СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ УРОГЕНИТАЛЬНОГО УРЕАПЛАЗМОЗА Российский патент 2009 года по МПК G01N33/493 

Изобретение относится к медицине, в частности к лабораторному методу исследования.

Открытие антибиотиков в середине 20 века и их дальнейшее широкое распространение при лечении гнойно-септических заболеваний изменило иерархию структуры микроорганизмов, патогенных для человека. В настоящее время особо коварную вирулентность приобрела так называемая условно-патогенная группа микроорганизмов. Данная микрофлора всегда входила в спектр обычных комменсалов в качестве естественной микрофлоры человека. Под действием антибиотиков условно-патогенная микрофлора выработала для своего существования особые механизмы повреждения генетического аппарата клеток макроорганизма. Реакция организма в ответ на активность естественной микрофлоры резко отличается от реакции на внедрение чужеродной патогенной микрофлоры. На «свою» микрофлору нет выраженного иммунного ответа и условно-патогенные микроорганизмы выработали механизмы внедрения во внутриклеточные структуры самой клетки, разрушая ее и инфицируя новые. При этом «захват территорий» макроорганизма протекает скрыто и выявляется на поздних этапах далеко зашедшего патологического процесса, когда уже имеет место проявление развившихся осложнений.

Диагностика урогенитального уреаплазмоза в последнее время является важной, так как установлено, что данная условно-патогенная микрофлора характеризуется скрытым носительством и играет важную роль в развитии цистита у женщин, воспалительных заболеваний органов малого таза, пиелонефрита, уретрита и воспалении придаточных половых желез мужчин, а также нарушения фертильности за счет непосредственного влияния на сперматозоиды и их подвижность.

Диагностика данной инфекции осуществляется при использовании трудоемких и дорогостоящих методов: бактериологического (культурального), метода активированных частиц, прямой иммунной флюоресценции с использованием моноклональных антител, тест-системы MYCOPLASMA DUO и ПЦР (полимеразной цепной реакции). [Инфекции, передаваемые половым путем (клиника, диагностика, лечение). Под ред. В.А.Молочкова, О.Л.Иванова, В.В.Чеботарева, М., Медицина, 2006, стр.435-447].

Однако обнаружение этой инфекции не является достаточно надежным: методы обнаружения специфических антител в крови не позволяют установить излеченность, так как антитела сохраняются длительное время и после исчезновения возбудителя.

Как правило, диагностика уреаплазмоза осуществляется при наличии определенных жалоб у больных, однако не всегда эту инфекцию можно выявить всеми перечисленными выше способами.

В настоящее время исследователи предлагают способ провокации для проявления уреаплазмоза. При этом в течение 3-7 дней в организм вводят лекарственные препараты, способствующие обнаружению возбудителей этого заболевания, после чего осуществляют диагностику известными методами (Патент RU 2218413, МПК C12Q 1/04, опубл 2003 г.).

Недостатком этого способа является то, что диагностика дорогостоящая, так как должна осуществляться с методами провокации, поскольку часто отсутствуют какие-либо признаки патологического процесса в органах мочеполовой системы, либо проявления возникают поздно, при наличии определенных жалоб у больных, что приводит к запаздыванию в проведении адекватной терапии. Кроме того, данным спсобом невозможно провести экспресс-диагностику, поскольку после ввдения препаратов исследования мазков проводят через несколько дней.

Известен способ экспресс-диагностики уреаплазмоза (Патент РФ №2247373, МПК G01N 33/48, опубл. 2005 г., прототип), включающий микросткопическое исследование крови, определение значений Igα, Igβ, Igλ и общего билирубина, по которым судят о наличии уреаплазмоза.

Недостатком этого способа является то, что данный метод инвазивный, трудоемкий в исполнении и назначается врачом для дифференциальной диагностики явной урогенитальной инфекции. При скрытой форме заболевания этот способ, в случае его применения, выявляет уреаплазмоз как случайную находку.

Задача предлагаемого изобретения - устранение указанных недостатков, упрощение способа, расширение возможностей использования способа в любых клиниках. Это обеспечивается за счет того, что используется неинвазивный метод исследования мочи.

Для этого исследуют первую порцию утренней мочи, которую в количестве 10-20 мл смешивают с 10%-ным раствором альбумина в соотношении 4:1 соответственно, затем каплю смеси наносят на прозрачную поверхность, высушивают при температуре 20-27°С при относительной влажности 55-60%, микроскопируют при обычном освещении и при наличии трещин в краевой зоне образца с резким изменением направления концевого отдела диагностируют уреаплазмоз.

Известно, что уреаплазмоз имеет хроническое течение, в результате которого имеет место усиленный катаболизм тканей, который в дегидратированном образце утренней мочи в смеси с раствором альбумина представлен в виде аморфизированной субстанции по внутреннему краю белковой зоны альбумина. Трещина, сформированная в насыщенном белком (альбюумином) краевом валике, продолжается в аморфизированной субстанции продуктов катаболизма за счет жизнедеятельности уреаплазмы, которая представлена специфическими белковыми молекулами, что и дает другое направление в формировании концевого отдела трещины.

Ранее не производилось более детализированного исследования трещин при больших увеличениях микроскопа. Вместе с тем, наш многолетний опыт исследования образцов мочи (свыше 50000) в параллели с клинико-лабораторными данными позволили обратить внимание, что в некоторых случаях концевые отделы трещин искривлены под углом. Тщательное обследование больных позволило установить у них уреаплазмоз (Ureaplasma urealyticum).

На фиг.1 показан фрагмент фации мочи пациента без уреаплазмоза; на фиг.2 -. фрагмент фации мочи при заболевании уреаплазмозом.

Предлагаемый способ осуществляется следующим образом.

Берется утренняя порция мочи, готовится смесь мочи с 10%-ным раствором альбумина в соотношении 4:1 соответственно, затем капля смеси наносится на прозрачную поверхность, высушивается при температуре 20-27°С при относительно влажности 55-60% в условиях рабочей комнаты, высушенный образец микроскопируется при обычном освещении, обращается особое внимание на концевые отделы трещин (60-100 крат) и при наличие искривления концевого отдела трещины диагностируют уреаплазмоз.

В дальнейшем, при исследовании образцов мочи 567 амбулаторных больных у 77 из них были выявлены морфологические признаки уреаплазмоза, которые были подтверждены при однократном исследовании у 43 человек, а при повторных исследованиях отделяемого уретры и влагалища - у остальных 34 больных.

Пример.

Пациенту Р. при комплексном обследовании по причине бесплодия было проведено дополнительно исследование по предлагаемому способу. Была выявлена картина уреаплазмоза (искривление концевого отдела трещин в краевой белковой зоне).

По известным методикам (культуральный посев и методом ИФА) уреаплазмоз был подтвержден.

После проведения курса лечения при повторном исследовании по предлагаемому способу искривление концевого отдела трещин в краевой белковой зоне не обнаружено (фиг.2). Заключение: курс лечения эффективен, уреаплазмоз не обнаружен.

Эффективность метода.

Скрининг по уреаплазмозу при неинвазивном исследовании (моча) для выявления скрытых форм заболевания до стадии клинических проявлений. Это позволяет быстро и эффективно провести адекватную терапию и устранить заболевание, тогда как при явной картине заболевания лечение уреплазмоза более длительное, возможно возникновение рецидива заболевания.

Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторным методам анализа, и касается способа диагностики урогенитального уреаплазмоза. Способ заключается в изучении под микроскопом капли первой порции утренней мочи с добавлением 10% раствора альбумина, нанесенной на прозрачную поверхность и высушенной при температуре 20-27°С, и при наличии в краевой зоне образца трещин с резким изменением направления концевого отдела диагностируют уреаплазмоз. Использование способа позволяет выявить скрытые формы заболевания до стадии клинических проявлений. 2 ил.

Способ диагностики урогенитального уреаплазмоза, включающий микроскопическое исследование биологической жидкости, по которому определяют наличие инфекции, отличающийся тем, что в качестве исследуемого материала используют первую порцию утренней мочи в количестве 10-20 мл, готовят смесь мочи с 10%-ным раствором альбумина в соотношении 4:1 соответственно, затем каплю смеси наносят на прозрачную поверхность, высушивают при температуре 20-27°С при относительной влажности 55-60%, микроскопируют при обычном освещении, и при наличии в краевой зоне образца трещин с резким изменением направления концевого отдела диагностируют уреаплазмоз.