СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЧИСЛЕННОСТИ МИКРООРГАНИЗМОВ В ВОЗДУХЕ Российский патент 2013 года по МПК C12Q1/02 G01N27/06 

Изобретение относится к способу определения численности микроорганизмов в воздухе рабочей зоны и может найти применение в отраслях АПК, характеризующихся высокой бактериальной обсемененностью, например в животноводстве и переработке ветеринарно-санитарного брака.

ГОСТ ССБТ 12.1005-88 «Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны» устанавливает общие санитарно-гигиенические требования к показателям микроклимата и допустимому содержанию вредных веществ в воздухе рабочей зоны. Содержание вредных веществ в воздухе рабочей зоны не должно превышать предельно допустимых концентраций (ПДК). Величина ПДК микробного аэрозоля животноводческих и птицеводческих помещений - 50000 клеток в 1 м³. Содержание вредных веществ в воздухе рабочей зоны подлежит систематическому контролю для предупреждения возможности превышения ПДК.

Известен способ измерения в воздухе рабочей зоны концентраций микроорганизмов, живых клеток и спор (Руководство по гигиенической оценке факторов рабочей среды и трудового процесса. Критерии и классификация условий труда. Руководство Р 2.2.2006-05).

Способ основан на аспирации микроорганизмов из воздуха на поверхность плотных питательных сред. После инкубации в термостате производится подсчет выросших колоний. Микроорганизмы, выросшие на чашке Петри, подлежат макро- и микроскопической идентификации.

Для бактериологического анализа воздуха используют импактор воздуха микробиологический «Флора-100» (ТУ 64-098-33-95), который работает в автоматическом режиме, отбирает заданный объем воздуха и осаждает биологический аэрозоль на чашку Петри с плотной питательной средой. Перед отбором проб питательные среды и посуду стерилизуют в автоклаве в течение 2 часов. После инкубации в термостате в течение 24-48 часов при температуре 35-40°С производится визуальный подсчет микроорганизмов. Таким образом, известный способ определения численности микроорганизмов в воздухе рабочей зоны занимает 26-50 часов.

Недостатками данного способа являются длительность и трудоемкость определения численности микроорганизмов.

Задачей изобретения является сокращение времени определения численности микроорганизмов в воздухе рабочей зоны и снижение трудоемкости.

Поставленная задача решается благодаря тому, что в известном способе определения численности микроорганизмов в воздухе, заключающимся в том, что микробный аэрозоль осаждают на питательную среду с последующим термостатированием и определением численности микроорганизмов, согласно изобретению, в качестве питательной среды используют 1% стерильный раствор глюкозы, а численность микроорганизмов определяется по электропроводности термостатированных проб по графику эмпирической зависимости. Осаждение производится с помощью аспиратора марки «Бриз-1» и поглотителя Зайцева.

На представленном чертеже дан график для определения численности микроорганизмов в воздухе.

Реализация способа состоит в следующем. К аспиратору марки «Бриз-1» (ГОСТ Р 51945 Аспираторы. Общие технические условия) с расходомером, рассчитанным на отбор пробы воздуха в количестве 2 л/мин, подсоединяется поглотитель Зайцева (ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры.), в колбе которого помещются 10 мл 1%-ного раствора глюкозы, приготовленный на физиологическом растворе.

Устройство помещают в исследуемое помещение, и аспиратор включается на 15 минут. При этом микроорганизмы, находящиеся в воздухе, проходя через раствор глюкозы, задерживаются раствором. Затем раствор из поглотителя Зайцева переливают в пробирку и термостатируют при 37°С в течение двух часов. Перед отбором проб питательные среды и посуду стерилизуют в автоклаве в течение 2 часов.

В процессе термостатирования микробы используют глюкозу с образованием кислых продуктов жизнедеятельности, которые изменяют электропроводность раствора.

После термостатирования измеряют электропроводность раствора с помощью датчика KDS-1038.

Численность микроорганизмов в воздухе рабочей зоны определяют по графику эмпирической зависимости электропроводности раствора от числа микробов, который строят по значениям, полученным опытным путем.

Для определения численности микроорганизмов на оси ординат откладывают величину удельной электропроводности раствора глюкозы, зафиксированную датчиком. Из этой точки проводят горизонталь до пересечения с графиком, а затем опускают вертикаль на ось абсцисс. Точка пересечения вертикали с осью абсцисс будет соответствовать искомой величине численности микроорганизмов. Например, при удельной электропроводности раствора глюкозы, равной 288 мкС/см, численность микроорганизмов составит 37 тыс. КОЕ в 1 м³ воздуха, что не превышает величину ПДК микробного аэрозоля животноводческих и птицеводческих помещений.

Предлагаемая методика определения численности микроорганизмов в воздухе является низкозатратной и нетрудоемкой. Ее продолжительность составляет 4 часа 20 мин, что намного меньше времени, затраченного на определение численности микроорганизмов известными методами.

Готовят 1% стерильный раствор глюкозы на физиологическом растворе, который используют в качестве питательной среды. Подсоединяют к аспиратору марки «Бриз-1» поглотитель Зайцева, в колбе которого помещают 10 мл подготовленного 1%-ного раствора глюкозы. Помещают устройство в исследуемое помещение и включают аспиратор на 15 мин. Микроорганизмы, находящиеся в воздухе, проходят через раствор глюкозы и задерживаются в нем. Помещают раствор в пробирку и термостатируют при 37°С в течение 2 ч. Измеряют электропроводность раствора с помощью датчика KDS-1038. Численность микроорганизмов в воздухе определяют по графику эмпирической зависимости электропроводности раствора от числа микробов, который строят по полученным значениям. Изобретение позволяет сократить время определения численности микроорганизмов в воздухе рабочей зоны до 2 ч 20 мин. 1 ил.

Способ определения численности микроорганизмов в воздухе, заключающийся в том, что микробный аэрозоль осаждают на питательную среду с последующим термостатированием и определением численности микроорганизмов, отличающийся тем, что в качестве питательной среды используют 1%-ный стерильный раствор глюкозы, а численность микроорганизмов определяют по электропроводности термостатированных проб по графику эмпирической зависимости.