СПОСОБСТВУЮЩИЕ РАСТВОРЕНИЮ, СОДЕРЖАЩИЕ БИГУАНИД СРЕДСТВА ДЛЯ ПЕРОРАЛЬНОЙ ДОСТАВКИ ПЕПТИДА Российский патент 2011 года по МПК A61K38/23 A61K38/28 A61K47/10 A61K47/14 A61K47/16 A61K47/18 A61P19/10 A61P3/00 A61P3/10 A61P19/00 A61P35/00 

Данное изобретение относится к применению некоторых ароматических спиртов в качестве усилителей абсорбции для облегчения прохождения пептидов, белков и других макромолекул через кишечную стенку и, в особенности, к применению новых агентов для обеспечения растворения указанных ароматических спиртов для того, чтобы улучшить доступность таких агентов в биологических жидкостях, в которых при нормальных условиях они чрезвычайно плохо растворимы.

Ранее, в WO 2004/091584 описано, что ароматические спирты, такие как пропилгаллат, бутилированный гидроксианизол и бутилированный гидрокситолуол могут действовать как усилители абсорбции для пептидов и белков через поверхности слизистой оболочки, например, кишечника, и действие этих агентов становится максимальным при изготовлении в сочетании с другими агентами, которые усиливают их растворение в водных средах. Примерами таких агентов, способствующих растворению, являются цитированные ранее соли желчных кислот, такие как деоксихолат натрия и хенодеоксихолат натрия.

На основании сведений из предшествующего уровня техники специалист в области техники придет к выводу, что для того чтобы достигнуть удовлетворительных результатов, средство, способствующее растворению, должно обладать поверхностной активностью, предпочтительно, мицеллообразованием, каким обладают соли желчных кислот, и, в действительности, одной из биологических функций солей желчных кислот in vivo является обеспечение растворения пищевых компонентов, в особенности липидов, в кишечнике.

В настоящее время неожиданно обнаружено, что новый и несвязанный класс небольших молекул (молекул с небольшим молекулярным весом) также способен действовать как средства, способствующие растворению для плохо растворимых ароматических спиртов, несмотря на тот факт, что эти молекулы не демонстрируют поверхностно-активных свойств и имеют небольшую тенденцию к образованию мицелл. Этот класс небольших молекул включает замещенные бигуаниды, типичными примерами которых являются метформин и фенформин.

Оказывается, что действие бигуанидов как средств, способствующих растворению, является специфическим для ароматических спиртов и не распространяется на другие классы молекул, такие как холестерин или жирные кислоты, для которых соли желчных кислот хорошо известны как солюбилизирующие агенты. Следовательно, можно сделать вывод, что не имеется информации о солях желчных кислот, либо со структурной, либо с функциональной точки зрения такого, что приведет специалиста в области техники к предположению, что бигуаниды обладают также такими свойствами, способствующими растворению.

Бигуаниды можно технологически изготавливать вместе с плохо растворимыми ароматическими спиртами в качестве эксципиентов с получением вводимых через слизистую оболочку фармацевтических препаратов, содержащих одно или несколько активных молекулярных веществ, прохождение которых через барьер слизистой оболочки увеличивается в результате введения в сочетании со смесью бигуанид/ ароматический спирт.

Изобретение предлагает фармацевтическую композицию, включающую смесь:

(а) активного макромолекулярного вещества; и

(b) ароматического спирта, усилителя абсорбции, выбранного из пропилгаллата, бутилированного гидрокситолуола, бутилированного гидроксианизола и их аналогов и производных, и

(с) бигуанида, способного увеличивать растворимость ароматического спирта, усилителя абсорбции, в водных средах,

в которой ароматический спирт, усилитель абсорбции, присутствует в количестве (по массе), большем или равном количеству активного макромолекулярного вещества.

Изобретение также предлагает применение в фармацевтической композиции ароматического спирта, выбранного из пропилгаллата, бутилированного гидрокситолуола, бутилированного гидроксианизола и их аналогов и производных, вместе с бигуанидом или его фармацевтически приемлемой солью, способной увеличивать растворимость ароматического спирта в водной среде, в качестве усилителя абсорбции макромолекул внутри организма.

В следующем варианте осуществления изобретение предлагает применение ароматического спирта, выбранного из пропилгаллата, бутилированного гидрокситолуола, бутилированного гидроксианизола и их аналогов и производных, вместе с бигуанидом или его фармацевтически приемлемой солью, способной увеличивать растворимость ароматического спирта в водной среде для изготовления препарата, содержащего активное макромолекулярное вещество, для того чтобы повысить абсорбцию активного макромолекулярного вещества в организме человека или животного.

Общей чертой групп молекул, действующих как средства, способствующие растворению, описанных в этом изобретении, является бигуанидное ядро, и молекулы с целым рядом заместителей в бигуанидном ядре демонстрируют требуемую активность. Для того чтобы оценить пригодность бигуанида для использования как средства, способствующего растворению, можно применять следующую процедуру. Обычно, раствор бигуанида приготавливают в воде с концентрацией 100 мг/мл, если требуется, при нагревании, и устанавливают соответствующий рН, если раствор не получают немедленно. К 1 мл раствора добавляют 25 мг пропилгаллата и смесь нагревают при встряхивании вплоть до получаса. Если получается прозрачный раствор, то замещенный бигуанид можно считать подходящим для применения в качестве средства, способствующего растворению.

Для применения в настоящем изобретении бигуаниды будут соответственно иметь следующую формулу

где R¹, R², R³ и R⁴, каждый, независимо выбран из водорода, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного фенила, этиленгликоля, диэтиленгликоля, триэтиленгликоля и тетраэтиленгликоля, или один из R¹, R², R³ и R⁴ может иметь формулу

где R⁵, R⁶ и R⁷, каждый, независимо выбран из водорода, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного фенила, этиленгликоля, диэтиленгликоля, триэтиленгликоля и тетраэтиленгликоля.

Заместители алкильных и фенильных групп включают галоген, например хлор, бром, фтор или иод, гидрокси и амино. Алкильные группы предпочтительно имеют от 1 до 6 атомов углерода и могут быть насыщенными или ненасыщенными, с цепью нормального или разветвленного строения. Бигуанид может быть включен в композицию согласно изобретению как фармацевтически приемлемая соль.

Предпочтительные бигуаниды для применения в настоящем изобретении включают метформин, фенформин и хлоргексидин или их фармацевтически приемлемые соли. Подходящими фармацевтически приемлемыми солями являются хлорид, бромид, иодид или соли органических кислот, такие как ацетат, пропионат, мезилат (метилсульфонат) или глюкуронат.

Бигуанид может присутствовать в композиции в количестве, по меньшей мере, 50 мас.%, предпочтительно, от 60 до 95% и, более предпочтительно, от 80 до 90%.

Ароматический спирт - усилитель абсорбции, может быть пропилгаллатом или его аналогом или производным и, предпочтительно, представляет собой пропилгаллат. Подходящие аналоги и производные пропилгаллата включают сложные эфиры галловой кислоты. Сложные эфиры могут представлять собой эфиры, имеющие С_1-12алкил, С_1-12 алкилокси, С_1-12 алкитио или С_2-12 алкенил с цепью нормального или разветвленного строения. Соединения представляют собой необязательно замещенные галогеном, сложные эфиры, имеющие С_1-12 алкил, С_1-12 алкилокси, С_1-12 алкилтио или С_2-12 алкенил с цепью нормального или разветвленного строения. Ароматический спирт, усилитель абсорбции, также можно выбрать из ВНТ, ВНА и их аналогов и производных. Подходящие аналоги и производные ВНТ или ВНА включают аналоги и производные гидрокситолуола или гидроксианизола, где метильная группа или метоксигруппа, связанная с ароматическим кольцом, и/или атом водорода в ортоположении к гидроксильной группе заменены С_1-12 алкилом, С_1-12 алкилокси, С_1-12 алкилтио или С_2-12 алкенилом с цепью нормального или разветвленного строения, либо незамещенным, либо замещенным в любом положении, в особенности, атомами галогена. Предпочтительно, ароматический спирт, усилитель абсорбции, выбран из пропилгаллата, ВНТ и ВНА.

Ароматические спирты, описанные выше, которые применяют в фармацевтической практике как антиоксиданты, включаются в концентрациях вплоть до 0,1 мас.%/об. всего препарата (см. позиции списков для индивидуальных соединений в Handbook of Parmaceutical Excipients, Eds Wade & Weller, The Pharmaceutical Press, London UK, 2^th edition 1994). Обычно полагают, что более высокие концентрации соединений не дают дополнительной выгоды в качестве антиоксидантов, и поэтому имеется стандартная фармацевтическая практика ограничивать концентрации антиоксидантов в препаратах до величины не более чем 0,1%. Однако согласно настоящему изобретению при их применении как усилителей абсорбции, эффективность таких соединений зависит от концентрации вплоть до значительно более высокого уровня, и их содержание в фармацевтическом препарате значительно выше, чем ранее описано в известном уровне техники.

Например, в WO-A-0222158 предложены композиции, включающие циклоспорин (не являющийся макромолекулой) и содержащие ВНА, ВНТ и PG обычно в качестве антиоксидантов. Несмотря на то что конкретные концентрации антиоксидантов не даны, применение соединений как антиоксидантов предполагает уровень не выше чем 0,1 мас.%.

Спирт может присутствовать в композиции в количестве от 5 до 30 мас.%, предпочтительно, от 10 до 20%.

Активные макромолекулярные вещества, входящие в объем изобретения, включают все молекулы, обладающие полезным действием при абсорбировании в организме человека или животного, в особенности, через кишечные стенки. Полезным действием может быть, например, терапевтическое, косметическое или превентивное, такое как профилактическое или контрацептивное. Активные макромолекулярные вещества могут быть природного (биологического), синтетического или полусинтетического происхождения.

Макромолекулами, предпочтительно, обозначают молекулы, имеющие молекулярную массу выше 1000 Да, предпочтительно, выше 2000 Да и, наиболее предпочтительно, выше 3000 Да. Примеры макромолекул, включающие макромолекулярные активные вещества, включают:

1. Полипептиды и белки, такие как инсулин; кальцитонин; человеческий сывороточный альбумин; гормон роста; факторы, высвобождающие гормон роста; галанин; паратиреоидный гормон; пептид YY; оксинтомодулин; белки свертывания крови, такие как киноген, протромбин, фибриноген, фактор VII, фактор VIII или фактор IX; эритропоэтины и имитаторы ЕРО; колониестимулирующие факторы, включая GCSF и GMCSF; тромбоцитарные факторы роста; эпидермальные факторы роста; факторы роста фибробластов; трансформирующие факторы роста; GLP-1; экзендин; лептин; GAG; цитокины; инсулиноподобные факторы роста; костный и хрящевой индуцирующие факторы; нейротрофические факторы; интерлейкины, включающие IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12; интерфероны, включающие интерферон гамма, интерферон-1а, интерферон альфа; TNF-альфа; TNF-бета; TGF-бета; фрагменты А и В токсина холеры; фрагменты А и В энтеротоксина E. сoli; секретин; ферменты, включающие гистон деацетилазу, супероксид дисмутазу, каталазу, аденозин деаминазу, тимидин киназу, цитозин деаминазу, протеазы, липазы, карбогидразы, нуклеотидазы, полимеразы, киназы и фосфатазы; белки транспорта и связывания, особенно такие, которые связывают и/или транспортируют витамин, ион металла, аминокислоту или липид или липопротеин, такой как белок переноса сложного эфира холестерина, белок переноса фосфолипида, белок связывания HDL; белки соединительных тканей, такие как коллаген, эластин или фибронектин; мышечный белок, такой как актин, миозин, дистрофин или минидистрофин; нейрональный белок, белок печени, сердца или адипоцита; цитотоксический белок; цитохром; белок, который способен вызвать репликацию, рост или дифференцировку клеток; молекула передачи сигнала, такая, как белок внутриклеточной передачи сигнала или белок внеклеточной передачи сигнала (например, гормон); трофические факторы, такие, как BDNF, CNTF, NGF, IGF, GMF, aFGF, bFGF, VEGF, NT3, T3 и HARP; аполипопротеины; молекулы антител; рецепторы в растворимой форме, такие как рецепторы Т-клеток и рецепторы цитокинов, интерфероны или хемокины; белки или пептиды, содержащие антигенные эпитопы и фрагменты; и производные, конъюгаты и варианты последовательности любого из вышеназванных белков. Эти и другие белки можно получать из организма человека, растения, животного, из бактерий и грибов как источников и либо экстрагировать из природных источников, получать как рекомбинанты ферментацией, либо химически синтезировать.

2. Полинуклеотиды, такие как имеющие длинную цепь нормального или циклического строения ДНК с одной, двойной или тройной цепью, РНК с одной, двойной или тройной цепью, олигонуклеотиды, такие как антисмысловая ДНК или РНК, и их аналоги, включающие РНК и фосфотиоатные производные. В одном варианте осуществления предпочтительным является то, что полинуклеотиды, применяемые в изобретении, содержат мотив CpG. Кодирующая последовательность полинуклеотида может кодировать терапевтический продукт, в особенности кодирующая последовательность может кодировать внеклеточный белок (например, секретируемый белок); внутриклеточный белок (например, цитозольный, ядерный или мембранный белок); белок, присутствующий в клеточной мембране; белок крови, такой как белок свертывания (например, киноген, протромбин, фактор VII, фактор VIII или фактор IX фибриногена); фермент, такой как катаболический, анаболический желудочно-кишечный, метаболический (например, гликолиза или цикла Кребса), или фермент передачи сигнала клетки, фермент, который разрушает или модифицирует липиды, жирные кислоты, гликоген, аминокислоты, белки, нуклеотиды, полинуклеотиды (например, ДНК или РНК) или углевод (например, протеаза, липаза или карбогидраза), или фермент, модифицирующий белок, такой как фермент, который присоединяет или воспринимает химические мотивы из белка (например, киназа или фосфатаза); белок транспорта или связывания (например, тот, который связывает и/или транспортирует витамин, ион металла, аминокислоту или липид, такой как белок переноса сложного эфира холестерина, белок переноса фосфолипида или белок, связывающий HDL); белок соединительной ткани (например, коллаген, эластин или фибронектин); мышечный белок (например, актин, миозин, дистрофин или минидистрофин); нейрональный белок, белок печени, сердца или адипоцита; цитотоксический белок; цитохром; белок, который способен вызвать репликацию, рост или дифференцировку клеток; белок, который способствует транскрипции или трансляции гена или регулирует транскрипцию или трансляцию (например, фактор транскрипции, или белок, который связывает фактор транскрипции или полимеразу); молекула передачи сигнала, такая как молекула внутриклеточной или внеклеточной передачи сигнала (например, гормон); белок иммунной системы, такой как антитело, рецептор Т-клетки, молекула МНС, цитокин (например, IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, TNF-, TNF-, TGF-), интерферон (например, IFN-, IFN-, IFN-), хемокин (например, MIP-1, MIP-1, RANTES), иммунный рецептор (например, рецептор цитокина, интерферона или хемокина, такой как рецептор для любого из указанных выше цитокинов, интерферонов или хемокинов) или маркер клеточной поверхности (например, макрофаг, Т-клетка, В-клетка, NK-клетка или маркер поверхности дендритной клетки) (например, CD 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 16, 18, 19, 28, 40 или 45; или его природный лиганд), трофический фактор (например, BDNF, CNTF, NGF, IGF, GMF, aFGF, bFGF, VEGF, NT3, T5, HARP) или аполипопротеин; супрессор опухоли (например, р53, Rb, Rap1A, DCC или k-rev); суицидный белок (тимидинкиназа или цитозиндеаминаза); или ген-репрессор. Белки и пептиды, кодированные полинуклеотидами, применяемыми в изобретении, могут быть иммуногенными, т.е. содержат антиген, специфичный для активности белка, против которого иммунной системой генерируются антитела.

Полинуклеотид может иметь регулирующие последовательности, операбельно связанные с кодирующей последовательностью. Регулирующие последовательности обычно могут быть последовательностями любого эукариота или вируса, который инфицирует такие эукариоты. Полинуклеотид может включать источник репликации.

Полинуклеотиды могут быть химически модифицированными. Это может усиливать их резистентность к нуклеазам или может усиливать их способность к введению в клетки. Например, можно применять фосфоротиоат олигонуклеотидов. Другие аналоги деоксинуклеотида включают метилфосфонаты, фосфорамидаты, фосфородитиоаты, N3'P5'-фосфорамидаты и олигорибонуклеотид фосфоротиоаты и их 2'-О-алкильные аналоги и 2'-О-метилрибонуклеотид метилфосфонаты. В альтернативном случае можно применять олигонуклеотиды со смешанными основными цепями (МВО). МВО содержат сегменты фосфотиоат олигонуклеотидов и соответственно установленные сегменты модифицированных олигодеокси- или олигорибонуклеотидов. МВО имеют сегменты фосфоротиоатных связей и другие сегменты других модифицированных олигонуклеотидов, таких как метилфосфонат, который не является ионным и в значительной степени резистентным к нуклеазам или 2'-О-алкилолигорибонуклеотидам.

Полинуклеотид, подходящий для применения в изобретении, предпочтительно находится в форме, в которой он является по существу свободным или ассоциированным с клетками или клеточным, прокариотическим, эукариотическим, ядерным, хроматиновым, гистоновым или белковым веществом. Он может быть, по существу, в изолированной форме, или он может быть, по существу, в очищенной форме, в каждом случае, обычно, он будет включать более 90%, например (более чем или по меньшей мере) 95%, 98% или 99% полинуклеотида или сухой массы в препарате. Тем самым полинуклеотид может быть в форме 'незащищенной ДНК'.

3. Полисахариды, такие как гепарин, низкомолекулярный гепарин, полиманноза, циклодекстрины и липополисахарид.

4. Любое из указанных выше веществ либо в отдельности, либо в сочетании друг с другом (например, в форме гетероконъюгата) или с дополнительными агентами.

В предпочтительных вариантах осуществления изобретения активное макромолекулярное вещество, которое абсорбируется, выбрано из кальцитонинов, инсулина, низкомолекулярного гепарина, эритропоэтина, колониестимулирующего фактора, включая гранулоцитарный колониестимулирующий фактор (GCSF) и гранулоцитарно-моноцитарный колониестимулирующий фактор (GMCSF), интерфероны, С-пептид, глюкагоноподобный белок 1 (GLP-1), человеческий гормон роста и паратиреоидный гормон и их аналоги и фрагменты.

В композициях согласно изобретению ароматический спирт, усилитель абсорбции, присутствует в количестве (по массе), большем или равном количеству активного макромолекулярного вещества. Это обеспечивает эффективную концентрацию ароматического спирта, усилителя абсорбции, в клеточном барьерном слое кишечника (кишечной стенке) такую, чтобы вызвать повышенную абсорбцию при совместном присутствии подходящего количества активного макромолекулярного вещества, которое после абсорбции будет проявлять нормальное полезное действие. Количества ароматического спирта, усилителя абсорбции, и активного макромолекулярного вещества легко (быстро) выбирают на основании количества (например, уровня концентрации в крови) представляющего интерес активного макромолекулярного вещества, которое необходимо для терапевтической эффективности. Массовое отношение ароматического спирта, усилителя абсорбции, к активному макромолекулярному веществу в смеси, содержащейся в капсуле, соответственно составляет, по меньшей мере, 1:1, предпочтительно, по меньшей мере, 5:1, например от 1:1 до 100:1, предпочтительно, от 3:1 до 50:1, наиболее предпочтительно, от 5:1 до 20:1.

Отношение бигуанида к ароматическому спирту, усилителю абсорбции, соответственно, по меньшей мере, составляет 2:1 (по массе), предпочтительно, от 2:1 до 10:1 и, наиболее предпочтительно, от 2:1 до 5:1.

Абсолютное количество активного макромолекулярного вещества можно выбрать на основании дозирования вещества, требуемого для проявления нормального полезного действия в отношении применяемой схемы приема и рассматриваемого пациента. Установление этих количеств находится в пределах сферы деятельности специалиста, осуществляющего на практике изобретение.

В композиции для перорального введения предпочтительным является то, что содержимое капсулы включает подходящее количество активного макромолекулярного вещества для достижения его нормального терапевтического действия. Например, композиция может содержать от 0,05 до 50%, предпочтительно, от 0,1 до 25%, более предпочтительно, от 0,1 до 10 мас.% активного макромолекулярного вещества, считая на массу содержимого капсулы (не включая саму капсулу).

Композиция согласно изобретению может дополнительно включать одно или несколько других, усиливающих абсорбцию соединений, например жирные кислоты со средней длиной цепи и моноглицериды со средней длиной цепи.

Композиция согласно изобретению может дополнительно включать любую общепринятую добавку, применяемую в технологии изготовления фармацевтических продуктов, включая, например, антиоксиданты, антимикробные агенты, суспендирующие агенты, наполнители, разбавители, дезинтегрирующие агенты, агенты для набухания, регуляторы вязкости, пластификаторы и регуляторы кислотности (в особенности, добавки, устанавливающие рН кишечной среды от 7 до 7,5) и ингибиторы протеазы, такие как апротинин, соевый ингибитор трипсина или мезилат габексата.

Кроме того, композиция согласно изобретению может необязательно включать дополнительные активные вещества, которые могут синергическим образом усиливать требуемое действие композиции. Например, когда активным макромолекулярным веществом является инсулин, композиция может также включать сенсибилизатор инсулина, способный усиливать ответную реакцию на абсорбированный инсулин. Примерами сенсибилизаторов, которые можно применять в этом способе, являются троглитазон, пиоглитазон, розиглитазон и другие члены класса молекул глитазонов.

В композиции согласно изобретению, когда смесь содержится в капсуле или таблетке, которая включает ароматический спирт, усилитель абсорбции, и активное макромолекулярное вещество, предпочтительно, препарат является, по существу, безводным. В более предпочтительных вариантах осуществления изобретения полная композиция является, по существу, безводной. По существу безводная смесь в контексте данного изобретения означает содержание менее 5%, предпочтительно, менее 1% и, более предпочтительно, менее 0,5 мас.% воды.

Композиции согласно изобретению, в зависимости от применяемого в них активного макромолекулярного вещества, можно применять при лечении ряда болезненных состояний и заболеваний организма человека или животного путем терапии или, в альтернативном случае, можно применять для введения макромолекул, важных для диагностики заболеваний и болезненных состояний в организме человека или животного. Композиции согласно изобретению, предпочтительно, являются фармацевтическими или косметическими композициями.

Фармацевтические композиции согласно изобретению в особенности применяют при лечении диабета, когда композиция может включать инсулин, С-пептид или GLP-1 или их смесь в качестве активного вещества; при лечении остеопороза, когда композиция может включать кальцитонин или РТН или их смесь; при лечении остеоартрита, когда композиция может включать кальцитонин; при лечении ожирения, когда композиция может включать пептид YY или оксинтомодулин или их смесь, или при лечении рака, когда композиция может включать эритропоэтин, GCSF, GMCSF или их смесь.

В композициях согласно изобретению смесь, содержащаяся в капсуле, может быть жидкостью, полутвердым веществом или гелем, который находится либо в форме раствора, либо дисперсии микрочастиц. То есть активное макромолекулярное вещество(а) для абсорбции означает введенное в препарат либо в форме раствора, либо как дисперсия микрочастиц. В альтернативном случае композиция может быть в форме твердого вещества.

Композиции согласно изобретению соответственно изготавливают путем приготовления по существу безводной смеси активного макромолекулярного вещества и ароматического спирта, усилителя абсорбции, и затем, необязательно, наполнением смесью непокрытых капсул и, необязательно, покрытием их подходящей полимерной смесью для достижения свойств требуемой проницаемости.

В зависимости от природы применяемых дополнительных эксципиентов, фармацевтическая композиция согласно изобретению может быть в жидкой, твердой, полутвердой или гелеобразной форме. Фармацевтическая композиция согласно изобретению является подходящей для введения через любой путь, предоставляющий доступ к различным тканям слизистой оболочки, таким как щечная или сублингвальная слизистая оболочка, слизистая оболочка носа, неба, легких, прямой кишки, кишечного тракта (включая большой и малый кишечник) и влагалища. В случае жидких, полутвердых или гелеобразных препаратов, они могут быть либо безводными, либо водными.

Когда предполагаемой областью действия композиции согласно изобретению является кишечник, требуется, чтобы композиция помещалась внутри энтеросолюбильного покрытия, которое может противостоять желудку так, чтобы компоненты препарата остались вместе, нерастворенными и непосредственно объединенными до тех пор, пока не достигнут тканей малого кишечника или ободочной кишки. Такие препараты, по существу, будут являться безводными. Композиции в жидкой форме будут являться подходящими для введения в виде капсул с энтеросолюбильным покрытием, тогда как твердые препараты можно вводить либо внутри капсул с энтеросолюбильным покрытием, либо в форме таблетки.

Энтеросолюбильное покрытие выбирают соответственно так, чтобы противостоять природному состоянию желудка и чтобы становиться проницаемым в требуемом месте в кишечнике. Предпочтительно, это определяют условиями рН, которые модулируют на всем протяжении длины кишечника. Когда местом действия является малый кишечник, предпочтительным является то, что энтеросолюбильное покрытие становится проницаемым и высвобождает свое содержимое при рН от 3 до 7, предпочтительно, от 5,5 до 7, более предпочтительно, от 5,5 до 6,5. Когда предназначенным местом действия является ободочная кишка, предпочтительно то, что энтеросолюбильное покрытие становится проницаемым и высвобождает свое содержимое при рН 6,8 или выше.

Подходящие энтеросолюбильные покрытия хорошо известны в области техники и включают полиметакрилаты, такие как покрытия, выбранные из L и S групп Eudragits в особенности Eudragits, L12.5P, L12.5, L100, L100-55, L30 D-55, S12.5P, S12,5 и S100. Выбор соответствующего покрытия для капсулы, которая, предпочтительно, представляет собой желатиновую капсулу, может легко сделать специалист в области техники на основе своих знаний и доступной литературы, поддерживающей продукты Eudragit.

Когда предназначенным местом действия является назальная слизистая оболочка, препарат может быть в форме водного раствора или в виде сухого порошка, который можно вводить как спрей.

Когда предназначенное место действия представляет прямую кишку, соответствующим способом введения является, например, безводная жидкость или твердое вещество, заключенное внутри оболочки капсулы или введенное в матрицу эродируемого суппозитория.

Для вагинальной аппликации также имеет место введение препарата в форме геля.

Следующие примеры служат для иллюстрации настоящего согласно изобретению и не должны быть истолкованы как ограничение.

Примеры

Пример 1

Изготовление препарата, содержащего метформин и пропилгаллат

К 1 г метформина добавляют 1,83 г дистиллированной воды. Затем смесь нагревают приблизительно до 60°С при энергичном встряхивании до тех пор, пока не растворится все твердое вещество. К прозрачному раствору добавляют 250 мг пропилгаллата. Затем смесь нагревают приблизительно при 60°С при энергичном встряхивании до тех пор, пока не растворится все твердое вещество. Устанавливают рН 5,5 добавлением приблизительно 25 мкл гидроксида натрия. Получают гомогенный раствор, который остается прозрачным при комнатной температуре.

Пример 2

Изготовление препарата, содержащего фенформин и пропилгаллат

Препарат фенформин/пропилгаллат изготавливают, как описано в примере 1, за исключением того, что метформин заменяют фенформином. Получают гомогенный раствор, который остается прозрачным при комнатной температуре.

Пример 3

Изготовление препарата, содержащего диглюконат хлоргексидина и пропилгаллат

Раствор диглюконата хлоргексидина 200 мг/мл разбавляют 2× дистиллированной водой с получением раствора 100 мг/мл. К 10 мл этого раствора добавляют 250 мг пропилгаллата. Затем смесь нагревают, приблизительно при 60°С при энергичном встряхивании до тех пор, пока все твердое вещество не растворится. Устанавливают рН 5,5 добавлением приблизительно 25 мкл 1М гидроксида натрия. Получают гомогенный раствор, который остается прозрачным при комнатной температуре.

Пример 4

Изготовление препарата, содержащего метформин и бутилированный гидрокситолуол (ВНТ)

К 400 мг метформина добавляют 4,0 г дистиллированной воды. Затем смесь нагревают приблизительно при 70°С при энергичном встряхивании до тех пор, пока все твердое вещество не растворится. К прозрачному раствору добавляют 40 мг ВНТ. Затем смесь нагревают приблизительно при 70°С при энергичном встряхивании до тех пор, пока все твердое вещество не растворится. Получают гомогенный раствор, который остается прозрачным при комнатной температуре.

Пример 5

Изготовление препарата, содержащего фенформин и бутилированный гидрокситолуол (ВНТ)

К 400 мг фенформина добавляют 4,0 г дистиллированной воды. Затем смесь нагревают приблизительно при 70°С при энергичном встряхивании до тех пор, пока все твердое вещество не растворится. К прозрачному раствору добавляют 100 мг ВНТ. Затем смесь нагревают приблизительно при 70°С при энергичном встряхивании до тех пор, пока все твердое вещество не растворится. Получают гомогенный раствор, который остается прозрачным при комнатной температуре.

Пример 6

Изготовление препарата, содержащего фенформин и бутилированный гидроксианизол (ВНА)

Способ изготовления препарата такой, как описан в примере 5 для препарата метформин/ВНТ, за исключением того, что ВНТ заменяют ВНА. Получают гомогенный раствор, который остается прозрачным при комнатной температуре.

Пример 7

Изготовление препарата, содержащего метформин, пропилгаллат и инсулин

Раствор метформин/пропилгаллат изготавливают, как описано в примере 1. Затем полученный раствор охлаждают до 37°С и добавляют 28,1 мг инсулина. Затем смесь инкубируют при 37°С с перемешиванием до тех пор, пока инсулин полностью не растворится. Затем раствор быстро замораживают при -20°С, далее инкубируют при -20°С в течение 1 часа, и затем высушивают вымораживанием в течение ночи, подвергая воздействию вакуума 1 мбар. Затем сухую порошкообразную массу пропускают через сито так, чтобы получить мелкий порошок.

Пример 8

Растворение препарата, содержащего метформин, пропилгаллат и инсулин

В 8-мл пробирке взвешивают 244 мг порошка метформин/PG/инсулин, которую затем переносят в водяную баню при 37°С. В образец вносят 1 мл моделированной кишечной жидкости с рН 5,5, предварительно нагретой до 37°С, который затем инкубируют при 37°С. Порошок растворяют в течение 10 минут. 100 мкл раствора переносят в лунку микропланшета и измеряют поглощение при 620 нм и 492 нм. Оптическая плотность растворов подобна плотности моделированной кишечной жидкости, взятой отдельно, демонстрируя, что раствор является прозрачным и не содержит частиц, и рассеяние не наблюдается.

Образец Поглощение при 492 нм Поглощение при 620 нм Порошок 0,064 0,038 Кишечная жидкость 0,038 0,043

Пример 9

Эффективность in vivo смеси гидрохлорид метформина/пропилгаллат/инсулин в организме ювенильных свиней

Препараты, изготовленные так же, как в примере 7, смешивают с набухающим агентом и агентом для скольжения, и сухим порошком наполняют капсулы, причем каждая имеет компоненты в количественном соотношении, представленном ниже. Для сравнения, изготавливают препараты, содержащие хенодеоксихолат вместо метформина и кальцитонин лосося вместо инсулина. Все препараты имеют идентичные количества пропилгаллата на капсулу.

  41В 90А 88Е Инсулин 3,75 мг 3,75 мг   Кальцитонин     1,00 мг Метформин   133,4 мг 133,4 мг Хенодеоксихолат 70,60 мг     Пропилгаллат 33,35 мг 33,35 мг 33,35 мг Натриевая соль гликолята крахмала 9,69 мг 15,15 мг 15,15 мг Тонкоизмельченный оксид кремния 1,08 мг 1,67 мг 1,67 мг Ингибитор трипсина сои     10,00 мг

Препараты вводили в капсулах через отверстие в тонкую кишку восьми ювенильным свиньям (каждая массой ~40 кг). Уровни глюкозы в крови измеряли с интервалами в течение шестичасового периода и среднее изменение AUC глюкозы в плазме вычисляли в час.ммоль/л. Как можно видеть из суммарных данных ниже, препарат, содержащий сочетание метформин/пропилгаллат, демонстрирует эффективность, которая равна или больше величины для хенодеоксихолат/пропилгаллат.

    AUC изменения глюкозы в плазме через 6 часов (час.ммоль/л) 41В Инсулин/Хено/PG -2,25 90А Инсулин/метформин/PG -4,02 88Е Кальцитонин/метформин/PG + SBTI (произвольное действие (-ve), контроль) -0,21

Пример 10

Эффективность in vivo смеси гидрохлорид метформина/пропилгаллат/кальцитонин в организме ювенильных свиней

Препараты, такие как изготовленные в примере 9 (содержащие 6000 МЕ кальцитонина лосося, 133 мг гидрохлорида метформина и 33 мг пропилгаллата или 6000 МЕ кальцитонина лосося и только гидрохлорид метформина), вводили в виде сухих порошков внутри капсул через отверстие в тонкую кишку восьми ювенильным свиньям (каждая массой ~40 кг). Композиции содержимого каждой капсулы представлены в таблице ниже. Препараты, содержащие хенодеоксихолат, включены для сравнения.

Уровни кальция в крови измеряли с интервалами в течение шестичасового периода и среднее значение в AUC кальция в плазме вычисляли в час.ммоль/л. Как можно видеть из суммарных данных ниже, уровни кальция уменьшаются, становятся ниже базовой линии как результат внедрения кальцитонина в кровоток из кишечника. Сочетание метформин/PG является наиболее эффективным, больше также, чем метформин в отсутствие PG, указывая, что действие усиления абсорбции обусловлено не самим метформином, но является результатом действия пропилгаллата, растворение которого в водной среде в кишке осуществляется благодаря присутствию метформина. Дальнейшее усиление активности можно осуществлять путем инклюзии ингибиторов протеазы в препараты.

    AUC изменения кальция в плазме через 6 часов (час.ммоль/л) 90А Инсулин/метформин/PG (произвольное действие(-ve), контроль) -0,51 81А Кальцитонин/хенодеоксихолат/PG -0,89 81В Кальцитонин/хенодеоксихолат/PG + SBTI -1,43 82А Кальцитонин/метформин/PG -1,12 82В Кальцитонин/метформин/PG + апротинин -2,04 84А Кальцитонин/метформин - нет PG -0,65 84В Кальцитонин/метформин + апротинин - нет PG -0,68

Пример 11

Эффективность in vivo смеси гидрохлорид метформина/пропилгаллат/кальцитонин в организме ювенильных свиней

Препарат, такой как изготовлен в примере 9 (каждая капсула содержит 4 мг паратиреоидного гормона, 133,4 мг гидрохлорида метформина, 33,35 мг пропилгаллата, 15,15 мг натриевой соли гликолята крахмала, 1,65 мг тонкоизмельченного оксида кремния и 10,00 мг ингибитора трипсина сои) вводили через отверстие в тонкую кишку восьми ювенильным свиньям (каждая массой ~40 кг). Уровни кальция в крови измеряли с интервалами в течение шестичасового периода. Как можно видеть из данных ниже, уровни кальция отличаются от базовой линии как результат внедрения РТН в кровоток из кишечника.

    Различие между максимальным и минимальным уровнем кальция в плазме (ммоль/л)   Раствор РТН в буферированном физиологическом растворе, подкожно (0,4 мг) 0,31 88В РТН в препарате метформин/PG, внутрь тонкой кишки (4,0 мг) 0,27

Группа изобретений относится к фармации и медицине. Фармацевтическая композиция включает смесь: (а) активного макромолекулярного вещества; (b) ароматического спирта, усилителя абсорбции, выбранного из пропилгаллата, бутилированного гидрокситолуола (ВНТ), бутилированного гидроксианизола (ВНА) и их аналогов и производных, или их смесей; и (с) бигуанида или его фармацевтически приемлемой соли, способной увеличивать растворимость ароматического спирта, усилителя абсорбции, в водной среде, где ароматический спирт, усилитель абсорбции, присутствует в количестве (по массе), большем или равном количеству активного вещества. Применение в фармацевтической композиции ароматического спирта, выбранного из пропилгаллата, ВНТ, ВНА и их аналогов и производных, вместе с бигуанидом или его фармацевтически приемлемой солью, способной увеличивать растворимость ароматического спирта в водной среде, как усилителя абсорбции макромолекул через стенку кишечника. Способ увеличения абсорбции активного макромолекулярного вещества и способ лечения пациента включают введение пациенту указанной композиции. Применение активного макромолекулярного вещества, выбранного из инсулина, С-пептида, GLP-1 или их смеси; ароматического спирта, усилителя абсорбции, выбранного из пропилгаллата, бутилированного гидрокситолуола (ВНТ), бутилированного гидроксианизола (ВНА) и их аналогов и производных, или их смесей; и бигуанида или его фармацевтически приемлемой соли, способной увеличивать растворимость ароматического спирта, усилителя абсорбции, в водной среде, в изготовлении препаратов для лечения диабета, остеопороза, ожирения, рака, остеоартрита. Группа изобретений обеспечивает облегчение прохождения пептидов, белков и других макромолекулярных веществ через кишечную стенку для улучшения их биодоступности. 10 н. и 17 з.п. ф-лы, 3 табл.

1. Фармацевтическая композиция, способствующая прохождению активного макромолекулярного вещества через стенку кишечника, включающая смесь:
(a) активного макромолекулярного вещества;
(b) ароматического спирта, усилителя абсорбции, выбранного из пропилгаллата, бутилированного гидрокситолуола (ВНТ), бутилированного гидроксианизола (ВНА) и их аналогов и производных, или их смесей; и
(c) бигуанида или его фармацевтически приемлемой соли, способной увеличивать растворимость ароматического спирта, усилителя абсорбции, в водной среде,
где ароматический спирт, усилитель абсорбции, присутствует (по массе) в большем или равном количеству активного макромолекулярного вещества.

2. Композиция по п.1, которая включает менее 5 мас.% воды.

3. Композиция по п.1, где композиция покрыта энтеросолюбильным покрытием, которое становится проницаемым при рН от 3 до 7.

4. Композиция по п.1, где смесь включает от 5 до 30 мас.%, ароматического спирта, усилителя абсорбции.

5. Композиция по п.1, где бигуанид выбран из метформина, фенформина и хлоргексидина и их фармацевтически приемлемых солей.

6. Композиция по п.1, в которой смесь находится в форме раствора или дисперсии микрочастиц.

7. Композиция по п.1, в которой смесь находится в твердой форме.

8. Композиция по п.1, где активное макромолекулярное вещество представляет собой полипептид или белок, полинуклеотид, полисахарид или их смесь.

9. Композиция по п.8, где активное макромолеклярное вещество выбрано из кальцитонина, инсулина, гепарина с низкой молекулярной массой, эритропоэтина, гранулоцитарного колониестимулирующего фактора, интерферона, С-пептида, GLP-1, человеческого гормона роста и паратиреоидного гормона или их аналогов или фрагментов.

10. Композиция по п.8, где активное макромолекулярное вещество представляет собой инсулин, кальцитонин, или паратиреоидный гормон, или его аналог или производное.

11. Композиция по п.10, где активное макромолекулярное вещество представляет собой инсулин или его аналог или производное.

12. Композиция по любому из предшествующих пунктов для применения при терапевтическом или диагностическом лечении организма человека или животного.

13. Применение в фармацевтической композиции ароматического спирта, выбранного из пропилгаллата, ВНТ, ВНА и их аналогов и производных, вместе с бигуанидом или его фармацевтически приемлемой солью, способной увеличивать растворимость ароматического спирта в водной среде, как усилителя абсорбции макромолекул через стенку кишечника.

14. Применение ароматического спирта, выбранного из пропилгаллата, ВНТ, ВНА и их аналогов и производных, вместе с бигуанидом или его фармацевтически приемлемой солью, способной увеличивать растворимость ароматического спирта в водной среде, в изготовлении препарата, содержащего активное макромолекулярное вещество, для того, чтобы увеличить абсорбцию активного макромолекулярного вещества в организме человека или животного.

15. Применение по п.13 или 14, где активное макромолекулярное вещество, которое абсорбируется, представляет собой полипептид или белок, полинуклеотид, полисахарид или их смесь.

16. Применение по п.15, где активное макромолекулярное вещество, которое абсорбируется, выбрано из кальцитонина, инсулина, гепарина с низкой молекулярной массой, эритропоэтина, гранулоцитарного колониестимулирующего фактора, интерферона, С-пептида, GLP-1, человеческого гормона роста и паратиреоидного гормона или их аналогов или фрагментов.

17. Применение по п.16, где активное макромолекулярное вещество, которое абсорбируется, представляет собой инсулин, кальцитонин или паратиреоидный гормон или их аналоги или фрагменты.

18. Применение по п.17, где активное макромолекулярное вещество, которое абсорбируется, представляет собой инсулин или его аналог или фрагмент.

19. Применение по любому из пп.13-18, где композиция включает менее 5 мас.% воды.

20. Применение по пп.13-18, которое включает введение активного макромолекулярного вещества (веществ), которое абсорбируется, в ароматический спирт в форме раствора, в виде дисперсии микрочастиц или в виде твердого вещества.

21. Способ увеличения абсорбции активного макромолекулярного вещества в организме пациента, который включает введение указанному пациенту композиции по любому из пп.1-12.

22. Способ лечения пациента, страдающего болезненным состоянием или заболеванием, излечиваемым введением композиции по любому из пп.1-12.

23. Применение активного макромолекулярного вещества, выбранного из инсулина, С-пептида, GLP-1 или их смеси; ароматического спирта, усилителя абсорбции, выбранного из пропилгаллата, бутилированного гидрокситолуола (ВНТ), бутилированного гидроксианизола (ВНА) и их аналогов и производных, или их смесей; и бигуанида или его фармацевтически приемлемой соли, способной увеличивать растворимость ароматического спирта, усилителя абсорбции, в водной среде, в изготовлении препарата для лечения диабета.

24. Применение активного макромолекулярного вещества, выбранного из кальцитонина и РТН; ароматического спирта, усилителя абсорбции, выбранного из пропилгаллата, бутилированного гидрокситолуола (ВНТ), бутилированного гидроксианизола (ВНА) и их аналогов и производных, или их смесей; и бигуанида или его фармацевтически приемлемой соли, способной увеличивать растворимость ароматического спирта, усилителя абсорбции, в водной среде, в изготовлении препарата для лечения остеопороза.

25. Применение кальцитонина, ароматического спирта, усилителя абсорбции, выбранного из пропилгаллата, бутилированного гидрокситолуола (ВНТ), бутилированного гидроксианизола (ВНА) и их аналогов и производных, или их смесей; и бигуанида или его фармацевтически приемлемой соли, способной увеличивать растворимость ароматического спирта, усилителя абсорбции, в водной среде, в изготовлении препарата для лечения остеоартрита.

26. Применение активного макромолекулярного вещества, выбранного из пептида YY, оксинтомодулина и их смеси; ароматического спирта, усилителя абсорбции, выбранного из пропилгаллата, бутилированного гидрокситолуола (ВНТ), бутилированного гидроксианизола (ВНА) и их аналогов и производных, или их смесей; и бигуанида или его фармацевтически приемлемой соли, способной увеличивать растворимость ароматического спирта, усилителя абсорбции, в водной среде, в изготовлении препарата для лечения ожирения.

27. Применение активного макромолекулярного вещества, выбранного из эритропоэтина, GCST, GMCSF и их смесей; ароматического спирта, усилителя абсорбции, выбранного из пропилгаллата, бутилированного гидрокситолуола (ВНТ), бутилированного гидроксианизола (ВНА) и их аналогов и производных, или их смесей; и бигуанида или его фармацевтически приемлемой соли, способной увеличивать растворимость ароматического спирта, усилителя абсорбции, в водной среде, в изготовлении препарата для лечения рака.