЭГ 400 < 10 > 100 Сорастворитель Этанол > 200 > 200 Сорастворитель Диметилсульфоксид < 50 > 100

[0093] Растворимость CRV431 в исследованных поверхностно-активных веществах (как показано в таблице 3) варьировалась в пределах 10-30 мг/мл в отличие от CsA, чья растворимость составляла по меньшей мере 50 мг/мл, и в большинстве случаев > 100 мг/мл. Учитывая высокую липофильность CRV431, относительно низкая растворимость была неожиданным открытием. Растворимость CRV431 была наивысшей в Кремофоре® RH40, Лаурогликоле™ 90 и Каприоле™ 90. Растворимость CRV431 в исследованных маслах была меньше (главным образом 10 мг/мл), чем CsA (> 100 мг/мл), за исключением витамина E (25 мг/мл). Обнаружили, что растворимость CRV431 в различных сорастворителях была выше (10-50 мг/мл), чем в исследованных поверхностно-активных веществах и маслах, хотя растворимость CsA также главным образом была больше.

Разработка СМЭСДЛС CRV431

[0094] Предварительные исследования составов включали оценку влияния различных соотношений вспомогательных веществ на способность к смешиванию СМЭСДЛС и образование микроэмульсии в отсутствие лекарственного средства. Результаты исследований (таблица 4) указывают на то, что при соотношениях сочетаний Кремофора® RH40/Майзина менее 3 не образуются микроэмульсии при диспергировании в воде. Образование микроэмульсии оценивали при визуальном осмотре, и она должна быть прозрачной для глаз, чтобы рассмотреть дальнейшую разработку. Все водные дисперсии с соотношениями Кремофора® RH40/Майзина менее 3 были мутными. Данные представлены графически на псевдотройной фазовой диаграмме (фиг. 2), на которой отчетливо обозначена граница раздела фаз для образования микроэмульсии.

Таблица 4. Предварительные исследования СМЭСДЛС: совместимость вспомогательных веществ и образование микроэмульсии в зависимости от соотношений вспомогательных веществ

Кремофор® RH40 Майзин® CC Витамин E Пропиленгликоль Транскутол® Этанол СМЭСДЛС (вид) Образование микроэмульсии 3 3 0 10 0 2 Двухфазная Нет 3 5 0 8 0 2 Двухфазная Нет 3 9 0 4 0 2 Смешивающаяся Нет 6,2 5 3 1,2 0 2 Смешивающаяся Нет 6,4 7,8 0 1,6 0 1,6 Смешивающаяся Нет

7,2 6 1 1,2 0 2 Смешивающаяся Нет 7 3 0 6 0 2 Смешивающаяся Нет 7 4,5 0 4,5 0 2 Смешивающаяся Нет 7 1 0 8 0 2 Смешивающаяся Есть 9 3 1 3 0 2 Смешивающаяся Есть 10 4,2 0 1,5 0 2 Смешивающаяся Нет 11 4 0,5 0 0 2 Смешивающаяся Есть 13 1 0 2 0 2 Смешивающаяся Есть

Разработка и стабильность составов СМЭСДЛС CRV431: серии 1 и 2

[0095] Серия 1

[0096] Исходя из предварительных исследований микроэмульсий СМЭСДЛС, готовили состав прототипа СМЭСДЛС (таблица 5: состав №1) и оценивали его на растворимость CRV431 и стабильность. Целью было получить смешивающийся и стабильный состав СМЭСДЛС, который солюбилизировал CRV431 до по меньшей мере 50 мг/мл, и образовывал прозрачную микроэмульсию в водной среде. При этом состав №1 изначально солюбилизировал CRV431 до 50 мг/мл и давал прозрачную микроэмульсию, при последующем хранении наблюдали в пределах нескольких дней образование кристаллов CRV431, налипающих на стекленную емкость, что совпадало с потерей CRV431, количество которой определяли с помощью ЖХ-МС (фиг. 3). Состав №1 находится в верхнем левом кругу фазовой диаграммы на фиг. 2.

Таблица 5. Вспомогательные вещества и соотношения в серии 1

Состав № Витамин E Майзин® CC Пропиленгликоль Транскутол® Этанол Кремофор® RH40 Соотношение вспомогательных веществ по массе 1 1 3 3 0 2 9 2 1 3 2 1 2 9 3 0,5 3 2 1,5 2 9 4 0,5 3 1,5 2 2 9 5 0,5 2 1,5 3 2 9 6 1 2 2 2 2 9 7 0,5 2 0,5 4 2 9 8 1 2 2,5 2,5 2 8

[0097] Разрабатывали дополнительные СМЭСДЛС (серия 1, таблица 5), где долю сорастворителя Транскутола® увеличивали в попытке способствовать дополнительной растворимости и уменьшению образования кристаллов. Все составы серии 1 могли образовывать микроэмульсии при диспергировании в воде (показано в среднем круге фазовой диаграммы на фиг. 2). Однако результаты исследования стабильности (фиг. 3) указывают на то, что все СМЭСДЛС серии 1 нестабильны, и что образуются значительные кристаллы CRV431 при хранении при комнатной температуре.

[0098] СМЭСДЛС серии 2

[0099] Все СМЭСДЛС серии 2 образовывали прозрачные растворы СМЭСДЛС (таблица 6). Показано, что эти составы находятся в фазе микроэмульсии псевдотройной фазовой диаграммы (нижний правый круг на фиг. 2).

Таблица 6. СМЭСДЛС серии 2

Состав № Витамин E Майзин® CC Пропиленгликоль Транскутол® Этанол Кремофор® RH40 1 1,5 2 2,25 2 2,25 8 2 1,5 2 2 2,25 2,25 8 3 1,5 2 2,75 2,5 2,25 7 4 1,5 2 2,5 2,75 2,25 7 5 1 2 3,5 3,5 2 6 6 1 1 5 5 2 4 6 (75 мг/мл) 1 1 5 5 2 4 7 (70 мг/мл) 1 1,5 2,5 5 2,4 5

СМЭСДЛС CRV431

[00100] Чтобы дополнительно повысить растворимость CRV431, увеличивали содержание этанола. В таблицах 7 и 8 показано, что при увеличении массового отношения этанола до 2,4 лекарственную нагрузку CRV431 можно увеличить до по меньшей мере 90 мг/мл, и она считается стабильной. Готовили образец 100 мг/мл, но он не полностью солюбилизировал CRV431, и поэтому его исключили из дополнительного испытания. Все препараты образцов были стабильными при измерении после 54 дней хранения при комнатной температуре. Таким образом, составы СМЭСДЛС CRV431, содержащие витамин E/Майзин® CC/пропиленгликоль/Транскутол®/этанол/Кремофор® RH40 в массовых соотношениях 1/1/5/5/2,4/4 и 1/1,5/2,5/5/2,4/5, считаются СМЭСДЛС CRV431 с высокими растворимостью и стабильностью.

Таблица 7. Растворимость и стабильность CRV431 в СМЭСДЛС 1/1/5/5/2,4/4 (витамин E/Майзин® CC/пропиленгликоль/Транскутол®/этанол/ Кремофор® RH40 (масс./масс./масс./масс./масс./масс.))

Состав СМЭСДЛС: 1/1/5/5/2,4/4 (витамин E/Майзин® CC/пропиленгликоль/Транскутол®/этанол/Кремофор® RH40 (масс./масс./масс./масс./масс./масс.)) Приготовленная концентрация CRV431 (мг/мл) Измеренная концентрация CRV431 на 54 день (мг/мл) 75 75,2 80 78,6 90 90,0

Таблица 8. Стабильность CRV431 (70 мг/мл) в СМЭСДЛС 1/1,5/2,5/5/2,4/5 (витамин E/Майзин® CC/пропиленгликоль/Транскутол®/этанол/Кремофор® RH40 (масс./масс./масс./масс./масс./масс.))

Описание испытания Спецификации Результаты (через 3,5 месяца хранения при комнатной температуре) Анализ (мг/г) Отчет о результатах 70,135 мг/г Анализ в % Отчет о результатах 100,2 %

[00101] Как показано на фиг. 2, СМЭСДЛС в верхней левой отмеченной кругом области представляют собой составы прототипа с высоким содержанием поверхностно-активного вещества. СМЭСДЛС в средней отмеченной кругом области представляют собой составы серии 1, содержащие большие количества сорастворителей. СМЭСДЛС в нижней правой области представляют собой составы серии 2 с низкими количествами поверхностно-активного вещества и большими количествами сорастворителей. Как показано в таблице 6, все составы содержали CRV431 в количестве 50 мг/мл за исключением случаев, когда указано иное. Аликвоты составов СМЭСДЛС отбирали в указанное время и анализировали с помощью ЖХ-МС. Показано, что все СМЭСДЛС из серии 2 обладали увеличенной стабильностью (фиг. 4) относительно исходного прототипа СМЭСДЛС серии 1 (1/3/3/9/2). У СМЭСДЛС серии 2 нет заметной потери лекарственного средства после 77 дней хранения при комнатной температуре.

Характеристика составов СМЭСДЛС CRV431 (1/1/5/5/2,4/4 и 1/1,5/2,5/5/2,4/5 (витамин E/Майзин® CC/пропиленгликоль/Транскутол®/этанол/Кремофор® RH40 (масс./масс./масс./масс./масс./масс.)))

Образование микроэмульсии и стабильность СМЭСДЛС CRV431

[00102] При диспергировании СМЭСДЛС CRV431 (1/1/5/5/2,4/4 и 1/1,5/2,5/5/2,4/5 (витамин E/Майзин® CC/пропиленгликоль/Транскутол®/этанол/Кремофор® RH40 (масс./масс./масс./масс./масс./масс.))) в водной среде образовывался визуально прозрачный раствор менее чем за одну минуту осторожного перемешивания путем вращения и/или переворачивания. Растворы микроэмульсии в воде, 0,1 н HCl и фосфатном буфере оставались прозрачными до 1 часа при 37°C (таблица 9).

Таблица 9. Стабильность микроэмульсии в водной среде при 37°C для СМЭСДЛС CRV431 1/1,5/2,5/5/2,2/5 и 1/1/5/5/2,4/4

Момент времени Наблюдения (визуальные) Вода 0,1 н HCl Фосфатный буфер (pH = 6,8) Начальный Диспергированные повсюду крошечные капли Диспергированные повсюду крошечные капли Диспергированные повсюду крошечные капли

После перемешивания путем вращения и переворачивания Явно прозрачный раствор Явно прозрачный раствор Явно прозрачный раствор Через 1 час Явно прозрачный раствор Явно прозрачный раствор Явно прозрачный раствор

Размер частиц

[00103] Измерили, что средний диаметр частиц состава СМЭСДЛС CRV431 1/1,5/2,5/5/2,4/5 при диспергировании в воде составил 24,6±5,7 нм (среднее значение ± стандартное отклонение) (фиг. 5). Этот размер согласуется с заявленным размером частиц водных дисперсий Неорал®. Кроме того, состав СМЭСДЛС 1/1/5/5/2,4/4 имеет примерно такой же размер частиц (фиг. 6).

Фармакокинетика СМЭСДЛС CRV431

[00104] Фармакокинетика СМЭСДЛС CRV431 1/1,5/2,5/5/2,4/5 у людей показала превосходную экспозицию и приблизительную пропорциональность дозе (фиг. 7A-7C и таблица 10). Пациентам (n = 6) давали однократную дозу CRV431 и аликвоты цельной крови анализировали с помощью ЖХ-ИЭР-МС в указанные моменты времени. Планки погрешностей представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение. (Фиг. 7A: линейная шкала. Фиг. 7B: логарифмическая шкала для дозы 75 мг. Фиг. 7C: логарифмическая шкала для дозы 225 мг). Относительно заявленных экспозиций циклоспорина A (2,5 мг/кг) у здоровых людей (23) С_макс CRV431 была незначительно больше, чем Неорала^®, и общая экспозиция (AUC) была примерно в 14 раз больше, чем Неорала^®.

Таблица 10. Фармакокинетика однократной дозы CRV431 у 6 здоровых добровольцев относительно циклоспорина A. Значения представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение

Группа дозирования Доза (мг/кг) AUC _0-∞ (нг·ч/мл) С_макс
(нг/мл) Т_макс
(часы) t_1/2
(часы) CRV431 1 20,916±3,780 334±106 4±3,09 73,6±15,2 CRV431 3 84,421±32,373 1,368±221 1,33±0,52 97,4±18,4 Циклоспорин A 2,5 4,981±1,584 944±244 1,67±0,48 6,3±20,4

[00105] В отдельном исследовании на крысах измеряли уровень CRV431, распределенного в печени, по сравнению с кровью (смотрите фиг. 8). В этом исследовании крысам Спрег-Доули (n = 6) вводили (30 мг/кг) СМЭСДЛС CRV431 1/3/3/2/9 (витамин E/Майзин® CC/пропиленгликоль/этанол/Кремофор® RH40 (масс./масс./масс./масс./масс.)) (50 мг/мл) через желудочный зонд в течение 7 дней, и аликвоты цельной крови и гомогенаты печени анализировали с помощью ЖХ-ИЭР-МС через 12 часов после последней дозы. Обнаружили, что уровень CRV431, распределенного в печени, (10 мкг/г ткани) был в 6,5 раз больше, чем во фракции цельной крови. Планки погрешностей представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение.

Группа изобретений относится к области фармацевтики и раскрывает самомикроэмульгирующуюся систему доставки лекарственного средства (СМЭСДЛС) для лечения или предотвращения заболевания печени у субъекта, содержащую CRV431 или его фармацевтически приемлемую соль, где СМЭСДЛС также содержит витамин E, Майзин® CC, пропиленгликоль, Транскутол^®, этанол и Кремофор^® RH40 в массовом отношении 1/1,5/2,5/5/2,4/5 соответственно. Также раскрыты способ лечения или предотвращения заболевания печени у нуждающегося в этом субъекта и применение терапевтически эффективного количества самомикроэмульгирующейся системы доставки лекарственного средства (СМЭСДЛС). Техническим результатом группы изобретений является обеспечение хорошей растворимости производного циклоспорина A (например, CRV431) и значительной экспозиции в крови у людей после однократной пероральной дозы у здоровых субъектов. 3 н. и 41 з.п. ф-лы, 10 табл., 8 ил., 1 пр.

(CRV431)

1. Самомикроэмульгирующаяся система доставки лекарственного средства (СМЭСДЛС) для лечения или предотвращения заболевания печени у субъекта, содержащая CRV431

(CRV431)

или его фармацевтически приемлемую соль, где СМЭСДЛС также содержит витамин E, Майзин® CC, пропиленгликоль, Транскутол®, этанол и Кремофор® RH40 в массовом отношении 1/1,5/2,5/5/2,4/5 соответственно.

2. Самомикроэмульгирующаяся система доставки лекарственного средства по п. 1, отличающаяся тем, что указанная система содержит CRV431 в концентрации от 10 мг/мл до 90 мг/мл.

3. Самомикроэмульгирующаяся система доставки лекарственного средства по любому из пп. 1 или 2, отличающаяся тем, что указанная система содержит CRV431 в концентрации 90 мг/мл.

4. Способ лечения или предотвращения заболевания печени у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества самомикроэмульгирующейся системы доставки лекарственного средства (СМЭСДЛС) по любому из пп. 1-3.

5. Применение терапевтически эффективного количества самомикроэмульгирующейся системы доставки лекарственного средства (СМЭСДЛС) по любому из пп. 1-3 для получения лекарственного средства для лечения или предотвращения заболевания печени у субъекта.

6. Способ по п. 4, отличающийся тем, что указанное заболевание представляет собой тяжелое заболевание печени.

7. Способ по п. 4, отличающийся тем, что указанное заболевание представляет собой гепатит B (ВГВ), фиброз печени или гепатоцеллюлярную карциному.

8. Способ по п. 4, отличающийся тем, что указанное заболевание представляет собой гепатит B (ВГВ).

9. Способ по п. 4, отличающийся тем, что указанное заболевание представляет собой фиброз печени.

10. Способ по п. 4, отличающийся тем, что указанное заболевание представляет собой гепатоцеллюлярную карциному.

11. Способ по любому из пп. 4 или 6-10, отличающийся тем, что площадь под кривой (AUC) на графике зависимости концентрации CRV431 в крови субъекта от времени составляет от 5000 нг⋅ч/мл до 150000 нг⋅ч/мл.

12. Способ по любому из пп. 4 или 6-11, отличающийся тем, что максимальная концентрация (C_макс) CRV431 в крови субъекта составляет от 1500 нг/мл до 2500 нг/мл.

13. Способ по любому из пп. 4 или 6-12, отличающийся тем, что время (T_макс) достижения максимальной концентрации CRV431 в крови субъекта составляет от 0,5 часа до 8 часов.

14. Способ по любому из пп. 4 или 6-13, отличающийся тем, что период полувыведения (T_1/2) CRV431 из крови субъекта составляет от 10 часов до 200 часов.

15. Способ по любому из пп. 4 или 6-14, отличающийся тем, что концентрация CRV431 в печени субъекта относительно концентрации CRV431 в крови субъекта составляет от 1 до 19.

16. Способ по любому из пп. 4 или 6-15, отличающийся тем, что терапевтически эффективное количество СМЭСДЛС составляет от 0,5 мг/кг до 5 мг/кг.

17. Способ по любому из пп. 4 или 6-16, благодаря которому у субъекта облегчается симптом заболевания и/или снижается тяжесть заболевания.

18. Способ по любому из пп. 4 или 6-17, благодаря которому у субъекта улучшается функция печени.

19. Способ по любому из пп. 4 или 6-18, благодаря которому уменьшается нагрузка вируса, вызывающего заболевание.

20. Способ по любому из пп. 4 или 6-19, отличающийся тем, что указанная СМЭСДЛС стабильна при комнатной температуре.

21. Способ по любому из пп. 4 или 6-20, отличающийся тем, что указанная СМЭСДЛС стабильна в течение от по меньшей мере 25 дней до по меньшей мере 200 дней.

22. Способ по любому из пп. 4 или 6-21, отличающийся тем, что диаметр частиц, образованных СМЭСДЛС, диспергированной в водном растворе, составляет от 15 нм до 40 нм.

23. СМЭСДЛС по любому из пп. 1-3, отличающаяся тем, что указанное заболевание представляет собой тяжелое заболевание печени.

24. СМЭСДЛС по любому из пп. 1-3, отличающаяся тем, что указанное заболевание представляет собой гепатит B (ВГВ), фиброз печени или гепатоцеллюлярную карциному.

25. СМЭСДЛС по любому из пп. 1-3, отличающаяся тем, что указанное заболевание представляет собой гепатит B (ВГВ).

26. СМЭСДЛС по любому из пп. 1-3, отличающаяся тем, что указанное заболевание представляет собой фиброз печени.

27. СМЭСДЛС по любому из пп. 1-3, отличающаяся тем, что указанное заболевание представляет собой гепатоцеллюлярную карциному.

28. Применение по п. 5, отличающееся тем, что указанное заболевание представляет собой тяжелое заболевание печени.

29. Применение по п. 5, отличающееся тем, что указанное заболевание представляет собой гепатит B (ВГВ), фиброз печени или гепатоцеллюлярную карциному.

30. Применение по п. 5, отличающееся тем, что указанное заболевание представляет собой гепатит B (ВГВ).

31. Применение по п. 5, отличающееся тем, что указанное заболевание представляет собой фиброз печени.

32. Применение по п. 5, отличающееся тем, что указанное заболевание представляет собой гепатоцеллюлярную карциному.

33. Применение по любому из пп. 5 или 28-32, отличающееся тем, что площадь под кривой (AUC) на графике зависимости концентрации CRV431 в крови субъекта от времени составляет от 5000 нг⋅ч/мл до 150000 нг⋅ч/мл.

34. Применение по любому из пп. 5 или 28-32, отличающееся тем, что максимальная концентрация (C_макс) CRV431 в крови субъекта составляет от 1500 нг/мл до 2500 нг/мл.

35. Применение по любому из пп. 5 или 28-34, отличающееся тем, что время (T_макс) достижения максимальной концентрации CRV431 в крови субъекта составляет от 0,5 часа до 8 часов.

36. Применение по любому из пп. 5 или 28-35, отличающееся тем, что период полувыведения (T_1/2) CRV431 из крови субъекта составляет от 10 часов до 200 часов.

37. Применение по любому из пп. 5 или 28-36, отличающееся тем, что концентрация CRV431 в печени субъекта относительно концентрации CRV431 в крови субъекта составляет от 1 до 20.

38. Применение по любому из пп. 5 или 28-37, отличающееся тем, что терапевтически эффективное количество СМЭСДЛС составляет от 0,5 мг/кг до 5 мг/кг.

39. Применение по любому из пп. 5 или 28-38, благодаря которому у субъекта облегчается симптом заболевания и/или снижается тяжесть заболевания.

40. Применение по любому из пп. 5 или 28-39, благодаря которому у субъекта улучшается функция печени.

41. Применение по любому из пп. 5 или 28-40, благодаря которому уменьшается нагрузка вируса, вызывающего заболевание.

42. Применение по любому из пп. 5 или 28-41, отличающееся тем, что указанная СМЭСДЛС стабильна при комнатной температуре.

43. Применение по любому из пп. 5 или 28-42, отличающееся тем, что указанная СМЭСДЛС стабильна в течение от по меньшей мере 25 дней до по меньшей мере 200 дней.

44. Применение по любому из пп. 5 или 28-43, отличающееся тем, что диаметр частиц, образованных СМЭСДЛС, диспергированной в водном растворе, составляет от 15 нм до 40 нм.