СПОСОБ ЭКСПРЕСС-ОЦЕНКИ ПРОМЫВОЧНОЙ АКТИВНОСТИ ЛЕКАРСТВ Российский патент 2010 года по МПК G01N33/15 

Изобретение относится к медицине, в частности к клинической фармакологии, хирургии и фтизиатрии, и может быть использовано для срочной оценки промывочной активности антисептических средств, предназначенных для промывания закрытых полостей от густого гноя.

Известен способ моделирования санации гнойных полостей, включающий введение с помощью стандартного подключичного катетера по 5 мл водного раствора, содержащего 3% перекиси водорода, 0,05% антифибрина, 2% натрия хлорида и двуокиси углерода до создания избыточного давления в 0,2 атм при 32, 37 и 42°С в область дна стеклянных пробирок объемом по 20 мл, заполненных наполовину серозно-гнойным содержимым из плевральной полости и находящихся вертикально в лабораторном штативе, после чего производится анализ газообразования и перемещения гнойных масс в них (Уракова Н.А. и соавт. Гипергазированность, гипербаричность, гиперосмолярность, гипертермичность, гиперщелочность и высокая поверхностная активность раствора как факторы повышения его промывочной активности. - Химическая физика и мезоскопия. - 2007. - Т.9. - №3. - С.260-261).

Недостатком данного способа является высокая трудоемкость, низкая безопасность, скорость и точность экспресс-оценки промывочной активности лекарственных средств вследствие необходимости использования серозно-гнойного содержимого, взятого из плевральной полости больного, устройств для подогревания и термостатирования сред при нескольких температурных режимах, а также вследствие отсутствия объективной оценки разжижающей активности лекарств.

Низкая безопасность обусловлена использованием патогенного биоматериала и тем, что из-за газообразования вследствие наличия 3% перекиси водорода и гейзерообразования вследствие наличия двуокиси углерода с избыточным давлением в 0,2 атм возможно выбрасывание и/или разбрызгивание из пробирок мелких фрагментов серозно-гнойного содержимого, изъятого из плевральной полости больного. Появление брызг ведет к заражению патогенной микрофлорой воздушно-капельным путем окружающей атмосферы и персонала, проводящего исследование. В связи с этим применение способа опасно заражением не только участников, но и посторонних людей. Кроме этого, способ для своей реализации требует специальных условий и дополнительного обеззараживания лаборатории после его применения, что повышает трудоемкость и стоимость способа.

Высокая трудоемкость обусловлена необходимостью термостатирования реагирующих сред при нескольких температурных режимах, а именно - строго при 32, 37 и 42°С, тогда как при лабораторных исследованиях комнатная температура растворов и оборудования находится обычно в диапазоне 24-26°С. Поэтому способ предусматривает первоначальное нагревание, а затем поддержание в нагретом виде пробирок, катетера и всех реагирующих сред, что значительно удлиняет, усложняет процедуру исследования, повышает энергозатраты на его проведение, ведет к повышению стоимости и трудоемкости.

Низкая точность экспресс-оценки промывочной активности растворов лекарственных средств обусловлена отсутствием условий для объективного выявления разжижающей способности препаратов по отношению к густому гною. Кроме этого, использование серозно-гнойного содержимого, изъятого из плевральной полости пациентов, снижает точность исследования из-за отсутствия стандарта качества применяемого биоматериала (гноя). В итоге в каждой пробирке оказывается порция гноя различного качества, что снижает точность проводимых исследований и исключает повторяемость результатов.

Известен способ проведения экспертизы качества лекарственных форм для инъекций (растворов для инъекций) (Практическое руководство по регистрации лекарственных средств. - М.: Информационно-издательское агентство «Ремедиум», 2001. - С.73-76, 161-192) посредством экспертизы соответствия их показателей качества требованиям фармакопейных статей.

Недостатком данного способа является низкая точность определения промывочной активности препаратов из-за отсутствия показателя качества лекарственных средств в виде их разжижающей активности.

При оценке качества лекарств, применяемых для промывания закрытых гнойных полостей нашего организма, разжижающая активность препаратов не учитывается и не оценивается. Более того, промывание гнойных полостей производится растворами, созданными не для этих целей. В частности, при туберкулезных эмпиемах плевры фтизиатры промывают полости дезинфицирующими или антисептическими средствами, предназначенными для наружного применения, либо плазмозамещающими растворами, предназначенными для инъекционного введения. Поэтому вводимые в гнойные полости растворы могут иметь показатели качества в рамках стандарта «растворов для наружного применения» либо в рамках стандарта «растворов для инъекций». В этих условиях часть антисептических средств (например, Ахдез 3000) лишена гноеразжижающей активности, более того уплотняет гной за счет наличия в своем составе этилового спирта, поэтому имеет низкую промывочную активность при промывании гнойных полостей и высокую локальную токсичность для слизистых оболочек за счет денатурирующей активности. Другая часть препаратов (например, такой плазмозамещающий раствор, как раствор 0,9% натрия хлорида) не разжижает гной, кровь и иные ткани, но и не уплотняет их, поэтому эта часть препаратов отличается низкой промывочной активностью при промывании гнойных полостей и высоко безопасна для здоровых тканей. Некоторые лекарства могут обладать выраженной гноеразжижающей активностью, обеспечивающей им высокую промывочную активность при промывании полостей, заполненных густым гноем.

Кроме этого, в соответствии с общепринятыми способами оценки качества каждое лекарственное средство, предназначенное для инъекционного введения, производится в соответствии только с одним стандартом качества, принятым для растворов для инъекций независимо от перечня тканей нашего организма, в которые рекомендуется введение препарата, включая гнойную ткань внутри закрытой полости. В то же время процессы разжижения гноя требуют иную степень прямого физико-химического воздействия препаратов при введении их в закрытую гнойную полость, чем процессы плазмозамещения при введении препаратов в кровь, находящуюся внутри кровеносного русла. Поэтому даже подтвержденное высокое качество препаратов и выявляемая высокая эффективность их при внутривенном введении не гарантируют проявление достаточной гноеразжижающей активности и отсутствие локальной токсичности для здоровых тканей при введении в закрытую гнойную полость пациента.

В соответствии с указанными стандартами качества многие растворы лекарственных средств, предназначенные для инъекционного и наружного применения, содержат, помимо основных действующих веществ, различные стабилизирующие, консервирующие и вспомогательные средства, каждое из которых при определенной концентрации может обладать неспецифической гноеразжижающей или гноеуплотняющей активностью. Поэтому после введения в закрытую гнойную полость растворов лекарственных средств, произведенных некоторыми заводами-изготовителями в полном соответствии с требованиями отдельных фармакопейных статей, возможно отсутствие разжижения гноя и промывочной активности.

Целью изобретения является снижение трудоемкости, повышение безопасности, скорости и качества экспертизы растворов лекарственных средств за счет экстренного получения дополнительной информации о наличии у них потенциальной гноеразжижающей активности.

Сущность изобретения заключается в том, что анализ соответствия показателей качества растворов для инъекций требованиям фармакопейных статей дополняют лабораторным исследованием при определенном температурном режиме, включающем введение по 5 мл исследуемых растворов в область дна стеклянных пробирок объемом по 20 мл, находящихся вертикально в лабораторном штативе и заполненных наполовину биоматериалом с последующим перемешиванием и анализом его состояния, способ отличается тем, что исследование проводится при комнатной температуре, в качестве биоматериала используется обезжиренный творог, процеженный через сито с диаметром отверстий 1 мм, растворы вводятся с помощью шприца с инъекционной иглой, перемешивание осуществляется путем однократного забора в шприц с иглой, имеющей внутренний просвет диаметром более 1 мм, с области дна всего содержимого и его последующего обратного выливания, по истечении 10 минут визуально в проходящем свете анализируется состояние прозрачности смеси растворов с творогом в пробирках и на сите сразу после выливания ее на него, а при отсутствии разделения сред и белых крупиц судят о высокой промывочной активности растворов.

Проведение лабораторного исследования при комнатной температуре снижает трудоемкость способа, поскольку не требует нагревания или охлаждения до определенного температурного режима реагирующих сред и инструментов. Кроме этого, проведение исследования только при комнатной температуре ускоряет получение результатов, поскольку позволяет немедленно применять все реагирующие среды без затрат времени на проверку их первоначальной и последующей температуры, а также без затрат времени на подогревание или охлаждение до определенного температурного режима.

Использование в качестве биоматериала обезжиренного творога, процеженного через сито с диаметром отверстий 1 мм, повышает безопасность и точность способа, поскольку такой биоматериал лишен патогенной микрофлоры, безопасен для персонала и стандартизирован по физико-химическому составу, поэтому позволяет получать сравнимые и точные результаты, разброс значений которых не зависит от физико-химического состояния биоматериала. При этом густой гной и творог представляют собой густую биомассу, образующуюся путем бактериальной переработки жидкой ткани животного происхождения, поэтому биологическая и физико-химическая природа вязкости густого гноя и творога в принципе едина, что обеспечивает высокую сопоставимость гноеразжижающей и творогоразжижающей активностей препаратов.

Использование шприца с инъекционной иглой, имеющий внутренний просвет диаметром более 1 мм, для введения исследуемых растворов в область дна пробирок, содержащих творог, и для перемешивания их друг с другом путем забора всего содержимого с области дна и его последующего обратного выливания, направлено на снижение трудоемкости и повышение скорости получения результатов экспресс-оценки потенциальной гноеразжижающей активности, поскольку позволяет быстро и не трудоемко осуществлять способ в лабораторных условиях. При этом использование инъекционной иглы с диаметром внутреннего просвета более 1 мм обеспечивает забор в шприц не только раствора, но и всей массы измельченного творога, что обеспечивает эффективное перемешивание их друг с другом и обратное выливание смеси в пробирку. Однократное перемешивание достаточно для эффективного взаимодействия всего объема исследуемого раствора со всей массой процеженного творога, а также обеспечивает низкую трудоемкость способа и направлено (за счет стандартизированности процесса перемешивания) на повышение точности исследования.

Осуществление анализа состояния биоматериала не ранее, чем через 10 минут после смешивания с раствором лекарственного средства обеспечивает надежное выявление препаратов, обладающих потенциальной гноеразжижающей активностью, которые за этот период взаимодействия способны полностью разжижать творог, изменяя его физическое состояние из крупиц белого цвета в бесцветный гель. Проведение анализа позже этого времени также обеспечивает получение желаемого результата, поскольку творог остается разжиженным длительное время. Однако откладывание анализа на существенный промежуток времени замедляет скорость получения результата.

Визуальный анализ в проходящем свете состояния прозрачности смеси растворов с творогом в пробирках и на сите сразу после выливания смеси на него обеспечивает снижение трудоемкости и повышение скорости экспресс-оценки промывочной активности препаратов за счет простоты технологии и высокой скорости получения результата, который может быть получен практически тут же. Дело в том, что при наличии у раствора низкой разжижающей активности крупицы творога останутся за этот период взаимодействия с ним без изменения, что снижает прозрачность смеси и белую непрозрачную массу творога можно увидеть в пробирках как до, так и после выливания смеси. При этом в пробирке до выливания смеси творог выглядит в виде суспензии белого цвета, а после выливания смеси из пробирки ее стенки остаются покрытыми крупицами белого цвета и пробирка выглядит белой и непрозрачной. Причем в пробирке возможно разделение сред на среду из раствора и среду из творога. Выливание смеси на сито с ячейками 1 мм позволяет продублировать анализ состояния прозрачности смеси и повысить качество экспресс-оценки, поскольку в случае отсутствия разделения сред в пробирке при низкой разжижающей активности испытуемого раствора и при наличии сомнений относительно разжижающей активности раствора, разделение сред произойдет автоматически, во-первых, в пробирке при выливании смеси, во-вторых, на сите. При выливании смеси творога с испытуемым раствором со слабой разжижающей активностью на стенках пробирки остаются крупицы белого цвета, а раствор стекает. На сите раствор также просачивается сквозь сито и творог остается на сите в виде белой массы.

При высокой разжижающей активности растворов лекарственных средств они полностью разжижают творог, превращая его в прозрачный гель, поэтому через 10 минут взаимодействия их друг с другом смесь становится более прозрачной и крупицы белого цвета исчезают. За счет разжижения и набухания крупиц они увеличиваются в объеме и трансформируются в гель, который заполняет собой весь объем сред. В связи с этим явление разделения сред при визуальном анализе прозрачности становится невидимым. Полное разжижение творога превращает его белые крупицы в бесцветный гель, что проявляется исчезновением белых крупиц в пробирке и на сите сразу после выливания смеси на него. Поэтому отсутствие разделения сред и белых крупиц в пробирке и на сите позволяет судить о высокой промывочной активности раствора, которая обеспечивается высокой его разжижающей активностью по отношению к творогу. Поскольку физико-химическое состояние и биологическое качество творога и гноя сопоставимы, растворы с высокой промывочной активностью по отношению к творогу обладают высокой промывочной активностью по отношению к густому гною.

Пример. Пациент П., 43 лет, поступил в туберкулезный диспансер с деструктивной пневмонией и наличием эмпиемы плевры справа. С целью лечения гнойной эмпиемы плевры было выполнено дренирование плевральной полости. Попытка эвакуации из нее гнойного содержимого завершилась удалением всего 50 мл густого гнойного содержимого грязно-коричневого цвета с гнилостным запахом. Последующее промывание полости раствором фурациллина в разведении 1:5000 с помощью шприца объемом 200 мл выявило наличие прожилок густого гноя в практически прозрачном объеме эвакуируемого раствора. На этом основании было сделано заключение о наличии в полости густого гноя, о низкой промывочной активности используемого раствора и о необходимости промывания полости препаратом, который бы обладал высокой промывочной активностью.

Для выбора препарата, способного эффективно промыть полость, заполненную густым гноем, решено было провести экспресс-оценку потенциальной гноеразжижающей активности нескольких препаратов: раствора 0,9% натрия хлорида, 1:5000 фурациллина, 4% аламинола, 1,5% лизоформина, 2% Пюржавеля, 4% натрия гидрокарбоната и Ахдеза 3000. С этой целью были использованы стеклянные пробирки объемом по 20 мл, каждую из которых наполовину заполнили процеженным сквозь сито с диаметром ячеек 1 мм свежим обезжиренным (массовая доля жира 2,0%) творогом «Био Баланс» (Производитель: ОАО «Перммолоко», филиал Молочный Комбинат «Компания ЮНИМИЛК»), а затем в область дна каждой из них поочередно прилили по 5 мл каждого из испытуемых растворов с помощью шприца и инъекционной иглы с диаметром отверстия 1,4 мм. При этом сразу после вливания каждого раствора в пробирку тут же произвели забор всей смеси в шприц и выливание ее обратно в пробирку. Через 10 мин после вливания первого раствора начали поочередный анализ в проходящем свете прозрачности смесей растворов с творогом сначала в пробирках, затем в пробирках после выливания на сито и на сите тут же после выливания на него каждой смеси. Оказалось, что все пробирки за исключением пробирки, в которую был влит раствор 4% натрия гидрокарбоната, имели белый цвет и низкую прозрачность из-за наличия крупиц белого цвета в виде суспензии, частично осевшей в нижней части пробирок. Пробирка с раствором 4% натрия гидрокарбоната была лишена белой суспензии и выглядела бесцветной и достаточно прозрачной. После выливания смесей на сито на нем и на стенках всех пробирок за исключением пробирки с раствором 4% натрия гидрокарбоната остались крупицы белого цвета. После выливания смеси с раствором 4% натрия гидрокарбоната пробирка осталась прозрачной и лишенной крупиц белого цвета. Не было крупиц и на сите, на которое было вылито содержимое. Оно выглядело в виде прозрачного геля. На этом основании было сделано заключение о высокой промывочной активности раствора 4% натрия гидрокарбоната.

Затем указанная процедура осуществлялась 1 раз в день ежедневно на протяжении месяца. При этом на протяжении 3-х недель лечения сохранялось обильное гнойное отделяемое из дренажей. Проведенное рентгеновское исследование грудной клетки выявило почти полное расправление правого легкого и значительное уменьшение гнойной полости. Через месяц гнойная полость исчезла. Больной был выписан в удовлетворительном состоянии.

Изобретение относится к медицине, в частности к лабораторным методам исследования, и может быть использовано для срочной оценки промывочной активности растворов антисептических средств, предназначенных для промывания закрытых полостей от густого гноя. Сущность способа заключается в том, что при комнатной температуре вводят по 5 мл исследуемых растворов в область дна стеклянных пробирок со свежим обезжиренным творогом, процеженным через сито с размером ячеек 1 мм, внесенным в стеклянные пробирки. По истечении не менее 10 минут анализируют в проходящем свете прозрачность смеси растворов с творогом в пробирках и на сите сразу после выливания ее на него. При отсутствии разделения сред и белых крупиц судят о высокой промывочной активности раствора. Использование способа способствует снижению трудозатрат, повышению безопасности, скорости и качества экспертизы растворов лекарственных средств за счет срочного выявления потенциальной гноеразжижающей активности.

Способ экспресс-оценки промывочной активности антисептических средств, предназначенных для промывания закрытых полостей от густого гноя, включающий анализ соответствия показателей качества растворов для инъекций требованиям фармакопейных статей, лабораторное исследование при определенном температурном режиме посредством введения по 5 мл исследуемых растворов в область дна стеклянных пробирок объемом по 20 мл, находящихся вертикально в лабораторном штативе и заполненных наполовину биоматериалом с последующим перемешиванием и анализом его состояния, отличающийся тем, что исследование проводят при комнатной температуре, в качестве биоматериала используют обезжиренный творог, процеженный через сито с диаметром отверстий 1 мм, растворы вводят с помощью шприца с инъекционной иглой, перемешивание осуществляют путем однократного забора в шприц с иглой, имеющей внутренний просвет диаметром более 1 мм, с области дна всего содержимого и его последующего обратного выливания, по истечении 10 минут визуально в проходящем свете анализируют прозрачность смеси растворов с творогом в пробирках и на сите сразу после выливания ее на него, а при отсутствии разделения сред и белых крупиц судят о высокой промывочной активности раствора.