Изобретение относится к ветеринарной медицине, в частности к способам получения и применения биологически активных тканевых препаратов, обладающих иммунокорректирующим профилактическим и терапевтическим действием для лечения и профилактики заболеваний различной этиологии сельскохозяйственной птицы, в частности бройлеров.
Известно применение в птицеводстве высокоактивного тканевого препарата ПДЭ (плацента денатурированная эмульгированная), изготовляемого из плаценты человека.
Для цыплят бройлеров препарат рекомендуется применять с кормом или питьем при расходе 0,05 г на 1 кг живого веса за одно кормление при курсе 15 кормлений по схеме: 3 дня кормлений 3 дня перерыва (см. Рекомендации по применению «Высокоактивный тканевый препарат ПДЭ. Разработан по Госпрограмме для сельского хозяйства. Фирма «Регонда ВЕТ.» Регистрационный №ПВР2.01.0126-96. ТУ9358-001-03434058-96).
При высокой эффективности ограничением в применении является стоимость препарата ПДЭ, связанная с дефицитом сырья для его массового производства.
Известно также применение в птицеводстве тканевого препарата иммуномодулятора широкого спектра действия АСД-2Ф. Бройлерам препарат используют с питьевой водой при расходе 0,35 мл на 1 л воды первые 7 дней, повторно за 2 дня до и через 2 дня после вакцинации (см. И.Околева и др. Эффективность применения АСД-2Ф при выпойке бройлерам // Птицеводство, №10, 2008, с.49-50).
При хороших результатах, полученных авторами, ограничением в применении АСД-2Ф в птицеводстве является сложная технология приготовления препаратов методом сухой перегонки сырья животного происхождения, влияющим на его стоимость.
Известен также «Способ приготовления биостимулятора эмбрионального» (см. Патент РФ №2197251, A61K 35/12. Опубл. 27.01.2003. Бюл. №3). В качестве биологически активного сырья в стимуляторе используют инкубированные в течение 9 суток куриные яйца, облученные на 5; 6; 7 сутки лазером в течение 30 секунд при мощности излучения 9 мВт. Обработанные таким образом яйца гомогенезируют, охлаждают в течение 6-7 суток при 2-4 °C, с использованием в качестве разбавителя физиологического раствора в соотношении 1:10 с добавлением 5% раствора фенола до концентрации 0,3%.
При доступности и стабильном составе биологического сырья для производства такого биостимулятора, применение которого возможно в птицеводстве, некоторым недостатком его является наличие фенола до 3% в стимуляторе, что нежелательно при введении его птице, и использование в процессе инкубации лазерного облучения яиц, равномерность которого трудно обеспечить при массовом производстве биостимулятора, что может сказываться на стабильности и качестве препарата.
Задачей изобретения является разработка препарата для расширения ассортимента иммуностимулирующих препаратов, применяемых при выращивании птицы, получаемых из тканевого сырья животного происхождения, при упрощении сбора и подработки исходного животного сырья с гарантированным качеством и стабильным составом при массовом производстве, применение которого позволит повысить сохранность и продуктивность птицы при снижении общих затрат на выращивание бройлеров.
Задача решается тем, что в качестве исходного сырья для получения иммуномодулирующего тканевого препарата используют фабрициеву бурсу цыплят бройлеров в возрасте 35-42 дня жизни, взятую в процессе убоя и разделки цыплят в убойном цехе, на птицефабрике, в период технологического цикла выращивания, причем при выращивании бройлеров иммуномодулятор цыплятам применяют в жидком виде перорально вместе с питьевой водой курсами в три этапа - с 1 по 7 день, с 11 по 17 и с 21 по 27 день жизни бройлеров включительно из расчета от 0,15 до 0,1 г препарата иммуномодулятора на 1 кг живой массы бройлеров, при этом препарат из фабрициевой бурсы цыплят готовят посредством измельчения сырья, его гомогенизации в водно-солевом растворе, экстрагирования, нагревания экстракта, удаления термолабильной фракции, последовательного отделения вещества на мембране, задерживающей вещества с молекулярной массой более 10,0 Кд, разделения веществ на мембране, задерживающей вещества с молекулярной массой более 1,0 Кд, с добавлением стерилизующей фильтрацией раствора, с последующим розливом раствора во флаконы и его стерилизацией и автоклавированием при 1,5 атм, в течение 1 часа, причем полученный препарат содержит комплекс белков с молекулярной массой от 10,0 до 1,0 Кд и обладает иммуномодулирующими свойствами в отношении В - системы иммунитета.
Приготовление иммуномодулятора осуществляют следующим образом. Фабрициеву бурсу цыплят бройлеров, взятую в первые часы после убоя птицы, замораживают до температуры - 20°C в морозильной камере на 6-7 дней, затем производят дефростацию до температуры +4°C в лаборатории при температуре 20-22°C в течение двух часов (до появления сока), кусочки бурсы дефростируются, находясь в стерильной емкости, в которой находится термометр, для контроля температурного режима. Затем фабрициеву бурсу измельчают до состояния фарша с помощью блендера и заливают физиологическим раствором, из расчета 5-6 литров на 1 кг фарша. Полученную массу помещают в холодильник для экстрагирования. Через сутки массу процеживают, фильтрат кипятят 9-10 минут. Остывшую взвесь центрифугируют в течение 30 минут при 2000 об/мин.
Удаление термолабильной фракции, последовательного отделения вещества проводят сначала с помощью центрифугирования 30 мин, 2000 оборотов в 1 мин. Жировую пленку, образовавшуюся на фугате, удаляют, коагулят декантируют, а полученный материал пропускали через ватно-марлевый фильтр и повторно через тканевый фильтр (последовательное отделения вещества на мембране, задерживающей вещества с молекулярной массой более 10,0 Кд, разделение веществ на мембране, задерживающей вещества с молекулярной массой более 1,0 Кд, с добавлением стерилизующей фильтрацией раствора, с последующим разливом полученного раствора во флаконы, стерилизацией и автоклавированием при 1,5 атм, в течение 1 часа. Полученный препарат иммуномодулятор условно назван «Бурсанатал».
Фабрициева бурса-сумка (bursa Fabricii) - центральный лимфоидный орган, ответственный за созревание клеток-продуцентов (B-лимфоцитов). Образование B-клеток у птицы, так же как и у млекопитающих, начинается в эмбриональной печени, а затем перемещается в фабрициеву бурсу. Фабрициева сумка была открыта Гликом в 1956 году, и она обнаружена только у птиц (см. Алиев А.И., 1986). Фабрициева бурса - полостной орган, представляет собой округлый или овальный дивертикул дорсальной стенки массой 2-4 грамма, ранее как медицинское сырье не использовался и шел как отход производства при переработке бройлеров.
Эффект действия полученного препарата - тканевого иммуномодулятора «Бурсанатал» - изучали в лабораторных опытах и после отработки дозировки с учетом аналогов и схемы введения проводили исследования в производственных условиях на птицефабриках Свердловской области.
В задачу исследований на Среднеуральской птицефабрике входила оценка эффективности тканевого иммуномодулятора «Бурсанатал» и способа его применения в птицеводстве с ростостимулирующей, с профилактической и лечебной целью.
Работа выполнена на Среднеуральской птицефабрике на двух группах цыплят-бройлеров кросса «Ломан Белый» по 200 голов в каждой. Опыт продолжался в течение технологического цикла выращивания (40 дней) по схеме, представленной в таблице 1. Цыплятам опытной группы тканевый иммуномодулятор давали перорально вместе с питьевой водой в поилки, из расчета 0,15-0,1 г на 1 кг живой массы бройлеров в группе, в три этапа с 1-7 день жизни включительно, с 11-17 день жизни включительно и с 21 по 27 день жизни включительно. Состав готовили ежедневно, разливали в поилки при клеточном содержании и контролировали выпивание.
Цыплята контрольной группы в период выращивания получали физиологический раствор по технологической схеме в тех же объемах.
Определение живой массы бройлеров проводили через 5 дней до убоя. Убой цыплят был осуществлен в возрасте 40 дней. В результате проведенных исследований установлено положительное влияние выпивания тканевого иммуномодулятора по предложенной схеме на интенсивность роста цыплят (таблица 2).
Результаты исследований показали, что цыплята опытной группы отреагировали на получении тканевого иммунокорректора большей скоростью роста по сравнению с цыплятами-аналогами контрольной группы.
Полученные данные свидетельствуют о том, что в период с 1-го по 5-й день опыта увеличение средней массы цыплят опытной группы по сравнению с контрольной группой было больше на 4%. В период с 5-го по 15-й день опыта средняя масса цыплят возросла в опытной группе на 5,8% по сравнению с контрольной.
В период с 15-го по 20-й день опыта средняя масса бройлеров опытной группы увеличилась по сравнению с контролем на 5,0%. В период с 20-го по 25-й день опыта средняя масса цыплят в опытной группе по сравнению с контрольной увеличилась на 5,3%.
В следующий период (25-й-35-й день опыта) средняя масса цыплят в опытной группе повысилась на 5,9% по сравнению с контрольной группой. В период с 35-го по 40-й день средняя масса цыплят, получавших тканевый иммунокорректор, по сравнению с контрольной группой увеличилась на 8,6%.
Таким образом, максимальный прирост живой массы у цыплят опытной группы относительно аналогов из контроля приходится на заключительные недели выращивания, что значительно повышает выход конечной продукции.
В таблице 3 приведены данные расчета скорости роста цыплят в опытной и контрольной группах.
Как видно из таблицы 3, динамика скорости роста цыплят соответствовала увеличению их массы.
Среднесуточный прирост цыплят опытной группы по сравнению с аналогами контроля был постоянно выше на протяжении всего опыта. Наиболее высокая разница в приросте была в период с 25-го по 35-й день опыта (8,3%) и в период с 35-го по 40-й день (16,4%).
За весь период опыта (с 1-го по 40-й день) скорость роста цыплят, получавших тканевый иммуномодулятор, на 8,6% превышала соответствующий показатель контрольной группы.
В опыте также изучали иммунологические показатели крови цыплят-бройлеров при применении тканевого иммуномодулятора. У цыплят-бройлеров при применении тканевого иммуномодулятора отмечены изменения морфологических показателей крови, при этом изученные морфологические показатели изменяются в пределах физиологических норм. Данные таблицы 4 указывают, что на 20-й день опыта количество эозинофилов у цыплят опытной группы уменьшилось по сравнению с контрольной группой на 3,2%. Количество псевдоэозинофилов у цыплят, получавших тканевый иммунокорректор, увеличилось на 2,3%, количество лимфоцитов - на 9,6% по сравнению с контрольной группой.
Выявлена и возрастная динамика колебания данных показателей. Так, в опытной группе на 20-й день опыта количество эозинофилов и псевдоэозинофилов уменьшилось соответственно у опытной группы на 25,2% а у контрольной группы на 22,8%, количество лимфоцитов увеличилось у опытной группы на 71%, а у контрольной на 68% по сравнению с количеством данных клеток в 1-й день опыта.
На 40-й день опыта количество эозинофилов у цыплят опытной группы уменьшилось на 3,4% по сравнению с контрольной группой. Количество псевдоэозинофилов у бройлеров опытной и контрольной групп находилось практически на одном уровне. Количество лимфоцитов у цыплят опытной группы увеличилось по сравнению с контрольной группой на 0,8%.
При анализе возрастной динамики установлено, что в опытной группе на 40-й день опыта количество базофилов, эозинофилов, псевдоэозинофилов и моноцитов уменьшилось соответственно на 26,4%, 19,6%, 44,4% и 16,6%, количество лимфоцитов увеличилось на 61,3% по сравнению с количеством этих клеток на 20-й день опыта.
лы, %
нофилы
В контрольной группе на 40-й день опыта количество базофилов, эозинофилов, псевдоэозинофилов и моноцитов уменьшилось соответственно на 25,7%, 19,36%, 46,9% и 16,6%, количество лимфоцитов увеличилось на 55,83% по сравнению с их количеством на 20-й день опыта.
Результаты иммунологических исследований крови цыплят представлены в таблице 5.
Проведенные исследования свидетельствуют, что количество эритроцитов и гемоглобина с возрастом повысилось в обеих группах птицы. У цыплят опытной группы эта динамика была более выраженной. Так, количество эритроцитов на 40-й день у опытных бройлеров было выше на 0,56-10 г/л (23,3%), а уровень гемоглобина выше на 16,2%, чем в контрольной группе. Данные показатели свидетельствуют об увеличении кислородной емкости крови и высокой насыщенности эритроцитов гемоглобином.
Для оценки показателей гуморального иммунитета были определены бактерицидная и лизоцимная активность сыворотки крови (таблица 5).
Полученные результаты свидетельствуют, что с увеличением возраста повышается уровень бактерицидной активности сыворотки. Так, в опытной группе к 20-му дню бактерицидная активность была выше на 35,7%, а в контрольной - на 40,3% по сравнению с первоначальными показателями. К концу опыта произошло дальнейшее повышение показателя: в опытной группе на 32,03%, в контрольной - на 39,05% по сравнению с 20-дневным возрастом. При этом в опытной группе бактерицидная активность была выше на 3,7% данного показателя в контроле.
К концу опыта произошло повышение лизоцимной активности: в опытной группе в 2,1 раза, в контрольной - в 2,2 раза по сравнению с 20-дневным возрастом. В конце периода выращивания лизоцимная активность сыворотки крови у опытных цыплят была на 10% выше, чем в контрольной группе.
Уровень функциональной активности клеток мононуклеарной фагоцитирующей системы является одним из важнейших показателей неспецифической резистентности макроорганизма, так как они первыми взаимодействуют чужеродными антигенами при развитии инфекции и играют существенную роль в противомикробной защите организма. Подавление фагоцитоза снижает резистентность организма.
Результаты исследований показали, что фагоцитарная активность нейтрофилов стабильно имела более высокие значения у опытных цыплят. Кроме того, данный показатель имел и возрастную динамику: повышение его в опытной группе ко второму исследованию составило 28,4%, к третьему - 11,5%. В конце опыта в опытной группе фагоцитарная активность нейтрофилов составила 50,4% и была достоверно выше (по критерию Фишера), чем в контрольной группе, где равнялась 37,6%.
Также в опытной группе был выше фагоцитарный индекс (3,68), в отличие от контрольной группы, где данный показатель составил 2,75. Это говорит о том, что в опытной группе более высокая поглотительная способность нейтрофилов.
Полученные результаты проведенных гематологических исследований свидетельствуют о том, что цыплята, получавшие тканевый иммуномодулятор, имеют более высокие показатели неспецифической резистентности организма.
Показатели клеточного иммунитета: T-лимфоциты у цыплят в начале опыта в обеих группах были ниже нормы. При этом в опытной группе содержание Т-лимфоцитов было на 0,4% ниже, а В-лимфоцитов - на 2,4% ниже, чем в контрольной группе.
К концу опыта в периферической крови у цыплят опытной группы содержание Т-лимфоцитов достоверно выше (на 6,8%), чем в контроле, где данный показатель остается ниже нормы (таблица 5).
Относительное содержание В-лимфоцитов в периферической крови в конце опытного периода у цыплят, получавших тканевый иммунокорректор, на 3,6% выше, чем в контрольной группе. Это отразилось на соотношении T- и B-клеток в периферической крови. К концу выращивания индекс T- и B-лимфоцитов в опытной группе достигает нормы и составляет 1,08. Это на 11% выше, чем у цыплят контрольной группы, где данный показатель остается ниже нормы.
Проведенный иммунологический анализ крови цыплят-бройлеров свидетельствует о том, что применение тканевого иммуномодулятора стабилизирует физиологические и иммунологические показатели птицы и активирует формирование клеточного и гуморального иммунитета.
Таким образом, с учетом полученных данных можно заключить, то в условиях промышленного производства применение тканевого иммунокорректора способствует улучшению формирования и функционирования иммунной системы цыплят-бройлеров и может быть рекомендовано к промышленному применению.
Проведенный анализ сохранности цыплят-бройлеров за опытный период (без учета убитой по плану исследований птицы) представлен в таблице 6. Данные таблицы 6 указывают, что сохранность цыплят первые две недели в опытной группе выше по сравнению с контрольной группой на 4,0%. Начиная с третьей недели и до конца опытного периода, сохранность опытных цыплят также превышает сохранность птицы в контрольной группе.
Наиболее высокий процент сохранности цыплят в группе, получавшей тканевый иммуномодулятор, отмечался в пятую и шестую недели опыта.
Анализируя полученные результаты, можно сказать, что целом за технологический цикл выращивания сохранность бройлеров составила в опыте 98,5%, в контроле - 88,0%.
На момент убоя в опытной группе количество цыплят было больше на 10,65%, масса одной головы при убое была выше на 145,4 г (таблица 2), общая масса опытной группы больше на 28,6 кг по сравнению с контрольной группой (с учетом убитой по плану исследований птицы).
Дополнительно было изучено качество тушек бройлеров при использовании тканевого иммуномодулятора.
Бактериологическое исследование внутренних органов у пяти голов опытной и контрольной групп на 20-й день было проведено на базе Уральской государственной медицинской академии, на кафедре инфекционных болезней, вирусологии и микробиологии и в специализированной лаборатории ГКБ №40.
Результаты бактериологического исследования внутренних органов, полученных от 20-дневных цыплят, показали, что у трех бройлеров контрольной группы выделена культура Streptococcus faecalis, а из внутренних органов цыплят опытной группы патогенной микрофлоры не выделено.
Исследования качества мяса после убоя бройлеров (40-й день) были проведены на базе аккредитованной испытательной лаборатории по мясу и мясопродуктам Екатеринбургского мясокомбината в соответствии с действующими нормативами на методы исследования. Микробиологические показатели включали определение мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов, в том числе сальмонелл. Микробиологические параметры тушек цыплят-бройлеров опытной и контрольной групп отличались. Так, показатель общей микробной обсемененности (мезофильные аэробные и факультативно-анаэробные микроорганизмы) в контрольной группе был на 33,20% выше, чем в опытной.
Таким образом, полученные данные позволяют заключить, что при применении тканевого иммуномодулятора получен неочевидный эффект, происходит санация опытных цыплят от мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов. Это обусловлено, по-видимому, предупреждением развития феномена транслокации условно-патогенной микрофлоры из желудочно-кишечного тракта в органы и ткани при применении тканевого иммуномодулятора. Иммунологические показатели крови (Т- и B-лимфоциты), лизоцимная и бактерицидная активность сыворотки крови бройлеров свидетельствуют об активации клеточных и гуморальных факторов защиты под действием тканевого иммуномодулятора (таблица 5).
Применение тканевого иммуномодулятора «Бурсанатал» по предложенному способу способствует опережению скорости роста цыплят-бройлеров опытной группы по сравнению с их аналогами из контрольной группы, способствует увеличению среднесуточного прироста живой массы цыплят и сохранности поголовья на 10,5%.
Тканевый иммуномодулятор целесообразно применять для стимуляции роста, развития и повышения сохранности цыплят-бройлеров.
Таким образом, проведенные исследования в условиях птицефабрики показали, что использование тканевого иммуномодулятора в технологическом цикле выращивания цыплят-бройлеров позволяет сохранить и повысить их резистентность в жестких условиях промышленной технологии, а «Бурсанатал» при простоте его изготовления и доступности используемого сырья может широко применяться в промышленном птицеводстве.
название | год | авторы | номер документа |
---|---|---|---|
СТИМУЛЯТОР ЯЙЦЕНОСКОСТИ КУР И СПОСОБ ЕГО ПРИМЕНЕНИЯ | 2011 |
|
RU2501307C2 |
КОРМОВАЯ ДОБАВКА ДЛЯ КУР НЕСУШЕК И СПОСОБ ЕЕ ПРИМЕНЕНИЯ | 2011 |
|
RU2506811C2 |
Способ переработки фабрициевой бурсы птиц | 2021 |
|
RU2782347C1 |
СРЕДСТВО ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ МАСТИТОВ У КОРОВ И СПОСОБ ЕГО ПРИМЕНЕНИЯ | 2012 |
|
RU2522247C1 |
Способ иммунопрофилактики у птиц | 2022 |
|
RU2808575C1 |
СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ КАЧЕСТВА ПРОДУКЦИИ ПРИ ВЫРАЩИВАНИИ ЦЫПЛЯТ-БРОЙЛЕРОВ | 2016 |
|
RU2632935C1 |
Способ выращивания бройлеров с фитобиотиками | 2021 |
|
RU2771642C1 |
Способ повышения яичной продуктивности кур-несушек | 2023 |
|
RU2815535C1 |
Способ повышения стрессоустойчивости цыплят-бройлеров при вакцинальном стрессе | 2023 |
|
RU2804011C1 |
Способ вскармливания цыплят-бройлеров кормовой добавкой на основе бетулинсодержащего экстракта бересты | 2017 |
|
RU2634956C1 |
Группа изобретений относится к области ветеринарии. Способ приготовления включает переработку Фабрициевой бурсы бройлеров в возрасте 35-42 дней жизни. Фабрициеву бурсу однократно замораживают до -20°С и выдерживают в морозильной камере 6-7 дней, после чего производят дефростацию до +4°С, измельчают до состояния фарша, заливают физиологическим раствором из расчета 5-6 литров на 1 кг фарша. Полученную массу помещают в холодильник для экстрагирования, через сутки массу процеживают, фильтрат кипятят 9-10 минут. Взвесь центрифугируют 30 минут при 2000 об/мин. Жировую пленку, образовавшуюся на фугате, удаляют, коагулят декантируют. Полученный материал фильтруют, стерилизуют, разливают во флаконы и автоклавируют. Иммуномодулятор применяют в жидком виде перорально вместе с питьевой водой курсами в три этапа - с 1 по 7 день, с 11 по 17 и с 21 по 27 день жизни бройлеров включительно из расчета от 0,15 до 0,10 г/кг живой массы. Предложенная группа изобретений позволяет сохранить и повысить резистентность, стимулировать рост и развитие бройлеров. 2 н.п. ф-лы, 6 табл.
1. Способ приготовления иммуномодулятора для выращивания бройлеров, включающий переработку Фабрициевой бурсы птиц путем измельчения, охлаждения, экстракции, очистки и стерилизации полученного состава, отличающийся тем, что в качестве исходного сырья для получения иммуномодулятора используют Фабрициеву бурсу бройлеров в возрасте 35-42 дней жизни, при этом Фабрициеву бурсу однократно замораживают до -20°С, и выдерживают в морозильной камере 6-7 дней, после чего производят дефрастацию до +4°С, измельчают до состояния фарша, заливают физиологическим раствором из расчета 5-6 л на 1 кг фарша, полученную массу помещают в холодильник для экстрагирования, через сутки массу процеживают, фильтрат кипятят 9-10 мин, взвесь центрифугируют 30 мин при 2000 об/мин, жировую пленку, образовавшуюся на фугате, удаляют, коагулят декантируют, полученный материал фильтруют, стерилизуют, разливают во флаконы и автоклавируют.
2. Способ применения иммуномодулятора, полученного по п.1, отличающийся тем, что иммуномодулятор применяют в жидком виде перорально вместе с питьевой водой курсами в три этапа - с 1 по 7 день, с 11 по 17 и с 21 по 27 день жизни бройлеров включительно из расчета от 0,15 до 0,10 г препарата иммуномодулятора на 1 кг живой массы бройлеров.
ПАК Т.В | |||
Технология получения и исследование свойств биологически активных веществ из Фабрициевой сумки (бурсы) кур | |||
Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук | |||
- Щелково, 2000, с.5-29 | |||
ПОЛИПЕПТИДНЫЙ ПРЕПАРАТ ИЗ БУРСЫ КУР, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ НА ЕГО ОСНОВЕ | 2000 |
|
RU2180592C1 |
СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ОРГАНИЗМА БРОЙЛЕРОВ | 2007 |
|
RU2351151C1 |
CN 101113176 A, 30.01.2008. |
Авторы
Даты
2011-03-20—Публикация
2009-10-05—Подача