ПРЕПАРАТ И СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ И КОРРЕКЦИИ ПАТОЛОГИЧЕСКИХ СОСТОЯНИЙ ЖИВОТНЫХ НА ЕГО ОСНОВЕ Российский патент 2010 года по МПК A61K31/00 A61K31/195 A61K31/375 A61K31/455 A61K31/505 A61K31/525 A61K33/14 A61K33/26 A61P3/00 A61P43/00 

Изобретение относится к препаратам и способам профилактики и лечения гипоавитаминозов, нормализации обмена веществ, повышения резистентности организма, при интоксикациях сельскохозяйственных и домашних животных и может быть использовано в ветеринарии.

В ветеринарной практике у животных часто наблюдаются симптомы дефицита целого ряда витаминов, чему способствует несбалансированное и неполноценное кормление, нарушение пищеварения, воздействие различных стрессов, а также факторов, порожденных высокими технологиями выращивания животных. Для профилактики авитаминозов необходимо применение витаминных препаратов, регулирующих метаболические процессы, а также аминокислот, служащих строительным материалом для белковых молекул. Аминокислоты, являясь не только структурными элементами белков и других эндогенных соединений, имеют большое функциональное значение. Важно принимать аминокислоты с кофакторами, которыми обычно являются витамины, минеральные соли и другие питательные вещества, помогающие аминокислотам в ходе процессов метаболизма в организме животных. Препараты, содержащие синтетические аминокислоты, жирорастворимые и водорастворимые витамины, соли микроэлементов, нашли широкое применение в качестве лекарственных средств для животных, влияющих на состояние обмена веществ в организме и на факторы неспецифической резистентности.

Известна композиция аминокислот с микроэлементами и кальцием, обладающая противоопухолевой, антидепрессивной и противораковой активностью (патент РФ № 2151596, МПК A61K 31/197, опубл. 26.06.2000 г.). Композиция содержит десять природных аминокислот с четырьмя микроэлементами и кальцием.

Однако указанное средство не обладает достаточными профилактическими и лечебными свойствами при лечении гипоавитаминозов, нормализации обмена веществ, для повышения резистентности организма, для дезинтоксикации при отравлениях пищевыми и синтетическими ядами.

Известно средство для повышения общей работоспособности организма и стимуляции обменных процессов, содержащее экстракт плаценты для инъекций, нуклеинат натрия и в качестве источника витаминов и аминокислот - питательную среду для культур клеток 199 (патент РФ № 2203073, МПК A61K 31/00, опубл. 20.10.2002 г.).

Данное средство эффективно в отношении целого ряда патологических состояний животных, однако при его применении существует опасность аллергических реакций на вводимые в составе препарата чужеродные для организма животного компоненты плаценты.

Известен препарат, используемый при лечении токсикоинфекций для повышения резистентности организма (патент РФ № 21689900, МПК A61K 31/195, опубл. 20.06.2000 г.). В данном препарате в качестве лекарственного средства применяется питательная среда для культур клеток 199. Состав питательной среды для культур клеток включает аминокислоты, витамины, коферменты, источники липидов (холестерин, твин 80) и углеводов (глюкоза, Д-рибоза, 2-дезокси-Д-рибоза, ацетат натрия), а также предшественники нуклеиновых кислот [1].

Однако такой состав среды необходим для роста клеток в культуре in vitro, поскольку скорость синтеза некоторых аминокислот в изолированной клетке крайне недостаточна для обеспечения интенсивного роста, который является особенностью клеточных культур. Потребности клеток в культуре зависят от многих факторов (в том числе от концентрации самих клеток, от их происхождения, от концентрации веществ, необходимых для роста клеток на поверхности стекла, концентрации водородных ионов в среде и т.д.) и значительно отличаются от потребностей клеток в живом организме [2]. При этом известно, что содержащийся в питательной среде L-глутамин частично переходит в пирролидонкарбоновую кислоту в течение уже первых трех месяцев хранения, а высокое содержание аспарагиновой кислоты в среде может приводить к возникновению мозговых нарушений у подопытных молодых животных [3, 4]. При этом АТФ, входящий в состав среды 199, является препаратом с очень быстрым периодом разложения (около 30 секунд) и введение его внутримышечно мало эффективно. Кроме того, использование состава питательной среды, необходимого для роста клеток в культуре in vitro, значительно удорожает препарат при его применении в качестве лекарственного средства in vivo.

Наиболее близким аналогом (прототипом) препарата является препарат в виде водного раствора, содержащего L-лизин гидрохлорид в количестве 20-25 мг/мл, DL-метионин в количестве 20-25 мг/мл, глицин в количестве 20-25 мг/мл, витамин В₈ в количестве 10-15 мг/мл, витамин B₁₂ в количестве 0,15-0,16 мг/мл, провитамин В₃ в количестве 15-20 мг/мл, витамин Н в количестве 0,010-0,015 мг/мл, а также аммоний цитрат железа в количестве 1,7-1,8 мг/мл в пересчете на ион Fe(+3), сульфат кобальта в количестве 0,095-0,100 мг/мл в пересчете на ион Со(+2), сульфат меди в количестве 0,028-0,029 мг/мл в пересчете на ион Cu(+2), описанный в патенте РФ № 2343906, МПК А61К 31/00, опубл. 20.01.2009 г.

Наиболее близким аналогом (прототипом) способа является способ коррекции и профилактики патологических состояний животных, защищенный (патент РФ № 2343906, МПК A61K 31/00, опубл. 20.01.2009 г.). Данный способ предлагает проводить коррекцию и профилактику патологических состояний животных путем введения в организм животного препарата, включающего аминокислотный и витаминные комплексы, содержащие дополнительно физиологически приемлемые соли Fe(3+), Со(2+), Cu(2+) в виде инъекций один раз в 2-4 дня при общем количестве инъекций не более 10. Препарат вводят животным с массой до 3 кг в дозе 0,1 мл, животным с массой от 3 до 5 кг в дозе 0,25 мл, животным с массой свыше 5 до 15 кг в дозе 0,5 мл, а животным с массой свыше 15 до 45 кг в дозе 1 мл. Препарат вводят лошадям, крупному рогатому скоту и свиньям в дозе 1 мл на 45 кг живой массы.

Техническим результатом предлагаемых препарата и способа его применения является обеспечение более эффективной профилактики и лечения гипоавитаминозов, нормализации обмена веществ, для повышения резистентности организма, для дезинтоксикации при пищевых отравлениях.

Техническим результатом предлагаемых препарата и способа его применения является обеспечение более эффективной профилактики и лечения заболеваний различной этиологии в качестве общеукрепляющего средства для сельскохозяйственных и домашних животных при анемиях, гипоавитаминозах, токсикозах беременности, больных бронхитами, пневмонией, дисбактериозах и других.

Указанный технический результат достигается использованием препарата для профилактики и коррекции патологических состояний животных, содержащего следующие действующие вещества: L-аргинин моногидрохлорид в количестве 48-72 мг/л, L-лизин моногидрохлорид в количестве 48-72 мг/л, L-гистидин моногидрохлорид в количестве 13,8-20,8 мг/л, L-изолейцин в количестве 13,8-20,8 мг/л, L-лейцин в количестве 41,6-62,4 мг/л, L-метионин в количестве 10,4-15,6 мг/л, L-фенилаланин в количестве 17,2-25,8 мг/л, L-треонин в количестве 20,8-31,2 мг/л, L-триптофан в количестве 7,9-10,3 мг/л, L-глутамин в количестве 68,8-103,2 мг/л, L-валин в количестве 17,2-25,8 мг/л, L-тирозин в количестве 27,7-41,5 мг/л, L-цистин монохлорид в количестве 17,9-26,9 мг/л, L-серин в количестве 17,2-25,8 мг/л, глицин в количестве 34,4-54,6 мг/л, L-альфа-аланин в количестве 17,2-25,8 мг/л, L-пролин в количестве 25,6-38,4 мг/л, L-аспарагиновая кислота в количестве 18,0-30,0 мг/л, L-оксипролин в количестве 7,9-10,3 мг/л, L-глутаминовая кислота в количестве 48-72 мг/л, L-цистеин моногидрохлорид в количестве 0,12-0,70 мг/л, холина хлорид в количестве 0,4-3,0 мг/л, фолиевая кислота в количестве 0,01-0,09 мг/л, кальция пантотенат в количестве 0,01-0,09 мг/л, тиамина гидрохлорид в количестве 0,01-0,09 мг/л, никотиновая кислота в количестве 0,03-0,22 мг/л, пиридоксаль моногидрохлорид в количестве 0,03-0,22 мг/л, рибофлавин в количестве 0,012-0,09 мг/л, никотинамид в количестве 0,03-0,22 мг/л, Д-биотин в количестве 0,01-0,09 мг/л, мио-инозитол в количестве 0,06-0,45 мг/л, пиридоксин гидрохлорид в количестве 0,03-0,22 мг/л, кальциферол в количестве 0,01-0,09 мг/л, аскорбиновая кислота в количестве 0,06-0,45 мг/л, парааминобензойная кислота в количестве 0,06-0,45 мг/л, глюкоза в количестве 800-1200 мг/л, а также следующие неорганические соли: натрия хлорид в количестве 7,2-8,8 г/л, калий хлористый в количестве 360-440 мг/л, калий фосфорнокислый однозамещенный в количестве 54-66 мг/л, натрий фосфорнокислый двузамещенный 12-водный в количестве 13,5-16,5 мг/л, кальций хлористый 6-водный в количестве 24,8-30,4 мг/л, магний хлористый 6-водный в количестве 9,9-11,6 мг/л, магний сернокислый 7-водный в количестве 9,0-11,0 мг/л, железо азотнокислое 9-водное в количестве 0,65-0,79 мг/л, натрий уксуснокислый 3-водный в количестве 7,1-8,7 мг/л.

Указанный технический результат достигается также тем, что в способе профилактики и коррекции патологических состояний животных путем инъекционного введения в организм животного препарата в виде водного раствора, согласно изобретению, в качестве препарата используют препарат по п. 1 формулы изобретения, который вводят животным внутримышечно или подкожно с профилактической целью 2 раза в неделю в течение месяца в дозах 1,5-2,0 мл на 10 кг массы тела, с лечебной целью - в дозе 3,0-5,0 мл на 10 кг массы тела 2 раза в сутки в течение 3-5 дней, при интоксикациях в связи с отравлением синтетическими и/или пищевыми ядами - в десятикратной лечебной дозе. Причем, если доза препарата превышает 20 мл, то его вводят в нескольких местах.

Получение указанного результата достигается разработкой оптимальных качественных и количественных составов и методики приготовления водных растворов аминокислот, витаминов, микро- и макроэлементов, глюкозы, нормализирующих обменные процессы в организме животного, а также в предлагаемой схеме применения препарата. Экспериментально установленные дозы препарата обеспечивают его эффективность для профилактики и лечения патологических состояний животных, связанных с гипоавитаминозами, для нормализации обмена веществ и повышения резистентности организма, при интоксикациях сельскохозяйственных и домашних животных.

Технология получения препарата. В 100 л воды очищенной (рН от 5,0 до 7,0 ед. рН) растворяют неорганические соли: натрия хлорид в количестве 7,2-8,8 г/л, калий хлористый в количестве 360-440 мг/л, калий фосфорнокислый однозамещенный в количестве 54-66 мг/л, натрий фосфорнокислый двузамещенный 12-водный в количестве 13,5-16,5 мг/л, кальций хлористый 6-водный в количестве 24,8-30,4 мг/л, магний хлористый 6-водный в количестве 9,9-11,6 мг/л, магний сернокислый 7-водный в количестве 9,0-11,0 мг/л, железо азотнокислое 9-водное в количестве 0,65-0,79 мг/л, натрий уксуснокислый 3-водный в количестве 7,1-8,7 мг/л. Растворение ведут при перемешивании в течение не менее 5-7 мин.

Затем последовательно растворяют аминокислоты и витамины: L-аргинин моногидрохлорид в количестве 48-72 мг/л, L-лизин моногидрохлорид в количестве 48-72 мг/л, L-гистидин моногидрохлорид в количестве 13,8-20,8 мг/л, L-изолейцин в количестве 13,8-20,8 мг/л, L-лейцин в количестве 41,6-62,4 мг/л, L-метионин в количестве 10,4-15,6 мг/л, L-фенилаланин в количестве 17,2-25,8 мг/л, L-треонин в количестве 20,8-31,2 мг/л, L-триптофан в количестве 7,9-10,3 мг/л, L-глутамин в количестве 68,8-103,2 мг/л, L-валин в количестве 17,2-25,8 мг/л, L-тирозин в количестве 27,7-41,5 мг/л, L-цистин монохлорид в количестве 17,9-26,9 мг/л, L-серин в количестве 17,2-25,8 мг/л, глицин в количестве 34,4-54,6 мг/л, L-альфа-аланин в количестве 17,2-25,8 мг/л, L-пролин в количестве 25,6-38,4 мг/л, L-аспарагиновая кислота в количестве 18,0-30,0 мг/л, L-оксипролин в количестве 7,9-10,3 мг/л, L-глутаминовая кислота в количестве 48-72 мг/л, L-цистеин моногидрохлорид в количестве 0,12-0,70 мг/л, холина хлорид в количестве 0,4-3,0 мг/л, фолиевая кислота в количестве 0,01-0,09 мг/л, кальция пантотенат в количестве 0,01-0,09 мг/л, тиамина гидрохлорид в количестве 0,01-0,09 мг/л, никотиновая кислота в количестве 0,03-0,22 мг/л, пиридоксаль моногидрохлорид в количестве 0,03-0,22 мг/л, рибофлавин в количестве 0,012-0,09 мг/л, никотинамид в количестве 0,03-0,22 мг/л, Д-биотин в количестве 0,01-0,09 мг/л, мио-инозитол в количестве 0,06-0,45 мг/л, пиридоксин гидрохлорид в количестве 0,03-0,22 мг/л, кальциферол в количестве 0,01-0,09 мг/л, аскорбиновая кислота в количестве 0,06-0,45 мг/л, парааминобензойная кислота в количестве 0,06-0,45 мг/л. L-цистин перед загрузкой в реактор растворяют в 0,1 моль/л растворе соляной кислоты.

Далее растворяют глюкозу в количестве 800-1200 мг/л, феноловый красный водорастворимый в количестве 18-22 мг/л и добавляют раствор натрия углекислого кислого из расчета 540-660 мг/л. Доводят объем раствора препарата до 100 л водой очищенной. Устанавливают показатель концентрации ионов водорода (рН) равным 7,1-7,5, и затем подвергают приготовленный раствор стерилизующей фильтрации.

Ниже приведены примеры 1 и 2 состава препарата.

Пример 1. Состав препарата для профилактики заболеваний

L-аргинин моногидрохлорид в количестве 48 мг/л, L-лизин моногидрохлорид в количестве 48 мг/л, L-гистидин моногидрохлорид в количестве 13,8 мг/л, L-изолейцин в количестве 13,8 мг/л, L-лейцин в количестве 41,6 мг/л, L-метионин в количестве 10,4 мг/л, L-фенилаланин в количестве 17,2 мг/л, L-треонин в количестве 20,8 мг/л, L-триптофан в количестве 7,9 мг/л, L-глутамин в количестве 68,8 мг/л, L-валин в количестве 17,2 мг/л, L-тирозин в количестве 27,7 мг/л, L-цистин монохлорид в количестве 17,9 мг/л, L-серин в количестве 17,2 мг/л, глицин в количестве 34,4 мг/л, L-альфа-аланин в количестве 17,2 мг/л, L-пролин в количестве 25,6 мг/л, L-аспарагиновая кислота в количестве 18,0 мг/л, L-оксипролин в количестве 7,9 мг/л, L-глутаминовая кислота в количестве 48 мг/л, L-цистеин моногидрохлорид в количестве 0,12 мг/л, холина хлорид в количестве 0,4 мг/л, фолиевая кислота в количестве 0,01 мг/л, кальция пантотенат в количестве 0,01 мг/л, тиамина гидрохлорид в количестве 0,01 мг/л, никотиновая кислота в количестве 0,03 мг/л, пиридоксаль моногидрохлорид в количестве 0,03 мг/л, рибофлавин в количестве 0,012 мг/л, никотинамид в количестве 0,03 мг/л, Д-биотин в количестве 0,01 мг/л, мио-инозитол в количестве 0,06 мг/л, пиридоксин гидрохлорид в количестве 0,03 мг/л, кальциферол в количестве 0,01 мг/л, аскорбиновая кислота в количестве 0,06 мг/л, парааминобензойная кислота в количестве 0,06 мг/л, глюкоза в количестве 800 мг/л, натрия хлорид в количестве 7,2 г/л, калий хлористый в количестве 360 мг/л, калий фосфорнокислый однозамещенный в количестве 54 мг/л, натрий фосфорнокислый двузамещенный 12-водный в количестве 13,5 мг/л, кальций хлористый 6-водный в количестве 24,8 мг/л, магний хлористый 6-водный в количестве 9,9 мг/л, магний сернокислый 7-водный в количестве 9,0 мг/л, железо азотнокислое 9-водное в количестве 0,65 мг/л, натрий уксуснокислый 3-водный в количестве 7,1 мг/л.

Пример 2. Состав препарата для коррекции патологических состояний

L-аргинин моногидрохлорид в количестве 72 мг/л, L-лизин моногидрохлорид в количестве 72 мг/л, L-гистидин моногидрохлорид в количестве 20,8 мг/л, L-изолейцин в количестве 20,8 мг/л, L-лейцин в количестве 62,4 мг/л, L-метионин в количестве 15,6 мг/л, L-фенилаланин в количестве 25,8 мг/л, L-треонин в количестве 31,2 мг/л, L-триптофан в количестве 10,3 мг/л, L-глутамин в количестве 103,2 мг/л, L-валин в количестве 25,8 мг/л, L-тирозин в количестве 41,5 мг/л, L-цистин монохлорид в количестве 26,9 мг/л, L-серин в количестве 25,8 мг/л, глицин в количестве 54,6 мг/л, L-альфа-аланин в количестве 25,8 мг/л, L-пролин в количестве 38,4 мг/л, L-аспарагиновая кислота в количестве 30,0 мг/л, L-оксипролин в количестве 10,3 мг/л, L-глутаминовая кислота в количестве 72 мг/л, L-цистеин моногидрохлорид в количестве 0,70 мг/л, холина хлорид в количестве 3,0 мг/л, фолиевая кислота в количестве 0,09 мг/л, кальция пантотенат в количестве 0,09 мг/л, тиамина гидрохлорид в количестве 0,09 мг/л, никотиновая кислота в количестве 0,22 мг/л, пиридоксаль моногидрохлорид в количестве 0,22 мг/л, рибофлавин в количестве 0,09 мг/л, никотинамид в количестве 0,22 мг/л, Д-биотин в количестве 0,09 мг/л, мио-инозитол в количестве 0,45 мг/л, пиридоксин гидрохлорид в количестве 0,22 мг/л, кальциферол в количестве 0,09 мг/л, аскорбиновая кислота в количестве 0,45 мг/л, парааминобензойная кислота в количестве 0,45 мг/л, глюкоза в количестве 1200 мг/л, натрия хлорид в количестве 8,8 г/л, калий хлористый в количестве 440 мг/л, калий фосфорнокислый однозамещенный в количестве 66 мг/л, натрий фосфорнокислый двузамещенный 12-водный в количестве 16,5 мг/л, кальций хлористый 6-водный в количестве 30,4 мг/л, магний хлористый 6-водный в количестве 11,6 мг/л, магний сернокислый 7-водный в количестве 11,0 мг/л, железо азотнокислое 9-водное в количестве 0,79 мг/л, натрий уксуснокислый 3-водный в количестве 8,7 мг/л.

Пример 3. Препарат по примеру 1 вводят животным в виде инъекций внутримышечно или подкожно с профилактической целью 2 раза в неделю в течение месяца в дозах 1,5-2,0 мл на 10 кг массы тела (если доза превышает 20 мл, то препарат вводят в нескольких местах).

Препарат по примеру 2 вводят животным в виде инъекций внутримышечно или подкожно с лечебной целью в дозе 3,0-5,0 мл на 10 кг массы тела 2 раза в сутки в течение 3-5 дней. При интоксикациях (отравлении синтетическими и пищевыми ядами) - в десятикратной лечебной дозировке (если доза превышает 20 мл, то препарат вводят в нескольких местах).

Поскольку в заявляемом способе используется многокомпонентный препарат, было проведено изучение его острой токсичности, аллергизирующего действия на лабораторных животных, переносимости, субхронической токсичности.

Примеры 4, 5, 6 подтверждают отсутствие токсического действия препарата, подтверждают, что предлагаемый препарат не обладает аллергизирующим действием, не оказывает отрицательного влияния на физиологическое состояние организма животных, биохимические показатели крови и не вызывает макро- и микроскопических изменений со стороны внутренних органов.

Также была подтверждена эффективность использования заявляемого способа для обеспечения нормального роста и развития животных, лечения и профилактики заболеваний различной этиологии в качестве общеукрепляющего средства для сельскохозяйственных и домашних животных при анемиях, гипоавитаминозах, токсикозах беременности, больных бронхопневмонией, дисбактериозах и других (примеры 7, 8, 9).

Пример 4. Оценка острой токсичности предлагаемого препарата

Оценку острой токсичности предлагаемого препарата проводили на белых крысах обоего пола массой 230-240 г. Препарат вводили внутрижелудочно - в дозах 1,5; 2,5 и 3,5 мл (третья доза максимальна по объему желудка). Контрольной группе животных вводили дистиллированную воду. Наблюдения проводили в течение 14 дней. Со стороны шерстного покрова, слизистых оболочек и состояния ушных раковин отклонений не зарегистрировано. При макроскопии внутренних органов животных кровоизлияний и воспалительные процессы не обнаружены. Слизистая оболочка пищевода, желудка и кишечника не имела никаких признаков патологии. Массовые коэффициенты внутренних органов опытных животных не имели отличий от контрольных. Случаев гибели животных ни в одной из групп не зарегистрировано. Полученные данные свидетельствуют об отсутствии токсического действия предлагаемого препарата и позволяют отнести его к 4-му классу - вещества малоопасные (ГОСТ 12.1.007-76), а среднесмертельную дозу установить не представляется возможным.

Дополнительно параметры острой токсичности определяли при однократном внутримышечном введении (в ягодицу бедра) на 56 белых беспородных крысах обоего пола массой 220-240 г. Животные были разделены на 6 опытных и одну контрольную группы по 8 голов в каждой. Препарат вводили из расчета 650, 975, 1463, 2194, 3291, 4936 мг/кг соответственно по группам. Контрольным животным препарат не вводили. Наблюдение за лабораторными животными вели в течение 14 дней. На 15 день эксперимента животных декантировали (после легкой эфирной наркотизации) и провели патолого-анатомическое вскрытие. В результате вскрытия у животных всех опытных групп не выявлено патологических изменений, что позволяет сделать вывод о безопасности предлагаемой композиции. Дополнительные испытания острой токсичности также не позволили установить LD50 для исследуемого препарата, что позволяет отнести его к веществам 4 класса опасности по гигиенической классификации ГОСТ 12.1.007-76.

Пример 5. Исследование аллергизирующего действия проводили на морских свинках путем накожных аппликаций раствора предлагаемой композиции с учетом массы тела, ректальной температуры, количества лейкоцитов, реакции специфической агломерации лейкоцитов (РСАЛ). В результате проведенных исследований установлено, что при нанесении препарата в количестве 1,0 и 2,0 мл/кг в течение 18 дней все учитываемые показатели находились в пределах физиологической нормы, статистически достоверных изменений ректальной температуры, количества лейкоцитов, а также результатов РСАЛ между опытными и контрольными группами не отмечалось. Таким образом, предлагаемый препарат не обладает аллергизирующим действием и может назначаться животным с необходимой для профилактики и лечения периодичностью.

Пример 6. Изучение переносимости предлагаемого препарата. Для оценки переносимости препарата было сформировано 4 группы (3 опытных и 1 контрольная) поросят по 7 голов в каждой. Опытным группам препарат вводили внутримышечно из расчета 2,0 6,0 и 10 мл на 10 кг живой массы (условно-терапевтическая, трех- и пятикратная доза от условно терапевтической) в течение 20 суток. Установлено, что в течение экспериментального периода ни одна из применяемых доз препарата не оказала отрицательного воздействия на организм поросят, на биохимические показатели крови поросят всех групп, гибели животных не наблюдалось ни в контрольной, ни в опытной группах. При этом за изучаемый период среднесуточный прирост поросят в опытных группах превышал показатели в контрольной группе на 2,14; 4,52 и 4,03%, что свидетельствует о безвредности препарата и хорошей биодоступности биологически активных веществ препарата. Проведенный убой поросят в конце экспериментального периода и макроскопические исследования кишечника и внутренних органов подтвердили отсутствие патологических изменений в тканях и органах животных, подвергшихся инъекциям наиболее высоких доз препарата.

Изучение переносимости на телятах проводили на телятах черно-пестрой породы в возрасте от 2 до 10 дней, из которых было сформировано 3 опытных и контрольная группы по 5 телят в каждой группе. Животных в опытные группы отбирали по принципу аналогов с учетом возраста, массы и физиологического состояния. Опытным группам препарат вводили внутримышечно из расчета 2,0; 6,0 и 10 мл на 10 кг живой массы (условно-терапевтическая, трех- и пятикратная доза от условно терапевтической) в течение 20 суток. В результате проведенных исследований установлено, что в течение всего экспериментального периода ни одна из доз препарата не оказала отрицательного воздействия на организм телят. Ни в контрольной, ни в опытной группах гибели животных не наблюдалось. За изучаемый период среднесуточный прирост телят в опытных группах превышал показатели в контрольной группе на 5,53; 8,93 и 3,82%, что свидетельствует о безвредности препарата и хорошей биодоступности биологически активных веществ препарата. Проведенные на двадцатый день применения препарата исследования морфобиохимических показателей крови телят показали, что в среднем эритроцитов увеличилось на 0,13×10¹²/л, гемоглобин увеличился на 0,45 г/%, цветной показатель снизился на 0,01. Количество лейкоцитов увеличилось на 0,34×10⁹ /л, СОЭ снизилось на 0,36 мм. Такие показатели могут указывать на нормализацию функций организма - повышение фагоцитарной активности, улучшение дыхательной активности функций крови и повышении резистентности организма.

Таким образом, 20-суточное внутримышечное введение поросятам-отъемышам и телятам предлагаемого препарата в дозах 2,0; 6,0 и 10 мл на 10 кг живой массы не оказывает отрицательного влияния на физиологическое состояние организма животных, биохимические показатели крови и не вызывает макро- и микроскопических изменений со стороны внутренних органов.

Пример 7. Испытания эффективности применения препарата по примеру 1 с профилактической целью проводили на 54 супоросных свиноматках, которых разделили по принципу пар-аналогов на 3 группы по 18 голов в каждой. Первой группе - контрольной - внутримышечно вводили стерильную очищенную воду. Второй и третьей опытным группам вводили препарат из расчета 1,5 и 2,0 мл на 10 кг массы тела 2 раза в неделю в течение месяца. Количество вводимого препарата в одно место не превышало 15 мл. Результаты исследований представлены в таблице 1. Как видно из таблицы 1, в опытных группах у свиноматок родилось жизнеспособных поросят больше, чем в контроле, на 5,7 и 12,3% соответственно. Живая масса одного поросенка при рождении была также больше на 0,03 и 0,07 кг.

При этом препарат оказал положительное влияние и на последующий рост поросят: к моменту отъема средняя масса поросенка контрольной группы составила 7,33 кг, тогда как в опытных группах - 8,15 и 8,27 кг. Введение препарата свиноматкам позволило обеспечить и несколько большую сохранность поросят - на 8,7 и 24,1%, что можно объяснить улучшением общего физиологического состояния организма свиноматок. В крови свиноматок увеличивалось количество эритроцитов: на 3,1-6,2%. Концентрация гемоглобина также повышалась дозозависимо на 6,7 и 8,9% соответственно. В содержании лейкоцитов значимых различий по группам не наблюдалось. Содержание общего белка повышалось во второй группе на 5,4%, в третьей - на 7,6%. В сыворотке крови обнаруживалось больше витамина А: во второй группе - на 28,6, а в третьей - на 36,4%. Проведенные исследования подтверждают положительное действие предлагаемого препарата на организм свиноматок и новорожденных поросят.

Поросята, полученные от свиноматок, находившихся в эксперименте, были отсажены и продолжали получать инъекции препарата по лечебной схеме, т.е. по 3,0-5,0 мл на 10 кг массы тела 2 раза в сутки в течение 5 дней. Наблюдения проводились до 90-суточного возраста поросят. Было отмечено положительное влияние предлагаемого препарата на мясную продуктивность поросят. Животные из опытных групп по приросту живой массы превосходили контрольных на 7,4 и 9,6%. Гематологические показатели крови у получавших препарат поросят (в 90-суточном возрасте), представленные в таблице 2, демонстрируют тенденцию улучшения показателей по гемоглобину крови, общему белку, белковому индексу, содержанию мочевины. Полученные данные свидетельствуют о хорошей биодоступности и усвояемости организмом животных предлагаемого препарата. Применение предлагаемого препарата приводит к снижению постнатальной смертности и повышению жизнеспособность потомства.

Пример 8. Для испытания эффективности применения препарата по примеру 2 с профилактической целью на телятах было отобрано 28 голов от 1 до 1,5-месячных телят и сформировано 2 группы (контрольная и опытная) по 14 голов в каждой. Первая группа была контрольной, телятам второй опытной группы вводили препарат по примеру 2 из расчета 1,5 и 2,0 мл на 10 кг массы тела 2 раза в неделю в течение месяца. Препарат показал положительное влияние на динамику живой массы тела и прирост телят. Из таблицы 3 видно, что среднесуточный прирост живой массы телят в опытной группе (получавших внутримышечные инъекции препарата) превышал контроль на 5,1%. Затраты кормов на единицу прироста были ниже в опытной группе на 5,4%, чем в контрольной. Сохранность во всех группах к концу эксперимента составляла 100%. Введение инъекции телятам способствовало также повышению их естественной резистентности, в связи с чем в опытной группе телята значительно реже болели респираторными и желудочно-кишечными заболеваниями. Так же были проведены морфологические и биохимические исследования крови телят (табл.4, 5). Результаты, представленные в табл.4, свидетельствуют о том, что концентрация эритроцитов у телят в опытной группе в конце эксперимента была на 10% больше, чем в контрольной. Наблюдалось значительное увеличение количества лейкоцитов. В опытной группе количество гемоглобина увеличилось на 15,3%, что свидетельствует о положительном влиянии препарата. Проведенные биохимические исследования крови телят (таблица 5) показали увеличение общего белка в сыворотке крови телят опытной группы по сравнению с контрольной на 7,9%. Содержание витамина А в опытной группе на 17,7% также превосходило контроль. Кроме того, в сыворотке крови был повышен уровень аскорбиновой кислоты и витамина Е. Приведенные данные свидетельствуют об эффективности препарата и целесообразности его применения телятам, поскольку после применения предлагаемого препарата отсутствуют внешние признаки авитаминозов, увеличивается содержание витаминов А, Е, С в сыворотке крови телят.

Таким образом, проведенные испытания предлагаемого препарата в профилактических целях на свиньях и телятах подтверждают, что предлагаемый препарат способствует повышению сохранности и продуктивности животных, улучшению клинического состояния за счет оптимизации метаболических процессов в организме, связанных с содержанием в нем аминокислот, витаминов и микроэлементов.

Пример 9. Для испытания эффективности применения препарата по примеру 2 с лечебной целью заявляемый способ применяли при лечении телят больных бронхопневмонией. При постановке диагноза учитывали данные анамнеза, клинических исследований, результатов гематологичеких и биохимических исследований крови больных телят.

Для испытания было отобрано 20 голов 3-месячных больных телят, их средняя масса составляла 78 кг. Группы формировали по принципу аналогов: 2 группы по 10 голов в каждой. Условия содержания и кормления были идентичны. Животным опытной и контрольной группы проводили комплекс необходимых лечебных мероприятий. Дополнительно, животные первой группы (контрольной) получали препарат применяемый в хозяйстве: тривитамин (1 мл препарата содержит витамин А 15000МЕ, витамин Д 20000 ME, витамин Е - 10 мг), телятам второй группы вводили заявляемый препарат по примеру 2 внутримышечно в область ягодицы по 3,0-5,0 мл на 10 кг массы тела 2 раза в сутки в течение 5 дней. Результаты лечебных мероприятий представлены в табл.6. Среднесуточные приросты живой массы в опытной группе телят выше таковых в контрольной группе в 2 раза. При этом в опытной группе выздоровели 100% телят, в отличие от контрольной, в которой падеж составил 20%. После лечения больных телят в обеих группах отмечены изменения гематологических и биохимических показателей крови (табл.7, 8). Кровь повторно бралась после клинического выздоровления больных телят. В результате лабораторных исследований установлено, что в крови телят первой группы повысилось содержание гемоглобина, количество эритроцитов. Количество лейкоцитов снизилось до физиологической нормы, отсутствуют юные формы нейтрофилов. В крови телят опытной второй группы отмечено повышение содержания гемоглобина, количества эритроцитов. Изменения в лейкоцитарной формуле аналогичны таковым в первой группе. Также произошли существенные изменения в биохимических показателях крови телят после их выздоровления. У выздоровевших телят отмечается повышение содержания общего белка, кальция. При этом изменения гематологических показателей крови телят после проведенного лечения в опытной группе значительно лучше, чем в контрольной группе. Такая же картина наблюдается и в биохимических показателях, что свидетельствует о терапевтической активности заявляемого препарата при бронхопневмонии телят.

При применении препарата по примеру 2 телятам возрасте от 15 дней до 10 месяцев в комплексном лечении при энтеритах, гастроэнтеритах у телят наблюдалось улучшение общего состояния, появлялся аппетит, нормализовались обменные процессы, ускорялись процессы выздоровления в 2-3 раза по сравнению с телятами, которым препарат не вводился.

Пример 10. Заявляемый способ применяли при лечении собак с заболеваниями и критическими состояниями, возникающими при попадании в организм животного исходно ядовитых веществ, а также пищевых продуктов, становящихся ядовитыми в результате неправильного хранения, с целью восстановления нарушенных функций органов и всего организма в целом.

Для испытания препарата было отобрано 29 животных с клиническими признаками энтероколита как осложнения перенесенного отравления или находящихся в состоянии интоксикации, в возрасте от 13 до 18 месяцев и массой тела от 7,4 до 13,6 кг. Все животные были размещены в вольерах по 2 или 3 головы в каждом. Животных разделили на 3 группы по принципу аналогов. Первая группа - 9 животных, контрольная; вторая группа и третья группы - по 10 животных, опытные. Животным 2 (с признаками энтероколита) и 3 (в состоянии пищевого отравления) опытных групп проводили курс внутримышечных инъекций препарата по примеру 2. Дозу для инъекции для каждого животного 2-й группы определяли в соответствии с его массой из расчета 3,0 мл препарата на 10 кг массы тела, а для животных 3 группы из расчета 30-50 мл на 10 кг массы тела в зависимости от состояния организма. Рассчитанное количество препарата вводили 2 раза в сутки в течение 5 дней. Животным контрольной группы вводили раствор глюкозы.

Наблюдение за состоянием животных подтвердило более быстрое снижение явлений интоксикации у животных в опытных группах, быстрее прекращались явления дисфункции желудочно-кишечного тракта, исчезали проявления слабости и истощения. Морфобиохимические показатели крови собак также быстрее достигали средненормативного уровня в опытных группах. Период восстановления организма у животных в опытной группе был на 2-3 дня меньше, чем в контрольной.

По результатам испытаний предлагаемый препарат применим для профилактики и вспомогательного лечения следующих патологий: анемии, гипо- и авитаминозы, отравления, токсикозы беременности, роды, инфекционные заболевания (пневмонии, бронхиты, гепатиты и др.). Использование препарата позволяет снизить постнатальную смертность, повысить жизнеспособность потомства.

Таким образом, заявляемый способ обладает заметным положительным лечебно-профилактическим действием на организм животных, а именно улучшает дезинтоксикационные функции, стимулирует нормализацию нарушенного обмена веществ, повышает иммунитет организма.

Источники информации

1. Новые методы культуры животных тканей. Под ред. Ю.М.Оленова. - М.: «Мир». - 1976.

2. Адамс Р. Методы культур клеток для биотехнологии. - М.: Мир, 1983. - 243 с.

3. Демина Н.Г., Полажуер Б.М., Румянцева Н.Ф. Изучение стабильности глутамина в процессе его выделения из ферментационных процессов // Биотехнология. - 1992. - №2. - с.63-67.

4. Инфузионная терапия и клиническое питание. Под ред. Г.Н.Хлябича. Франкфурт-на-Майне. - 1992. - 796 с.

Таблица 1 Продуктивность свиноматок, в среднем на одно животное Показатели Группы 1-контрольная 2-опытная 3-опытная Количество свиноматок, гол. 18 18 18 Родилось жизнеспособных поросят 12,2±0,8 12,9±0,5 13,7±0,9 Живая масса, кг при рождении 1,21±0,04 1,24±0,01 1,28±0,07 в% к контролю - 102,4 105,7 Живая масса, кг при отъеме 7,33±0,80 8,15±0,20 8,27±0,60 в% к контролю - 111,1 112,8 Прирост за подсосный период, кг/гол 6,32±0,70 6,53±0,90 6,87±00,40 Среднесуточный прирост, г 164,6±15,6 178,4±17,3 173,9±13,7 в% к контролю - 108,3 105,6 Число поросят при отъеме 9,4±0,6 10,8±0,7 13,1±0,4 Сохранность,% 77,0 83,7 95,6

Таблица 3 Продуктивность телят и затраты корма на прирост через 5 дней терапии Показатели Группы 1-я контрольная 2-я опытная (препарат 2,0 мл/10 кг массы тела) Среднесуточный прирост, г 621,5±28,3 653,2±34,7 Затрачено на 1 кг прироста, к.ед. 3,7 3,5

Таблица 4 Морфологические показатели крови телят через 5 дней терапии Показатели Группы 1-я контрольная 2-я опытная(препарат 2,0 мл/10 кг массы тела) Эритроциты, млн·мкл-1 4,7±0,1 5,2±0,3 Лейкоциты, тыс·мкл-1 7,9±0,6 8,2±0,2 Гемоглобин, ·мкл-1 7,2±4,2 8,3±2,2

Таблица 5 Биохимические показатели крови телят через 5 дней терапии Показатели Группы 1-контрольная 2-опытная Общий белок, г/л 64,10±1,51 69,20±3,18 Витамин А, мкг/мл 0,79±0,12 0,93±0,05 Витамин С, мкг% 0,22±0,03 0,29±0,03 Витамин Е, мкг% 0,24±0,02 0,31±0,04 Кальций, мг% 17,30±0,14 18,00±0,15 Фосфор, мг% 7,20±0,11 6,80±0,12 Цинк, мкг% 178,0±3,9 185,9±1,2

Таблица 6 Результаты лечебных мероприятий Группа Заболело голов Продолжительность лечения Выздоровление голов Пало голов Среднесуточные привесы, кг 1-я контрольная 10 10 8 2 0,2 2-я опытная 10 5 10 0 0,4

Таблица 8 Биохимические показатели крови телят Группа Каротин, мг% Кальций, г Фосфор, г Рез. щелочь Общ. белок, г% 1-контрольная 0,250 6,73 6,38 36,4 5,6 0,279 7,05 7,50 33,3 7,2 2-опытная 0,258 6,80 6,15 35,6 5,5 0,282 8,30 7,77 33,2 6,8

Изобретение относится к ветеринарии. Препарат содержит следующие действующие вещества: L-аргинин моногидрохлорид в количестве 48-72 мг/л, L-лизин моногидрохлорид в количестве 48-72 мг/л, L-гистидин моногидрохлорид в количестве 13,8-20,8 мг/л, L-изолейцин в количестве 13,8-20,8 мг/л, L-лейцин в количестве 41,6-62,4 мг/л, L-метионин в количестве 10,4-15,6 мг/л, L-фенилаланин в количестве 17,2-25,8 мг/л, L-треонин в количестве 20,8-31,2 мг/л, L-триптофан в количестве 7,9-10,3 мг/л, L-глутамин в количестве 68,8-103,2 мг/л, L-валин в количестве 17,2-25,8 мг/л, L-тирозин в количестве 27,7-41,5 мг/л, L-цистин монохлорид в количестве 17,9-26,9 мг/л, L-серин в количестве 17,2-25,8 мг/л, глицин в количестве 34,4-54,6 мг/л, L-альфа-аланин в количестве 17,2-25,8 мг/л, L-пролин в количестве 25,6-38,4 мг/л, L-аспарагиновая кислота в количестве 18,0-30,0 мг/л, L-оксипролин в количестве 7,9-10,3 мг/л, L-глутаминовая кислота в количестве 48-72 мг/л, L-цистеин моногидрохлорид в количестве 0,12-0,70 мг/л, холина хлорид в количестве 0,4-3,0 мг/л, фолиевая кислота в количестве 0,01-0,09 мг/л, кальция пантотенат в количестве 0,01-0,09 мг/л, тиамина гидрохлорид в количестве 0,01-0,09 мг/л, никотиновая кислота в количестве 0,03-0,22 мг/л, пиридоксаль моногидрохлорид в количестве 0,03-0,22 мг/л, рибофлавин в количестве 0,012-0,09 мг/л, никотинамид в количестве 0,03-0,22 мг/л, Д-биотин в количестве 0,01-0,09 мг/л, мио-инозитол в количестве 0,06-0,45 мг/л, пиридоксин гидрохлорид в количестве 0,03-0,22 мг/л, кальциферол в количестве 0,01-0,09 мг/л, аскорбиновая кислота в количестве 0,06-0,45 мг/л, парааминобензойная кислота в количестве 0,06-0,45 мг/л, глюкоза в количестве 800-1200 мг/л, а также следующие неорганические соли: натрия хлорид в количестве 7,2-8,8 г/л, калий хлористый в количестве 360-440 мг/л, калий фосфорнокислый однозамещенный в количестве 54-66 мг/л, натрий фосфорнокислый двузамещенный 12-водный в количестве 13,5-16,5 мг/л, кальций хлористый 6-водный в количестве 24,8-30,4 мг/л, магний хлористый 6-водный в количестве 9,9-11,6 мг/л, магний сернокислый 7-водный в количестве 9,0-11,0 мг/л, железо азотнокислое 9-водное в количестве 0,65-0,79 мг/л, натрий уксуснокислый 3-водный в количестве 7,1-8,7 мг/л. Способ профилактики и коррекции патологических состояний животных заключается в инъекционном введении в организм животного указанного препарата в виде водного раствора с профилактической целью 2 раза в неделю в течение месяца в дозах 1,5-2,0 мл на 10 кг массы тела, с лечебной целью в дозе 3,0-5,0 мл на 10 кг массы тела 2 раза в сутки в течение 3-5 дней, при интоксикациях в связи с отравлением синтетическими и/или пищевыми ядами - в десятикратной лечебной дозе. Причем, если доза препарата превышает 20 мл, то его вводят в нескольких местах. Изобретение обеспечивает повышение лечебной и профилактической эффективности. 2 н. и 4 з.п. ф-лы, 8 табл.

1. Препарат для профилактики и коррекции патологических состояний животных, содержащий следующие действующие вещества: L-аргинин моногидрохлорид в количестве 48-72 мг/л, L-лизин моногидрохлорид в количестве 48-72 мг/л, L-гистидин моногидрохлорид в количестве 13,8-20,8 мг/л, L-изолейцин в количестве 13,8-20,8 мг/л, L-лейцин в количестве 41,6-62,4 мг/л, L-метионин в количестве 10,4-15,6 мг/л, L-фенилаланин в количестве 17,2-25,8 мг/л, L-треонин в количестве 20,8-31,2 мг/л, L-триптофан в количестве 7,9-10,3 мг/л, L-глутамин в количестве 68,8-103,2 мг/л, L-валин в количестве 17,2-25,8 мг/л, L-тирозин в количестве 27,7-41,5 мг/л, L-цистин монохлорид в количестве 17,9-26,9 мг/л, L-серин в количестве 17,2-25,8 мг/л, глицин в количестве 34,4-54,6 мг/л, L-альфа-аланин в количестве 17,2-25,8 мг/л, L-пролин в количестве 25,6-38,4 мг/л, L-аспарагиновая кислота в количестве 18,0-30,0 мг/л, L-оксипролин в количестве 7,9-10,3 мг/л, L-глутаминовая кислота в количестве 48-72 мг/л, L-цистеин моногидрохлорид в количестве 0,12-0,70 мг/л, холина хлорид в количестве 0,4-3,0 мг/л, фолиевая кислота в количестве 0,01-0,09 мг/л, кальция пантотенат в количестве 0,01-0,09 мг/л, тиамина гидрохлорид в количестве 0,01-0,09 мг/л, никотиновая кислота в количестве 0,03-0,22 мг/л, пиридоксаль моногидрохлорид в количестве 0,03-0,22 мг/л, рибофлавин в количестве 0,012-0,09 мг/л, никотинамид в количестве 0,03-0,22 мг/л, Д-биотин в количестве 0,01-0,09 мг/л, мио-инозитол в количестве 0,06 -0,45 мг/л, пиридоксин гидрохлорид в количестве 0,03-0,22 мг/л, кальциферол в количестве 0,01-0,09 мг/л, аскорбиновая кислота в количестве 0,06-0,45 мг/л, парааминобензойная кислота в количестве 0,06-0,45 мг/л, глюкоза в количестве 800-1200 мг/л, натрия хлорид в количестве 7,2-8,8 г/л, калий хлористый в количестве 360-440 мг/л, калий фосфорнокислый однозамещенный в количестве 54-66 мг/л, натрий фосфорнокислый двузамещенный 12-водный в количестве 13,5-16,5 мг/л, кальций хлористый 6-водный в количестве 24,8-30,4 мг/л, магний хлористый 6-водный в количестве 9,9 -11,6 мг/л, магний сернокислый 7-водный в количестве 9,0-11,0 мг/л, железо азотнокислое 9-водное в количестве 0,65-0,79 мг/л, натрий уксуснокислый 3-водный в количестве 7,1-8,7 мг/л.

2. Способ профилактики и коррекции патологических состояний животных путем инъекционного введения в организм животного препарата в виде водного раствора, отличающийся тем, что в качестве препарата используют препарат по п.1, который вводят животным внутримышечно или подкожно.

3. Способ по п.2, отличающийся тем, что при превышении дозы препарата 20 мл его вводят частями в нескольких местах.

4. Способ по п.2 или 3, отличающийся тем, что с профилактической целью препарат по п.1 вводят 2 раза в неделю в течение месяца в дозах 1,5-2,0 мл на 10 кг массы тела.

5. Способ по п.2 или 3, отличающийся тем, что с лечебной целью препарат по п.1 вводят в дозе 3,0-5,0 мл на 10 кг массы тела 2 раза в сутки в течение 3-5 дней.

6. Способ по п.5, отличающийся тем, что при интоксикациях в связи с отравлениями синтетическими и/или пищевыми ядами препарат по п.1 вводят в десятикратной лечебной дозе.