СПОСОБ КОРРЕКЦИИ РЕПРОДУКТИВНОЙ ФУНКЦИИ КОРОВ В ПОСЛЕРОДОВОЙ ПЕРИОД Российский патент 2013 года по МПК A61K31/07 A61K31/185 A61K31/194 A61P15/04 

Изобретение относится к ветеринарии, касается способа коррекции репродуктивной функции у коров в послеродовой период и может быть использовано для профилактики субинволюции матки и воспалительных процессов в половой сфере, вызываемых патогенной микрофлорой.

В основе этиологии нарушения репродуктивной функции у коров лежат нарушения в обмене веществ и снижение мощности эндокринной, антиоксидантной и иммунной систем.

Уже известны способы восстановления функции репродуктивных органов у коров с применением гормональных препаратов и антибиотиков /1/. Активизация функциональной деятельности яичников гормональными препаратами требует квалифицированного индивидуального подхода с учетом стадии полового цикла, в противном случае гормоны могут угнетать функцию репродуктивных органов, что приводит к бесплодию. Кроме того, высока вероятность неблагоприятного воздействия на здоровье людей через продукты животноводства. Эффективность применения антибиотиков нестабильная, что связано с распространением лекарственно устойчивых штаммов патогенной и условно патогенной микрофлоры.

Известны также способы нормализации и стимулирования репродуктивной функции у коров с применением биологически активных веществ, фармакологическое действие которых определяется компенсацией энергозатрат на родовые и послеродовые процессы, требующие большого расхода энергии на мышечные усилия, синтез, секрецию составных элементов молозива, молока, гормонов, ферментов и других веществ, расходуемых при восстановлении репродуктивной функции, например, сахара, /2/ или их участием в ферментативных реакциях, например, витаминов или их комплексов /3/. Известные способы имеют свои недостатки. Так, при применении сахара необходимо учитывать не только сбалансированность рационов по сахару и протеину, но и по фосфору: при сбалансированности рационов по фосфору в рационы животных ежедневно вводят сахар, а при сбалансированности рационов по сахару - фосфор для нормализации сахаро-протеинового отношения. Подкормка сухостойных коров сахаром ускоряет процессы очищения матки, восстановления гормональной функции и приход коров в первую охоту, однако раннее проявление охоты в большинстве случаев не сопровождается оплодотворением, что увеличивает сервис-период /4/. При применении витаминов - в профилактике бесплодия подтверждена роль витаминов группы B, A, E и C - необходимо учитывать взаимодействие между ними. Так, ретинол (витамин A) вызывает частичное разрушение α-токоферола (витамин E), что способствует сокращению поступления последнего в организм и снижению его содержания в сыворотке крови и печени, а поступление в организм α-токоферола (витамин E) повышает уровень аскорбиновой кислоты (витамин C), который может снижаться при скармливании гипердоз ретинола (витамин А) /5/.

Цель изобретения - способ коррекции репродуктивной функции коров в послеродовой период в результате ускорения инволюционных и регенерационных процессов в половых органах у коров после отела путем оптимизации метаболических процессов в организме, повышения уровня общей естественной резистентности и иммунного статуса.

Поставленная цель достигается способом коррекции репродуктивной функции коров в послеродовой период с применением комплекса органических кислот - лимонной, янтарной и аскорбиновой.

Лимонная, янтарная и аскорбиновая кислоты синтезируются всеми клетками человека, животных и некоторых растений и являются важнейшими метаболитами, участвующими в окислительно-восстановительных реакциях, стимулирующих биоэнергетические процессы. Предложенная комбинация позволяет оптимально использовать свойства естественных метаболитов как регуляторов образования энергии, антигипоксантов и детоксикационных агентов. Янтарная кислота участвует в ряде биохимических реакций энергетического, структурного и ферментного обеспечения организма. Лимонная кислота является активатором янтарной кислоты в цикле трикарбоновых кислот Кребса. Аскорбиновая кислота (витамин C) играет ключевую роль в антиоксидантной защите организма, в том числе от окислительного стресса, являясь активатором ретикулоэндотелиальной системы, усиливает метаболическую активность янтарной кислоты.

Способ осуществляется следующим образом.

Сухостойным коровам в течение 10 дней перед отелом применяют лимонную, янтарную и аскорбиновую кислоты, взятые в соотношении 1:2:2, в дозе 15-25 мг/кг живой массы один раз в сутки.

Эффективность способа коррекции репродуктивной функции у коров в послеродовой период определяли на глубокостельных коровах черно-пестрой породы в возрасте 3-8 лет средней и выше средней упитанности (массой тела 500-550 кг).

Пример 1. Эффективность способа в зависимости от дозы комплекса органических кислот определяли на 6 группах животных по 10 голов в каждой: коровам первых пяти групп в течение 10 дней до отела один раз в сутки применяли лимонную, янтарную и аскорбиновую кислоты, взятые в соотношении 1:2:2, в дозах 10, 15, 20, 25, 30 мг/кг живой массы соответственно. Животные шестой группы препарата не получали и служили контролем. У коров контролировали характер течения родов и послеродового периода, проводили клинико-гинекологические обследования с учетом количества заболевших животных, сроков инволюции репродуктивных органов, охоты и осеменения. Все подопытные коровы находились в одинаковых условиях содержания и кормления, соответствующих существующим требованиям. На 8-12 день после отела у коров брали кровь для иммунобиологических исследований. Эффективность оценивали по основным иммунобиохимическим (таблица 1) и клиническим показателям. Результаты представлены в таблицах 2 и 3.

Таблица 1 Основные иммунобиологические показатели и способы их определения Показатели Метод определения Гематологические Гемоглобин гемиглобинцианидный Эритроциты по А.И. Воробьеву Лейкоциты в камере Горяева Лейкоцитарная формула путем дифференцированного подсчета лейкоцитов Биохимические Общий белок сыворотки крови рефрактометрический Белковые фракции нефелометрический Глюкоза орто-толуидиновый Общие липиды по Криницкому в модификации Волгина Общий холестерин по Ильку Витамин A (ретинол) в реакции с треххлористой сурьмой Характеризующие состояние процессов пероксидации липидов и антиоксидантной системы защиты Малоновый диальдегид в реакции с тиобарбитуровой кислотой Активность каталазы в реакции с молибдатом аммония Характеризующие состояние общей естественной резистентности и иммунологической реактивности Иммунные белки с применением цинк-сульфатного теста Бактерицидная активность сыворотки крови (БАС) по О.В. Смирновой и Т.А. Кузьминой Фагоцитарная активность нейтрофилов (ФАН) по B.C. Гостеву Лизоцимная активность сыворотки крови (ЛАС) по В.Г. Дорофейчук

Таблица 3 Влияние комплекса органических кислот (лимонная, янтарная, аскорбиновая кислоты в соотношении 1:2:2) на основные клинические показатели в зависимости от дозы Показатели Группы коров 1-я 2-я 3-я 4-я 5-я 6-я Доза комплекса органических кислот, мг/кг живой массы 10,0 15,0 20,0 25,0 30,0 - Сроки отделения последа, часов 4,8±0,10 4,3±0,08 4,2±0,07 4,2±0,06 4,6±0,09 4,7±0,08 Сроки выделения лохий, дней 13,8±0,21 13,2±0,14 13,0±0,16 13,1±0,19 13,4±0,23 13,9±0,19 Сроки инволюции половых органов, дней 24,8±0,3 23,8±0,4 23,3±0,3 23,6±0,3 24,3±0,2 25,0±0,3 Сроки первого осеменения, дней 26,7±0,3 25,3±0,4 24,8±0,3 25,0±0,2 26,2±0,4 27,0±0,3

Представленные показатели гомеостаза (таблица 2) и восстановления репродуктивной функции коров (таблица 3) свидетельствуют об их глубокой взаимосвязи.

Анализ данных таблицы 2 показал, что лимонная, янтарная и аскорбиновая кислоты, взятые в соотношении 1:2:2, оказывали стимулирующее действие на механизмы резистентности коров, проявляющееся повышением уровня гемоглобина и содержания эритроцитов в крови. Так, уровень гемоглобина и содержание эритроцитов в крови животных всех опытных групп достоверно выше на 12,9-21,8 и 5,4-10,7% соответственно в сравнении с контрольной группой, причем эти показатели в группах 2, 3, 4 и 5 (дозы комплекса органических кислот 15-30 мг/кг живой массы) превышали соответствующие показатели в группе 1 (доза комплекса органических кислот 10 мг/кг живой массы).

Аналогичная тенденция проявилась в отношении лейкоцитов и эозинофилов. Так, содержание лейкоцитов у животных всех опытных групп достоверно выше на 19,6-41,1% в сравнении с контролем. У животных всех опытных групп содержание эозинофилов в 2,4-2,6 раза выше, чем у животных контрольной группы, что подтвердило высокую адаптационную стресс-устойчивость и иммунологическую реактивность у коров этих групп в послеродовой период.

Показатели содержания глюкозы в крови у коров 2-5-й группы свидетельствовали об активизации не только углеводного, но и энергетического обмена веществ, что крайне важно в сухостойный, родовой и послеродовой периоды для профилактики различных акушерско-гинекологических патологий. В частности, они достоверно на 47,7-70,7% превышали соответствующий показатель контрольной группы, который в свою очередь на 21,0% ниже физиологической нормы, что свидетельствовало о нарушении энергетической обеспеченности животных и возможной патологии органов воспроизводства.

Для липидного обмена характерно достоверное снижение данного показателя у животных опытных групп на 31,6-38,1% в сравнении с контролем, что указывало на интенсивное использование пластических и энергетических материалов в поздние сроки беременности и в первый месяц после родов. В этот период усиливаются процессы гидроксилирования - значительное количество липидов и их производных принимают непосредственное активное участие не только в выработке половых гормонов и других биологически активных соединений, но и в углеводном и белковом обменах, способствуют повышению тонуса мышц и инволюции половых органов. Уровень липидов в пределах 3,62-4,0 г/л (физиологическая норма 3,0-4,0 г/л) свидетельствует об активизации метаболизма и более эффективном их использовании. В то же время высокий уровень липидов у животных контрольной группы является доказательством нарушения их обмена.

У животных опытных групп отмечена тенденция к повышению показателей общей естественной резистентности. Так, лизоцимная и бактерицидная активность сыворотки крови, а также фагоцитарная активность нейтрофилов подопытных коров этих групп после родов превышали соответствующие показатели контроля в среднем в 1,3-1.5 раза.

Активизация в пределах физиологических норм окислительно-восстановительных процессов, углеводного и липидного метаболизма, улучшение показателей иммунного статуса и общей естественной резистентности явились, по-видимому, фактором, способствующим восстановлению репродуктивных органов коров в послеродовой период (таблица 3). У коров опытных групп сократились сроки: отделения последа на 0,1-0,5 часа, выделения лохий - на 0,1-0,9 дня, инволюции половых органов - на 0,2-1,7 дня и первого осеменения - на 0,3-2,2 дня.

Как видно из таблицы 2, комплекс органических кислот (лимонной, янтарной и аскорбиновой, взятых в соотношении 1:2:2) оказывал стимулирующее действие разной степени выраженности на показатели иммунобиологического гомеостаза. Доза ниже заявленной минимальной (10,0 мг/кг живой массы) обеспечивала незначительное повышение иммунобиологических показателей относительно контроля, причем их значения оказались ниже физиологической нормы. Средняя доза (20,0 мг/кг живой массы) нормализовала иммунобиологические показатели на уровне верхней границы физиологической нормы, максимальная доза (25,0 мг/кг живой массы) обеспечивала незначительное повышение показателей относительно средней дозы, а доза выше максимальной (30,0 мг/кг живой массы) - ниже показателей относительно средней и максимальной доз, что подтвердило обоснованность доз, колеблющихся в интервале 15-25 мг/кг живой массы. Дозы вне заявленных пределов экономически нецелесообразны из-за неадекватности затрат результатам.

Пример 2. Эффективность восстановления репродуктивной функции в зависимости от комплекса биологически активных веществ определяли на 4 группах коров. Животным первой группы (n=17) препаратов не назначали (контроль), второй (n=18) - за 55-60 и 25-30 дней до отела внутримышечно вводили тривитамин в дозе 5 мл/гол., третьей (n=18) - в течение 60 дней до отела в дополнение к основному рациону скармливали ежедневно по 600 г сахара, четвертой (n=17) - в течение 10 дней до отела ежедневно перорально применяли лимонную, янтарную и аскорбиновую кислоты, взятые в соотношении 1:2:2, в дозе 20 мг/кг живой массы. Все подопытные коровы находились в одинаковых условиях содержания и кормления, соответствующих существующим требованиям. Учет результатов, как в примере 1 (таблицы 4 и 5).

Таблица 4 Изменение иммунобиологических показателей под действием различных биологически активных веществ Показатели Группы коров 1-я (контроль) 2-я (тривитамин) 3-я (сахар) 4-я (лимонная, янтарная, аскорбиновая кислоты) Гемоглобин, г/л 101±2,2 110±1,3 112±2,2 122±2,0 Эритроциты, 10¹²/л 5,58±0,1 5,69±0,15 5,67±0,22 6,00±0,06 Лейкоциты, 10⁹/л 5,63±0,2 6,70±0,2 6,63±0,2 7,85±0,2 Общий белок, г/л 66,0±1,3 73,0±1,3 71,5±1,3 73,5±1,0 γ-глобулины, % 22,4±1,6 33,0±1,6 31,4±1,6 32,4±1,3 Общие липиды, г/л 5,85±0,5 4,60±0,18 4,55±0,3 3,75±0,2

Таблица 5 Влияние биологически активных веществ на основные клинические показатели Показатели Группы коров 1-я - n=17 2-я - n=18 3-я - n=18 4-я - n=17 Биологически активное вещество - Тривитамин Сахар (лимонная, янтарная, аскорбиновая кислоты) Сроки отделения последа, часов 4,8±0,08 4,5±0,05 4,4±0,07 4,2±0,05 Сроки выделения лохий, дней 14,0±0,19 13,5±0,25 13,7±0,24 13,1±0,22 Сроки инволюции половых органов, дней 24,9±0,5 24,2±0,4 24,4±0,4 23,5±0,6 Сроки осеменения, дней 27,3±0,5 25,7±0,6 26,3±0,4 24,9±0,6

Результаты биохимических исследований, представленные в таблице 4, показали, что при применении лимонной, янтарной и аскорбиновой кислот, взятых в соотношении 1:2:2 (группа 4), показатели гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов, ОБС и гамма-глобулинов выше на 6,7-39,4%, а общих липидов на 32,5% ниже соответствующих показателей контрольной группы.

Как видно из таблиц 4 и 5, под действием биологически активных веществ отмечались изменения гомеостаза в направлении его оптимизации в отношении общего белка сыворотки крови, гамма-глобулинов и форменных элементов крови. У коров четвертой группы (лимонная, янтарная, аскорбиновая кислоты, взятые в соотношении 1:2:2) отмечались по сравнению с животными других групп повышенные уровни гемоглобина и эритроцитов, что указывало на отсутствие симптомов гипоксии, которые могут сопровождать неблагоприятные сдвиги в энергетическом обмене, и пониженный уровень общих липидов, что указывало на активизацию метаболизма липоидных соединений, имеющую особое значение в связи с повышением синтеза эстрогенов и других биологически активных соединений для инволюции половых органов после отела. Оптимизация окислительно-восстановительных процессов, о чем свидетельствовало повышение показателей гемоглобина и эритроцитов, иммунного статуса и общей естественной резистентности, о чем свидетельствовали показатели ОБС, лейкоцитов и гамма-глобулинов, и липидного обмена веществ на уровне физиологической нормы проявлялась улучшением показателей, характеризующих восстановление репродуктивной функции у коров. Так, у животных четвертой группы (заявленный способ) сроки отделения последа сократились на 0,6 часа по сравнению с контролем, на 0,3 часа и 0,2 часа по сравнению со второй и с третьей группами соответственно; сроки выделения лохий - на 0,9 дня по сравнению с контролем и на 0,4 дня и 0,6 дней по сравнению со второй и третьей группами соответственно; сроки первого осеменения - на 2,4 дня по сравнению с контролем и на 0,8 дня и 1,4 дня по сравнению со второй и третьей группами соответственно.

Пример 3. Эффективность способа коррекции репродуктивной функции у коров в послеродовой период с применением лимонной, янтарной и аскорбиновой кислот, взятых в соотношении 1:2:2, определяли в сравнении с известным способом с применением биологически активных веществ на 2 группах коров. Животным первой группы в течение 10 дней до отела ежедневно скармливали лимонную, янтарную и аскорбиновую кислоты, взятые в соотношении 1:2:2, в дозе 20 мг/кг живой массы (опыт). Коровам второй группы вводили препараты селемаг и тетравит в дозе 5 мл/гол, внутримышечно двукратно за 60 и 30 дней до отела (контроль). Все подопытные коровы находились в одинаковых условиях содержания и кормления, соответствующих существующим требованиям. За коровами вели клинические наблюдения и учитывали: характер течения предродового, родового и послеродового периодов, наличие акушерских заболеваний, срок инволюции половых органов, число осемененных и оплодотворившихся коров, срок от отела до оплодотворения, продолжительность бесплодия. Результаты представлены в таблице 6.

Таблица 6 Эффективность профилактики патологий послеродового периода у коров лимонной, янтарной и аскорбиновой кислотами, взятыми в соотношении 1:2:2 Показатели Группы коров 1-я (n=29) лимонная, янтарная, аскорбиновая кислоты 1:2:2 2-я (n=29) селемаг + тетравит Заболело коров (эндометрит + субинволюция матки), гол. 7 12 Профилактическая эффективность, % 75,9 48,6 Сроки инволюции матки, дней 29,6±1,3 35,1±1,8 Осеменено коров, гол. 27 23 Оплодотворилось, гол. (%) 25(86,2) 20(69,0) Период от отела до оплодотворения, дней 49,8±3,1 59,5±3,5 Продолжительность бесплодия, дней 19,8±3,1 29,5±3,5

Проведенные исследования показали, что заявленный способ стимулировал инволюционные процессы, что выразилось в снижении патологий родового и послеродового периодов и закономерном повышении количественных показателей репродуктивной функции. Как видно из таблицы 6, эффективность профилактики эндометрита и субинволюции матки заявленным способом составила 75,9% (по сравнению с 48,6% при применении известного способа). Сроки инволюции матки сократились на 5,5 дня, оплодотворяемость повысилась на 17,2%, продолжительность бесплодия составила 19,8±3,1 дней по сравнению с 29,5±3,5 днями.

Результаты проведенных исследований подтвердили, что при реализации заявленной совокупности существенных признаков достигается технический результат - коррекция репродуктивной функции у коров в послеродовой период. Оптимизация обменных процессов способствовала улучшению функции фетоплацентарной системы, что выражалось в повышении оплодотворяемости и сокращении продолжительности бесплодия, а повышение уровня общей естественной резистентности и иммунологической реактивности обеспечивало нормальное течение родов и послеродового периода.

Источники информации, принятые во внимание

1. Горев Э.Л. Восстановление репродуктивной функции и аспекты ее регуляции у коров после родов. - Душанбе: Дониш, 1981. - С.209-264.

2. Волков Н.П. Оптимальные нормы кормления коров по энергии и протеину. // Зоотехния. 1992. - №5-6. - С.10-12.

3. Добровольский Б.Г. Влияние витаминно-минеральных кормов на воспроизводительную способность коров. // Зоотехния,1998. - №2. - С.25-29.

4. Солун А.С., Петухов Е.А., Хеленова Л.Д. Контроль сахарного питания - необходимое условие полноценного кормления жвачных. - Тр. МВА, Москва, 1970, т.56, С.3-8.

5. Горев Э.Л. Восстановление репродуктивной функции и аспекты ее регуляции у коров после родов. - Душанбе: Дониш, 1981. - С.165-185.

Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для коррекции репродуктивной функции коров в послеродовой период. Сухостойным коровам перорально применяют лимонную, янтарную и аскорбиновую кислоты, взятые в соотношении 1:2:2, в течение 10 дней перед отелом в дозе 15-25 мг/кг живой массы один раз в сутки. Использование заявленного изобретения позволяет оптимизировать обменные процессы, способствует повышению оплодотворяемости и уровня общей естественной резистентности и иммунологической реактивности, обеспечивает нормальное течение родов и послеродового периода. 6 табл., 3 пр.

Способ коррекции репродуктивной функции у коров в послеродовой период, включающий пероральное применение биологически активных веществ, отличающийся тем, что в качестве биологически активных веществ применяют лимонную, янтарную и аскорбиновую кислоты, взятые в соотношении 1:2:2, в течение 10 дней перед отелом в дозе 15-25 мг/кг живой массы один раз в сутки.