СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ СУБКЛИНИЧЕСКОГО МАСТИТА У СВИНОМАТОК Российский патент 2012 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к ветеринарии, в частности к диагностике субклинического мастита у свиноматок.

В секрете молочных желез свиноматок, больных скрытой формой мастита, увеличивается число соматических клеток (лимфоцитов). Известно, что при цитологическом исследовании молока и молозива их число подсчитывают на приборе «Фоссоматик», в счетной камере Горяева, приборе Культера или камере Фукс-Розенталя. Однако способы подсчета соматических клеток сложны, трудоемки, требуют много времени и по этой причине малопригодны для большого количества исследований (Карташова В.М. Маститы коров / В.М.Карташова, А.И.Ивашура. - М.: ВО Агропромиздат, 1988. - 78-83 с.).

Субклинические маститы у свиноматок протекают с невыраженными симптомами заболевания и диагностируются путем исследования проб молока в тест-реакциях (Гончаров В.П. Профилактика и лечение маститов у животных / В.П.Гончаров, В.А.Карпов, И.Л.Якимчук. - М.: Россельхозиздат, 1989. - 10-125 с., 125-140 с.).

Разработаны способы диагностики, в которых маститное молоко, смешивая с тем или иным реактивом, приобретает определенный цвет или консистенцию, что значительно ускоряет и упрощает ход исследования. Используют 2%, 5% или 10% раствор мастидина, димастин, мастипроб и реактивы, содержащие ПАВ (поверхностно-активные вещества). Применяют 0,5% спиртово-водный раствор бромтимолблау, калифорнийский маститный тест (КМТ), пробу отстаивания (Париков В.А. Состояние и перспективы научных исследований по борьбе с маститом у коров. / В.А.Париков, В.Д.Мисайлов, А.Г.Нежданов. Материалы МНПК Актуальные проблемы болезней органов размножения и молочной железы. 5-7 октября 2005 года. Издательство Истоки. Воронеж, 2005, стр.3-5.; R.Mukherjee, G.Ram, P.K.Dash, T.Gosowami, 2004. The activity of milk leukocytes in response to a water-soluble fraction of Mycobacterium phlei in bovine subclinical mastitis. Veterinary Research Communications, 28(1), 47-54, 2004; U.Gronlund, C.Hallen, K.Persson Haptoglobulin and serum amyloid A in milk from dairy cows with chronic sub-clinical mastitis. Vet. Res. 36 (2005) 191-198), ибромаст (Багманов М.А. Научные разработки кафедры акушерства - производству / М.А.Багманов, Н.Ю.Терентьева, Ю.Б.Никульшина. Материалы МНПК Актуальные проблемы болезней органов размножения и молочной железы. 5-7 октября 2005 года. Издательство Истоки. Воронеж, 2005, стр.20-23).

Известен также способ диагностики субклинического мастита у коров при помощи ибромаста, содержащего 1 часть 0,5% спиртового раствора бромтимолблау и 9 частей 50% раствора моющего средства (RU 2240557, МПК G01N 33/04, Багманов М.А., Никульшина Ю.Б., Курдюмов В.И.; Ульянов. Гос. с.-х. акад. - №2002134850/13; Заявл. 23.12.02; Опубл. 20.11.04, Бюл. №32), включающий отбор проб молока, смешивание молока с реактивом ибромаст в соотношении 1:1 в течение 15-30 секунд, диагностирование наличия субклинического мастита по консистенции и цвету смеси.

Наиболее близким из аналогов к заявляемому является способ диагностики субклинического мастита у коров при помощи ПАВ Прогресс в разведении 1:19 (RU №2177257, МПК, A61B 10/00, Полянцев Н.И., Шакиров О.Ф Донск. гос. аграрн. Ун-т. - №2000106707/13; Заявл. 20.03.00; опубл. 27.12.01, бюл. №36), включающий отбор проб молока, смешивание в соотношении 1:1 в течение 15-30 секунд пробы молока с водным раствором моющего средства Прогресс, содержащего ПАВ, при этом разведение с водой составляет 1:19, затем диагностируют наличие субклинического мастита по консистенции и цвету смеси.

Указанный способ, несмотря на его простоту и экономическую эффективность, невозможно применить для диагностики субклинического мастита у свиноматок, поскольку для поведения реакции необходимо минимум 1 мл молока, отобранного от свиноматки, что не всегда возможно из-за физиологической особенности молокоотдачи у свиноматок. Кроме того, согласно инструкции по применению необходимо использование специальных пластин для проведения теста и пипеток для равного объема молока и реактива, что усложняет проведение исследований в производственных условиях и экономически неэффективно.

Технической задачей является выявление максимально возможного количества свиноматок, больных субклиническим маститом, при помощи экспресс-диагностики в производственных условиях.

Технический результат заключается в раннем диагностировании субклинического мастита у свиноматок (в течение первых суток после опороса) в производственных условиях с высокой точностью диагностирования, повышении сохранности поросят-сосунов за счет раннего диагностирования субклинического мастита и его своевременной терапии, снижении трудозатрат, повышении экономической эффективности, повышении рентабельности свиноводства.

Технический результат достигается тем, что известный способ диагностики субклинического мастита у свиноматок, включающий отбор проб молока, смешивание молока с водным раствором моющего средства Прогресс, содержащего поверхностно-активные вещества, в соотношении 1:1 в течение 15-30 секунд, диагностирование субклинического мастита по виду консистенции смеси, отличается тем, что отбор проб осуществляют во время кормления поросят свиноматкой в первые сутки после опороса, смесь моющего средства Прогресс с водой берут в соотношении не менее чем 1:2, смешивают молоко с водным раствором реактива в дозе по 1 капле на стеклянной поверхности, после чего диагностируют наличие субклинического мастита по образованию тяжей, хлопьев или мелких крупинок.

Новизна заявляемого предложения заключается в том, что диагностику субклинического мастита у свиноматок осуществляют в первые сутки после опороса в одной капле молока с использованием моющего средства, содержащего ПАВ в разведении с водопроводной водой 1:2.

По данным патентной и научно-технической литературы не обнаружена совокупность признаков, аналогичная заявляемой, что позволяет судить об изобретательском уровне предложения.

Отбор проб молока во время кормления поросят проводят в первые сутки после опороса, т.к. в другое время отобрать пробы молока для проведения экспресс-метода невозможно ввиду физиологической особенности молокоотдачи у свиноматок. В последующие сроки после опороса пробы молока возможно отобрать уже лишь с применением миотропных средств, что небезопасно для матки, приплода и обслуживающего персонала. Предлагаемый срок отбора проб молока позволит значительно ускорить постановку диагноза на скрытый мастит, повысить сохранность поросят-сосунов за счет своевременной терапии мастита и снизить трудозатраты.

Использование смеси моющего средства Прогресс в соотношении не менее 1:2 с водопроводной водой позволяет максимально точно выявить свиноматок, больных скрытым маститом, что уменьшает сроки терапии, способствует сохранности приплода, снижает материальные затраты.

Смешивание реактива с молоком в дозе по 1 капле позволяет ускорить диагностирование субклинического мастита, быстрее осуществить терапию и повысить экономическую эффективность.

Проведение реакции на плоской стеклянной поверхности способствует повышению экономической эффективности, так как возможно многократно использовать любую гладкую стеклянную поверхность. В других методах необходимо применение специальных пластин для диагностики мастита, для которых необходима обязательная мойка и высушивание после исследования каждой пробы.

Способ осуществляют следующим образом

Отбирают пробы молока во время кормления поросят свиноматкой в первые сутки после опороса. Смешивают пробы молока с водным раствором моющего средства Прогресс, содержащего ПАВ, в соотношении 1:1 в течение 15-30 секунд, в дозе по 1 капле. Смесь моющего средства Прогресс с водой берут в соотношении не менее чем 1:2. Смешивают молоко с водным раствором моющего средства Прогресс на стеклянной поверхности, после чего диагностируют наличие субклинического мастита.

Образование сгустка, появление тяжа или хлопьев считают признаком положительной реакции на наличие субклинического мастита (рис.1).

Появление мелких, едва заметных крупинок, незначительное, едва различимое изменение консистенции пробы молока при добавлении реагента считают сомнительной реакцией (рис.2).

Однородную, легко перемешиваемую на стекле жидкую массу учитывают как отрицательную тест-реакцию на наличие скрытого мастита (рис.3).

Научно-производственные опыты проводили на предприятии по селекции и гибридизации свиней "Moldsuinhibrid" на свиньях пород ландрас, дюрок, крупная белая.

Пробы молока отбирали в первые сутки после опороса путем сцеживания секрета молочной железы из правого и левого молочных пакетов свиноматки в пластиковые пробирки «эппиндорфа». Затем смешивали пробы молока с водным раствором моющего средства Прогресс, содержащего поверхностно-активные вещества, на плоской поверхности в соотношении 1:1 в течение 15-30 секунд.

В качестве контроля, согласно методическим рекомендациям по диагностике, терапии и профилактике субклинического мастита у свиноматок (Мисайлов В.Д. / Состояние и пути решения проблемы борьбы с болезнями органов размножения и молочной железы у свиней. / В.Д.Мисайлов, В.Н.Коцарев, А.Г.Шахов, С.М.Сулейманов. Материалы МНПК Актуальные проблемы болезней органов размножения и молочной железы. 5-7 октября 2005 года. Издательство истоки, Воронеж. 2005, стр.11-14.), использовали 5% раствор мастидина и пробу отстаивания.

Опыт 1-й. Провели исследование проб молока от 93-х свиноматок с применением разведения реагента с водопроводной водой в соотношении - 1:4, 1:12, 1:19.

Опыт 2-й. Провели дополнительное исследование 30-ти проб молока. Использовали разведения реактива с водопроводной водой в соотношении - 1:2, 1:4, 1:8, 1:12, 1:19.

Опыт 3-й. Для проверки и уточнения результатов, полученных во втором опыте, исследовали еще 108 проб молока. При проведении данных исследований использовали разведения реактива с водопроводной водой в соотношении - 1:2, 1:4, 1:8, 1:12.

Реакцию оценивали по следующим критериям:

- образование сгустка, появление тяжа или хлопьев считалось признаком положительной реакции на наличие субклинического мастита,

- появление мелких, едва заметных крупинок, незначительное, едва различимое изменение консистенции пробы молока при добавлении реагента считали сомнительной реакцией,

- однородную, легко перемешиваемую на стекле жидкую массу мы учитывали как отрицательную тест-реакцию на наличие скрытого мастита. Рис.1-3.

Результаты диагностики субклинического мастита у свиноматок (N - общее кол-во проб, n - количество проб молока)   N Результаты положительная сомнительная отрицательная n % n % n % Первый опыт Прогресс 93 52 59,9 5 5,4 36 38,7 Прогресс 1:4 41 44,1 9 9,7 43 46,2 Прогресс 1:12 25 26,9 10 10,8 58 62,4 Прогресс 1:19 прототип 16 17,2 8 8,6 69 74,2 Контроль - Мастидин 5% 38 40,8 10 10,8 45 48,4 Контроль - Проба отстаивания 32 34,4 14 15,1 47 50,5 Второй опыт Прогресс 30 13 43,3 0 - 17 56,6 Прогресс 1:2 13 43,3 0 - 17 56,6 Прогресс 1:4 10 33,3 3 10,0 17 56,6 Прогресс 1:8 6 20 4 13,3 20 66,6 Прогресс 1:12 2 6,8 4 13,3 24 80,0 Прогресс 1:1 прототип 9 0 0 2 6,7 28 93,3 Контроль - Мастидин 5% 13 43,3 0 0 17 56,6 Контроль - Проба отстаивания 12 40 0 0 18 60 Третий опыт Прогресс 1:2 108 43 39,81 11 10,2 54 50 Прогресс 1:4 25 23,1 17 15,74 66 61,11 Прогресс 1:8 18 16,7 7 6,48 83 76,85 Прогресс 1:12 10 9,3 7 6,48 91 84,25 Контроль - Мастидин 5% 25 23,1 16 14,81 67 62,03 Контроль - Проба отстаивания 22 20,37 15 13,9 71 65,7

Согласно результатам проведенных исследований (таблица) следует, что разведение средства Прогресс 1:4, 1:12 и 1:19 показало большое расхождение в диагностической тест-реакции по сравнению с контролем (5% мастидин и пробой отстаивания). Положительная реакция регистрировалась в 59,9% исследованных проб, в то время как при использовании мастидина и пробы отстаивания эта реакция отмечалась в 40,8% и 34,4% случаев. Сомнительная реакция была в 5,4% проб при использовании Прогресс и в 10,8% и 15,1% в случае применения мастидина и пробы отстаивания. Отрицательную реакцию отмечали в 38,7% проб, что меньше на 9,7%, чем у мастидина, и на 11,8%, чем в пробе отстаивания.

В результате исследований (опыт 2, 3, таблица) установлено, что оптимальные результаты были получены при разведении 1:2. В этом разведении положительная реакция прослеживалась в 43,3% и 39,81% проб молока, при использовании 5% мастидина эта реакция прослеживалась в среднем в 43,3% и 23,1% проб, а проба отстаивания молока давала положительную реакцию в 40% и 20,37% проб. Сомнительная реакция составила 10,2% проб молока, при использовании 5% мастидина эта реакция прослеживалась в среднем в 14,81% проб, а проба отстаивания молока давала сомнительную реакцию в 13,9% проб. Отрицательную реакцию отмечали в 56,6-50% проб (в среднем 51,4%), что на 4,4% меньше, чем у мастидина, и на 7,5% меньше, чем в пробе отстаивания. Таким образом, нами было выбрано разведение Прогресс - 1:2.

Проведенные исследования показывают, что моющее средство Прогресс регистрирует скрытый мастит у свиноматок наиболее точно, чем мастидин. Так, расхождение в положительной реакции у Прогресса относительно контроля (пробы отстаивания) составляет 16%, а у мастидина расхождение составляет 2,9%, что на 13,1% меньше, чем у моющего средства Прогресс. Также отмечено, что применение Прогресс позволяет выявить на 3,7% меньше проб, дающих сомнительную реакцию, по сравнению с мастидином и на 2,9% меньше по сравнению с контролем. Опытный реактив точно регистрирует отрицательную реакцию. Так, при использовании Прогресс отрицательная реакция регистрировалась в 51,4% случаев, что на 13,1% ниже по сравнению с пробой отстаивания, а у мастидина этот показатель был ниже на 3,6% (рис.4).

Таким образом, по сравнению с мастидином использование моющего средства Прогресс в разведении 1:2 в качестве реактива скрытого мастита у свиноматок позволяет выявить больше животных, молоко от которых дает положительный результат в тест-реакции на наличие субклинического мастита.

Наблюдение за поросятами-сосунами, которые употребляли молоко, давшее положительную, а в некоторых случаях и сомнительную реакцию на наличие мастита, подтвердило правильность тест-реакции тем, что у большинства подсосных поросят в последующем развились симптомы истощения, интоксикация и диарея.

Технико-экономические показатели эффективности предлагаемого способа следующие:

раннее диагностирование субклинического мастита у свиноматок (в течение первых суток после опороса) с высокой точностью диагностирования;

повышение сохранности поросят-сосунов за счет раннего диагностирования субклинического мастита и его своевременной терапии;

уменьшение сроков терапии; снижение трудозатрат; повышение экономической эффективности и рентабельности свиноводства.

Использование предлагаемого способа позволяет достичь заявляемый технический результат.

Изобретение относится к ветеринарии. Способ диагностики субклинического мастита у свиноматок включает отбор проб молока во время кормления поросят свиноматкой в первые сутки после опороса. Затем смешивают молоко с водным раствором моющего средства Прогресс, содержащего поверхностно-активные вещества, в соотношении 1:1, в дозе по 1 капле. При этом смесь моющего средства Прогресс с водой берут в соотношении не менее чем 1:2. Причем смешивание производят на плоской стеклянной поверхности в течение 15-30 секунд. Диагностируют субклинический мастит по виду консистенции смеси, а именно по образованию желеобразных сгустков или тяжей, хлопьев или в виде мелких крупинок. Техническим результатом являются: раннее диагностирование субклинического мастита у свиноматок (в течение первых суток после опороса) в производственных условиях с высокой точностью диагностирования; повышение сохранности поросят-сосунов за счет раннего диагностирования субклинического мастита и его своевременной терапии, снижение трудозатрат, повышение экономической эффективности, повышение рентабельности свиноводства. 1 табл., 4 ил.

Способ диагностики субклинического мастита у свиноматок, включающий отбор проб молока, смешивание молока с водным раствором моющего средства Прогресс, содержащего поверхностно-активные вещества, в соотношении 1:1 в течение 15-30 с, диагностирование субклинического мастита по виду консистенции смеси, отличающийся тем, что отбор проб осуществляют во время кормления поросят свиноматкой в первые сутки после опороса, смесь моющего средства Прогресс с водой берут в соотношении не менее чем 1:2, смешивают молоко с водным раствором реактива в дозе по 1 капле на стеклянной поверхности, после чего диагностируют наличие субклинического мастита по образованию тяжей, хлопьев или мелких крупинок.