МЕТИЛ, ХЛОР И НИТРОПРОИЗВОДНЫЕ N-{3, 5-ДИОКСО-4-АЗАТЕТРАЦИКЛО[5.3.2.0.0]ДОДЕЦ-11-ЕН-4-ИЛ}-2-ГИДРОКСИБЕНЗАМИДА-ПРОТИВОВИРУСНЫЕ ПРЕПАРАТЫ, ИНГИБИРУЮЩИЕ РЕПЛИКАЦИЮ РАЗЛИЧНЫХ ВИДОВ ОРТОПОКСВИРУСОВ Российский патент 2012 года по МПК C07D209/56 A61P31/00 

Изобретение относится к новым биологически активным химическим соединениям формулы I

Ia R=5-Сl, Ib R=4-Ме, Ic R=5-Ме, Id R=5-NO₂

обладающим высокой противовирусной активностью, которые могут применяться в медицине и ветеринарии для лечения и профилактики заболеваний, вызываемых патогенными для человека и животных вирусами, в частности ортопоксвирусами, патогенными для человека, лабораторных и домашних животных.

Наиболее опасными для человеческой популяции из-за чрезвычайно высокой патогенности, многообразия и эпидемиологических показателей являются вирусы рода ортопоксвирусов (семейство Poxviridae, род Orthopoxvirus). В последние годы неожиданную остроту и актуальность приобрела проблема натуральной оспы, поскольку вакцинация населения с 1980 г. не проводится. Появилась значительная прослойка населения без иммунитета или с ослабленным иммунитетом, отсутствуют гарантии полного исчезновения возбуждающих это заболевание вирусов, а также существует возможность несанкционированной утечки вирусного материала из мест его официального хранения. Более того, в условиях постоянного роста численности категорий населения с иммунодефицитными состояниями сама идея вакцинации живым вирусом осповакцины становится проблематичной, и весьма важное значение приобретает задача успешного купирования с помощью высокоэффективных химиотерапевтических препаратов поствакцинальных осложнений, а также вспышек заболеваний, вызванных другими ортопоксвирусами, патогенными для человека. Хорошо известна, высокая патогенность вирусов оспы обезьян, оспы коров, относящихся к тому же роду Orthopoxvirus, и способных вызывать заболевание у людей со смертельным исходом. Так, в последнее время в Африке, особенно в районах с высоким процентом ВИЧ-инфицированных, отмечаются вспышки оспы обезьян (летальность достигает 10-20%). Широкое распространение в 2003 году вируса оспы обезьян по территории США посредством луговых собачек также показывает совершенно необычный эпидемический потенциал ортопоксвирусов. Кроме того, существует реальная возможность селекции новых вариантов ортопоксвирусов в природных условиях, а также создания новых генетических вариантов ортопоксвирусов с необычными свойствами. Такая возможность была продемонстрирована в лабораторных условиях для маловирулентного штамма вируса оспы мышей, который после генетических манипуляций стал патогенным для этих животных.

В настоящее время фактически отсутствуют эффективные средства специфической профилактики и лечения заболеваний, вызываемых вирусами рода ортопоксвирусов, поэтому поиск и создание высокоэффективных противовирусных препаратов, обладающих высокой активностью, низкой токсичностью и продолжительным действием в отношении ортопоксвирусов, является важной задачей для обеспечения безопасности здоровья и жизни людей.

Хорошо известен препарат метисазон, который выпускается также под названиями Кемовиран (Kemoviran); Марборан (Маr-Воrаn); Вирузон (Viruzon) и обладает невысокой профилактической активностью в отношении вируса натуральной оспы [Quenelle D.C., Keith К.А., Kern E.R. // Antiviral Res. 2006; 71(1): 24-30].

Описан [Jesus D.M, Costa L.T, Gonçalves D.L, Achete C.A, Attias M, Moussatché N, Damaso C.R. // J Virol. 2009; 83(22): 11477-11490] препарат цидофовир (Vistide^®), который проходит в настоящее время исследования для применения его в качестве профилактического или лечебного препарата, но пока его исследования не закончены.

Известно, что производные адамантана являются потенциальными источниками веществ с противовирусными свойствами. В частности, ингибиторы вируса осповакцины выявлены в ряду адамантоил-1-гидразинов [Гужова С.В., Даниленко Г.И., Коробченко Л.В., Денисова Л.В., Андреева О.Т., Бореко Е.И., Даниленко В.Ф., Баклан В.Ф. Ингибиторы вируса вакцины в ряду адамантоил-1-гидразинов // Физиол. Активн. В-ва. Киев: Наукова думка. 1986. вып.18. С.24]. Изомерные 1-(аминобензоил)аминоадамантаны наряду с действием на различные типы вирусов проявляют умеренную активность в отношении вируса осповакцины [Вотяков В.И., Андреева О.Т., Кипара М.С.и др. // В сб.: Физиологически активные вещества. Киев. 1978. Вып.10. С.88]. Опубликованы данные о выраженном ингибирующем действии на размножение вирусов осповакцины замещенных аминоацетиладамантиламинов, аминоалкоксиацетиладамантиламинов и тромантадина [May G., Peteri D. // Arzneimitt-Forsch. 1973. Bd. 23. N. 5. S. 718]. Широкий ряд гидрокси-, азот- и серосодержащих функциональных производных адамантанового ряда проявил слабую и умеренную степень активности против вируса осповакцины [Климочкин Ю.Н., Леонова М.В., Коржев И.Р., Моисеев И.К., Владыко Г.В., Коробченко Л.В., Бореко Е.И., Николаева С.Н. // Хим.-фарм. журнал. 1992. N.7-8. С.58; Климочкин Ю.Н., Моисеев И.К., Владыко Г.В., Коробченко Л.В., Бореко Е.И. // Хим.-фарм. журнал. 1991. Т. 25. N. 7. С.46; Климочкин Ю.Н., Моисеев И.К., Абрамов О.В., Владыко Г.В., Коробченко Л.В., Бореко Е.И. // Хим.-фарм. ж. 1991. Т. 25. N. 7. С.49].

Недостатком вышеперечисленных аналогов является невысокая активность соединений в отношении вируса осповакцины.

Среди производных адамантана известно биологически активное соединение 1-адамантаноилгидразон α-азидометил (1-адамантил)кетона, обладающее противовирусной активностью в отношении вируса осповакцины [А.с. СССР №1568481, МПК C07D 253/06, опубл. 2006]. К недостаткам этого соединения следует отнести недостаточно высокую эффективность в отношении вируса осповакцины. Указанное соединение не изучалось на предмет противовирусной активности в отношении вируса оспы коров, вируса оспы обезьян и других.

Известны 3-фенил-6-R₁-7-R₂-1,2,4-бензотриазины (соединение СК-29 и его производные), обладающие противовирусной активностью, в частности в отношении ортопоксвирусов, патогенных для человека [патент РФ №2252218, МПК C07D 253/10, А61К 31/53, опубл. 20.05.2005].

Однако и эти химические соединения обладают недостаточной противовирусной активностью и невысоким индексом селективности в отношении ортопоксвирусов.

Наиболее близким аналогом (прототипом) является химическое соединение - 4-трифторметил-N-(3,3а,4,4а,5,5а,6,6а-октагидро-1,3-диоксо-4,6-этеноциклопроп-[f]изоиндол-2(1H)-ил)бензамид (ST-246), обладающее противовирусной активностью в отношении ортопоксвирусов с высоким индексом селективности [Пат. США №2006\0235051, МПК А61К 31/4439, C07D 403/02, опубликовано 19.10.2006 г.; Bailey T.R, Rippin S.R., Opsitnick Е., et al, // J. Med Chem. 2007; 50(7); 1442-1444; Yang G., Pevear D.C., Davies M.H., et al, J. Virol. 2005; 79(20); 13139-13149]. При получении указанного химического соединения, наряду с органическим растворителем - этанолом, используется основание (третичный амин).

Важным обстоятельством является то, что опыт использования различных противовирусных средств показывает (а) необходимость использования комбинации нескольких препаратов для повышения эффективности лечения вирусной инфекции, (б) легкость появления новых вариантов вирусов, устойчивых к действию монопрепарата. Это привело к тому, что для лечения ряда вирусных заболеваний, например ВИЧ-инфекции, используются одновременно 3-5 различных препаратов. Причем рекомендуется последовательное использование нескольких таких смесей для достижения максимального терапевтического эффекта и для предупреждения появления новых лекарственно устойчивых вариантов патогенных вирусов. Исследование прототипа [Пат. США №2006\0235051, МПК А61К 31/4439, C07D 403/02, опубликовано 19.10.2006 г.; Bailey T.R, Rippin S.R., Opsitnick Е., et al, // J. Med Chem. 2007; 50(7): 1442-1444; Yang G., Pevear D.C., Davies M.H., et al, J. Virol. 2005; 79(20); 13139-13149] показало, что лекарственно устойчивые к ST-246 ортопоксвирусы возникают чрезвычайно легко. Это является одним из существенных недостатков прототипа. Другим недостатком способа получения прототипа является использование органического растворителя - этанола, катализатора - третичного амина, что повышает стоимость данного продукта.

Преодолеть эти недостатки возможно только путем создания новых высокоэффективных антивирусных препаратов, то есть расширения ассортимента препаратов, пригодных для комплексной терапии ортопоксвирусных инфекций несколькими противовирусными препаратами.

Задачей изобретения является создание новых химических соединений, обладающих высоким индексом селективности и противовирусным действием в отношении различных видов ортопоксвирусов, патогенных для человека, домашних и лабораторных животных, и имеющих простую технологию получения.

Задача решается новыми биологически активными органическими соединениями - производными N-{3,5-диоксо-4-азатетрацикло[5.3.2.0^2,6.0^8,10]додец-11-ен-4-ил}-2-гидроксибензамида, общей формулы I

Ia R=5- Сl, Ib R=4-Me, Ic R=5-Me, Id R=5-NO₂

проявляющими противовирусную активность в отношении различных видов ортопоксвирусов, которые могут найти применение в медицинской практике в качестве препаратов для лечения ортопоксвирусных инфекций человека, лабораторных и домашних животных.

Соединения I получают взаимодействием гидразидов производных о-гидроксибензойной кислоты с 4,4а,5,5а,6,6а-гексагидро-4,6-этено-1H-циклопроп[f]изобензофуран-1,3(3аH)-дионом в уксусной кислоте при кипячении в течение 8-12 часов по следующей схеме:

Сопоставительный анализ с аналогами показывает, что заявляемые соединения отличаются тем, что, являясь полициклическими, содержат в молекуле триацилированную молекулу гидразина, один из атомов азота которого является частью гетероциклической - изоиндольной структуры, а другой связан с о-гидроксизамещенным бензоильным остатком.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. 2-Гидрокси-N-{3,5-диоксо-4-азатетрацикло[5.3.2.0^2,6.0^8,10]додец-11-ен-4-ил}-5-хлорбензамид (Iа). Раствор 1.9 г (10 ммолей) 4,4а,5,5а,6,6а-гексагидро-4,6-этено-1H-циклопроп[f]изобензо-фуран-1,3(3аH)-диона и 1.87 г (10 ммолей) гидразида 2-гидрокси-5-хлорбензойной кислоты кипятят в 30 мл уксусной кислоты в течение 10 часов. Растворитель отгоняют в вакууме водоструйного насоса. Остаток растирают с 50 мл воды. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают на фильтре водой (3 раза по 15 мл), сушат на воздухе до постоянного веса. Получают 3.70 г (98%) вещества в виде белых кристаллов; т. пл. 223.1°С. Спектр ЯМР ¹Н (400 МГц, J/Гц, DMSO-d₆), δ, м.д.: 0.06 (дт, J=3.7, 5.0, 1Н); 0.25 (дт, J=5.8, 7.1, 1Н); 1.16 (м, 2Н); 3.21 (уш. с, 2Н); 3.28 (м, 2Н); 5.77 (дц, J=3.6, 5.0, 2Н); 7.01 (д, J-8.4, 1H); 7.48 (дд, J=2.7, 8.4, 1H); 7.81 (д, J=2.7, 1H); 11.04 (уш. с, 2Н). Спектр ЯМР¹³С (400 МГц, DMSO-de), δ, м.д.: 4.09, 9.21, 32.90, 43.14, 45.75, 116.71, 119.34, 122.54, 127.41, 128.61, 133.87, 157.38, 174.59. ИК-спектр (КВr), см^-1: 615, 733, 819, 1192, 1209, 1292, 1340, 1418, 1475, 1603, 1644, 1714, 1729, 1788, 2958, 3011, 3177, 3289, 3422. Вычислено, %: С, 57.38; Н, 4.55; N, 7.43. C₁₈H₁₅ClN₂O₄·H₂O. Найдено, %: С, 57.37, 57.31; Н, 4.36, 4.31; N, 7.59, 7.47.

Пример 2. 2-Гидрокси-N-{3,5-Диоксо-4-азатетрацикло[5.3.2.0^2,6.0^8,10]додец-11-ен-4-ил}-4-метилбензамид (Ib). Раствор 1.9 г (10 ммолей) 4,4а,5,5а,6,6а-гексагидро-4,6-этено-1H-циклопроп[f]изобензо-фуран-1,3(3аH)-диона и 1.65 г (10 ммолей) гидразида 2-гидрокси-4-метилбензойной кислоты кипятят в 30 мл уксусной кислоты в течение 12 часов. Растворитель отгоняют в вакууме водоструйного насоса. Остаток растирают с 50 мл воды. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают на фильтре водой (3 раза по 15 мл), сушат на воздухе до постоянного веса. Получают 3.25 г (91%) вещества в виде белых кристаллов; т. пл. 231.4°С. Спектр ЯМР ^-1Н (400 МГц, J/Гц, DMSO-d₆), δ, м.д.: 0.06 (дт, J=3.7, 5.3, 1Н); 0.26 (дт, J=5.7, 7.3, 1H); 1.17 (м, 2Н); 2.26 (с, 3Н); 3.22 (уш. с, 2Н); 3.28 (м, 2Н); 5.78 (дд, J=3.5, 4.8, 2Н); 6.78 (д, J=8.1, 1Н); 6.80 (с, 1Н); 7.42 (д, J=8.1, 1H); 10.78 (уш. с, 1Н); 11.51 (уш. с, 1Н). Спектр ЯМР¹³С (400 МГц, DMSO-d₆), δ, м.д.: 4.41, 9.53, 21.49, 33.23, 43.43, 117.85, 120.71, 127.77, 129.00, 145.83, 159.53, 175.10. ИК-спектр (КВr), см^-1: 603, 733, 1165, 1199, 1219, 1310, 1336, 1539, 1616, 1654, 1723, 1786, 2958, 3010, 3490. Вычислено, %: С, 64.04; Н, 5.66; N, 7.86. C₁₉H₁₈N₂O₄H₂O. Найдено, %: С, 64.04, 64.19; Н, 5.43, 5.49; N, 7.90, 8.01.

Пример 3. 2-Гидрокси-N-{3,5-диоксо-4-азатетрацикло[5.3.2.0^2,6.0^8,10]додец-11-ен-4-ил}-5-метилбензамид (Iс). Раствор 1.9 г (10 ммолей) 4,4а,5,5а,6,6а-гексагидро-4,6-этено-1H-циклопроп[f]изобензо-фуран-1,3(3аH)-диона и 1.65 г (10 ммолей) гидразида 2-гидрокси-5-метилбензойной кислоты кипятят в 30 мл уксусной кислоты в течение 12 часов. Растворитель отгоняют в вакууме водоструйного насоса. Остаток растирают с 50 мл воды. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают на фильтре водой (3 раза по 15 мл), сушат на воздухе до постоянного веса. Получают 3.25 г (91%) вещества в виде белых кристаллов; т. пл. 237.1°С. Спектр ЯМР ¹Н (400 МГц, J/Гц, DMSO-d₆), δ, м.д.: 0.06 (м., 1H); 0.25 (дт, J=5.9, 6.7, 1Н); 1.16 (м, 2H); 2.24 (с, 3Н); 3.22 (уш. с, 2Н); 3.29 (м, 2Н); 5.78 (дд, J=3.5, 4.9, 2Н); 6.89(д, J=8.3, 1Н); 7.29 (д, J=8.3, 1H); 7.67 (с, 1H); 10.81 (уш., с, 1H); 11.24 (уш. с, 1H). Спектр ЯМР¹³С (400 МГц, DMSO-d₆), δ, м.д.: 4.11, 9.24, 19.99, 32.94, 43.14, 117.23, 127.46, 128.01, 128.84, 132.25, 135.40, 156.58, 174.74. ИК-спектр (КВr), см^-1: 610, 732, 822, 1197, 1229, 1296, 1500, 1522, 1604, 1661, 1732, 1791, 2954, 3015, 3282, 3344. Вычислено, %: С, 67.44; Н, 5.36; N, 8.28. C₁₉H₁₈N₂O₄. Найдено, %: С, 67.27, 67.02; Н, 5.33, 5.33; N, 8.45, 8.34.

Пример 4. 2-Гидрокси-N-{3,5-диоксо-4-азатетрацикло[5.3.2.0^2,6.0^8,10]додец-11-ен-4-ил}-5-нитробензамид (Id). Раствор 1.9 г (10 ммолей) 4,4а,5,5а,6,6а-гексагидро-4,6-этено-1H-циклопроп[f]изобензо-фуран-1,3(3аH)-диона и 1.97 г (10 ммолей) гидразида 2-гидрокси-5-нитробензойной кислоты кипятят в 30 мл уксусной кислоты в течение 8 часов. Растворитель отгоняют в вакууме водоструйного насоса. Остаток растирают с 50 мл воды. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают на фильтре водой (3 раза по 15 мл), сушат на воздухе до постоянного веса. Получают 3.50 г (95%) вещества в виде белых кристаллов; т. пл. 259.4°С. Спектр ЯМР ¹Н (400 МГц, J/Гц, DMSO-d₆), δ, м.д.: 0.06 (дт, J=3.4, 5.7, 1Н); 0.26 (дт, J=5.7, 7.2, 1H); 1.17 (м, 2Н); 3.23 (уш. с, 2Н); 3.29 (м, 2Н); 5.78 (дд, J=3.4, 4.8, 2Н); 7.17 (д, J=9.2, 1H); 8.31 (дд, J=3.0, 9.2, 1H); 8.66 (д, J=3.0, 1Н); 10.87 (уш. с, 1H), 12.47 (уш. с, 1Н). Спектр ЯМР¹³С (400 МГц, DMSO-d₆), δ, м.д.: 4.09, 9.21, 32.92, 43.16, 116.41, 118.21, 126.31, 127.43, 129.23, 139.44, 163.25, 174.51. ИК-спектр (КВr), см^-1: 603, 734, 842, 1162, 1200, 1234, 1285, 1347, 1409, 1434, 1487, 1509, 1537, 1591, 1622, 1679, 1734, 1787, 2958, 3047, 3087, 3123, 3337. Вычислено, %: С, 58.54; Н, 4.09; N, 11.38. C₁₈H₁₅N₃O₆. Найдено, %: С, 58.44, 58.42; Н, 4.00, 4.12; N, 11.58, 11.47.

Пример 5. Исследование противовирусной активности заявляемых соединений.

Для оценки противовирусной активности соединений использовали следующую методику. Культуру клеток Vero выращивали в лунках плоскодонных 96-луночных планшетов. В культуральную среду добавляли серийные разведения исследуемых соединений и соответствующий вирус. После инкубирования в течение 3-5 суток, монослой клеток прокрашивали витальным красителем нейтральным красным, после удаления красителя и отмывки избытка красителя вносили лизирующий раствор и количество красителя, включенного в монослой клеток, учитывали на спектрофотометре при длине волны 490 нм. В качестве контролей использовали лунки планшета, в которые вирус не вносили (контроль токсичности соединений), в который вносили вирус без соединений (контроль вируса), и лунки, в которые не вносили ни вирус, ни соединения (контроль культуры клеток). Данная методика основана на способности тестируемых соединений предотвращать репродукцию вируса и его распространения от клетки к клетке, в связи с чем клетки не погибают и сохраняют способность фагоцитировать нейтральный красный. Результаты анализировали с помощью программы SoftMax (версия 4.0, Molecular Devices, Menlo Park, USA).

В качестве исследуемых вирусов использовали патогенный для человека вирус оспы коров (штамм Гришак) и вирус осповакцины, штамм ЛИВП, используемый для вакцинации населения. Помимо ортопоксвирусов, патогенных для человека, для оценки противовирусной активности использовали вирус эктромелии (оспы мышей), штамм К-1.

Анализ полученных данных наглядно показывает, что заявляемые соединения (Ia-d) так же, как и соединение-прототип (ST-246), обладают выраженным противовирусным действием, в частности, в отношении ортопоксвирусов, патогенных для человека.

Как видно из данных таблицы 1, исследованные соединения (заявляемые Ia-d так же, как и прототип ST-246) эффективно подавляют размножение ортопоксвирусов в культуре клеток: ингибируют размножение трех видов ортопоксвирусов в концентрациях 0,003-0,65 и 0,002-0,003 мкг/мл соответственно, значения которых по величине существенно превосходят препарат-аналог СК-29 [патент РФ №2252218, МПК C07D 253/10, А61К 31/53, опубл. 20.05.2005] на основе производных бензотриазинов, активная концентрация которого составляет 0.49-2.23 мкг/мл.

Изобретение может быть использовано в медицине, ветеринарии, лечебных учреждениях.

Таблица 1 Сравнение активности препаратов Ia-d (заявляемые соединения), ST-246 (прототип) и СК-29 (аналог) Препарат Токсичность для культуры клеток Vero
(ТС₅₀, мкг/мл) Ингибирующая активность (IC₅₀, мкг/мл) в отношении вирусов Индекс селективности для вируса осповакцины Осповакцины Оспы коров Оспы мышей Iа 20,6 0,003 0,025 0,007 6867 Ib 100 0,014 0,27 0,08 7143 Id 70,5 0,004 0,049 0,018 17625 Ic >100 0,026 0,65 0,4 >3846 ST-246, >100 0,003 0,002 0,003 >30000 прототип           CK-29 >300 0,5 2,23 0,49 От 134 до 600 аналог          

Таким образом, технический результат изобретения подтверждается тем, что заявляемые производные N-{3,5-диоксо-4-азатетрацикло[5.3.2.0^2,6.0^8,10]додец-11-ен-4-ил}-2-гидроксибензамида общей формулы I проявляют выраженную противовирусную активность по отношению к различным видам ортопоксвирусов и отличаются от прототипа [Заявка на патент США №20060235051] тем, что, являясь полициклическими, содержат в молекуле трижды ацилированную молекулу гидразина, один из атомов азота которого входит в состав гетероциклической - изоиндольной структуры, а другой связан с о-гидроксизамещенным бензоильным остатком.

Пример 6. Оценка противовирусной активности заявляемого препаратов (Ia-d) по отношению к вирусам: аденовирус человека 5-го серотипа, эховирус 12-го типа, вирус Западного Нила и вирус простого герпеса 2 типа.

Оценку противовирусной активности исследуемых соединений проводили на культурах клеток АД293 (аденовирус человека 5-го серотипа и эховирус 12-го типа) и Vero (вирус Западного Нила и вирус простого герпеса 2 типа) в 96-луночных планшетах. IC₅₀ соединений в отношении вышеуказанных вирусов определяли посредством регистрации ингибирования вирусиндуцированного цитопатического эффекта в присутствии различных концентраций исследуемых препаратов (конечные концентрации в лунках микропланшет с клеточным монослоем 80, 40, 20, 10 и 5 мкг/мл). После добавления к клеткам исследуемых соединений в вышеуказанных концентрациях проводили инфицирование клеток различными вирусами. Для этого использовали инфицирующие дозы каждого вируса, вызывающие 90% цитопатический эффект через трое суток после инфицирования. После инкубации клеток в планшетах в течение 72 ч при 37°С в атмосфере, содержащей 5% СO₂, клетки фиксировали 5% раствором глутарового альдегида. Цитопатический эффект визуализировали окрашиванием клеток 0.1% раствором кристаллического фиолетового и регистрировали спектрофотометрически при 570 нм. IC₅₀ расчитывали согласно G. Yang et al., 2005.

Результаты, представленные в таблице 2, показали, что соединения Ia-d и прототип ST-246 фактически не ингибируют репликацию эховируса 12-го типа, аденовируса человека 5-го серотипа, вируса Западного Нила и вируса простого герпеса 2 типа. Препараты в используемых концентрациях нетоксичны для клеток АД293, что также дополнительно подтверждает слабую токсичность препаратов для культур клеток. Отсутствие активности препаратов Ia-d в отношении двух типов ДНК-содержащих вирусов и двух типов РНК-содержащих вирусов говорит о том, что механизм действия препарата не связан с типом нуклеиновой кислоты.

Для препаратов Ia-d IC₅₀ в отношении вируса осповакцины составляет 0,003-0,65 мкг/мл (Таблица 1), что показывает высокую специфичность действия препарата в отношении ортопоксвирусов и свидетельствует о высокой степени селективности препаратов Ia-d в отношении этого рода вирусов. Индекс селективности составлял от 3846 до более, чем 17000 в отношении вируса осповакцины (пример 6).

Таким образом, заявляемые соединения Ia-d при низкой токсичности для клеток млекопитающих обладают выраженной селективностью по отношению к трем видам ортопоксвирусов и не ингибируют репликацию других РНК- и ДНК-содержащих вирусов.

Предлагаемые соединения Ia-d отличаются от описанных в прототипе [Пат. США № 2006\0235051; T.R.Bailey, S.R.Rippin et al, J. Med. Chem., V 50, N 7, 1442 (2007)] тем, что, являясь полициклическими, содержат в молекуле трижды ацилированную молекулу гидразина, один из атомов азота которого входит в состав гетероциклической - изоиндольной структуры, а другой связан с о-гидроксизамещенным бензоильным остатком.

Способ получения заявляемых веществ прост в исполнении, исходные вещества доступны: (4,4а,5,5а,6,6а-гексагидро-4,6-этено-1H-циклопроп[f]изобензо-фуран-1,3(3аH)-дион может быть получен согласно [пат. США №2006\0235051, МПК А61К 31/4439, C07D 403/02, опубликован 19.10.2006 г.], а гидразиды замещенных салициловых кислот - согласно [пат США №3127410, Chem. Abstrs., 1964, V. 61, N3118G], выходы составляют больше 90% от теоретически рассчитанного. Предлагаемые соединения устойчивы на воздухе, легко растворимы в ацетоне, хлороформе, диметилформамиде и диметилсульфоксиде, мало растворимы в алифатических спиртах, воде, практически нерастворимы в эфире, гексане.

Изобретение относится к новым метил, хлор и нитропроизводным N-{3,5-диоксо-4-азатетрацикло[5.3.2.0^2,6.0^8,10]додец-11-ен-4-ил}-2-гидроксибензамида формулы I

Ia R=5-Cl, Ib R=4-Me, Ic R-5-Me, Id R=5-NO₂

которые проявляют противовирусную активность по отношению к различным видам ортопоксвирусов, патогенных для человека и животных. Соединения получают реакцией гидразидов производных орто-гидроксибензойной кислоты с 4,4а,5,5а,6,6а-гексагидро-4,6-этено-1Н-циклопроп[f]изобензофуран-1,3(3аН)-дионом в уксусной кислоте при кипячении в течение 8-12 часов. Выходы 91-98%. 2 табл.

Метил, хлор и нитропроизводные N-{3,5-диоксо-4-азатетрацикло [5.3.2.0^2,6.0^8,10]додец-11-ен-4-ил}-2-гидроксибензамида общей формулы I:

Ia R - 5-Cl, Ib R - 4-Me, Ic R - 5-Me, Id R - 5-NO₂,
проявляющие противовирусную активность по отношению к различным видам ортопоксвирусов, патогенных для человека и животных.