СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КОМПЛЕКСНОГО ПРЕПАРАТА ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ НАРУШЕНИЙ ОБМЕНА ВЕЩЕСТВ, МИКРОЭЛЕМЕНТОЗОВ, ПОВЫШЕНИЯ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ОРГАНИЗМА ЖИВОТНЫХ Российский патент 2009 года по МПК A61K31/194 A61K31/295 A61K33/24 A61K31/26 A61K31/30 A61K31/34 A61K35/12 A61P3/02 

Изобретение относится к ветеринарии и, в частности к способам получения препаратов, предназначенных для профилактики и лечения микроэлементозов, нарушений обмена веществ, повышения резистентности организма.

Известен способ получения комплексного металлоглобулинового препарата (Кленина Н.В., Михайлова С.А., Антонов B.C.). Способ получения комплексного препарата иммуноглобулинов с металлами (А.С. SU 1352696 А61К 39/39 СССР от 26.06.1985). Соединение иммуноглобулинов с металлами обеспечивает их хорошую биодоступность при парентеральном методе введения, в связи с чем данный препарат обладает выраженным стимулирующим действием на иммунорезистентность организма. Однако использование при изготовлении препарата иммуноглобулинов предъявляет повышенные требования к здоровью животных, используемых в качестве доноров при сборе сыворотки крови. Кроме того, для обеспечения стерильности препарата исключается использование более надежного и простого метода стерилизации автоклавированием.

Известен противоанемический и ростстимулирующий препарат для животных «Гемовит-плюс» (Козлов Ю.М. Патент РФ RU 2203657 04.06.2002. А61К 31/295, 31/00, А61Р 7/00). Препарат «Гемовит-плюс» имеет своем составе динатриевую или дикалиевую соль этилендиамин-N,N¹-диянтарной кислоты, водорастворимые соли железа, марганца, меди, кобальта, цинка и селена. Важным отличительным признаком изобретения является комплексный состав водорастворимых солей металлов-имуномодуляторов в соединении с янтарной кислотой, которая усиливает их биологическую активность в организме животных. Препарат применяется перорально в дозировках с учетом суточной потребности в этих микроэлементах. Однако пероральный метод применения, несмотря на простоту, имеет основной недостаток - значительная часть солей микроэлементов (до 70%) не усваивается организмом и выделяется с экскрементами. В связи с чем пероральный метод применения уступает парентеральному в точности соблюдения дозировок и эффективности усвояемости активных веществ.

Задачей изобретения является получение инъекционной формы иммунотропного препарата с широким спектром биологического действия для профилактики и лечения микроэлементозов, нарушения обмена веществ, повышения резистентности организма животных.

Поставленная задача достигается включением в состав комплексного препарата АСД-Ф №2 водорастворимых солей железа, меди, цинка, кобальта с активатором этих солей янтарной кислотой и пролонгатором активных веществ полиэтиленгликолем при следующем соотношении компонентов, мас.%:

АСД-Ф №2 - 4,0

янтарная кислота - 1,0

сульфат железа - 0,2

сульфат меди - 0,01

сульфат цинка - 0,01

сульфат кобальта - 0,1

новокаин - 0,25

полиэтиленгликоль - 3,0

дистиллированная вода - остальное.

Существенным отличительным признаком изобретения является комплексный состав препарата, предназначенного для парентерального введения в дозах, учитывающих потребность организма в этих микроэлементах с возможностью индивидуальной корректировки в зависимости от тяжести иммунных расстройств и нарушений обмена веществ.

Новым является ряд моментов, которые нами учтены при разработке данного состава комплексного препарата. Включение в состав АСД-Ф №2 продиктовано тем, что сам по себе данный препарат обладает мощным антиинфекционным и иммуностимулирующим действием, что очень важно для ослабленного организма животного в противостоянии возбудителям «дремлющих» инфекций. Низкомолекулярные компоненты данной фракции по своей структуре родственны продуктам клеточного обмена и, следовательно, не воспринимаются организмом как чужеродные, что исключает индуцирование повышенной реактогенности. Повышенная щелочная реакция АСД-Ф №2 нейтрализуется янтарной кислотой, которая известна как адаптоген, активный регулятор обменных процессов и стимулятор иммунной системы. Соединение янтарной кислоты с микроэлементами значительно повышает их активность и усвояемость и вместе с тем, в случае «передозировки» какого-либо микроэлемента янтарная кислота выступает в роли корректора, предохраняя клетки и ткани от его избыточного поступления. Микроэлементы, входящие в состав данного препарата, являются жизненно необходимыми. Следует отметить, что даже при высоком содержании микроэлементов в кормах их усвояемость очень низкая. К примеру, усвояемость железа из большинства кормов может составлять 5-30%. Недостаток микроэлементов в организме приводит к сбою в работе иммунной системы, глубокие нарушения обменных процессов. На таком фоне организм животных особенно чувствителен к возбудителям факторных инфекционных болезней. Отмечая взаимосвязь указанных микроэлементов, следует подчеркнуть, что медь (сульфат меди) входит в состав ряда ферментов, участвующих в окислительно-восстановительных реакциях, способствующих переходу железа из неорганического соединения в органическое (гемоглобин), предотвращая анемическое состояние животных, при этом сульфат цинка, входящий в состав препарата, стимулирует реакции иммуногенеза, профилактирует паракератоз.

Для обеспечения более длительного биологического действия активных веществ компонентов в состав комплексного препарата включен полиэтиленгликоль в 3% концентрации, с молекулярной массой 400.

Безболезненность инъекций обеспечивается включением в состав препарата новокаина 0,25% концентрации.

Препарату, полученному заявляемым способом, нами присвоено название «металлосукцинат».

Пример 1 осуществления способа. Для приготовления комплексного препарата «металлосукцинат» использовали 900 мл дистиллированной воды, в которой последовательно растворили 10 г янтарной кислоты; 2 г сульфата железа; 1 г сульфата кобальта; 100 мг сульфата цинка; 100 мг сульфата меди; 30 г - полиэтиленгликоля; 40 г АСД-Ф №2; 2,5 г - новокаина. Дробным добавлением 10% гидроокиси натрия довели рН до 7,0. После чего добавили дистиллированную воду до объема равного 1000 мл. Таким образом, полученный препарат имеет следующий состав компонентов на 1000 мл (1000 г) раствора, мас.%: АСД №2 - 4,0; янтарная кислота - 1,0; сульфат железа - 0,2; сульфат меди - 0,01; сульфат цинка - 0,01; сульфат кобальта - 0,1; новокаина - 0,25; полиэтиленгликоль - 3,0; дистиллированная вода - остальное. Полученный комплексный препарат расфасовали по флаконам емкостью 50,0 мл и провели стерилизацию автоклавированием в режиме 1,2 атм в течение 20 минут. Стерилизация автоклавированием не изменила физических свойств препарата. При контрольных высевах содержимого флаконов на мясопептонный агар (МПА) и мясопептонный бульон (МПБ) рост микрофлоры отсутствовал, что свидетельствовало о его стерильности.

Разовое, а также двух- и трехкратное с интервалом 24 часа внутрибрюшинное введение препарата «металлосукцинат», полученного по примеру 1, в дозе 0,5 мл 12 белым мышам массой 16-18 г не вызвало у них какого-либо нарушения в поведении, что свидетельствовало о его безвредности.

Испытание препарата «металлосукцинат» провели на поросятах-гипотрофиках двухнедельного возраста, у которых при биохимическом исследовании сыворотки крови были выявлены ниже физиологически доступных норматив содержания железа и меди, при низких показателях кобальта, цинка, магния. Для сравнения эффективности предлагаемого препарата использовали известный препарат «Гемовит-плюс». Опыт провели на трех группах поросят по 7 голов в каждой, подобранных по принципу аналогов. Первой опытной группе испытуемый препарат вводили в дозе 1,5 мл на 1 голову внутримышечно раз в три дня - три инъекции. Во второй группе в указанные дни индивидуально получали «Гемовит-плюс» в дозах, согласно рекомендаций по применению.

Поросята третьей группы были контрольными.

Об эффективности препаратов судили по гематологическим и биохимическим показателям сыворотки крови и живой массе поросят в 30-суточном возрасте.

В период проведения опыта у поросят выявлена различная динамика гематологических, биохимических показателей, уровень и направленность микроэлементного, в том числе по железу, меди обмена веществ, естественная резистентность, энергия роста (таблица).

Биохимические показатели крови и живая масса подопытных поросят Показатели Металлосукцинат Гемовит-плюс Контроль   1 2 3 Гемоглобин, г/% 11.9±0.37 10.7±0.51 9.8±0.53 Общий белок, % 8.03±0.23 7.73±3.32 6.73±0.15 Общ.липиды, мг/% 385±8.3 378±4.5 282±2.6 Глюкоза, мг/% 68±6.2 68.1±4.2 62.6±3.1 Кислотн. емк., мг/% 468±10.9 465.3±6.9 422±3.1 Кетоновые тела, мг/% 3.8±0.26 3.9±0.2 3.6±0.11 Кальций, мг/% 14.1±0.9 13.9±1.1 13.1±1.1 Фосфор, мг/% 6.0±0.69 5.9±1.1 5.5±1.0 Железо, мкмоль/л 15,3±0,3 12,9±0,1 11,6±0,4 Медь, мкмоль/л 12,0±2,7 10,2±2,8 9,8±3,1 Бактерицидная активность, % 58,7±0,24 42,9±0,30 36,7±0,20 сыворотки крови (БАС)       Фагоцитарная активность, % сыворотки крови (ФАС) 40,15±0,75 28,6±0,45 25,4±0,34 Лизоцимная активность, % сыворотки крови(ЛАС) 49,7±0,22 40,6±0,25 37,2±0,40 Живая масса, кг 6.8±0.3 6.3±0.2 6.1±0.2

Отмечая особенности обмена веществ в организме поросят, следует указать на то, что параэнтеральное применение препарата «металлосукцинат» дает возможность длительному нахождению в крови вводимых элементов, а их взаимодействие в организме нормализует обмен веществ. Это подтверждается увеличением общих липидов в опытных группах поросят (Р<0,01), что свидетельствует о значительном образовании жирных кислот в организме и использовании их для энергетических реакций, протекающих непрерывно в биомембранах клеток. Обращает внимание факт увеличения глюкозы (Р<0,05) и кислотной емкости крови. Уровень метаболитов белкового обмена находится в пределах физиологической нормы. Содержание кальция и фосфора соответствовало возрастному периоду поросят. Содержание железа и меди находилось несколько выше средней величины физиологической нормы, против очень низких показателей у поросят из контрольной группы. Показатели бактерицидной фагоцитарной и лизоцимной активности у поросят первой группы были значительно выше (Р<0,05), чем у контрольных, что позитивно отразилось на их устойчивости к желудочно-кишечным заболеваниям, а в дальнейшем на показателях живой массы. Отмечена положительная тенденция увеличения живой массы поросят при закономерном возрастании гемоглобина в крови.

В следующей серии опытов эффективность применения металлосукцината была проверена на новорожденных телятах в сравнении с Гемовит-плюс. В опыте было задействовано 30 телят, которых разделили на три равные группы.

Телятам первой подопытной группы трехкратно с интервалом в 7 дней внутримышечно вводили металлосукцинат в возрастающих дозировках 2-2,5-3 мл. Телятам второй группы в эти же дни получали Гемовит-плюс соответственно 100-150-200 мг железа на голову. Телята третьей группы были контрольными.

Клинические наблюдения свидетельствовали о фактически полном отсутствии желудочно-кишечных заболеваний в первой группе, против 5 (50%) во второй и 10 (100%) в третьей группах.

По истечении 30 дней среднесуточный прирост у телят первой группы составил 755 г; во второй - 620 г; в третьей - 545 г. Содержание гемоглобина телят первой группы было на уровне 104,6 г/л, эритроцитов 11,3·10¹²/л, против 96,7 г/л гемоглобина и 9,8·10¹²/л эритроцитов во второй группе, на фоне данных показателей контрольной группы соответственно 95,3 г/л гемоглобина и 9,6·10¹²/л эритроцитов.

Следующая серия опытов проведена на 15 лактирующих коровах. Опыт был проведен на 3 группах коров одинаковой продуктивности, возраста, упитанности и практически равных исходных биохимических показателей сыворотки крови. Коровам первой опытной группы двукратно с интервалом в 7 дней внутримышечно вводили металлосукцинат в объеме 5 мл. Коровы второй группы в эти же дни получали Гемовит-плюс соответственно 400 мг на голову. Животные третьей группы были контрольными. По истечении 10 дней провели биохимические исследования крови всех подопытных животных. Контроль за молочной продуктивностью подопытных коров проводили в течение 30 дней.

Исходя из полученных данных следует, что внутримышечное введение металлосукцината положительно отразилось на обмене веществ (таблица 2). В крови стабилизировалось содержание общего белка, глюкозы и липидов. При этом содержание микроэлементов (меди, цинка и железа) у коров первой группы было более высоким, чем у животных второй и контрольной групп. Это положительно отразилось на молочной продуктивности. Среднесуточный удой у коров первой группы был на 700 г больше, чем в контрольной и на 400 г по отношению ко второй подопытной группе.

Влияние металлосукцината и Гемовит-плюс на биохимические показатели крови лактирующих коров Показатели Металлосукцинат Гемовит-плюс Контроль Общий белок, г/% 9,5 8,5 6,8 Общ. липиды, мг/% 301,0 286,1 250,3 Глюкоза, мг/% 61,0 51,1 49,8 Медь, мкг/% 39,7 25,7 24,8 Цинк, мкг/% 111,1 80,3 79,8 Кобальт, мкг/% 11,9 8,4 8,4 Железо, мкг/% 230,1 221,1 183,2 Кальций, мг/% 12,3 11,5 11,2 Фосфор, мг/% 4,7 4,7 4,5 Среднесуточный удой на 1 корову, кг 83 7,9 7,5

Таким образом, разработанный препарат, по сравнению с наиболее близким аналогом, обеспечил более эффективную коррекцию микроэлементного обмена, повысил уровень факторов естественной резистентности, что благоприятно отразилось на профилактике желудочно-кишечных заболеваний, ростовой активности подопытных животных, молочной продуктивности лактирующих коров.

Изобретение относится к ветеринарии. Препарат готовят растворением в дистиллированной воде компонентов при следующем соотношении, %: АСД-Ф №2 4,0; янтарная кислота 1,0; железа сульфат 0,2; меди сульфат 0,01; цинка сульфат 0,01; кобальта сульфат 0,1; новокаин 0,25; полиэтиленгликоль 3,0; дистиллированная вода - остальное, доводят рН раствора до 7,0 и стерилизуют автоклавированием в режиме 1,2 атм в течение 20 минут. Изобретение обеспечивает получение иммунотропного препарата инъекционной формы, с широким спектром биологического действия при профилактике и лечении микроэлементозов, нарушений обмена веществ, повышении резистентности организма животных. 1 табл.

Способ получения комплексного препарата для профилактики и лечения нарушений обмена веществ, микроэлементоза, повышения резистентности организма животных, включающий смешивание микроэлементов иммуномодуляторов железа, меди, цинка, кобальта в виде водорастворимых солей, отличающийся тем, что дополнительно вводят АСД-Ф №2, янтарную кислоту, новокаин и полиэтиленгликоль при следующем соотношении компонентов, %:
АСД-Ф №2 4,0 Янтарная кислота 1,0 Железа сульфат 0,2 Меди сульфат 0,01 Цинка сульфат 0,01 Кобальта сульфат 0,1 Новокаин 0,25 Полиэтиленгликоль 3,0 Дистиллированная вода Остальное,