СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИММУНОТРОПНОГО ПРЕПАРАТА ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ Российский патент 2013 года по МПК A61K31/429 A61K31/115 A61K36/06 A61K36/02 A61P37/04 

Изобретение относится к области биотехнологии и ветеринарной медицины, а именно к способам получения препаратов для профилактики и лечения воспалительных процессов и активизации неспецифической резистентности и иммуногенеза организма сельскохозяйственных животных.

Известен способ получения биологически активного препарата из дрожжей (SU 1808331 A1, A61K 35/72, 15.04.93) в виде очищенного полисахаридного комплекса, обладающий иммуностимулирующей активностью. Иммобилизация полисахаридов дрожжевых клеток в агаровом геле (ТУ 10.07.236-91 на производство препарата «Достим») или в 10-14% водно-солевом растворе поливинилпирролидона (RU 2137480 C1 A61K 31/79, 35/72, 20.09.99) повышает иммуностимулирующую активность препаратов.

Наиболее близким аналогом (прототипом) по решаемой задаче является способ получения препарата для повышения неспецифической резистентности и иммуногенеза организма животных (ПС-2), включающий смешивание 0,2-0,3% суспензии агара и концентрата очищенного полисахаридного комплекса дрожжевых клеток. К полученной смеси при постоянном перемешивании добавляют (-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-[2,1-b]-тиазол гидрохлорид и формалин, объем доводят до 100 мас.ч. Препарат обладает иммуностимулирующей активностью (RU 2332214 C1, A61K 31/429, 31/115, А61К 36/06, A61K 36/02, А61Р 37/04, 27.08.2008).

К недостаткам препарата можно отнести отсутствие бактерицидной активности к возбудителям болезней животных, которыми являются условно-патогенные и патогенные микроорганизмы, активизирующие свои воздействия на фоне снижения неспецифической резистентности и специфического иммунитета.

Изобретение направлено на получение комплексного препарата для повышения резистентности, профилактики и лечения воспалительных процессов у животных, расширяющего ассортимент средств для повышения активности клеточных и гуморальных звеньев неспецифической резистентности и специфического иммуногенеза организма, а также антибактериальной активности против возбудителей воспалительных процессов у животных.

Технический результат заключается в смешивании 90 мас.ч. 0,2-0,3% суспензии агара и 2,5 мас.ч. концентрата очищенного полисахаридного комплекса дрожжевых клеток. К полученной смеси при постоянном перемешивании добавляют 3,5 мас.ч.

(-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-[2,1-b]-тиазола гидрохлорида, 5,0 млн. ЕД антибиотика канамицина моносульфата и 0,2 мас.ч. формалина, объем доводят до 100 мас.ч. Полученный препарат разливают во флаконы по 50-100 мл, после стерилизации используют для нормализации неспецифической резистентности и иммуногенеза, профилактики и лечения воспалительных процессов у животных.

Отличие заявляемого решения от известного заключается в том, что при введении антибиотика канамицина моносульфата (0-3-Амино-3-дезокси-альфа-D-глюкопиранозил-(1''6)-0-[6-амино-6-дезокси-альфа-D-глюкопириназил-[1''4)]-2-дезокси-D-стрептамина (в виде сульфата)) совместно с полисахаридным комплексом и (-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-[2,1-b]-тиазола гидрохлоридом усиливается их действие на факторы неспецифической резистентности и иммуногенеза, активируется фагоцитоз и повышается бактерицидная активность против возбудителей воспалительных процессов.

Для осуществления способа использовали следующие вещества:

1) агар микробиологический ГОСТ 17206;

2) концентрат очищенного полисахаридного комплекса дрожжей SU 1808331;

3) (-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-[2.1-b]-тиазола гидрохлорид ТУ 9333-024;

4) канамицина моносульфат, регистрационный номер ЛС-001601;

5) формалин ГОСТ 1625;

6) вода дистиллированная ГОСТ 6709.

Способ осуществляется следующим образом:

Пример 1. 90 мас.ч. 0,2% суспензии агара смешивали 2,5 мас.ч. концентрата очищенного полисахаридного комплекса. К полученной смеси при постоянном перемешивании добавляли 3,5 мас.ч. (-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-[2,1-b]-тиазола гидрохлорида, 5,0 млн. ЕД антибиотика канамицина моносульфата и 0,2 мас.ч. формалина, объем доводили до 100 мас.ч. дистиллированной водой. Полученный препарат после стерилизации использовали для нормализации неспецифической резистентности и иммуногенеза, профилактики и лечения воспалительных процессов у животных.

Пример 2. 90 мас.ч. 0,3% суспензии агара смешивали 2,5 мас.ч. концентрата очищенного полисахаридного комплекса. К полученной смеси при постоянном перемешивании добавляли 3,5 мас.ч. (-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-[2,1-b]-тиазола гидрохлорида, 5,0 млн. ЕД антибиотика канамицина моносульфата и 0,2 мас.ч. формалина, объем доводили до 100 мас.ч. дистиллированной водой. Полученный препарат после стерилизации использовали для нормализации неспецифической резистентности и иммуногенеза, профилактики и лечения воспалительных процессов у животных.

Эффективность действия препарата, полученного заявленным способом, определялась в хозяйстве, неблагополучном по острым диарейным воспалительным процессам у молодняка свиней, обусловленных условно-патогенной и патогенной микрофлорой.

Пример 3. Испытание препарата, полученного заявленным способом, для изучения влияния на показатели неспецифической резистентности и иммуногенез проводили на свиньях, подобранных по принципу пар-аналогов, в возрасте 60-65 суток. Были созданы четыре группы животных по 5 голов в каждой. Первой группе свиней вводили препарат ПС-2 (прототип) в дозе 0,1 мл/кг массы, второй группе - препарат по изобретению (пример 1) в дозе 0,1 мл/кг массы, третьей группе - препарат по изобретению (пример 2) в дозе 0,1 мл/кг массы (опытные варианты). Четвертая группа свиней была контрольной, которым для профилактики болезней не использовали предлагаемый препарат, а лечение проводили использованием традиционных способов (применяли антибиотик биомицин, сульфаниламидные препараты, вяжущие средства). Через 14 суток после введения препаратов определяли показатели неспецифической резистентности и иммуногенеза организма согласно общепринятым методам исследований. Результаты исследований приведены в табл.1.

Таблица 1 Показатели неспецифической резистентности свиней Показатели 1 группа (прототип) Опытная группа Контрольная группа препарат по примеру 1 препарат по примеру 2 Эритроциты, RBC, ×10¹²/L 5,7±0,09 6,1±0,11 5,8±0,08 5,4±0,07 Средний объем эритроцитов, MCV, fL 58±1,36 58±1,62 59±2,02 57±1,29 Гемоглобин, HGB, g/L 114±2,97 126±4,03 117±3,28 104±3,14 Среднее содержание гемоглобина, МСН, pg 20±0,47 21±0,54 20±0,41 19±0,38 Средняя концентрация гемоглобина, МСНС, g/L 34±0,72 36±0,63 34±0,78 34±0,68 Гематокрит, НСТ, % 33±0,63 35±0,59 34±0,61 31±0,62 Лейкоциты, WBC, ×10⁹/L 17,83±0,26 19,89±0,23 19,16±0,24 14,73±0,16 Лимфоциты, Lymph, % 66,8±1,26 69,8±1,42 69,4±1,64 57,4±1,29 Гранулоциты, Gran, % 30,5±0,52 27,4±0,47 27,9±0,49 40,3±0,62 Моноциты, MON, % 2,7±0,03 2,8±0,04 2,7±0,02 2,3±0,03 Общий белок, g/L 63,92±1,17 64,38±1,09 64,03±1,12 62,54±0,98 Альбумины, % 36,4±0,49 37,1±0,53 36,7±0,61 45,8±0,67 Глобулины: ά, %, 18,1±0,18 17,8±0,14 17,3±0,21 17,4±0,22   β, % 19,6±0,22 16,7±0,19 16,9±0,11 18,6±0,23   γ, % 26,9±0,27 28,4±0,41 29,1±0,38 18,2±0,19 Т-лимфоциты, % 63,7±0,72 67,2±0,71 66,8±0,58 57,3±0,63 В-лимфоциты, % 20,3±0,21 19,8±0,20 19,9±0,18 20,7±0,21 Лизоцимная активность сыворотки крови 49,7±1,15 64,3±1,27 59,6±1,08 36,8±0,78 Бактерицидная активность сыворотки крови 53,9±1,24 71,8±1,62 67,3±1,46 41,2±0,94

Установлено, что предлагаемый препарат улучшает гемопоэз, о чем свидетельствует повышение содержания эритроцитов на 7,4-12,9%, лимфоцитов на 20,9-21,6%, уровня гемоглобина на 12,5-21,1%. Отмечено улучшение показателей неспецифической резистентности: лизоцимной активности сыворотки крови на 61,9-74,7% и бактерицидной активности сыворотки крови на 63,3-74,3%, а также уровня γ-глобулинов на 56,0-59,9%. Препарат улучшает клеточные факторы иммуногенеза, о чем свидетельствует повышение активности Т-лимфоцитов на 16,6-17,3%.

Пример 4. Для изучения профилактической и лечебной эффективности препарата исследования проводили на поросятах-сосунах, подобранных по принципу пар-аналогов, в возрасте 1-3 суток. Были созданы четыре группы животных по 12 голов в каждой. Первой группе поросят вводили препарат ПС-2 (прототип) в дозе 0,1 мл/кг массы, второй группе - препарат по изобретению (пример 1) в дозе 0,1 мл/кг массы, третьей группе - препарат по изобретению (пример 2) в дозе 0,1 мл/кг массы (опытные варианты). Четвертая группа была контрольной. Изучали заболеваемость и сохранность поросят в течение 60 суток. Результаты исследований приведены в табл.2.

Таблица 2 Показатели заболеваемости и сохранности поросят Показатели 1 группа (прототип) Опытная группа Контрольная группа препарат по примеру 1 препарат по примеру 2 Количество поросят 12 12 12 12 Заболели 3 2 2 5 Выздоровели 3 2 2 3 Пали 0 0 0 2 Продолжительность болезни, суток 2,8±0,3 2,5±0,5 2,5±0,5 6,6±0,5 Заболеваемость, % 25,0 16,7 16,7 41,7 Сохранность, % 100 100 100 83

Из данных этой таблицы видно, что в контрольной группе заболело 5 поросят или 41,7%, из них 2 поросенка пали и 3 выздоровели. Вначале у поросят регистрировались признаки острого воспаления кишечного тракта (диарея), проявляющаяся поносом, переходящая в токсическую диспепсию с признаками обезвоживания и эшерихиоза. Продолжительность болезни составила 6,6±0,5 суток. При лабораторных исследованиях патматериала от павших поросят были выделены эшерхии, стрептококки, протей. Осложнения в течение болезни у поросят происходят в результате снижения защитных свойств организма, в результате чего усиливается активность условно патогенной микрофлоры (эшерихий, стрептококков, протея) и болезнь переходит в токсическую форму с признаками обезвоживания и эшерихиоза.

Заболеваемость поросят в 1 опытной группе составила 25,0%, во второй - 16,7, в третьей - 16,7%, что в 1,7, 2,5 и 2,5 раза меньше, чем в контрольной группе. Болезнь у них протекала признаками угнетения, незначительными расстройствами пищеварения и при лечении предложенными способами поросята выздоравливали в течение 3-6 суток. Сохранность поросят в опытных группах составила 100%. Дополнительное включение канамицина моносульфата в состав препарата обезвреживает возможных возбудителей воспалительных процессов, что проявляется повышением профилактической и лечебной эффективности предлагаемого способа.

Таким образом, на основании гематологических, биохимических и иммунологических исследований, клинического состояния, заболеваемости и сохранности поросят установлено, что применение препарата, полученного заявленным способом, повышает параметры неспецифической резистентности и специфического иммунитета организма животных и обладает профилактической и терапевтической эффективностью при болезнях желудочно-кишечного тракта животных.

Изобретение относится к области биотехнологии и ветеринарной медицины. Способ получения иммунотропного препарата для профилактики и лечения воспалительных процессов сельскохозяйственных животных включает смешивание 90 мас.ч. 0,2-0,3% суспензии агара, 2,5 мас.ч. концентрата очищенного полисахаридного комплекса дрожжевых клеток, 3,5 мас.ч. (-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-[2,1-b]-тиазола гидрохлорида и 0,2 мас.ч. формалина, причем при смешивании дополнительно вводят 5,0 млн ЕД антибиотика канамицина моносульфата и объем препарата доводят до 100 мас.ч. Технический результат заключается в повышении неспецифической резистентности и иммуногенеза, профилактике и лечении болезней животных. 2 табл., 4 пр.

Способ получения иммунотропного препарата для профилактики и лечения воспалительных процессов сельскохозяйственных животных, включающий смешивание 90 мас.ч. 0,2-0,3% суспензии агара, 2,5 мас.ч. концентрата очищенного полисахаридного комплекса дрожжевых клеток, 3,5 мас.ч. (-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-[2,1-b]-тиазола гидрохлорида и 0,2 мас.ч. формалина, отличающийся тем, что при смешивании дополнительно вводят 5,0 млн ЕД антибиотика канамицина моносульфата и объем препарата доводят до 100 мас.ч.