СРЕДСТВО ДЛЯ УЛУЧШЕНИЯ СОСТОЯНИЯ ПРИ РЕЗИСТЕНТНОСТИ К ИНСУЛИНУ Российский патент 2010 года по МПК C07J9/00 A61K31/575 A61P3/10 A61K36/896 

Область техники

Изобретение относится к средству для улучшения состояния при резистентности к инсулину, которое содержит в качестве активного ингредиента соединение, имеющее структуру лофенола, и к пищевому продукту или напитку, содержащему это средство. В частности, настоящее изобретение относится к средству для улучшения состояния при резистентности к инсулину, которое обладает эффектом регуляции продукции адипоцитокинов, которые являются факторами, участвующими в возникновении и тяжести патологического процесса, где имеет значение резистентность к инсулину, таких как свободная жирная кислота, ингибитор активатора плазминогена, фактор некроза опухоли, хемоаттрактант моноцитов протеина-1 и резистин, и относится к пищевому продукту или напитку, содержащему это средство.

Уровень техники

Инсулин представляет собой вид гормонов, которые продуцируются β-клетками островков Лангерганса поджелудочной железы. Инсулин действует на метаболизм липидов и метаболизм белков, а также на метаболизм сахаров через инсулиновые рецепторы, которые присутствуют в тканях-мишенях инсулина, таких как скелетные мышцы, печень и жиры, и играют важную роль при сохранении гомеостаза живых организмов. Примерами влияний инсулина на ткани-мишени являются стимуляция введения глюкозы из крови в мышечные клетки и адипоциты, стимуляция продукции гликогена в печени и мышечных тканях, ингибирование гликонеогенеза в печени, стимуляция потребления глюкозы и синтеза жирных кислот в адипоцитах и ингибирование разложения липидов.

Резистентность к инсулину означает состояние, где клеткам, органам или индивидуумам необходимы более высокие количества инсулина, чем количества, обычно требующиеся для получения соответствующих эффектов инсулина, то есть, состояние ослабленного эффекта инсулина, где чувствительность к инсулину понижена. Из данных последних эпидемиологических исследований гипертензия, диабет, гиперлипидемия (гипертриглицеридемия и гипо-HDL-холестеринемия), ожирение и т.д., считаются патологическими состояниями, вызванными резистентностью к инсулину. Резистентность к инсулину вызывает недостаточное воздействие инсулина на метаболизм сахаров, что приводит к компенсационной гиперинсулинемии с целью поддержания уровня сахара в крови, в результате чего возникает гипергликемия и непереносимость глюкозы и развивается диабет из-за истощения панкреатических β-клеток. Кроме того, гиперинсулинемия усиливает активацию симпатических нервов и ускоряет абсорбцию натрия почками, вызывая гипертензию, а также индуцирует гиперлипидемию и гиперурикурию после приема пищи, усиление ингибитора-1 активатора плазминогена (PAI-1) и т.д.

Между тем, резистентность к инсулину индуцирует аномальный липидный метаболизм, вызванный недостаточными эффектами инсулина, и свободная жирная кислота (FFA), высвобожденная из адипоцитов, повышается в печени, ускоряя в ней синтез триглицерида (TG), что приводит к гипертриглицеридемии. Кроме того, активность липопротеидлипазы (LPL), обычно имеющей высокую чувствительность к инсулину, снижается в состоянии резистентности к инсулину, так что разложение TG снижается и гипертриглицеридемия усугубляется дополнительно. Кроме того, развитие диабета вызывает проявление симптомов осложнений, таких как ретинопатия, нефропатия и гангрена, обусловленная ангиопатией, так что развиваются инфаркт миокарда и ишемический инсульт, которые являются артериосклеротическими заболеваниями, а гипертензия вызывает сердечно-сосудистые заболевания. Как описано выше, резистентность к инсулину, как считают, сильно вовлечена в обострение осложнений патологического состояния (не патентный документ 1).

В последние годы проведен анализ экспрессии орган-специфических генов. В результате установили, что различные физиологически активные вещества выделяются из жировых тканей и что жировые ткани, таким образом, должны рассматриваться не только тканями, запасающими энергию, но также самым большим эндокринным органом в живом организме. Эндокринные факторы, берущие начало из жировых тканей, имеют родовое название «адипоцитокины» и играют важную роль при поддержании гомеостаза при метаболизме. Считается, что избыточное или слишком маленькое количество адипоцитокинов продуцируется и выделяется при ожирении, то есть, при состоянии, когда жиры накапливаются, и баланс адипоцитокинов нарушается, приводя к резистентности к инсулину.

Адипоцитокины классифицированы по двум группам: одна группа повышает чувствительность к инсулину; а другая группа вызывает резистентность к инсулину. Типичными примерами первой группы являются адипонектин, лептин и АМФ-зависимая протеинкиназа (AMPK) и т.д. В частности, адипонектин, как сообщается, обладает эффектом снимать резистентность к инсулину и эффектом ингибирования глюконеогенеза в печени (не патентный документ 2).

Между тем, примерами адипоцитокинов, которые вызывают резистентность к инсулину, являются, помимо упомянутых выше FFA и PAI-1, фактор некроза опухоли (TNF-α), хемоаттрактант моноцитов протеина-1 (МСР-1), который представляет собой вид воспалительного хемокина, и резистин. В частности, TNF-α, как сообщается, обладает эффектом ингибирования фосфорилирования тирозина инсулинового рецептора и IRS1 (субстрата инсулинового рецептора 1) в механизме трансдукции инсулинового сигнала так, что влияние инсулина снижается, в результате чего возникает устойчивость к инсулину. Кроме того, сообщается, что в состоянии резистентности к инсулину уровень МСР-1 в живых организмах повышается, уровень мРНК GLUT4 (транспортер глюкозы 4), который является транспортирующим глюкозу носителем, уровень PPARγ (активированный пролифератором пероксисомы рецептор γ), который является внутриядерным рецептором), уровень β3AR (β3-адренергический рецептор), который является разновидностью β-катехоламинного рецептора адипоцита, и уровень аР2 (протеин 2, связывающий жирную кислоту адипоцита), который является белком, связывающим жирную кислоту, понижается. Следовательно, считается, что МСР-1 является причинным фактором, который снижает чувствительность к инсулину (не патентные документы 3, 4 и 5).

В качестве средств улучшения состояния при резистентности к инсулину разработаны бигуанидиновые агенты, которые ингибируют глюконеогенез главным образом в печени, и тиазолидиновые производные для улучшения чувствительности к инсулину мышц и жировых тканей. Такие средства уже получили одобрение в качестве диабетических медикаментов и, кроме того, используются для лечения артериосклеротического заболевания. Типичными представителями тиазолидиновых производных являются троглитазон и пиоглитазон, каждый из которых, как считается, действует в качестве лиганда для рецептора, активированного пролифератом пероксисомы (PPAR), который представляет собой фактор транскрипции внутриядерного рецепторного типа, стимулируя дифференциацию адипоцитов, что в результате улучшает состояние при резистентности к инсулину.

Кроме того, средство для улучшения состояния при резистентности к инсулину, содержащее адипонектин или его гены в качестве активного ингредиента (Патентный документ 1); профилактическое и/или терапевтическое средство для заболеваний, обусловленных диабетом, которое содержит в качестве активного ингредиента вещество, обладающее сродством к рецептору бомбезина подтипа 3 (BRS-3) (патентный документ 2); средство, снижающее количество свободной жирной кислоты (FFA), содержащее в качестве активного ингредиента производное пиррола (патентный документ 3) и т.д., описаны в качестве средств улучшения состояния при резистентности к инсулину. Кроме того, композиция для улучшения состояния при резистентности к инсулину, содержащая в качестве активного ингредиента уксусную кислоту и ее ион или соль (патентный документ 4); средство для улучшения состояния при резистентности к инсулину, содержащее жирное масло, которое включает конкретный диглицерид и/или моноглицерид (патентный документ 5) и т.д., описаны как средства, содержащие в качестве активного ингредиента вещество, полученное из пищевого продукта или напитка.

Растительные стерины, такие как β-ситостерол, кампестерол, стигмастерол, как известно, обладают понижающим действием на холестерин крови за счет ингибирования абсорбции холестерина, и были сделаны попытки практического их применения путем их добавления в качестве жировой композиции к съедобному маслу. Кроме того, раскрыто средство против ожирения и средство, налаживающее липидный метаболизм, содержащее в качестве активного ингредиента холестеноновое соединение, которое синтезировано за счет использования в качестве исходного материала растительных стеринов, таких как β-ситостерол и кампестерол (патентные документы 6-8 и не патентный документ 6).

Кроме того, раскрыто средство для стимуляции выделения адипонектина, содержащее экстракт, полученный по меньшей мере из рисовых отрубей, грибов shimeji, хризантемы, ржи, березы белой и жасмина крупноцветного (Alpinia zerumber), и тритерпен циклоартанового типа или циклоартенол и/или (24S)-24,25-дигидроксициклоартанол, которые являются его производными (патентный документ 9).

Растения, принадлежащие к семейству Aloe of Liliaceae, представляют собой группу растений, включающую Aloe vera (Aloe barbadensis Miller), Aloe arboresens (Aloe arboresens Miller var. Natalensis Berger) и т.д., как известно из опыта, обладают различными эффектами. Например, раскрыт улучшающий иммунодепрессивное состояние агент, содержащий бутанольную фракцию экстракта алоэ или алоин (патентный документ 10); агенты, относящиеся к средствам, улучшающим уровень глюкозы в крови (патентные документы 11-14); и профилактический и улучшающий агент для ожирения (патентный документ 15) и т.д.; но о налаживающем резистентность к инсулину эффекте растений, принадлежащих к семейству Aloe, не сообщается.

[Патентный документ 1] - Международная публикация № WO 2003/63894.

[Патентный документ 2] - Опубликованный патент Японии № 10-298100.

[Патентный документ 3] - Опубликованный патент Японии № 08-12573.

[Патентный документ 4] - Опубликованный патент Японии

№ 2002-193797.

[Патентный документ 5] - Опубликованный патент Японии

№ 2001-247473.

[Патентный документ 6] - Опубликованный патент Японии № 07-165587.

[Патентный документ 7] - Опубликованный патент Японии № 11-193296.

[Патентный документ 8] - Опубликованный патент Японии

№ 2001-240544.

[Патентный документ 9] - Опубликованный патент Японии

№ 2005-68132.

[Патентный документ 10] - Опубликованный патент Японии

№ 08-208495.

[Патентный документ 11] - Опубликованный патент Японии

№ 59-214741.

[Патентный документ 12] - Опубликованный патент Японии

№ 2003-286185.

[Патентный документ 13] - Патент США № 4598069.

[Патентный документ 14] - Патентная заявка США

№ 2003/0207818.

[Патентный документ 15] - Опубликованный патент Японии

№ 2000-319190.

[Не патентный документ 1] - Insulin resistance and lifestyle-related diseases, Ed., Kazuaki Shimamoto, Shindan to Chiryo Company, 2003, pp. 1-5.

[Не патентный документ 2] - Adiposcience, 1(3), 2004, pp. 247-257.

[Не патентный документ 3] - Proceedings of the National Academy of Sciences, vol. 100, 2003, pp. 7265-7270.

[Не патентный документ 4] - Nature, vol. 389, 1997, pp. 610-614.

[Не патентный документ 5] - The Netherlands Journal of Medicine, 6(6), 2003, pp. 194-212.

[Не патентный документ 6] - Hormone Metabolism Research, vol. 37, 2005, pp. 79-83.

Описание изобретения

При использовании бигуанидинового агента, который является обычным агентом для улучшения состояния при резистентности к инсулину, иногда может иметь место желудочно-кишечная дисфункция или реже лактоцидоз. Кроме того, производное тиазолидина, которое представляет собой тот же тип агента, иногда может вызывать сильные побочные эффекты, такие как удерживание жидкости, повышение массы тела и нарушение функции печени, поэтому его применение требует дополнительного внимания. Более того, в случае резистентности к инсулину в состояниях, отличных от диабета или гипергликемии, особенно трудно применять противодиабетические средства. Для таких ситуаций желательна разработка функционального материала, который имеет прекрасную безопасность, может приниматься внутрь изо дня в день и может эффективно улучшать резистентность к инсулину с насколько это возможно незначительным болевым эффектом.

С учетом упомянутых выше проблем, в настоящем изобретении исследован механизм резистентности к инсулину, вовлеченный в заболевания, связанные с образом жизни, такие как гипертензия, диабет, гиперлипидемия, в том числе гипертриглицеридемия и гипохолестеринемия липопротеинов высокой плотности, а также ожирение, и изучено средство, связанное с профилактикой, смягчением и т.д. заболеваний, то есть, средство для улучшения состояния при резистентности к инсулину. В настоящем изобретении уделено внимание адипоцитокинам, которые представляют собой факторы, вовлеченные в проявление симптомов и обострение резистентности к инсулину, и проведены широкие исследования нового функционального материала, способного налаживать резистентность к инсулину путем регулирования упомянутых выше факторов. В результате авторы настоящего изобретения установили, что соединение, имеющее структуру лофенола, обладает регулирующим действием на продукцию адипоцитокинов, таких как свободная жирная кислота, TNF-α и МСР-1, в особенности, эффективным понижающим действием на продукцию адипоцитокина, который вызывает резистентность к инсулину, и в результате резистентность к инсулину улучшается.

Если сравнивать с упомянутыми выше эффектами настоящего изобретения, то патентный документ 9 описывает только профилактический эффект растительного экстракта на дифференцировку культивируемых адипоцитов, и стимулирующий эффект провитамина Д2 на секрецию адипонектина, и отсутствует описание или предположение о наличии налаживающего действия активного ингредиента настоящего изобретения на резистентность к инсулину.

Кроме того, за счет исследования с использованием теста на переносимость инсулина помимо теста с фиксированным уровнем глюкозы, теста на уровень глюкозы в плазме в устойчивом состоянии (SSPG) и метода моделирования минимума, которые представляют собой обычные методы оценки резистентности к инсулину, в настоящем изобретении установлено, что соединения, имеющие структуру лофенола, более направленно налаживают резистентность к инсулину, не вмешиваясь в свойство секреции инсулина и др.

Тест на переносимость инсулина не проводился в упомянутых выше патентных документах 1-5. Авторы настоящего изобретения выявили более благоприятный эффект соединения, имеющего структуру лофенола, который улучшает резистентность к инсулину без воздействия на свойство секреции инсулина и т.д. и который чрезвычайно полезен по сравнению с обычным улучшающим действием на резистентность к инсулину, и, таким образом, реализуется настоящее изобретение.

Цель настоящего изобретения состоит в разработке средства для улучшения состояния при резистентности к инсулину, которое в качестве активного ингредиента содержит соединение, имеющее структуру лофенола. Кроме того, другая цель настоящего изобретения состоит в разработке физиологически функционального пищевого продукта или напитка, такого как пищевой продукт для применения при конкретном состоянии здоровья, который содержит средство для улучшения состояния при резистентности к инсулину.

Первое изобретение для решения упомянутых выше проблем представляет собой средство для улучшения состояния при резистентности к инсулину, содержащее соединение, представленное следующей общей формулой (1) в качестве активного ингредиента.

(В формуле R1 представляет собой алкильную группу или алкенильную группу, содержащую 1 или 2 двойные связи, или замещенную алкильную или алкенильную группу, содержащую гидроксильную группу и/или карбонильную группу, которая является линейной или разветвленной и содержит от 5 до 16 атомов углерода; R2 и R3, каждый, независимо друг от друга, представляет собой атом водорода, алкильную группу или замещенную алкильную группу, содержащую от 1 до 3 атомов углерода, и R4 образует группу С=О с атомом углерода, образующим цикл, или представляет собой -ОН или -ОСОСН₃).

Кроме того, приведенные ниже пункты 1-4 составляют предпочтительные варианты осуществления изобретения.

1. В упомянутом выше соединении один из заместителей R2 и R3 представляет собой атом водорода, другой представляет собой метильную группу и заместитель R4 представляет собой гидроксильную группу.

2. В упомянутом выше пункте 1 заместитель R1 представлен любой из следующих формул:

-СН₂-СН₂-СН(-СН₂-СН₃)-СН(СН₃)₂

-СН₂-СН₂-СН=С(СН₃)₂

-СН₂-СН=С(СН₃)-СН(СН₃)₂

-СН₂-СН₂-С(=СН-СН₃)-СН(СН₃)₂

-СН₂-СН₂-СН(Ra)=С(СН₃)Rb

(где Ra и Rb представляет собой любую из групп -Н, -ОН или -СН₃)

-СН₂-СН₂-СН(Rc)-СH(СН₃)Rd

(где Rc и Rd представляет собой любую из групп -Н, -ОН или -СН₃).

3. Упомянутое выше соединение, описанное в пункте 2, выбрано из группы, включающей 4-метилхолест-7-ен-3-ол, 4-метилэргост-7-ен-3-ол и 4-метилстигмаст-7-ен-3-ол.

4. Упомянутое выше соединение, описанное в пунктах 1-3, содержится в количестве по меньшей мере 0,001 мас.%.

Второе изобретение для решения упомянутых выше проблем представляет собой средство для улучшения состояния при резистентности к инсулину, содержащее экстракт органическим растворителем или экстракт горячей водой растения Liliaceae или его части, который содержит соединение, представленное следующей общей формулой (1), и в котором экстракт органическим растворителем или экстракт горячей водой растения Liliaceae или его части содержит в качестве активного ингредиента композицию, содержащую по меньшей мере 0,001% сухой массы соединения, представленного следующей общей формулой (1).

(В формуле R1 представляет собой алкильную группу или алкенильную группу, содержащую 1 или 2 двойные связи, или замещенную алкильную или алкенильную группу, содержащую гидроксильную группу и/или карбонильную группу, которая является линейной или разветвленной и содержит от 5 до 16 атомов углерода; R2 и R3, каждый, независимо друг от друга, представляет собой атом водорода, алкильную группу или замещенную алкильную группу, содержащую от 1 до 3 атомов углерода, и R4 образует группу С=О с атомом углерода, образующим цикл, или представляет собой -ОН или -ОСОСН₃).

Кроме того, приведенные ниже пункты 5-7 являются предпочтительными вариантами осуществления изобретения.

5. В упомянутом выше соединении один из заместителей R2 и R3 представляет собой атом водорода, другой представляет собой метильную группу и заместитель R4 представляет собой гидроксильную группу.

6. В упомянутом выше пункте 5 заместитель R1 представлен любой из следующих формул:

-СН₂-СН₂-СН(-СН₂-СН₃)-СН(СН₃)₂

-СН₂-СН₂-СН=С(СН₃)₂

-СН₂-СН=С(СН₃)-СН(СН₃)₂

-СН₂-СН₂-С(=СН-СН₃)-СН(СН₃)₂

-СН₂-СН₂-СН(Ra)=С(СН₃)Rb

(где Ra и Rb представляет собой любую из групп -Н, -ОН или -СН₃)

-СН₂-СН₂-СН(Rc)-СH(СН₃)Rd

(где Rc и Rd представляет собой любую из групп -Н, -ОН или -СН₃).

7. Упомянутое выше соединение, описанное в пункте 6, выбрано из группы, включающей 4-метилхолест-7-ен-3-ол, 4-метилэргост-7-ен-3-ол и 4-метилстигмаст-7-ен-3-ол.

Третье изобретение для решения упомянутых выше проблем представляет собой пищевой продукт или напиток, содержащий упомянутое выше средство для улучшения состояния при резистентности к инсулину в соответствии с первым или вторым изобретением.

Кроме того, приведенный ниже пункт 8 представляет собой предпочтительный вариант осуществления изобретения.

8. Пищевой продукт или напиток содержит соединение, представленное приведенной выше общей формулой (1) в количестве 0,0001 мас.% или более.

Четвертое изобретение для решения упомянутых выше проблем представляет собой применение соединения, представленного приведенной выше общей формулой (1), или экстракта органическим растворителем или экстракта горячей водой растения Liliaceae или его части, который содержит по меньшей мере 0,001% из расчета на массу сухого вещества соединения, для получения средства для улучшения состояния при резистентности к инсулину.

Пятое изобретение для решения упомянутых выше проблем представляет собой способ улучшения состояния при резистентности к инсулину, включающий введение соединения, представленного приведенной выше общей формулой (1), или экстракта органическим растворителем, экстракта горячей водой или отжатого раствора растения Liliaceae или его части, которые содержат по меньшей мере 0,001% соединения из расчета на массу сухого вещества, пациенту, резистентность к инсулину которого необходимо уменьшить.

В упомянутом выше применении и в способе согласно настоящему изобретению предпочтительные варианты осуществления соединения, обозначенного общей формулой (1), представляют собой те же варианты, что и во втором изобретении.

Средство для улучшения состояния при резистентности к инсулину и пищевой продукт или напиток, содержащий средство согласно настоящему изобретению, могут быть введены или приняты внутрь безопасно и проявляют профилактическое действие на заболевания, связанные с образом жизни, которые, как считается, вызваны резистентностью к инсулину. Кроме того, активный ингредиент средства для улучшения состояния при резистентности к инсулину согласно настоящему изобретению на основании опыта может быть принят внутрь безопасно и может быть легко получен из доступных растений Liliaceae, таких как Aloe vera (Aloe barbadensis Miller)

Краткое описание чертежа

На чертеже представлен график, показывающий изменение уровня глюкозы в крови при проведении теста на переносимость инсулина.

Наилучший способ осуществления изобретения

Далее предпочтительные варианты осуществления настоящего изобретения будут рассмотрены более подробно. Однако настоящее изобретение не ограничено следующими предпочтительными вариантами изобретения и свободно могут быть выполнены модификации в пределах объема настоящего изобретения. Кроме того, используемые в описании проценты являются массовыми процентами, если не указано иное.

В настоящем изобретении эффект улучшения состояния при резистентности к инсулину (эффект повышения чувствительности к инсулину) означает эффект предупреждения или уменьшения различных отрицательных воздействий на здоровье, вызванных понижением чувствительности к инсулину, таких как заболевания, связанные с образом жизни. Конкретно, средство для улучшения состояния при резистентности к инсулину согласно настоящему изобретению эффективно ингибирует увеличение или продукцию адипоцитокинов, которые вызывают резистентность к инсулину, таких как ингибитор активатора плазминогена (PAI-1), свободная жирная кислота (FFA), фактор некроза опухоли (TNF-α), МСР-1 и резистин, и имеет эффект в отношении снижения рисков, профилактики, ослабления или лечения заболеваний, вовлеченных в резистентность к инсулину, таких как гиперинсулинемия, гиперлипидемия, аномальная толерантность к глюкозе, диабет, гипертензия, ожирение, артериосклеротическое заболевание и т.д. Таким образом, средство для улучшения состояния при резистентности к инсулину согласно настоящему изобретению может быть определено как средство повышения чувствительности к инсулину или средство регуляции продукции адипоцитокинов, которые вызывают резистентность к инсулину.

Существуют способы оценки резистентности к инсулину, такие как тест на переносимость глюкозы, тест на уровень глюкозы в плазме в устойчивом состоянии (SSPG), метод моделирования минимума, метод оценки резистентности к инсулину путем расчета модели оценки гомеостаза резистентности к инсулину (HOMA-IR) из уровней глюкозы в крови и концентрации инсулина в крови на голодный желудок, а также тест на переносимость инсулина. Любой из названных выше способов может быть использован для оценки резистентности к инсулину. Однако в настоящем изобретении предпочтительно использование теста на переносимость инсулина на животных, так как тест не влияет на свойство секреции инсулина или другие, и, следовательно, можно напрямую изучать чувствительность к инсулину.

Соединение, имеющее структуру, представленную приведенной выше формулой (1), обладает эффектом повышения чувствительности к инсулину и, следовательно, может предупреждать или облегчать заболевания, вызванные резистентностью к инсулину. Таким образом, соединение может быть использовано в качестве активного ингредиента средства для улучшения состояния при резистентности к инсулину или пищевого продукта или напитка, содержащего это средство. Кроме того, чувствительность к инсулину также может быть оценена путем измерения понижения уровня глюкозы в крови после введения инсулина.

Соединение, используемое в качестве активного ингредиента средства для улучшения состояния при резистентности к инсулину согласно настоящему изобретению (далее называется «средством согласно настоящему изобретению»), представляет собой соединение, имеющее структуру, представленную приведенной выше формулой (1), и любые его производные и другие соединения включают в качестве активного ингредиента, пока каждое из этих соединений является соединением, проявляющим эффект улучшения состояния при резистентности к инсулину (далее также называются «соединением согласно настоящему изобретению»).

Наиболее предпочтительно, когда чистота соединения согласно настоящему изобретению, которое используется в качестве активного ингредиента средства для улучшения состояния при резистентности к инсулину согласно настоящему изобретению, составляет 100%. Однако чистота может быть соответствующим образом установлена в пределах интервала, в котором средство обладает эффектом улучшения состояния при резистентности к инсулину.

Кроме того, композиция, которую используют в качестве активного ингредиента средства для улучшения состояния при резистентности к инсулину согласно настоящему изобретению (далее также называется «композицией согласно настоящему изобретению»), представляет собой экстракт растения Liliaceae или его части, который содержит соединение, имеющее структуру, представленную приведенной выше формулой (1), в количестве по меньшей мере 0,001% из расчета на массу сухого вещества, предпочтительно, 0,01% из расчета на массу сухого вещества или более, и более предпочтительно, 0,1% из расчета на массу сухого вещества или более. Верхний предел содержания соединения согласно настоящему изобретению составляет, например, но не ограничивается конкретно им, предпочтительно 10% из расчета на массу сухого вещества, 50% из расчета на массу сухого вещества, 70% из расчета на массу сухого вещества или 90% из расчета на массу сухого вещества.

В настоящем изобретении масса сухого вещества означает массу, измеренную после сушки соединения способом сушки, обозначаемым «Тест на потери при сушке» (Drying Loss Test), который представляет собой метод испытания, описанный в Japanese Pharmacopoeia, Fourteenth Revision (March 30, 2001, the Japan Ministry of Health, Labor and Welfare, Ministerial Notification № 111). Например, масса соединения согласно настоящему изобретению может быть определена способом, в котором отвешивают приблизительно 1 г соединения согласно настоящему изобретению и сушат при 105°С в течение 4 час; полученный остаток охлаждают в десикаторе; и массу соединения определяют с помощью весов.

В приведенной выше формуле (1) R1 представляет собой алкильную группу или алкенильную группу, содержащую 1 или 2 двойные связи, которые являются линейными или разветвленными и содержат от 5 до 16 атомов углерода. Кроме того, указанные алкильная группа и алкенильная группа могут представлять собой замещенную алкильную или алкенильную группу, содержащую гидроксильную группу и/или карбонильную группу, соответственно. Заместители R2 и R3, каждый, независимо друг от друга, представляет собой атом водорода, алкильную группу или замещенную алкильную группу, содержащую от 1 до 3 атомов углерода, и R4 образует группу С=О с атомом углерода, образующим цикл, или представляет собой -ОН или -ОСОСН₃. В качестве упомянутой выше алкильной группы, содержащей от 1 до 3 атомов углерода, предпочтительными являются метильная группа, этильная группа и т.д., особенно предпочтительной является метильная группа.

Указанный заместитель R1 предпочтительно представляет собой любую группу, представленную следующими формулами:

(i) -СН₂-СН₂-СН(-СН₂-СН₃)-СН(СН₃)₂

(ii) -СН₂-СН₂-СН=С(СН₃)₂

(iii) -СН₂-СН=С(СН₃)-СН(СН₃)₂

(iv) -СН₂-СН₂-С(=СН-СН₃)-СН(СН₃)₂

(v) -СН₂-СН₂-СН(Ra)=С(СН₃)Rb

(где Ra и Rb представляет собой любую из групп -Н, -ОН или -СН₃)

(vi) -СН₂-СН₂-СН(Rc)-СH(СН₃)Rd

(где Rc и Rd представляет собой любую из групп -Н, -ОН или -СН₃).

Кроме того, предпочтительно, когда один из заместителей R2 или R3 представляет собой атом водорода, а другой представляет собой метильную группу. Кроме того, предпочтительно, когда R4 представляет собой гидроксильную группу.

Наиболее предпочтительными соединениями в качестве упомянутых выше соединений являются соединения, представленные следующими формулами: 4-метилхолест-7-ен-3-ол (формула (2)), 4-метилэргост-7-ен-3-ол (формула (3)) и 4-метилстигмаст-7-ен-3-ол (формула (4)).

То есть 4-метилхолест-7-ен-3-ол представляет собой соединение, представленное приведенной выше формулой (1), где один из заместителей R2 и R3 представляет собой атом водорода, другой представляет собой метильную группу, R4 представляет собой гидроксильную группу и R1 представляет собой группу, представленную приведенной выше формулой (vi) (Rc представляет собой Н, и Rd представляет собой -СН₃). 4-Метилэргост-7-ен-3-ол представляет собой соединение, представленное приведенной выше формулой (1), где один из заместителей R2 и R3 представляет собой атом водорода, другой представляет собой метильную группу, R4 представляет собой гидроксильную группу и R1 представляет собой группу, представленную приведенной выше формулой (vi) (оба Rc и Rd представляют собой -СН₃). И 4-метилстигмаст-7-ен-3-ол представляет собой соединение, представленное приведенной выше формулой (1), где один из заместителей R2 и R3 представляет собой атом водорода, другой представляет собой метильную группу, R4 представляет собой гидроксильную группу и R1 представляет собой группу, представленную приведенной выше формулой (i).

Средство, пищевой продукт или напиток согласно настоящему изобретению может содержать один тип, или два, или более произвольных типов упомянутых выше соединений.

Известно, что лофенол содержится в растениях, и соединение согласно настоящему изобретению может быть получено в соответствии с известным способом получения лофенола (Yamada A., “Experimental Methods of Biochemistry”, Vol. 24, Experimental Methods for Fat and Lipid Metabolism, p. 174, Gakkai Shuppan Center, 1989). Соединение согласно настоящему изобретению может быть получено, например, экстракцией соединения из растения, содержащего это соединение, с использованием такого способа, как экстракция органическим растворителем или экстракция горячей водой и очистка полученного экстракта. В настоящем изобретении, хотя соединение согласно настоящему изобретению может быть очищено, композиция, такая как экстракт растения или его части, может быть использована до тех пор, пока она содержит эффективное количество соединения.

Соединение согласно настоящему изобретению или композиция, содержащая это соединение, может быть получена, например, следующим образом: из растения, принадлежащего семейству Liliaceae, его части или измельченного продукта, содержащих соединение согласно настоящему изобретению, экстрагируют органическим растворителем или горячей водой фракцию, содержащую соединение, и концентрируют.

Примерами упомянутого выше растения, принадлежащего семейству Liliaceae, являются растения, принадлежащие семейству Aloe или Allium. Примерами растений семейства Aloe являются Aloe vera (Aloe barbadensis Miller), Aloe Ferox Miller, Aloe africana Miller, Aloe arborescen Miller var. natalensis Berger, Aloe spicata Baker и т.д. При получении соединения согласно настоящему изобретению или содержащей соединение композиции, хотя может быть использовано все растение, предпочтительно использование его мезофилла (часть чистого геля). Такое растение или его часть измельчают предпочтительно с использованием гомогенизатора или подобного устройства и в результате разжижают, и соединение согласно настоящему изобретению или содержащую его композицию экстрагируют из измельченного продукта с использованием органического растворителя или горячей воды. Примерами органического растворителя являются спирты, такие как метанол, этанол и бутанол; сложные эфиры, такие как метилацетат, этилацетат, пропилацетат и бутилацетат; кетоны, такие как ацетон и метилизобутилкетон; простые эфиры, такие как диэтиловый эфир и петролейный эфир; углеводороды, такие как гексан, циклогексан, толуол и бензол; галогенированные углеводороды, такие как тетрахлорид углерода, дихлорметан и хлороформ; гетероциклические соединения, такие как пиридин; гликоли, такие как этиленгликоль; многоатомные спирты, такие как полиэтиленгликоль; нитрильные растворители, такие как ацетонитрил, смеси таких растворителей и т.д. Кроме того, такие растворители могут быть безводными или водными. Среди названных растворителей особенно предпочтительными являются смесь этилацетат/бутанол (3:1) и смесь хлороформ/метанол (2:1).

В качестве способа экстракции может быть использован способ, используемый для обычной экстракции растительного компонента. Обычно используют, например, способ кипячения с обратным холодильником от 1 до 300 массовых частей органического растворителя с 1 массовой частью свежего растения или высушенного растения при нагревании при температуре ниже температуры кипения растворителя и при перемешивании или встряхивании, или способ проведения экстракции с помощью обработки ультразвуком при комнатной температуре. Путем выделения нерастворимых веществ из экстракционной жидкости с использованием подходящего способа, такого как фильтрация или центрифугирование, может быть получен сырой экстракт.

Сырой экстракт может быть очищен с помощью различных видов хроматографии, таких как колоночная хроматография на силикагеле с нормальной или обращенной фазой. Когда в колоночной хроматографии на силикагеле с нормальной фазой в качестве элюирующего растворителя используется градиент смеси хлороформ/метанол, соединение согласно настоящему изобретению элюируют при соотношении смешения хлороформ:метанол приблизительно 25:1. Кроме того, когда в колоночной хроматографии на силикагеле с обращенной фазой в качестве элюирующего растворителя используется смесь гексан/этилацетат (4:1), соединение согласно настоящему изобретению выходит во фракции, элюирующей на ранней стадии. Полученную фракцию можно дополнительно очистить с помощью ВЭЖХ или др.

Кроме того, соединение, используемое для настоящего изобретения, также может быть получено химическими способами синтеза или биологическим или ферментативным способом с использованием микроорганизмов, ферментов и т.д.

Действительно ли соединение или содержащая его композиция, полученная, как описано выше, содержит соединение согласно настоящему изобретению, может быть подтверждено, например, с помощью масс-спектрометрии (МС), спектроскопии ядерного магнитного резонанса (ЯМР) или др.

Соединение согласно настоящему изобретению может быть использовано в качестве активного ингредиента средства для улучшения состояния при резистентности к инсулину согласно настоящему изобретению и пищевого продукта или напитка, содержащего это средство, как оно есть. Кроме того, экстракт органическим растворителем или экстракт горячей водой растения или его части (далее называется «экстрактом»), содержащий соединение согласно настоящему изобретению, может быть использован в качестве активного ингредиента средства для улучшения состояния при резистентности к инсулину или пищевого продукта или напитка, содержащего средство согласно настоящему изобретению. Более того, когда Aloe vera, принадлежащее семейству Liliaceae, используется в качестве растения, предпочтительно, чтобы суммарное содержание алоина и алоэ-эмодина, которые содержатся в большом количестве в кожуре листьев Aloe vera, составляло 5 ч./млн или менее.

Упомянутый выше экстракт, который содержится в средстве улучшения состояния при резистентности к инсулину, предпочтительно содержит по меньшей мере 0,001% из расчета на сухую массу, более предпочтительно, от 0,01 до 1% из расчета на сухую массу, особенно предпочтительно, от 0,05 до 1% из расчета на сухую массу соединения согласно настоящему изобретению. Кроме того, упомянутый выше экстракт, который содержится в пищевом продукте или напитке, предпочтительно содержит по меньшей мере 0,0001% из расчета на сухую массу, более предпочтительно, от 0,001 до 1% из расчета на сухую массу, особенно предпочтительно, от 0,005 до 1% из расчета на сухую массу соединения согласно настоящему изобретению. Упомянутый выше экстракт может содержать два или более типов соединения согласно настоящему изобретению. Кроме того, упомянутый выше экстракт может представлять собой раствор или может также быть лиофилизирован или высушен распылительной сушкой обычным образом и может храниться или использоваться в виде порошка.

Как средство для улучшения состояния при резистентности к инсулину согласно настоящему изобретению, соединение согласно настоящему изобретению или композиция, содержащая соединение как оно есть, или соединение согласно настоящему изобретению или композиция, содержащая соединение, вместе с фармацевтически приемлемым носителем, могут быть введены перорально или парентерально млекопитающему, включая человека. В средстве для улучшения состояния при резистентности к инсулину согласно настоящему изобретению соединение согласно настоящему изобретению может представлять собой фармацевтически приемлемую соль. Примерами фармацевтически приемлемой соли являются как металлические соли (неорганические), так и органические соли, в том числе, например, соли, перечисленные в публикации “Remington's Pharmaceutical Sciences”, 17^th edition, p. 1418, 1985. Конкретными примерами солей являются, но не ограничиваются ими, соли неорганических кислот, такие как гидрохлорид, сульфат, фосфат, дифосфат и гидробромид, и соли органических кислот, такие как малат, малеат, фумарат, тартрат, сукцинат, цитрат, ацетат, лактат, метансульфонат, п-толуолсульфонат, памоат, салицилат и стеарат. Кроме того, соль может представлять собой соль с металлом, таким как натрий, калий, кальций, магний и алюминий, или соль с аминокислотой, такой как лизин. Кроме того, сольваты, такие как гидраты, рассмотренного выше соединения или его фармацевтически приемлемой соли, также подпадают под объем настоящего изобретения.

Лекарственная форма средства для улучшения состояния при резистентности к инсулину согласно настоящему изобретению особенно не ограничена и может быть соответствующим образом выбрана в зависимости от терапевтических целей. Конкретными примерами являются таблетка, пилюля, порошок, раствор, суспензия, эмульсия, гранулы, капсула, сироп, суппозиторий, инъекция, мазь, пластырь, глазные капли, капли в нос и т.д. В случае препарата могут быть использованы добавки, как правило, используемые в обычных профилактических средствах для улучшения состояния при резистентности к инсулину в качестве фармацевтических носителей, таких как наполнители, связующие вещества, диспергирующие агенты, лубрикаторы, стабилизаторы, корригирующие вкус и запах агенты, разбавители, поверхностно-активные вещества и растворители для инъекций и т.д. Кроме того, если при этом эффект настоящего изобретения не ухудшается, соединение согласно настоящему изобретению или экстракт, содержащий это соединение, могут быть использованы с другими средствами, обладающими способностью улучшения состояния при резистентности к инсулину.

Хотя количество соединения согласно настоящему изобретению или экстракта, содержащего это соединение, в средстве для улучшения состояния при резистентности к инсулину согласно настоящему изобретению особенно не ограничено и может быть соответствующим образом выбрано, это количество может составлять, например, по меньшей мере 0,001 мас.%, предпочтительно, от 0,01 до 1 мас.%, особенно предпочтительно, от 0,05 до 1 мас.%, в значениях количества соединения согласно настоящему изобретению.

Средство для улучшения состояния при резистентности к инсулину согласно настоящему изобретению может предупреждать, ослаблять или лечить различные заболевания, осложнения и т.д., вызванные резистентностью к инсулину, и снижать риск таких заболеваний, осложнений и т.д. Кроме того, средство для улучшения состояния при резистентности к инсулину согласно настоящему изобретению предпочтительно может быть использовано в случае пациента, у которого резистентность к инсулину более обострена, чем резистентность к инсулину здорового человека. Более того, резистентность к инсулину обычно обозначает состояние, когда уровень инсулина в плазме натощак составляет от 10 до 15 мкЕд/мл или более, а показатель НОМА составляет 1,73 или более.

Примерами различных заболеваний, вызванных резистентностью к инсулину, являются гипертензия, гиперлипидемия, диабет и артериосклеротическое заболевание. Примерами осложнений, обусловленных резистентностью к инсулину, являются: (а) мозговой инсульт, склероз почек и почечная недостаточность, вызванная гипертензией; (b) артериосклероз и панкреатит, вызванный гиперлипидемией; (с) диабетическая ретинопатия, нефропатия, нейропатия и диабетическая гангрена, вызванные диабетом; и (d) мозговой инсульт, ишемический инсульт, сердечно-сосудистые заболевания, такие как стенокардия и инфаркт миокарда, и нейропатия, такая как уремия, склероз почек и почечная недостаточность, обусловленные артериосклеротическим заболеванием. Кроме того, авторы настоящего изобретения установили, что соединение согласно настоящему изобретению проявляет эффект снижения уровня гемоглобина А1с и улучшения гипергликемии (WO 2005/094838). Предпочтительно, чтобы заболевания, при которых применяют средство для улучшения состояния при резистентности к инсулину согласно настоящему изобретению, были заболеваниями, которые не ассоциируются с более высокими уровнями гемоглобина А1с, чем уровни у здорового человека.

Кроме того, средство согласно настоящему изобретению, которое проявляет эффект улучшения устойчивости к инсулину, как ожидается, обладает эффектом ингибирования продукции и увеличения количества адипоцитокинов, которые вызывают резистентность к инсулину, таких как TNF-α, МСР-1 и FFA. Таким образом, средство согласно настоящему изобретению обладает эффектом в отношении профилактики и/или ослабления заболеваний, вызванных названными адипоцитокинами, которые включают аутоиммунные заболевания, такие как ревматоидный артрит, болезнь Крона, воспалительные заболевания различных органов, такие как нефрит, панкреатит, гепатит и пневмонит, ангиопатия, сепсис, общее истощение при раке. Следовательно, средство для улучшения состояния при резистентности к инсулину согласно настоящему изобретению предпочтительно может быть использовано в случае больного, у которого продукция адипоцитокинов повышена, в частности в случае пациента, у которого повышена продукция адипоцитокинов, вызывающих резистентность к инсулину.

Время введения средства согласно настоящему изобретению особенно не ограничено и может быть выбрано приемлемым образом в соответствии со способом лечения реального заболевании. Кроме того, способ введения предпочтительно определяют в зависимости от дозированной лекарственной формы, возраста, пола и других состояний пациентов, серьезности симптомов у больных и т.д. Дозу активного ингредиента в средстве согласно настоящему изобретению выбирают соответствующим образом в зависимости от схемы приема лекарства, возраста и пола пациентов, серьезности заболевания, других состояний у больных и т.д. Количество соединения согласно настоящему изобретению в качестве активного ингредиента обычно выбирают из интервала предпочтительно от 0,001 до 50 мг/кг/день, более предпочтительно от 0,01 до 1 мг/кг/день, в качестве пробной дозы. Кроме того, когда используется экстракт, содержащий соединение согласно настоящему изобретению, массу сухих веществ экстракта выбирают из интервала, предпочтительно, от 0,1 до 1000 мг/кг/день, более предпочтительно, от 1 до 100 мг/кг/день, в качестве пробной дозы. В любом случае доза может быть введена один раз в день или несколько раз в день в виде поделенных частей.

Соединение согласно настоящему изобретению или композиция, содержащая соединение, могут быть добавлены к пищевому продукту или напитку (напитку или пищевому продукту) с получением пищевого продукта или напитка, обладающего эффектом улучшения состояния при резистентности к инсулину. Форма и свойства пищевого продукта или напитка особенно не ограничены, пока эффект улучшения состояния при резистентности к инсулину не падает, а пищевой продукт или напиток могут быть легко приняты внутрь и могут быть легко произведены обычным образом с использованием сырьевых материалов, обычно используемых для пищевого продукта или напитка, за исключением того, что добавляется указанный выше активный ингредиент. Количество соединения согласно настоящему изобретению или экстракта, содержащего это соединение, находящееся в пищевом продукте или напитке согласно настоящему изобретению, особенно не ограничено и может быть выбрано соответствующим образом. Например, соединение согласно настоящему изобретению или экстракт, содержащий это соединение, содержится в пищевом продукте или в напитке в количестве по меньшей мере 0,0001 мас.%, предпочтительно, от 0,001 до 1 мас.%, особенно предпочтительно, от 0,005 до 1 мас.%, в значениях количества соединения согласно настоящему изобретению.

Пищевой продукт или напиток согласно настоящему изобретению может быть приложен к различным вариантам применения, в которых используется эффект улучшения состояния при резистентности к инсулину. Например, пищевой продукт или напиток согласно настоящему изобретению может быть использован для снижения и исключения факторов риска заболеваний, связанных со стилем жизни, которые, как считается, обусловлены резистентностью к инсулину. Кроме того, пищевой продукт или напиток согласно настоящему изобретению может предупреждать заболевания, вызванные резистентностью к инсулину, такие как гипертензия, гиперлипидемия и диабет, и может снижать риск таких заболеваний. Кроме того, пищевой продукт или напиток согласно настоящему изобретению может предупреждать различные осложнения, вызванные резистентностью к инсулину, такие как мозговой инсульт, склероз почек, почечная недостаточность, вызванная гипертензией, артериосклероз, панкреатит и т.д., обусловленные гиперлипидемией, диабетическая ретинопатия, нефропатия, нейропатия, диабетическая гангрена, вызванная диабетом, мозговой инсульт, ишемический инсульт, сердечно-сосудистые заболевания, такие как стенокардия и инфаркт миокарда, и нефропатия, такая как уремия, склероз почек и почечная недостаточность, обусловленная артериосклеротическим заболеванием, и может снижать риск таких заболеваний.

Кроме того, пищевой продукт или напиток согласно настоящему изобретению, как ожидается, проявляет эффект в отношении ингибирования продукции и повышения количества адипоцитокинов, которые вызывают резистентность к инсулину, таких как TNF-α, МСР-1 и FFA. Таким образом, средство согласно настоящему изобретению обладает эффектом в отношении профилактики заболеваний и снижения риска таких заболеваний, вызванных повышением количества названных адипоцитокинов, которые включают аутоиммунные заболевания, такие как ревматоидный артрит, болезнь Крона, воспалительные заболевания в различных органах, такие как нефрит, панкреатит, гепатит и пневмонит, ангиопатия, сепсис, общее истощение при раке. Следовательно, пищевой продукт или напиток согласно настоящему изобретению предпочтительно может быть принят внутрь пациентом, у которого продукция указанных адипоцитокинов повышена, в частности пациентом, у которого повышена продукция адипоцитокинов, вызывающих резистентность к инсулину.

Пищевой продукт или напиток согласно настоящему изобретению предпочтительно поставляют в виде пищевого продукта или напитка, снабженного указанием, что пищевой продукт или напиток используется для улучшения состояния при резистентности к инсулину: например, «пищевой продукт или напиток, содержащий соединение, проявляющее эффект улучшения состояния при резистентности к инсулину, обозначенный как «для улучшения состояния при резистентности к инсулину»; «пищевой продукт или напиток, содержащий растительный экстракт, обозначенный как «для улучшения состояния при резистентности к инсулину»; «пищевой продукт или напиток, содержащий экстракт Aloe vera, обозначенный как «для улучшения состояния при резистентности к инсулину» и т.д. Кроме того, так как соединение согласно настоящему изобретению и композиция и т.д., содержащая это соединение, проявляют эффект улучшения состояния при резистентности к инсулину, указание на «улучшение состояния при резистентности к инсулину», таким образом, также рассматривается как обозначающее повышение чувствительности к инсулину. Следовательно, пищевой продукт или напиток согласно настоящему изобретению может быть представлен как «Для повышения чувствительности к инсулину». Другими словами, показание «Для улучшения состояния при резистентности к инсулину» может быть заменено показанием «Для повышения чувствительности к инсулину».

Выражение, используемое для показания по применению, рассмотренного выше, не ограничено выражением «Для улучшения состояния при резистентности к инсулину» или «Для повышения чувствительности к инсулину». Другие выражения также подпадают под объем согласно настоящему изобретению, пока такие выражения уведомляют об эффекте повышения чувствительности к инсулину или об эффекте предупреждения или улучшения резистентности к инсулину. В случае таких выражений показания для применения основаны на различных вариантах применения, которые уведомляют потребителей, что пищевой продукт или напиток обладает эффектом улучшения состояния при резистентности к инсулину или эффектом повышения чувствительности к инсулину. Примерами таких показаний являются следующие выражения: «Подходит для тех, кто склонен к резистентности к инсулину» и «Полезен для снижения или исключения факторов риска (риска) заболеваний, связанных с образом жизни».

Приведенное выше определение «показание для применения» включает все действия по информированию потребителей приведенного выше варианта применения, и любое показание, напоминающее об этом или аналогичное приведенному выше применению, подпадает под объем «показание для применения» согласно настоящему изобретению независимо от цели, содержания, конкретного изделия, средства реализации и т.д. показания. Однако показание к применению предпочтительно реализуется с помощью выражения, которое дает возможность потребителю непосредственно распознать указанное выше применение. Конкретные примеры включают действия по обозначению рассмотренного выше применения на товарах или упаковках товаров, относящихся к пищевым продуктам или напиткам согласно настоящему изобретению; действия по ассигнованию, производству, презентации с целью ассигнования или производства, или импортирования таких товаров или упаковок товаров, указывающих на упомянутые выше варианты применения; презентация или распространение рекламы, прайс-листов или торговых затрат, относящихся к товарам, указывающих на приведенное выше применение; или предоставление информации, включающей эти данные в качестве содержания, указывающей на приведенные выше варианты применения с помощью электромагнитного способа (Интернет и др.) и т.д. С другой стороны, показание для применения предпочтительно представляет собой показание, одобренное правительством и др. (например, показание в форме одобрения, которое отвечает требованиям любой из различных правовых систем, предложенных правительством); и особенно предпочтительно показание для применения на рекламных материалах в местах продаж, таких как упаковки, контейнеры, каталоги, проспекты и протоколы (РОРs), другие документы и т.д.

Примерами показания для применения являются показания для применения в качестве здорового продукта, функционального продукта, энтерального питательного продукта, продукта для специального диетического применения, пищевого продукта с заявленной питательной функцией, квази-лекарства и т.д.; а также показания для применения, одобренные Министерством здравоохранения, труда и социального обеспечения, например, показания к применению, одобренные на основе системы питания для специального применения для здоровья и аналогичных систем. Примерами последних являются показания для применения в качестве продукта для специального потребления для здоровья, показания для применения в качестве продукта для специального потребления для здоровья с уточненными требованиями по состоянию здоровья, указания по влиянию на структуры и функции организма, информация о снижении риска заболеваний и т.д.; и более точно, типичными примерами являются показания для применения в качестве пищевого продукта для специального потребления для здоровья (особенно указание на применение для поддержания здоровья), созданные под давлением предписаний закона, стимулирующего здоровый образ жизни (Health Promotion Low) (Министерство здравоохранения, труда и социального обеспечения Японии, Ministerial Ordinance № 86, April 30, 2003), и аналогичные указания к применению.

Настоящее изобретение более конкретно будет объяснено со ссылкой на следующие примеры. Однако объем настоящего изобретения не ограничен приведенными ниже примерами.

Во-первых, изобретение рассмотрено с помощью примера получения, в котором соединение или композиция согласно настоящему изобретению могут быть получены из растения, принадлежащего семейству Liliaceae.

Пример получения 1

В количестве 100 кг мезофилл (часть чистого геля) Aloe vera разжижают с использованием гомогенизатора, доводят до объема 100 л смесью этилацетат/бутанол (3:1) и перемешивают.

Смесь оставляют стоять в течение ночи, и затем смесь этилацетат/бутанол и водный слой разделяют с выделением смеси этилацетат/бутанол. Экстракт из смеси этилацетат/бутанол, полученный концентрированием смеси этилацетат/бутанол при пониженном давлении, весит 13,5 г. Раствор 13 г полученного экстракта, растворенного в 1 мл смеси хлороформ/метанол (1:1), загружают на колонку, заполненную 400 г силикагеля (Silica Gel 60, Merck Ltd.), для достижения адсорбции компонентов на колонке; затем компоненты элюируют смесью хлороформ/метанол с помощью метода ступенчатого градиента, в котором концентрацию метанола ступенчато повышают (соотношения смешения хлороформ:метанол = 100:1, 25:1, 10:1, 5:1 и 1:1), и элюат фракционируют для каждого соотношения смешения упомянутой смеси. C помощью тонкослойной хроматографии с нормальной фазой и обращенной фазой (Merck Ltd., Silica Gel 60F254 и RP-18F2543) подтверждено, что из указанных фракций соединение согласно настоящему изобретению присутствует во фракции, элюированной смесью хлороформ:метанол = 25:1.

Полученное сырое очищенное вещество (продукт сырой очистки 1), содержащее соединение согласно настоящему изобретению, имеет массу 3 г. Кроме того, выход продуктов сырой очистки, полученных в приведенной выше операции из фракций, элюированных смесями хлороформ:метанол = 10:1 и 1:1, составляет 1,17 и 2,27 г, соответственно. Растворители из этих фракций удаляют, затем каждый экстракт растворяют в 1 мл смеси хлороформ/метанол (1:1) и загружают на колонку, наполненную 100 г Silica Gel 60, чтобы обеспечить адсорбцию компонентов на колонке; и затем компоненты элюируют с помощью 1100 мл смеси гексан/этилацетат (4:1). Элюированные фракции собирают в виде аликвот объемом 300 мл (фракция А), 300 мл (фракция В) и 500 мл (фракция С) в указанном порядке. Выход, полученный после удаления растворителей из фракций А, В и С, составляет 0,6 г, 1,35 г и 0,15 г соответственно. C помощью тонкослойной хроматографии с нормальной фазой и обращенной фазой подтверждено, что соединение согласно настоящему изобретению сконцентрировано во фракции А (продукт сырой очистки 2). Указанный продукт сырой очистки 2 дополнительно разделяют с помощью ВЭЖХ с использованием COSMOSIL C18 (Nacalai Tesque, Inc.) и смеси хлороформ/гексан (85:15), получают 1,3 мг соединения 3 (4-метилхолест-7-ен-3-ол), 1,2 мг соединения 4 (4-метилэргост-7-ен-3-ол) и 1 мг соединения 5 (4-метилстигмаст-7-ен-3-ол). Структуры этих соединений подтверждены данными МС и ЯМР.

Пример 1

Рассматриваемый пример проведен с использованием мышей AKR, у которых индуцирована резистентность к инсулину путем кормления мышей пищей с высоким содержанием жиров, с целью оценки изменения в уровне свободных жирных кислот (FFA) в сыворотке крови, которое вызывает средство согласно настоящему изобретению для улучшения состояния при резистентности к инсулину.

(1) Приготовление образцов

Соединение 3 (4-метилхолест-7-ен-3-ол), соединение 4 (4-метилэргост-7-ен-3-ол) и соединение 5 (4-метилстигмаст-7-ен-3-ол), которые получены в примере получения 1, каждое растворяют в ДМСО, и раствор доводят с помощью дистиллированной воды так, чтобы каждое соединение имело концентрацию 1 мкг/мл с получением в результате образцов для испытания 1, 2 и 3. В этом случае количество ДМСО подгоняют так, чтобы конечная концентрация составляла 0,2%. Кроме того, готовят раствор без испытуемого образца в качестве отрицательного образца.

(2) Метод испытания

Самцов мышей AKR 6-недельного возраста (приобретенных у фирмы The Jackson Laboratory, US) предварительно кормят высокожирной пищей (Research Diet Inc.) в течение 2 месяцев, чтобы индуцировать резистентность к инсулину. Затем мышей разделяют на группы по 8 мышей в каждой. Каждой группе мышей перорально вводят 1 мл из расчета на 40 г массы тела (25 мкг/кг массы тела) испытуемого образца или отрицательного образца один раз в день с использованием зонда. Через 60 дней от начала введения образцов у мышей натощак отбирают кровь и измеряют уровень свободной жирной кислоты в сыворотке с использованием NEFA C-Test Wako (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.).

(3) Результаты (уровень свободной жирной кислоты в крови)

В таблице 1 представлен уровень свободной жирной кислоты в сыворотке мышей через 60 дней после начала введения. По сравнению с группой, которой вводится отрицательный образец, видно, что введение испытуемых образцов 1, 2 и 3 имеет тенденцию снижать уровни свободной жирной кислоты в сыворотке до значений 86,4%, 81,6% и 60,8%, соответственно. Следовательно, установлено, что введение средства для улучшения состояния при резистентности к инсулину согласно настоящему изобретению снижает систематические концентрации свободной жирной кислоты и оказывает превентивный эффект на ухудшение резистентности к инсулину.

Таблица 1 Образец Свободная жирная кислота (mEp/l) Испытуемый образец/отрицательный образец (%) Испытуемый образец 1 1,35±0,23 84,5 Испытуемый образец 2 1,21±0,22 81,6 Испытуемый образец 3 0,90±0,15 60,8 Отрицательный образец 1,48±0,17 -

Пример 2

Этот пример проведен с использованием мышей AKR, у которых индуцирована резистентность к инсулину путем кормления мышей пищей с высоким содержанием жиров, чтобы оценить влияние средства для улучшения состояния при резистентности к инсулину согласно настоящему изобретению на продукцию TNF-α и МСР-1 из соответствующих клеток жировых тканей.

(1) Приготовление образцов

В примере 2 используют те же образцы для испытаний и отрицательный образец, что и образцы, приготовленные в примере 1.

(2) Метод испытания

Самцов мышей AKR 6-недельного возраста (приобретенных у фирмы The Jackson Laboratory, US) предварительно кормят высокожирной пищей (Research Diet Inc.) в течение 2 месяцев, чтобы индуцировать резистентность к инсулину. Затем мышей разделяют на группы по 8 мышей в каждой. Каждой группе мышей перорально вводят 1 мл из расчета на 40 г массы тела (25 мкг/кг массы тела) испытуемого образца или отрицательного образца один раз в день с использованием зонда. Через 60 дней от начала введения образцов у мышей натощак собирают эпидидимальные жировые ткани, и 1 г каждого из жиров дополняют 1,5 мл среды D-MEM/F12, содержащей 0,5% бычьего сывороточного альбумина, после чего культивируют при 37°С. Через 1 час культивирования собирают культуральные надосадочные жидкости, и в культуральных надосадочных жидкостях с помощью ELISA (Biosource) измеряют концентрации TNF-α и МСР-1.

(3) Результаты (количества продуцированных TNF-α и МСР-1)

В таблице 2 представлено количество TNF-α, продуцированное жировыми тканями, а в таблице 3 представлено количество МСР-1, продуцированное жировыми тканями. Из полученных результатов видно, что группы, которым вводились испытуемые образцы 1, 2 и 3, соответственно, проявляют значительные ингибирующие эффекты на продукцию как TNF-α, так и МРС-1 по сравнению с группой мышей, которым вводился отрицательный образец. В результате данного примера установлено, что введение средства для улучшения состояния при резистентности к инсулину согласно настоящему изобретению снижает продукцию адипоцитокинов, которые вызывают резистентность к инсулину, в жировых тканях и улучшает состояние при резистентности к инсулину, и, таким образом, предупреждает возникновение резистентности к инсулину. Кроме того, величины р в таблице указывают на значительную достоверность по Tukey-Kramer тесту.

Таблица 2 Образец TNF-α
(пг/мл) Значение р Испытуемый образец 1 33,73±1,68* 0,0450 Испытуемый образец 2 32,71±1,70* 0,0170 Испытуемый образец 3 29,80±3,82* 0,0157 Отрицательный образец 37,89±2,56 - В этой таблице «*» указывает на то, что имеет место статистически значимый ингибирующий эффект на продуцирование TNF-α. Таблица 3 Образец МСР-1
(пг/мл) Значение р Испытуемый образец 1 100,86±8,31* 0,0154 Испытуемый образец 2 95,56±10,56* 0,0043 Испытуемый образец 3 87,80±9,24* 0,0017 Отрицательный образец 122,92±10,06 - В этой таблице «*» указывает на то, что имеет место статистически значимый ингибирующий эффект на продукцию МСР-1.

Пример 3

Этот пример проведен с использованием мышей AKR, у которых индуцирована резистентность к инсулину путем кормления мышей пищей с высоким содержанием жиров, чтобы с помощью проведения теста на переносимость инсулина подтвердить усиливающий эффект средства для улучшения состояния при резистентности к инсулину согласно настоящему изобретению на чувствительность к инсулину.

(1) Приготовление образцов

В примере 3 используют те же образцы для испытаний и отрицательный образец, что и образцы, приготовленные в примерах 1 и 2.

(2) Метод испытания

Самцов мышей AKR 6-недельного возраста (приобретенных у фирмы The Jackson Laboratory, US) предварительно кормят высокожирной пищей (Research Diet Inc.) в течение 2 месяцев, чтобы индуцировать резистентность к инсулину. Затем мышей разделяют на группы по 8 мышей в каждой. Каждой группе мышей перорально вводят 1 мл из расчета на 40 г массы тела (25 мкг/кг массы тела) испытуемого образца или отрицательного образца один раз в день с использованием зонда. Через 45 дней от начала введения образцов проводят тест на переносимость инсулина. Тест на переносимость инсулина в этом примере проводят таким образом: мышей не кормят в течение 4 часов и затем внутрибрюшинно вводят 0,75 Ед/кг массы тела человеческого инсулина (Eli Lily and Company); изменения во времени в уровне глюкозы в крови измеряют от начала введения инсулина до 60 минут после введения.

Пример 4

Для получения напитка 56 кг экстракта Алоэ, содержащего 0,0001 мас.% 4-метилэргост-7-ен-3-ола, помещали в смесительную емкость с предварительной фильтрацией через сито 20 меш. Далее, 43,9 кг воды, 80 г лимонной кислоты, 3 г сукралозы и 5 г ацесульфата калия (Sunett) добавляли в смесительную емкость и смешивали. Затем, 60 г ароматизатора добавляли к смеси и термически стерилизовали при 97°С в течение 30 секунд. Стерилизованную смесь помещали в цилиндрический контейнер из картона объемом 125 мл и герметизировали.

Описано фармацевтическое средство или напиток/пищевой продукт, которые могут ингибировать продукцию адипоцитокина, в особенности адипоцитокина, который может индуцировать резистентность к инсулину, что в результате предупреждает или облегчает случаи болезненного состояния, связанного с резистентностью к инсулину. Фармацевтическое средство или напиток/пищевой продукт содержит в качестве активного ингредиента соединение, выбранное из группы, состоящей из 4-метилхолест-7-ен-3-ола, 4-метилэргост-7-ен-3-ола и 4-метилстигмаст-7-ен-3-ола или экстракта растения, принадлежащего к семейству Liliaceae, органическим растворителем или горячей водой, содержащее по меньшей мере 0,001 мас.% соединения. 5 н. и 2 з.п.ф-лы, 3 табл., 1 ил.

1. Средство для улучшения состояния при резистентности к инсулину, которое в качестве активного ингредиента включает соединение, выбранное из группы, состоящей из 4-метилхолест-7-ен-3-ола, 4-метилэргост-7-ен-3-ола и 4-метилстигмаст-7-ен-3-ола.

2. Средство для улучшения состояния при резистентности к инсулину по п.1, которое содержит по меньшей мере 0,001 мас.% указанного выше соединения.

3. Средство для улучшения состояния при резистентности к инсулину, включающее экстракт органическим растворителем или экстракт горячей водой растения Liliaceae или его части, который содержит соединение, выбранное из группы, состоящей из 4-метилхолест-7-ен-3-ола, 4-метилэргост-7-ен-3-ола и 4-метилстигмаст-7-ен-3-ола, где экстракт органическим растворителем или экстракт горячей водой растения Liliaceae или его части содержит в качестве активного ингредиента композицию, содержащую по меньшей мере 0,001 мас.% соединения.

4. Пищевой продукт или напиток, содержащий средство для улучшения состояния при резистентности к инсулину по любому из пп.1-3.

5. Пищевой продукт или напиток по п.4, который содержит по меньшей мере 0,0001 мас.% соединения.

6. Применение соединения, выбранного из группы, состоящей из 4-метилхолест-7-ен-3-ола, 4-метилэргост-7-ен-3-ола и 4-метилстигмаст-7-ен-3-ола или экстракта органическим растворителем или экстракта горячей водой растения Liliaceae или его части, который содержит по меньшей мере 0,001 мас.% соединения, для получения средства для улучшения состояния при резистентности к инсулину.

7. Способ улучшения состояния при резистентности к инсулину, включающий введение соединения, выбранного из группы, состоящей из 4-метилхолест-7-ен-3-ола, 4-метилэргост-7-ен-3-ола и 4-метилстигмаст-7-ен-3-ола или экстракта органическим растворителем или экстракта горячей водой растения Liliaceae или его части, который содержит по меньшей мере 0,001 мас.% соединения, пациенту, резистентность к инсулину которого необходимо уменьшить.