СПОСОБ КЛЕТОЧНОГО АНАЛИЗА ПРОБЫ ПРИ ПОМОЩИ ВИРТУАЛЬНОЙ АНАЛИТИЧЕСКОЙ ПЛАСТИНКИ Российский патент 2014 года по МПК G01N33/48 

Настоящее изобретение касается способа клеточного анализа цитологической или гистологической пробы, располагаемой на аналитической пластинке, включающего следующие стадии:

- осуществляют по меньшей мере первую обработку пробы, при этом упомянутая обработка предназначена для обеспечения выявления патологических клеток среди здоровых клеток пробы,

- осуществляют съемку изображений пробы, находящейся на аналитической пластинке с целью получения множества изображений, каждое из которых отображает одну зону аналитической пластинки, при этом упомянутые изображения, расположенные в ряд, образуют полное изображение пробы.

Изобретение используют, в частности, для способов цитологического или гистологического анализа.

Изобретение касается также способа получения виртуальной аналитической пластинки для анализа пробы с целью обеспечения ее клеточного анализа, в частности, при помощи вышеупомянутого способа анализа.

Анализ проб используют, например, для диагноза патологий, например, на основании клеток, взятых при помощи мазков (цервикальных, вагинальных и т.д.), пункций органов (грудь, щитовидная железа, лимфатический узел и т.д.) или сбора (взятие мочи, бронхо-альвеолярный лаваж и т.д.), с целью обнаружения патологий любого типа и, в частности, предракового или ракового состояния.

Анализ проб производят опытные специалисты, обученные для обнаружения клеток, которые могут быть патологическими, в пробе, располагаемой на аналитической пластинке или предметном стекле. Чтобы можно было обнаружить потенциально патологические клетки, пробу подвергают обработке, такой как окрашивание, позволяющее выделить характеристики ядра и цитоплазмы клеток, что помогает выявить и диагностировать патологические клетки. Во время анализа пробы потенциально патологические клетки проявляют особенности тинкториального аффинитета, размера, формы как на уровне ядра, так и цитоплазмы, по отношению к нормальным клеткам.

Анализ можно производить вручную без каких-либо вспомогательных средств. В этом случае врач или специалист-лаборант перемещает пластинки с пробами под микроскопом и исследует каждую из них с целью обнаружения морфологических аномалий, указывающих на патологические клетки, которые могут соответствовать, например, предраковому или раковому состоянию. Такой способ анализа является трудоемким и занимает очень много времени. Кроме того, он не дает удовлетворительных результатов, особенно, что касается большого числа «ложных отрицательных результатов», которое достигает примерно 30%, то есть пробы считаются нормальными, тогда как у пациента имеется патология, в частности, предраковая или раковая, с риском дальнейшего развития рака у пациента, которого убедили в обратном.

Для улучшения результатов анализов было предложено улучшить взятие проб, то есть число клеток, их крепление, их окрашивание и их распределение на аналитической пластинке, а также обеспечить врача или специалиста-лаборанта, производящего анализ, информативными средствами анализа, такими как программы обработки изображений и др.

Для этого используют камеру или съемочный аппарат, чтобы получать изображения различных зон пробы, находящейся на аналитической пластинке, и передавать эти изображения в информативную систему, которая в этом случае работает на «виртуальной» аналитической пластинке.

Эта информативная система обеспечивает обработку сигнала, предварительную обработку изображений и сравнительный анализ, в случае необходимости, с использованием создаваемых или уже существующих баз данных, чтобы ускорить процесс анализа и обеспечить, таким образом, анализ большего числа проб, с целью оказания помощи врачу или лаборанту. Например, исследование изображений проб происходит автоматически, и, если обнаруживаются некоторые зоны с аномалией, соответствующие изображения выводятся на экран для врача или лаборанта, который может определить, действительно ли эти зоны показывают на наличие патологических клеток. Таким образом, врач или лаборант исследует только аномальные зоны, не тратя время на анализ зон, которые информативная система квалифицировала как нормальные. Такой способ, действительно, позволяет ускорить анализ.

Однако в этом случае врач или лаборант лишается возможности наблюдать нормальные пробы или пробы, содержащие незначительные изменения, что мешает его оценке проб и особенно повышению его квалификации и даже приводит к снижению его диагностических способностей. Действительно, анализ проб основан на уровне подготовки и на опыте врача или лаборанта, который должен исследовать пробы и сравнивать нормальные зоны и зоны, содержащие аномалии. Отсутствие такой практики при компьютерном анализе может привести к потере квалификации врачами или лаборантами и к появлению ошибок в анализах.

Настоящее изобретение призвано устранить вышеупомянутые недостатки и предложить способ анализа, который осуществляют с помощью информативных технологий, чтобы получить существенный выигрыш во времени, и который позволяет также врачам или лаборантам получать практику в исследовании как нормальных, так и аномальных проб.

В этой связи объектом изобретения является способ анализа вышеупомянутого типа, дополнительно включающий следующие стадии:

- осуществляют автоматическую прокрутку изображений на средстве отображения с заранее определенной скоростью прокрутки, при этом упомянутую скорость предусматривают таким образом, чтобы исследователь мог анализировать изображение и определить, содержит или не содержит отображаемая зона пробы потенциально патологические клетки,

- прокрутку останавливают при обнаружении, по меньшей мере, одной аномалии, которая может свидетельствовать о наличии патологической клетки,

при этом остановка прокрутки происходит автоматически в результате автоматического анализа изображения, при этому упомянутую остановку осуществляют, если в изображении обнаружен отдельный объект, определяемый как аномальный.

Таким образом, врач или лаборант наблюдает как нормальные зоны, так и аномальные зоны пробы, и анализ происходит быстрее, чем ручной анализ, за счет автоматической прокрутки полученных изображений. Кроме того, способ в соответствии с настоящим изобретением позволяет полностью воспроизвести изображение пробы, чтобы не прибегать к использованию микроскопа, при помощи съемочного аппарата, обеспечивающего получение изображений, отображающих всю поверхность аналитической пластинки, что будет описано ниже.

Согласно другим отличительным признакам способа анализа:

- скорость прокрутки изображений регулируется,

- способ дополнительно включает стадию возобновления прокрутки после анализа зоны пробы, содержащей аномалию, при этом упомянутый этап возобновления происходит по команде исследователя,

- способ включает стадию автоматической остановки прокрутки на изображении, не содержащем аномалии или соответствующем объектам, необходимым для оценки репрезентативности пробы, при этом возобновление прокрутки происходит по команде исследователя после подтверждения, что изображение не содержит аномалии,

- пробу подвергают двум разным видам обработки, которые позволяют маркировать патологические клетки среди клеток пробы, при этом осуществляют две стадии съемок изображений, при этом каждая стадия съемок позволяет производить обнаружение аномалий по одному из видов обработки, осуществляемых на пробе, при этом данные изображений, полученные на каждой стадии съемок, накладывают друг на друга, чтобы исследователь мог переходить от изображения одной зоны, полученного во время одной стадии съемок, к изображению этой же зоны, полученному во время другой стадии съемок, при прокрутке изображений,

- переход от изображения зоны на одной стадии съемок к изображению этой же зоны, снятой на другой стадии съемок, происходит, если в изображении обнаружена аномалия,

- стадии обработки являются стадиями окрашивания или маркировки пробы при помощи флуорофоров,

- отображение изображения, полученного на другой стадии съемки, сопровождается выводом на экран информации об отображаемой зоне пробы и/или о всей пробе и/или о пациенте, у которого взяли пробу,

- способ включает стадию увеличения изображения для просмотра детали отображаемой зоны,

- степень увеличения можно регулировать.

Объектом настоящего изобретения является также способ получения виртуальной пластинки для анализа пробы с целью ее клеточного анализа, включающий следующие стадии:

- получают пробу,

- осуществляют первую стадию обработки пробы, при этом упомянутая обработка позволяет маркировать патологические клети относительно остальных клеток,

- осуществляют вторую стадию обработки пробы, при этом упомянутая обработка позволяет маркировать патологические клети относительно остальных клеток иначе, чем на первой стадии обработки,

- пробу помещают на аналитическую пластинку перед или после, или между стадиями обработки пробы.

Этот способ дополнительно включает следующие стадии:

- осуществляют первую съемку изображений пробы, находящейся на аналитической пластинке, чтобы получить множество изображений, каждое из которых отображает одну зону аналитической пластинки, при этом упомянутые изображения, расположенные рядом друг с другом, образуют полное изображение пробы, при этом упомянутые изображения позволяют обнаружить патологические клетки, маркированные во время первой стадии обработки,

- осуществляют вторую съемку изображений пробы, находящейся на аналитической пластинке, чтобы получить множество изображений, каждое из которых отображает одну зону аналитической пластинки, при этом упомянутые изображения, расположенные рядом друг с другом, образуют полное изображение пробы, при этом упомянутые изображения позволяют обнаружить другие клеточные аномалии, отличные от маркированных на первой стадии обработки,

- упомянутые полученные изображения образуют виртуальную аналитическую пластинку.

Такой способ позволяет очень просто получить изображение пробы, позволяющее обнаруживать двумя разными путями потенциально патологические клетки и получать большое число данных о пробе, что будет описано ниже.

Согласно другим отличительным признакам способа получения:

- способ дополнительно включает стадию наложения данных изображений, полученных во время первой съемки изображений, и данных изображений, полученных во время второй съемки изображений,

- первая стадия обработки пробы является стадией флуоресцентной маркировки,

- первая стадия обработки включает стадию введения в пробу контрольных шариков, при этом упомянутые шарики служат метками для регулировки съемки изображений,

- вторая стадия обработки пробы является стадией окрашивания по Папаниколау.

После этого виртуальную аналитическую пластинку, полученную при помощи описанного выше способа получения, подвергают анализу при помощи описанного выше способа анализа.

Другие аспекты и преимущества настоящего изобретения будут более очевидны из нижеследующего описания, представленного в качестве примера, со ссылками на прилагаемые чертежи, на которых:

Фиг. 1 - схематичный вид различных стадий способа получения виртуальной аналитической пластинки в соответствии с настоящим изобретением.

Фиг.2 - блок-схема различных стадий способа клеточного анализа в соответствии с настоящим изобретением.

Фиг. 1 иллюстрирует способ получения виртуальной аналитической пластинки 1 с целью клеточного анализа с помощью информативной системы. Под виртуальной пластинкой следует понимать совокупность информации и сгруппированных цифровых данных, касающихся пробы 2.

Пробу 2 получают, например, путем взятия мазков (цервикальных, вагинальных и т.д.), пункций органов (грудь, щитовидная железа, лимфатический узел и т.д.) или сбора (взятие мочи, бронхо-альвеолярный лаваж и т.д.). На первой стадии А пробу переводят во взвешенное состояние, например, в пробирке или в флаконе 4 для проб.

На стадии В пробу подвергают первой обработке, предназначенной для маркировки патологических клеток относительно других клеток. Согласно варианту выполнения, эта первая обработка является флуоресцентной маркировкой, которая позволяет не только выделить патологические клетки, но также определить различные характеристики пробы. Действительно, эта флуоресцентная маркировка выявляет специфическую компоненту ядра или цитоплазмы и позволяет выделить их относительно друг друга с целью выбора потенциально патологических клеток. Такая маркировка, если она является специфической для ДНК, позволяет определить количественно ДНК клеток пробы, например, для анализа плоидности, или, если она является специфической для канцерогенного вируса, такого как вирус папилломы человека, например, в случае анализа мазка из шейки матки, позволяет пометить в качестве мишеней потенциально патологические клетки.

Флуоресцентную маркировку осуществляют, например, автоматически при помощи автомата 4, оборудованного пипеточными средствами, используемыми одновременно для растворения пробы и для смешивания пробы с флуоресцентными молекулами. Согласно варианту выполнения, в раствор пробы 2 вводят контрольные шарики. Такие шарики помечены флуоресцентной молекулой и позволяют облегчить автоматическую регулировку во время съемок изображений пробы, что будет описано ниже.

На стадии С маркированную пробу 2 помещают на аналитическую пластинку 6. Как известно, нанесение клеток на пластинку 6 осуществляют, например, путем декантации. Пробу 2 выливают в декантационную камеру 8, дно которой открыто в сторону аналитической пластинки 6. Абсорбционные средства 10 обеспечивают абсорбцию раствора по мере осаждения клеток на аналитическую пластинку 6. Такой способ нанесения известен, и его подробное описание опускается.

На стадии D пробу подвергают второй обработке, предназначенной для окрашивания клеток, что известно специалисту и описано для морфологического анализа. Согласно варианту выполнения, этой второй обработкой является окрашивание по методу Папаниколау. Такое окрашивание известно уже давно, и семиология, широко раскрытая в литературе, обеспечивает распознавание возможных аномалий, соответствующих, например, присутствию предраковых или раковых клеток. Это окрашивание позволяет также распознавать различные типы клеток и их число, чтобы определить репрезентативное качество пробы и, например, определить, является проба репрезентативной или нет. Стадию окрашивания по Папаниколау можно также осуществлять при помощи автоматических пипеточных средств.

Стадию декантации клеточной суспензии можно осуществлять до, после или между вышеуказанными стадиями маркировки и окрашивания.

Описанные выше стадии, комбинирующие флуоресцентную маркировку и известное окрашивание для клеточного анализа являются простыми в осуществлении и позволяют получить легко читаемую пробу, а также важную дополнительную информацию о пробе. Можно применять и другие известные методы окрашивания, но они имеют определенные недостатки. Так, можно предусмотреть стехиометрическое окрашивание, которое дает окрашивание клеток, пропорциональное количеству ДНК, что позволяет определить ее количественно и, следовательно, выявить и анализировать патологические клетки в рамках плоидности. Однако такое специфическое окрашивание, например, если речь идет об окрашивании по Фелгену, несовместимо с окрашиванием по Папаниколау и требует повторного нанесения клеток на пластинку для осуществления анализа врачом или цитолаборантом. В некоторых областях пытались комбинировать стехиометрическое окрашивание с окрашиванием по Папаниколау и применили окрашивающее вещество, содержащее тионин и требующее фиксации метанолом, который является токсичным и который тем более изменяет окрашивание по Папаниколау в его интерпретации, в частности, с ядрами, хроматин которых проявляется слишком «темным» для тонкого анализа состава упомянутых ядер и, следовательно, затрудняет анализ при диагнозе предракового или ракового состояния.

Можно использовать маркер, отличный от маркеров, используемых для количественного определения ДНК, такой как гиперицин или специальный маркер пролиферации или маркер патогенных факторов, таких как канцерогенные вирусы типа вируса папилломы человека, например, в случае мазка из шейки матки.

На стадии Е аналитическую пластинку 6, содержащую пробу, включающую один или несколько специфических флуоресцентных маркеров и окрашенную красителем, известным для морфологического анализа клетки, а также контрольные флуоресцентные шарики, позволяющие улучшить регулировку, подвергают однократно или многократно воздействию источника света, возбуждающего флуоресценцию, непрерывного или пульсирующего, когерентного или не когерентного, в любой области спектра от ультрафиолетовой до инфракрасной, освещающего пробу с целью обеспечения съемок изображений пробы при помощи аппарата 14 съемок изображений. Флуоресцентная съемка изображений позволяет осуществлять автоматическую регулировку, благодаря контрольным флуоресцентным шарикам, и получить, таким образом, максимальное количество изображений с оптимальным фокусированием. Совокупность изображений пробы, полученных флуоресцентным методом, которая может соответствовать одному или нескольким облучениям источником света, возбуждающего флуоресценцию, позволяет отличить нормальные клетки от патологических клеток.

На стадии F аналитическую пластинку 6, содержащую пробу, включающую один или несколько специфических флуоресцентных маркеров и окрашенную красителем, известным для морфологического анализа клетки, подвергают облучению белым светом 16 для получения изображений пробы при помощи устройства 14 съемок изображений. Съемка изображений в белом свете позволяет получить изображения пробы, окрашенной по методу Папаниколау, и выявить стандартные диагностические критерии, используемые специалистами для осуществления диагноза.

Флуоресцентную съемку изображений осуществляют перед съемкой изображений в белом свете, чтобы избежать явлений отбеливания (или “beaching”) изображения, которое может произойти во время флуоресцентной съемки изображений, если пластинку предварительно осветить белым светом, что может помешать использованию изображений в флуоресцентном виде.

Прибор 14 съемки изображений позволяет «сканировать» пробу 2 с очень высоким разрешением и получать с одной пластинки изображения в флуоресцентном режиме и в белом свете. Аналитическую пластинку сканируют строка за строкой. Таким образом, каждое снятое изображение представляет собой полосу 18 небольшой ширины аналитической пластинки. Расположенные рядом изображения позволяют получить полное изображение 20 пластинки 6 с пробой и, следовательно, полное изображение пробы 2, как показано на фиг. 1 для стадии G. Такой метод построчной съемки изображений является более эффективным, чем съемка «поле за полем», применявшаяся до настоящего времени, и позволяет привести к единому стандарту множество проходов в флуоресцентном режиме и одновременно свести к минимуму возможность отбеливания (или “bleaching”). Таким образом, изображение 20, полученное при помощи одного и того же прибора 14 и самым простым способом, является точным отображением пробы, сочетающим большое число данных в флуоресцентном режиме и в белом свете.

Прибор для съемок изображений является, например, прибором типа “Nanozoomer”, выпускаемым компанией HAMAMATSU.

Цифровые данные, полученные при помощи прибора 14 в флуоресцентном режиме и в белом свете, накладывают затем друг на друга при помощи информативной системы обработки, чтобы информативная система обработки могла переходить от данных, полученных при одном освещении, к данным, полученным при другом освещении, для каждой полосы 18 изображения пробы.

Таким образом, получают виртуальную аналитическую пластинку, образованную изображением 20 и данными, связанными с этим изображением, которую можно анализировать при помощи способа клеточного анализа, описание которого следует ниже со ссылками на фиг. 2.

Клеточный анализ происходит путем исследования изображений пробы 2 врачом или лаборантом, занимающимся обнаружением патологических клеток для постановки диагноза, за которым может последовать более углубленное обследование и даже лечение. Из соображений надежности присутствие врача или лаборанта является обязательным, поэтому обнаружение потенциально патологических клеток не может быть полностью автоматическим.

На стадии Н изображения, окрашенные стандартным методом, таким как метод Папаниколау, и снятые в белом свете, выводятся на средство отображения, такое как экран, и прокручиваются перед глазами врача или лаборанта, занимающегося исследованием. Прокруткой изображений управляет информативная система, поэтому эта прокрутка является автоматической. Каждое изображение выводится на весь экран без вывода дополнительных данных о пациенте, чтобы не отвлекать внимание врача или лаборанта во время анализа (или “screening” на английском языке), причем в течение заранее определенного времени, рассчитанного таким образом, чтобы позволить врачу или лаборанту исследовать проецируемое изображение в полном объеме и обнаружить возможную аномалию в изображении.

Время отображения каждого изображение может регулировать врач или лаборант в зависимости от своего опыта или в зависимости от других данных. Например, если проба была взята у пациента из «группы риска» с высокой степенью вероятности обнаружения патологических клеток, время отображения можно отрегулировать на более продолжительное, чтобы произвести более тщательное исследование пробы. С виртуальной аналитической пластинкой могут быть связаны данные о пациенте, введенные в базу данных, и их можно присовокупить к изображению пробы, взятой у этого пациента. В зависимости от этих данных время отображения может регулироваться автоматически. Например, информативная система содержит множество заранее установленных значений времени отображения, каждое из которых соответствует степени риска обнаружения аномалии у пациента. Эту степень риска сообщает врач, взявший пробу, и ее приобщают к взятой пробе. Таким образом, информативная система отмечает степень риска и соответственно регулирует время отображения. Время отображения может также устанавливать вручную врач или лаборант.

Таким образом, прокручиваемые изображения являются изображениями, полученными при окрашивании по Папаниколау. Изобретения при этом окрашивании позволяют обнаруживать возможное присутствие аномалий, соответствующих, например, наличию предраковых или раковых клеток, семиология которых известна давно и широко описана в литературе. Кроме того, как было указано выше, окрашивание по Папаниколау позволяет проверить, соответствует ли проба критериям Bethesda, например, при взятии мазка из шейки матки, и подтвердить или не подтвердить пробу. Проверка критериев Bethesda может осуществляться автоматически информативной системой при помощи программы анализа изображений. Эта программа может, например, подсчитывать клетки на изображении 20 и проверить, что было взято не менее 5000 клеток и что были взяты определенные типы клеток, свидетельствующие о хорошем качестве пробы, такие как эндоцервикальные клетки или соединительные клетки. Программа может также считывать другие данные о пробе клеток. Информативная система приобщает эти данные к изображению 20 для дополнения виртуальной аналитической пластинки.

Врач или лаборант визуально исследует каждое изображение, выведенное на экран, и определяет на этапе I наличие или отсутствие аномалии. Это обнаружение может также автоматически осуществлять информативная система при помощи программы анализа изображений.

В случае, когда ни врач или лаборант, ни информативная система не обнаружили аномалии в отображаемом изображении, способ возвращается на этап Н и продолжается проецированием следующего изображения после истечения установленного времени отображения.

Согласно варианту выполнения, предусмотрена стадия J, во время которой информативная система автоматически останавливает прокрутку изображений на изображении, на котором не обнаружено никакой аномалии, и ожидает подтверждения врача или лаборанта для возобновления прокрутки. Остановка на таком изображении позволяет детально анализировать так называемые контрольные изображения, чтобы подтвердить то, что можно считать нормальной пробой. Остановку на так называемых нормальных изображениях можно осуществлять произвольно или после определенного числа выведенных на экран изображений. Далее следует подробное описание анализа изображения, касающееся анализа изображения, содержащего аномалию.

Если врач или лаборант, или информативная система обнаруживают аномалию на стадии I, способ продолжается на стадии К путем остановки прокрутки изображений.

Остановку прокрутки изображений производит автоматически информативная система, если она обнаружила аномалию, или вручную врач или лаборант, если он захотел исследовать изображение более детально или если он обнаружил аномалию.

При этом изображение отображается с более высокой степенью увеличения, чтобы детально исследовать аномалию. Одновременно на экран можно вывести данные о пациенте, чтобы предоставить врачу дополнительную помощь при принятии решения.

Способ в соответствии с настоящим изобретением обеспечивает автоматическую остановку прокрутки изображений на изображении, содержащем потенциально патологические элементы. Таким образом, способ позволяет снизить процент ложных отрицательных результатов и соответственно повысить чувствительность обнаружения патологических проб, соответствующих аномалиям клеток, которые могли быть пропущены врачом или лаборантом, за счет того, что информативная система выявляет патологические клетки на изображениях, снятых как в флуоресцентном режиме, так в белом свете, в отличие от врача или лаборанта, который основывает свой первый анализ только на изображениях в белом свете, то есть на изображениях пробы, окрашенной по методу Папаниколау.

На стадии L изображение, выведенное на экран при окрашивании методом Папаниколау, на котором прокрутка была остановлена, связывают с изображением этой же зоны, снятой в флуоресцентном режиме, чтобы анализировать пробу, помеченную флуорофорами, в морфологическом и/или спектральном плане. Это отображение позволяет врачу или лаборанту уточнить свой анализ отображаемых клеток и подтвердить или не подтвердить, являются ли некоторые из них потенциально патологическими. Кроме того, при отображении флуоресцентного изображения одновременно на экран можно выводить другие данные, такие как количественные данные, спектральные данные или данные о пациенте, у которого была взята проба, и т.д. Этот более тонкий анализ в сочетании с автоматической остановкой прокрутки позволяет уменьшить число ложных отрицательных результатов. Кроме того, например, в рамках взятия мазка из шейки матки контроль диагноза, производимого врачом или лаборантом, по зонам, выбранным системой, позволяет сохранить уровень надежности цитологического диагноза, который в данном случае приближается к 95%. За счет этого критерии чувствительности и специфичности исследуемого мазка становятся более близкими и высокими.

На этой стадии врач или лаборант может свободно производить увеличение отдельных зон отображаемого изображения как в белом свете, так и в флуоресцентном режиме. Врач или лаборант может также перейти по своему усмотрению от изображения при окрашивании по Папаниколау к флуоресцентному изображению.

Возобновление прокрутки может произойти только по команде врача или лаборанта на стадии М, например, путем нажатия на кнопку подтверждения. Это позволяет убедиться, что, если прокрутка была остановлена автоматически, отображаемое изображение, содержащее возможную аномалию, было действительно исследовано врачом или лаборантом, что позволяет повысить степень надежности и обеспечивает повышение качества анализа. Это же относится и к нормальным изображениям, выведенным на экран во время описанной выше стадии J.

Описанный выше способ обеспечивает быстрый и эффективный анализ проб. Этот способ снижает риск «ложных отрицательных результатов», способствуя углубленному анализу изображений, содержащих возможную аномалию.

Кроме того, сохраняется возможность повышения квалификации врачей или лаборантов, поскольку на экран выводятся все изобретения, как нормальные, так и содержащие аномалии. Кроме того, способ обеспечивает широкую возможность манипулирования, в частности, за счет приобщения данных о пациенте и о пробе к данным отображаемых изображений.

Группа изобретений относится к способу клеточного анализа цитологической или гистологической пробы и к способу получения виртуальной аналитической пластинки. Для клеточного анализа осуществляют по меньшей мере первую обработку пробы (2), при этом указанная обработка предназначена для маркировки патологических клеток среди здоровых клеток пробы. Далее осуществляют несколько съемок изображений пробы (6), находящейся на аналитической пластинке (6) с целью получения множества изображений, каждое из которых отображает одну зону аналитической пластинки (6). Указанные изображения, расположенные в ряд, образуют полное изображение (20) пробы. Также осуществляют автоматическую прокрутку всех снятых изображений пробы (2) на средстве отображения с заранее определенной скоростью прокрутки, при этом упомянутую скорость предусматривают таким образом, чтобы исследователь мог анализировать изображение и определить, содержит или не содержит отображаемая зона пробы потенциально патологические клетки; прокрутка останавливается автоматически при обнаружении по меньшей мере одной аномалии, которая может свидетельствовать о наличии патологической клетки. Использование группы изобретений обеспечивает быстрый и эффективный анализ проб и снижает риск «ложных отрицательных результатов». 2 н. и 13 з.п. ф-лы, 2 ил.

1. Способ клеточного анализа цитологической или гистологической пробы (2), располагаемой на аналитической пластинке (6), включающий следующие стадии:
- осуществляют по меньшей мере первую обработку пробы (2), при этом указанная обработка предназначена для обеспечения выявления патологических клеток среди здоровых клеток пробы,
- осуществляют съемку изображений пробы (6), находящейся на аналитической пластинке (6), с целью получения множества изображений, каждое из которых отображает одну зону аналитической пластинки (6), при этом упомянутые изображения, расположенные в ряд, образуют полное изображение (20) пробы,
отличающийся тем, что он дополнительно включает следующие стадии:
- осуществляют автоматическую прокрутку всех снятых изображений пробы (2) на средстве отображения с заранее определенной скоростью прокрутки, при этом упомянутую скорость предусматривают таким образом, чтобы исследователь мог анализировать изображение и определить, содержит или не содержит отображаемая зона пробы потенциально патологические клетки,
- прокрутку останавливают при обнаружении по меньшей мере одной аномалии, которая может свидетельствовать о наличии патологической клетки,
и тем, что остановка прокрутки происходит автоматически в результате автоматического анализа изображения, при этом указанную остановку осуществляют, если в изображении обнаружен отдельный объект, определяемый как аномальный.

2. Способ анализа по п.1, отличающийся тем, что скорость прокрутки изображений регулируется.

3. Способ анализа по п.1, отличающийся тем, что он дополнительно включает стадию возобновления прокрутки после анализа зоны пробы, содержащей аномалию, при этом указанная стадия возобновления происходит по команде исследователя.

4. Способ анализа по п.1, отличающийся тем, что он включает стадию автоматической остановки прокрутки на изображении, не содержащем аномалии или соответствующем объектам, необходимым для оценки репрезентативности пробы, при этом возобновление прокрутки происходит по команде исследователя после подтверждения, что изображение не содержит аномалии.

5. Способ анализа по п.1, отличающийся тем, что пробу (2) подвергают двум разным видам обработки, которые позволяют маркировать патологические клетки среди клеток пробы, при этом осуществляют две стадии съемок изображений, при этом каждая стадия съемок позволяет производить обнаружение аномалий по одному из видов обработки, осуществляемых на пробе, при этом данные изображений, полученные на каждой стадии съемок, накладывают друг на друга, чтобы исследователь мог переходить от изображения зоны, полученного во время одной стадии съемок, к изображению этой же зоны, полученному во время другой стадии съемок, при прокрутке изображений.

6. Способ анализа по п.5, отличающийся тем, что переход от изображения зоны, снятой на одной стадии съемок, к изображению этой же зоны, снятой на другой стадии съемок, происходит, если в изображении обнаружена аномалия.

7. Способ анализа по п.1, отличающийся тем, что стадии обработки являются стадиями окрашивания или маркировки пробы при помощи флуорофоров.

8. Способ анализа по п.6, отличающийся тем, что отображение изображения, полученного на другой стадии съемки, сопровождается выводом на экран информации об отображаемой зоне пробы, и/или о всей пробе, и/или о пациенте, у которого взяли пробу.

9. Способ анализа по п.1, отличающийся тем, что он включает стадии увеличения изображения для просмотра детали отображаемой зоны.

10. Способ анализа по п.9, отличающийся тем, что степень увеличения можно регулировать.

11. Способ получения виртуальной пластинки для анализа пробы (2) с целью ее клеточного анализа при помощи способа анализа по любому из пп.1-10, включающий следующие стадии:
- получают пробу (2),
- осуществляют первую стадию обработки пробы, при этом упомянутая обработка позволяет маркировать патологические клетки относительно остальных клеток,
- осуществляют вторую стадию обработки пробы, при этом упомянутая обработка позволяет маркировать патологические клетки относительно остальных клеток иначе, чем на первой стадии обработки,
- пробу (2) помещают на аналитическую пластинку (6) перед, или после, или между стадиями обработки пробы (2),
отличающийся тем, что он дополнительно включает следующие стадии:
- осуществляют первую съемку изображений пробы (2), находящейся на аналитической пластинке (6), чтобы получить множество изображений, каждое из которых отображает одну зону аналитической пластинки, при этом упомянутые изображения, расположенные рядом друг с другом, образуют полное изображение (20) пробы, при этом упомянутые изображения позволяют обнаружить патологические клетки, маркированные во время первой стадии обработки,
- осуществляют вторую съемку изображений пробы (2), находящейся на аналитической пластинке (6), чтобы получить множество изображений, каждое из которых отображает одну зону аналитической пластинки (6), при этом указанные изображения, расположенные рядом друг с другом, образуют полное (20) изображение пробы, при этом указанные изображения позволяют обнаружить другие клеточные аномалии, отличные от маркированных на первой стадии обработки,
- указанные полученные изображения образуют виртуальную аналитическую пластинку.

12. Способ получения по п.11, отличающийся тем, что он дополнительно включает стадию наложения данных изображений, полученных во время первой съемки изображений, и данных изображений, полученных во время второй съемки изображений.

13. Способ получения по п.11, отличающийся тем, что первая стадия обработки пробы является стадией флуоресцентной маркировки.

14. Способ получения по п.13, отличающийся тем, что первая стадия обработки включает стадию введения в пробу контрольных шариков, при этом указанные шарики служат метками для регулировки съемки изображений.

15. Способ получения по п.11, отличающийся тем, что вторая стадия обработки пробы является стадией окрашивания по Папаниколау.