СПОСОБ УЛУЧШЕНИЯ ПОДВИЖНОСТИ СПЕРМАТОЗОИДОВ Российский патент 2012 года по МПК A61D19/02 A61P15/08 

Описание патента на изобретение RU2446772C1

Изобретение относится к области животноводства и может быть использовано при искусственном осеменении животных.

Известен способ повышения концентрации сперматозоидов за счет центрифугирования. Для улучшения исходных свойств спермы используют методики, основанные на центрифугировании или флотации сперматозоидов в специальных средах (Бесплодие в супружестве / под ред. И.Ф. Юнды // Киев, "Здоровья". - 1990 - 464 с.; Panel P. Insemenation artificielles intra-uterines / P.Panel, J.P.Chansigaud, J.B. de Meeus, G.Magnin // J.Gynecol. Obstet. Biol. Reprod. - 1995. - N 24 - p.496-504).

Существенным недостатком центрифугирования является механическое повреждение, алютинация, в результате чего снижается подвижность сперматозоидов и, как следствие, оплодотворяющая активность. Метод флотации не приводит к механическому повреждению сперматозоидов, при этом повышение подвижности происходит за счет перемещения активноподвижных сперматозоидов.

Известен способ улучшения подвижности сперматозоидов путем воздействия на пробу раствором α2-макроглобулина (RU №2167675, МПК А61К 39/395, А61Р 15/08, публ. 10.11.1999).

Известен способ повышения качественных показателей спермы, таких как увеличение числа подвижных сперматозоидов, увеличение дыхательной способности сперматозоидов и другие, путем обработки спермы перфтораном. Перфторан - кровезаменитель с газотранспортной функцией улучшает газообмен и метаболизм на уровне тканей (RU №2318211, МПК G01N 33/48, публ. 27.02.2008).

Недостатками известных способов является то, что они не обладают генопротекторным действием и не защищают ДНК сперматозоидов от повреждающего действия свободных радикалов. Известно, что одной из причин низкой оплодотворяемости сперматозоидов выступает модификация ДНК свободными радикалами, образующимися при окислительном стрессе, возникающем при действии неблагоприятных факторов эндогенной и экзогенной природы. Причем окислительный стресс может приводить к гибели сперматозоидов путем апоптоза.

Технический результат заключается в улучшении оплодотворяющих свойств спермы за счет повышения подвижности и жизнеспособности сперматозоида.

Сущность изобретения заключается в том, что в способе улучшения подвижности сперматозоидов в пробу эякулята добавляют такое количество раствора карнозина с аскорбиновой кислотой, чтобы получить концентрацию карнозина равной 4-5 мМ с 0,02% аскорбиновой кислотой с последующей оценкой возрастания активности сперматозоидов как высокую и достаточную для оплодотворения.

Карнозин является природным антиоксидантом и эффективным буфером, поддерживающим рН в цитоплазме клеток (Болдырев А.А. Карнозин. Правдивая история о сказочном соединении и его исследованиях / А.А. Болдырев // Химия и жизнь. 1997. - №10 - С.10-15). Карнозин ранее применялся в медицине для лечения катаракты, воспалительных процессов глаза различной этиологии (глазные капли «Карнозин 5%», «Севитин»), лечения трофических язв, развившихся на почве хронической венозной недостаточности.

Если концентрация карнозина будет менее 5 мМ, а аскорбиновой кислоты менее 0,02%, то антиоксидантное и генопротекторное действие компонентов на сперматозоиды будет недостаточным и при этом эффект повышения подвижности сперматозоидов малозначимым.

Способ осуществляется следующим образом. Эякулят, применяемый для искусственного осеменения свиноматок, получен от хряков-производителей и разбавлен в соотношении 1:1 средой для хранения ГХЦС (глюкозо-хелато-цитратно-сульфатная). Обрабатывают образцы, хранящиеся при 16-18°С. Рассчитано, что к образцу спермы объемом 9,9 мл добавляют 0,1 мл раствора, содержащего 50 мМ карнозина с 0,2% аскорбиновой кислотой на цитрат-фосфатном буфере, чтобы получить концентрацию карнозина равной 4-5 мМ с 0,02% аскорбиновой кислотой. Смесь инкубируют в течение 30 мин. Определяют подвижность путем микрокопирования нативного препарата. Подвижность спермиев (Пс) в баллах вычисляют по формуле согласно указаниям ГОСТ 20909.4 (Национальный стандарт Российской Федерации. Сперма хряков разбавленная, сохраненная. Санитарные и биологические нормы. Технические требования и методы испытания / М.: Стандартин-форм-2010):

,

где: n - общее число подсчитанных спермиев;

n1 - число подсчитанных спермиев с прямолинейным поступательным движением;

10 - постоянный коэффициент.

Показатели подвижности активных сперматозоидов оценивают до и после обработки раствором карнозина с аскорбиновой кислотой. Пригодной для успешного осеменения считается сперма, оцениваемая 6 баллами подвижности. В обработанных образцах подвижность повышается в среднем на 1,5-2 балла.

По сравнению с известными решениями предлагаемое позволяет улучшить оплодотворяющие свойства спермы за счет повышения подвижности и жизнеспособности сперматозоида in vitro путем активирования подвижности всех сперматозоидов при сохранении их исходной концентрации.

Похожие патенты RU2446772C1

название год авторы номер документа
СПОСОБ ОТБОРА ГЕНЕТИЧЕСКИ ПОЛНОЦЕННЫХ СПЕРМАТОЗОИДОВ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ 2017
  • Трофимов Владимир Александрович
  • Пузанов Сергей Юрьевич
  • Сидоров Денис Иванович
  • Трофимов Александр Владимирович
RU2662080C1
КОНСЕРВИРОВАНИЕ И КОНТРОЛИРУЕМАЯ ДОСТАВКА/ВЫСВОБОЖДЕНИЕ СПЕРМАТОЗОИДОВ 2007
  • Коммисруд Элизабет
  • Хофмо Пеер Ола
  • Клинкенберг Гейр
RU2438309C2
СПОСОБ ОЦЕНКИ ГЕНЕТИЧЕСКОЙ ПОЛНОЦЕННОСТИ СПЕРМАТОЗОИДОВ 2014
  • Трофимов Владимир Александрович
  • Пузанов Сергей Юрьевич
  • Трофимов Александр Владимирович
  • Стеблов Антон Павлович
RU2568845C1
СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ КАЧЕСТВА СПЕРМЫ ХРЯКОВ 2018
  • Дерхо Марина Аркадьевна
  • Середа Татьяна Игоревна
  • Фомина Наталья Васильевна
RU2700454C1
СПОСОБ СТИМУЛЯЦИИ РЕПРОДУКТИВНОЙ ФУНКЦИИ ЖИВОТНЫХ 2006
  • Авдеенко Владимир Семенович
  • Тупикин Владимир Дмитриевич
  • Креницкий Александр Павлович
  • Майбородин Анатолий Викторович
RU2316958C1
Способ оценки качества спермы сельскохозяйственных животных 1980
  • Мороз Людмила Григорьевна
  • Шапиев Исмаил Шапиевич
  • Корбан Нина Викторовна
SU938990A1
ИНЪЕКЦИОННЫЙ ПРЕПАРАТ ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ СПЕРМОПРОДУКЦИИ У ПРОИЗВОДИТЕЛЕЙ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ И ПЕТУХОВ И СПОСОБ ЕГО ПРИМЕНЕНИЯ 2012
  • Юдин Сергей Михайлович
  • Юдин Владимир Сергеевич
  • Советкин Станислав Васильевич
  • Ескин Геннадий Владимирович
  • Лунин Владимир Глебович
RU2493873C1
СПОСОБ УЛУЧШЕНИЯ ПОДВИЖНОСТИ СПЕРМАТОЗОИДОВ 1998
  • Посисеева Л.В.
  • Герасимов А.М.
RU2167675C2
СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ ОПЛОДОТВОРЯЮЩЕЙ СПОСОБНОСТИ СПЕРМЫ 2000
  • Деряженцев В.И.
  • Бортников А.М.
  • Шлыгин А.Н.
  • Шейко Е.И.
RU2181992C2
СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ ОПЛОДОТВОРЯЮЩЕЙ СПОСОБНОСТИ СПЕРМЫ БАРАНОВ 2005
  • Деряженцев Виктор Иванович
  • Дунин Иван Михайлович
  • Епишина Татьяна Михайловна
  • Никонов Виктор Васильевич
RU2297197C2

Реферат патента 2012 года СПОСОБ УЛУЧШЕНИЯ ПОДВИЖНОСТИ СПЕРМАТОЗОИДОВ

Изобретение относится к области животноводства и может быть использовано при искусственном осеменении животных. Способ осуществляют следующим образом: в пробу эякулята добавляют такое количество раствора карнозина с аскорбиновой кислотой, чтобы получить концентрацию карнозина равной 4-5 мМ с 0,02% аскорбиновой кислоты с последующей оценкой возрастания активности сперматозоидов до высокой и достаточной для оплодотворения. Изобретение позволяет повысить подвижность и жизнеспособность сперматозоидов.

Формула изобретения RU 2 446 772 C1

Способ улучшения подвижности сперматозоидов в пробе эякулята, отличающийся тем, что в пробу эякулята добавляют такое количество раствора карнозина с аскорбиновой кислотой, чтобы получить концентрацию карнозина равную 4-5 мМ с 0,02% аскорбиновой кислоты, с последующей оценкой возрастания активности сперматозоидов как высокой и достаточной для оплодотворения.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2012 года RU2446772C1

СПОСОБ УЛУЧШЕНИЯ ПОДВИЖНОСТИ СПЕРМАТОЗОИДОВ 1998
  • Посисеева Л.В.
  • Герасимов А.М.
RU2167675C2
СПОСОБ ПОДГОТОВКИ СПЕРМЫ ЖИВОТНЫХ-ПРОИЗВОДИТЕЛЕЙ К ЕЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЮ 2009
  • Алфимцев Николай Афанасьевич
  • Алфимцев Владимир Николаевич
  • Букреев Юрий Михайлович
  • Иванов Геннадий Павлович
RU2393816C1
СРЕДСТВО, УЛУЧШАЮЩЕЕ КАЧЕСТВО СПЕРМЫ, И СПОСОБ УЛУЧШЕНИЯ КАЧЕСТВА СПЕРМЫ 1999
  • Лисаковская О.В.
  • Кропотов А.В.
  • Хотимченко Ю.С.
RU2159122C1

RU 2 446 772 C1

Авторы

Трофимов Владимир Александрович

Палаев Сергей Николаевич

Лопухова Евгения Николаевна

Никулин Артем Валерьевич

Трофимов Александр Владимирович

Даты

2012-04-10Публикация

2011-03-24Подача