СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПЕРЕЖИВАЮЩИХ СРЕЗОВ ПИРИФОРМНОЙ ДОЛИ МОЗГА Российский патент 2011 года по МПК G09B23/28 

Описание патента на изобретение RU2438193C2

Изобретение относится к медицине, а именно к нейробиологии.

Известен способ приготовления переживающих срезов пириформной доли мозга И.Г.Акмаев, Л.Б.Калимуллина. Миндалевидный комплекс мозга. М., «Наука», 1993, стр.177-181, в котором иссечение пириформной доли мозга, включающей миндалевидный комплекс, осуществляют специальным резцом, выполненным в форме эллиптического параболоида. При этом угол иссечения устанавливают от 18-22 градусов к продольной оси мозга.

Недостатком этого способа является невозможность одномоментной дифференциации иссекаемого миндалевидного комплекса на кортикомедиальный и базолатеральный отделы.

Наиболее близким является изобретение по А.С. №1679246, в котором иссечение пириформной доли мозга, включающей миндалевидный комплекс, осуществляют специальным резцом, выполненным в форме эллиптического параболоида. При этом угол иссечения устанавливают от 18-22 градусов к продольной оси мозга.

Недостатком этого способа является невозможность одномоментной дифференциации иссекаемого миндалевидного комплекса на кортикомедиальный и базолатеральный отделы.

Техническим результатом изобретения является полное выделение структур пириформной доли мозга с одномоментной дифференциацией их на кортикомедиальный и базолатеральный отделы миндалевидного комплекса.

Технический результат достигается тем, что при приготовлении переживающих срезов пириформной доли мозга путем иссечения ткани по форме эллиптического параболоида под углом от 18 до 22 градусов к продольной оси мозга с последующей инкубацией в питательной среде иссечение производят с одномоментной дифференциацией пириформной доли мозга на кортикомедиальный и базолатеральный отделы миндалевидного комплекса.

Способ позволяет получить пириформную долю мозга с одномоментной дифференциацией ее на кортикомедиальный и базолатеральный отделы миндалевидного комплекса с сохраненными нейрональными связями.

На чертеже представлен резец с емкостью и иллюстрация техники иссечения пириформной доли мозга.

Способ осуществляется следующим образом.

Пириформная доля мозга включает в себя как часть миндалевидный комплекс, представляющий собой совокупность поверхностно расположенных структур обонятельной коры и глубинно расположенных ядер. В состав миндалевидного комплекса входит два функционально различных отдела - кортикомедиальный 1 и базолатеральный 2.

Для дифференцированного выделения кортикомедиального 1 и базолатерального 2 отделов миндалевидного комплекса в составе пириформной доли предложен резец 3 с емкостью 4 в форме объемного образования - эллиптического параболоида, в полости которого находится центральная режущая часть 5, позволяющая получить пириформную долю, разделенную на две основные составляющие части - кортикомедиальный 1 и базолатеральный 2 отделы миндалевидного комплекса.

После декапитации и извлечения мозга из черепа его располагают базальной поверхностью кверху. Резцом 3 из пириформной доли мозга иссекают кусочек ткани, имеющий форму эллиптического параболоида. Иссечение проводят под углом 18-22° (оптимально 20°) к продольной оси мозга. Результатом иссечения является получение двух неравных по величине кусочков ткани, при этом меньший по величине, иссеченный из медиальной части полушария конечного мозга, представляет собой кортикомедиальный отдел 1 миндалевидного комплекса, а другой - базолатеральный отдел 2 миндалевидного комплекса.

Иссеченные кусочки ткани помещают основанием на столик, имеющий охлаждение, и разделяют с помощью вибратома на срезы, толщина которых варьируется в пределах 220-350 мкм.

Полученные срезы переносят в первую порцию инкубационной среды, в которой выдерживают 30 мин (преинкубация). В качестве инкубационной среды используют бикарбонатную среду Кребса-Рингера, в состав которой входят следующие компоненты, ммоль л-1: NaCl 118; KCl 4,7; CaCl2 2,5; KHPO4 1,2; MgSO4 1,2; NaHCO3 25; глюкоза 10. Инкубационную среду при комнатной температуре насыщают газовой смесью, содержащей 95% O2 и 5% СО2, с момента извлечения мозга из черепа до перемещения срезов в инкубационную среду должно пройти не более 5 мин.

Нейрофизиологические исследования проводят на срезах, которые после преинкубации помещают в свежую порцию инкубационной среды («рабочая порция»). Фиксацию срезов (устранение их смещения при перемещении инкубационной среды) обеспечивают с помощью помещения их между двумя нейлоновыми сеточками. Для исследования срезов используют комплекс устройств и приборов, предназначенных как для обеспечения длительного переживания срезов, так и регистрации электрической активности компонентов нервной ткани. Под контролем микроскопа к различным структурам миндалевидного комплекса вводят стеклянные микроэлектроды с диаметром кончика до 10-20 мкм. Регистрируют вне- и внутриклеточную активность и фокальные потенциалы в структурах палеокортекса (периамигдалярная кора, ядро латерального обонятельного тракта) и ряда ядер миндалевидного комплекса (базомедиальное, медиальное, кортикальное, базолатеральное). Полученные результаты характеризуют электрофизиологические ответы различных структур, а также их своеобразие, обусловленное взаимодействием различных образований миндалевидного комплекса, сохраняющих целостность и комплексность в составе срезов.

Морфологический контроль эффективности иссечения пириформной доли мозга и констатацию топографии введенного микроэлектрода осуществляют после завершения регистрации электрофизиологических ответов путем окрашивания срезов гистологическими методами (крезилом фиолетовым и гематоксилином-эозином).

Изучение микропрепаратов показало, что способ, реализуемый с помощью специального резца, обеспечивает полное выделение пириформной доли мозга с одномоментной дифференциацией ее на кортикомедиальный 1 и базолатеральный 2 отделы миндалевидного комплекса, а иссекаемые кусочки и срезы этого образования мозга полностью сохраняют свою структурную организацию.

Пример. Резцом 3 иссекают из мозга его часть под углом 20° к продольной оси мозга размером не более 5 мм. Переднюю режущую часть 6 резца 3 приводят в соприкосновение с поверхностью мозга так, чтобы основание резца 3, стоящего вертикально, пришлось на уровень incisura olfactoria. После этого резец 3 погружают в ткань мозга на глубину выступа передней режущей части 6. Затем положение резца 3 меняют до 45° к поверхности мозга и резец 3 вводят наклонно вниз до полного заполнения его емкости 4 тканью мозга. Из биоптатов кортикомедиального 1 и базолатерального 2 отделов миндалевидного комплекса готовят срезы, которые помещают в питательную среду. Срезы использут в дальнейшем для нейробиологических исследований. Морфологический и физиологический контроль срезов позволил установить наличие сохранных связей нервных клеток пириформной доли мозга.

Способ позволяет выделить полностью пириформную долю с миндалевидным комплексом с дифференциацией его на кортикомедиальный и базолатеральный отделы с сохраненными нейрональными связями и использовать переживающие срезы в нейробиологических исследованиях.

Похожие патенты RU2438193C2

название год авторы номер документа
Способ приготовления переживающих срезов пириформной доли мозга 1987
  • Калимуллина Лилия Барыевна
  • Федотов Сергей Михайлович
SU1679246A1
СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИРОВАННОГО ИЗВЛЕЧЕНИЯ РОСТРАЛЬНЫХ И КАУДАЛЬНЫХ ЧАСТЕЙ МИНДАЛЕВИДНОГО КОМПЛЕКСА МОЗГА И УСТРОЙСТВО ДЛЯ ЕГО ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ 2012
  • Калимуллина Лилия Барыевна
  • Ахмадеев Азат Валерьевич
RU2487673C1
Способ определения состояния обменных процессов в сердце 1960
  • Киселев О.И.
  • Меделяновский А.Н.
  • Фролов В.А.
SU150574A1
СПОСОБ ПОДГОТОВКИ КОМПЛЕКСА ВНУТРЕННИХ ОРГАНОВ МЕЛКИХ ЖИВОТНЫХ К МОРФОЛОГИЧЕСКИМ ИССЛЕДОВАНИЯМ 2009
  • Ткаченко Лия Викторовна
  • Малофеев Юрий Михайлович
  • Коновалов Владимир Константинович
  • Тютюнников Сергей Владимирович
RU2425643C1
СПОСОБ ХИРУРГИЧЕСКОГО ЛЕЧЕНИЯ ВИСОЧНОЙ ЭПИЛЕПСИИ 2017
  • Холявин Андрей Иванович
  • Гурчин Александр Феликсович
  • Низковолос Владимир Беньевич
RU2646748C1
"Способ получения комплекса липидов "фосфотим" из животного сырья" 1991
  • Тихонова Светлана Николаевна
  • Комиссаренко Сергей Васильевич
  • Волощенко Юрий Васильевич
  • Богуславский Владимир Аронович
  • Мирошниченко Игорь Юрьевич
  • Гавриш Ирина Николаевна
SU1836092A3
Способ хирургического лечения структурной эпилепсии у детей 2020
  • Ларионов Сергей Николаевич
  • Рудакова Анна Викторовна
  • Сороковиков Владимир Алексеевич
  • Ливадаров Андрей Владимирович
  • Грузин Павел Григорьевич
  • Жданович Глеб Сергеевич
  • Александров Юрий Анатольевич
  • Матвеева Юлия Сергеевна
RU2743833C1
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ПАТОЛОГИЧЕСКОЙ ИЗВИТОСТИ ВНУТРЕННЕЙ СОННОЙ АРТЕРИИ 2017
  • Виноградов Роман Александрович
  • Матусевич Вячеслав Викторович
  • Закеряев Аслан Бубаевич
RU2654684C1
Способ пластики лицевого нерва "конец-в-конец" при его интратемпоральных повреждениях 2019
  • Дайхес Николай Аркадьевич
  • Диаб Хассан Мохамед Али
  • Михалевич Антон Евгеньевич
  • Бакаев Амир Абдусалимович
RU2729938C1
СПОСОБ ФАРИНГОПЛАСТИКИ В УСЛОВИЯХ ДЕФИЦИТА ПЛАСТИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА 2010
  • Кравцов Сергей Анатольевич
  • Решетов Игорь Владимирович
  • Чиссов Валерий Иванович
RU2427339C1

Иллюстрации к изобретению RU 2 438 193 C2

Реферат патента 2011 года СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПЕРЕЖИВАЮЩИХ СРЕЗОВ ПИРИФОРМНОЙ ДОЛИ МОЗГА

Изобретение относится к области медицины, а именно к нейробиологии. Для приготовления переживающих срезов пириформной доли мозга иссекают ткани по форме эллиптического параболоида под углом от 18 до 22 градусов к продольной оси мозга с последующей инкубацией в питательной среде. При иссечении производят одномоментную дифференциацию пириформной доли мозга на кортикомедиальный и базолатеральный отделы миндалевидного комплекса. Способ позволяет провести одномоментную дифференциацию пириформной доли мозга на кортикомедиальный и базолатеральный отделы миндалевидного комплекса при иссечении пириформной доли мозга. 1 ил.

Формула изобретения RU 2 438 193 C2

Способ приготовления переживающих срезов пириформной доли мозга путем иссечения ткани по форме эллиптического параболоида под углом от 18 до 22° к продольной оси мозга с последующей инкубацией в питательной среде, отличающийся тем, что при иссечении производят одномоментную дифференциацию пириформной доли мозга на кортикомедиальный и базолатеральный отделы миндалевидного комплекса.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2011 года RU2438193C2

Способ приготовления переживающих срезов пириформной доли мозга 1987
  • Калимуллина Лилия Барыевна
  • Федотов Сергей Михайлович
SU1679246A1
КАЛИМУЛЛИНА Л.Б
и др
Оценка информативности срезов - путь к оптимизации исследований мозга
Архив анатомии, гистологии и эмбриологии, №8, 1990, с.82-85
АХМАДЕЕВ А.В
Нейрогистология миндалевидного комплекса мозга для начинающих
- Уфа: БашГУ, 2005, 98 с
МИТЮШКОВ М.И
и др
Переживающий срез мозга как объект

RU 2 438 193 C2

Авторы

Ахмадеев Азат Валерьевич

Калимуллина Лилия Бариевна

Даты

2011-12-27Публикация

2007-12-25Подача